目的:揭示2011年和2019年甘肃蚊虫中库蚊黄病毒的分子遗传差异。方法:使用逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction, RT-PCR)获得甘肃2011年和2019年蚊虫中库蚊黄病毒基因组核苷酸序列，利用病毒分子生物学和生物信息学方法分析病毒基因差异。结果:共获得10株库蚊黄病毒基因核苷酸序列，包括2011年8株(均来自于淡色库蚊)、2019年2株(来自三带喙库蚊和中华按蚊)。病毒E基因核苷酸与氨基酸序列同源性分析结果显示，甘肃2019年分离的病毒与2011年分离病毒核苷酸序列相似性98.4%~100%，氨基酸相似性95.4%~97.3%。库蚊黄病毒E基因序列系统进化分析结果显示，2019年甘肃分离的2株库蚊黄病毒(GS1975和GS1976)与2011年的8株库蚊黄病毒均属于基因1型B组库蚊黄病毒；2019年分离的GS1975病毒与我国辽宁(2010年和2011年)和内蒙(2018年)分离病毒处在共同的进化簇，而2019年分离的GS1976病毒与我国内蒙(2018年)和甘肃2011年分离病毒形成共同进化簇。结论:甘肃2011年和2019年分离的库蚊黄病毒均属于基因1型病毒，2019年分离的2株病毒分布在不同的进化簇，随着时间的推移当地库蚊黄病毒基因组在发生变化，为此需要开展当地库蚊黄病毒分子差异的长期监测。

目的:分析贵州省黔东南州消除疟疾前后疫情特征，为今后当地巩固消除疟疾防治成果制定有效策略和措施提供依据。方法:收集2005-2018年黔东南州16个县（市）的疟疾病例资料，采用描述性流行病学方法，分析消除疟疾前（2005-2011年）、后（2012-2018年）当地居民疟原虫和流动人口疟原虫感染率，疟疾病例人群分布、季节分布、疟原虫种类、传疟媒介种类等特征。结果:消除疟疾前共报告疟疾病例1 412例，其中本地病例1 361例，占总病例数的96.39%；消除疟疾后报告病例17例，均为境外输入性病例。消除疟疾前，18~60岁人员比例为70.54%（996/1 412），消除后的17例病例年龄均为18~60岁；儿童/学生比例由消除前的24.65%（348/1 412）降至消除后的0；消除前疟疾病例发病高峰为6-10月份，且每月均有病例发生；而消除后，输入性病例呈散在发生；消除前疟原虫种类以间日疟为主（98.58%，1 392/1 412），消除后主要为恶性疟输入为主（70.59%，12/17）；消除前后，疟疾媒介中华按蚊均为优势种群，2015年以后未发现微小按蚊和嗜人按蚊分布。结论:黔东南州消除疟疾后，存在输入病例引起的本地疟疾病例风险，建议当地相关部门今后应重点做好境外回归人员疑似疟疾病例处置及其媒介监测工作。

目的 调查辽宁省蚊、蠓的种类与分布.方法 采用人帐诱、人诱法、诱虫灯诱法采集蚊、蠓,实验室分类鉴定,同时参考文献整理辽宁省蚊、蠓种类及分布.结果 2015-2023 年辽宁省已知蚊科昆虫 5 属 44 种,分布在省内各市,其中广泛分布的种类有淡色库蚊、三带喙库蚊、背点伊蚊、刺扰伊蚊、中华按蚊;已知蠓科昆虫 3 属 50 种,分布在 11 个市,占辽宁省 14 个市的 78.6%.结论 该研究可为辽宁省蚊、蠓的防控提供参考依据.

目的 分析四川省监测县传疟媒介种群分布、密度及季节消长情况,为消除疟疾后疫点处置提供参考.方法 2022年5至9月随机选取了 73个传疟媒介种群调查监测县和23个种群和密度调查监测县分别通过灯诱法和人帐诱法开展种群和密度监测,对捕获到的蚊虫进行形态学鉴定,对捕获蚊虫、按蚊数量、密度利用WPS Office软件建立数据库,用SPSS 26.0软件进行方差分析和卡方检验等描述性统计分析,检验水准为α=0.05.结果 2022年在5至9月期间有165个点开展种群监测,23个点开展了密度监测.共捕获180 402只蚊虫,其中按蚊有26521只(14.70％).中华按蚊26274只(99.07％),嗜人按蚊19只(0.07％),未鉴定按蚊种70只(0.26％),未捕获到微小按蚊和大劣按蚊.通过灯诱法捕获到民房外3712只中华按蚊(15.45％),牲畜房14390只(59.88％),可孳生地5 927只(24.67％);仅青神县和洪雅县捕获到18只嗜人按蚊;未鉴定的按蚊位于资中县;不同场所中华按蚊和嗜人按蚊构成差异有统计学意义(x2=29.33,P＜0.001).有16个区县未监测到按蚊,武胜县捕获的中华按蚊最多,不同场所监测到中华按蚊密度差异无统计学意义(x2=15.66,P=0.11).通过人帐诱法除安岳县外其他22个县均捕获到中华按蚊(2403只),仅青神县捕获到1只嗜人按蚊,中华按蚊平均密度为2.09只/(人·时).晚上8时～9时捕获到中华按蚊最高(436只),密度为3.79只/(人·时),不同时间段捕获中华按蚊数量上差异有统计学意义(F=1 751.96,P＜0.001).6月下旬捕获到中华按蚊最多(720只),密度为3.13只/(人·时),不同月份捕获中华按蚊数量上差异也有统计学意义(F=2 176.56,P＜0.001);达川区、洪雅县2个地区每月每个时间段都捕获有中华按蚊.结论 四川省传疟媒介持续存在,输入性疟疾病例时有发生,应继续加强传疟媒介监测工作,采用合适的方法,综合评估疫点情况,及时采取有效媒介控制措施,合理、科学地处置疫点工作,守好消除疟疾成果,防止出现输入性继发二代病例.

目的 建立一种基于环介导等温扩增(LAMP)微流控芯片技术的快速检测蚊媒携带登革病毒的方法.方法 根据登革病毒衣壳蛋白(C)、前膜蛋白(prM)和非结构蛋白2A(NS2A)基因片段构建pUC-GW-Amp-CprM和pUC-GW-Amp-NS2A质粒,设计多组环介导等温扩增特异性引物组.制备LAMP微流控芯片,以靶基因质粒、登革病毒核酸为模板进行检测,根据起峰时间、相对荧光单位、假阳性、重复实验稳定性、检测灵敏度等指标筛选最优引物组.用最优引物组分别检测埃及伊蚊、白纹伊蚊等主要登革热传播媒介和常见的致倦库蚊、中华按蚊、摇蚊的cDNA,并与寨卡病毒、流行性乙型脑炎病毒、恶性疟原虫、黄热病毒等常见蚊媒传播病原体进行交叉检测,评价LAMP法的特异性.评价LAMP法检测CprM和NS2A靶基因质粒的灵敏度,分别与PCR、实时荧光定量PCR(qPCR)检测结果进行比较.用登革病毒RNA与传播媒介埃及伊蚊、白纹伊蚊RNA分别以1∶10、1∶100和1∶1 000混合,模拟媒介携带登革病毒的样品进行LAMP微流控芯片检测.对采集自宁德市三都岛、西安市、上海朱家角、长兴岛和五角场等5地的白纹伊蚊的cDNA进行检测.结果 引物组筛选结果显示,CprMG2和NS2AG1引物组起峰时间早,相对荧光单位高,灵敏度最高,为最优引物组.CprMG2引物组可检测浓度低至10-6ng/μl的pUC-GW-Amp-CprM质粒,最低检测限为1.3 × 103拷贝;NS2AG1引物组可检测浓度低至10-9 ng/pl的pUC-GW-Amp-NS2A质粒,最低检测限为1拷贝.最优引物组CprMG2、NS2AG1对埃及伊蚊、白纹伊蚊、中华按蚊、致倦库蚊、摇蚊等蚊虫cDNA无非特异性扩增,与寨卡病毒、流行性乙型脑炎病毒、恶性疟原虫、黄热病毒核酸无交叉反应.LAMP微流控芯片检测CprM靶基因的最低检测限为1.3 × 103拷贝,较PCR检测的最低检测限(1.3 × 104拷贝)高1个数量级;LAMP微流控芯片检测CprM和NS2A靶基因的最低检测限分别为1.3×103拷贝、1拷贝,与qPCR检测的最低检测限(1.3 × 103拷贝、1拷贝)相当.LAMP微流控芯片检测模拟现场样品的结果显示,CprMG2可检出与埃及伊蚊、白纹伊蚊RNA 1∶10、1∶100和1∶1 000混合的登革病毒RNA,NS2AG1最低可检出1∶100混合的登革病毒,特异性均为100％.LAMP微流控芯片检测5地现场采集白纹伊蚊的结果均为阴性.结论 建立了基于LAMP微流控芯片检测登革病毒的方法,该法敏感性和特异性高,检测时间短,可用于现场蚊媒携带登革病毒的检测.

[目的]羧酸酯酶(carboxylesterases,CCEs)是一类重要的水解酶超家族,参与昆虫体内各种外源物质的代谢过程.本研究利用不同发育阶段、不同组织和吸血前后中华按蚊Anopheles sinensis的转录组数据分析CCE基因表达模式,为进一步研究CCEs在不同生理过程中的潜在功能奠定基础.[方法]以前期从中华按蚊实验室品系转录组数据库中筛选出的50个CCE基因,利用生物信息学分析其在中华按蚊不同发育阶段(卵、1-4龄幼虫、雄蛹、雌蛹、雄成蚊和雌成蚊)、成蚊不同组织(触角、唾液腺、中肠、马氏管、精巢、卵巢、表皮和脂肪体)中以及雌成蚊吸血前和吸血后不同时间(1,3,6,12,24和48 h)的表达模式.[结果]CCE基因主要在幼虫或成蚊阶段高表达或特异性表达;AsAe12,AsAe4和AsBe4在所有发育阶段均高表达.CCE基因的表达具有组织特异性,主要集中在成蚊触角、表皮和精巢中表达;此外,5个CCE基因(AsAe13,AsAe12,AsAe6,AsAe4和AsBe4)在成蚊中肠、马氏管和脂肪体中均高表达,可能与这些解毒器官代谢异生物有关.在雌成蚊吸血后,大多数CCE基因的表达量发生了变化,它们的表达模式也存在差异,这表明血液消化是一个复杂的过程.[结论]本研究结果丰富了中华按蚊CCE基因的知识,为深入探究CCE家族基因在中华按蚊生长发育中的的潜在功能提供有价值的参考.

[目的]筛选出促黑化条件下中华按蚊Anopheles sinensis蛹体壁中表达变化最显著的基因类群,并初步探究它们与黑色素前体累积及表皮结构特征间的相关性.[方法]在Grace's昆虫细胞培养基中添加黑色素前体多巴(dopa)和多巴胺(dopamine),对化蛹20 min内中华按蚊体壁进行体外培养,对照组(CK)中不添加黑色素前体,培养16 h时利用体视显微镜观察黑色素前体处理组与对照组蛹体壁着色和表皮截面特征;通过Illumina测序平台对黑色素前体处理组与对照组蛹体壁进行转录组测序,对差异表达基因(different expression genes,DEGs)进行GO功能分类和KEGG通路富集分析;分析被显著富集的基因注释和染色体分布;利用qRT-PCR验证转录组数据.[结果]多巴和多巴胺处理组中华按蚊蛹体壁与表皮截面相比于CK明显黑化,且多巴处理组着色程度最深;多巴和多巴胺处理组中华按蚊蛹表皮相比于CK明显增厚,且增厚程度与黑化程度相关.多巴处理组vs CK与多巴胺处理组vs CK比较组的DEGs分别为2 952和697个,且下调基因居多;这两类比较组间共有上调的DEGs有223个,共有下调的DEGs有347个.DEGs的GO功能注释结果表明,在上述比较组以及两比较组间共有的上调DEGs被显著富集到表皮结构组分(GO:0042302).KEGG通路富集分析结果显示,多巴处理组vs CK比较组上调的DEGs被显著富集到剪切体通路,下调的DEGs被显著富集到Toll-Imd和Hippo信号通路;在多巴胺处理组vs CK比较组中下调DEGs被显著富集到自噬通路;这两比较组间共享的DEGs没有被显著被富集的通路;65个被富集的上调表皮蛋白基因来自于CPR,CPF,TWDL,CPLC和CPAP 5个家族,并分布于3条染色体,其中部分成员成簇分布.qRT-PCR结果显示,两比较组中所选择的共有上调的12个表皮蛋白基因的表达量与转录组数据一致.[结论]本研究在组学水平上证实了蚊虫体壁组织中黑色素的过量累积能够诱导大量表皮蛋白基因的显著上调表达,并使得其表皮结构特征发生改变.研究结果为后续探索黑色素前体对表皮结构基因的调控机制,以及理解昆虫表皮重要组分间的互作模式,对昆虫适应性状的影响提供了新的视角.

目的 探讨中国国内关于蚊虫抗药性研究领域的发展状况、研究脉络及热点,为我国蚊虫抗药性进一步研究提供方向,为抗药性治理及蚊媒传染病防治提供参考.方法 以蚊和抗药性为主题检索词,对 2013 年1 月 1 日至 2023 年 5 月 1 日中国知网(CNKI)数据库收录的蚊虫抗药性文献进行检索,共检索获得文献 655篇,最终纳入 569 篇.应用SATI 3.2 软件及Excel 2019 对作者、期刊和机构进行统计.应用Citespace5.8.R3对 569 篇文献关键词绘制知识图谱,并对突现词、时间线进行分析.结果 2013-2023 年我国国内对蚊抗药性的研究总体呈缓慢上升趋势,其中 2013-2016 年上升迅速;发文机构主要为疾病预防控制中心、寄生虫病防治研究所等;研究热点主要为白纹伊蚊、淡色库蚊、溴氰菊酯等.结论 中华按蚊、白纹伊蚊、淡色库蚊是近年我国蚊虫抗药性重点关注的蚊种,重点关注的杀虫剂品类为拟除虫菊酯类.今后研究人员应重点关注生物杀虫剂等其他品类杀虫剂的抗性和研发,以及抗药性治理的研究,为蚊虫及相关传染病的防控策略及风险评估提供依据.

目的 了解辽宁省 2021 年蚊虫密度、种类构成和季节消长情况,为蚊虫防治提供科学依据.方法 采用诱蚊灯法于 2021 年 5-10 月在辽宁 14 个市开展蚊虫监测,每月2 次,使用Excel 2010 和SPSS 23.0 软件进行数据统计分析.结果 2021 年辽宁省蚊虫总平均密度为 42.72 只/(灯·夜),背点伊蚊为优势种群,占捕获总数的 35.37%,其后依次为淡色库蚊(23.85%)、中华按蚊(19.57%)和刺扰伊蚊(10.40%).不同生境蚊虫密度以牲畜棚最高,达 154.75 只/(灯·夜),居民区最低,为 5.50 只/(灯·夜).全省各监测点蚊虫密度营口最高,密度为 190.67 只/(灯·夜);其次为盘锦,密度为 59.32 只/(灯·夜);大连最低,密度仅为 2.10只/(灯·夜).蚊虫密度季节消长趋势呈双峰曲线,分别在 6 月上旬和 8 月上旬达到高峰,峰值密度分别为104.55 和 81.61 只/(灯·夜).不同生境蚊虫密度季节消长差异有统计学意义(χ2 =24.230,P＜0.05).结论 基本掌握了辽宁省蚊虫种类构成、密度及季节消长情况,建议各地进行蚊虫防治时,应根据监测结果采取有针对性的综合控制措施.

目的 了解盐城市盐都区 2016-2022 年蚊虫种群构成、密度变化、生境分布、季节消长特征,为预防控制蚊虫及蚊媒传染病提供参考.方法 采用灯诱法在居民区、城区公园、医院、农村民房、稻田处和湿地公园等生境进行蚊密度监测,比较分析不同年份、不同生境的蚊种和密度变化规律.结果 共捕获蚊虫86 959只,平均蚊密度为29.34 只/(灯·夜),在不同年份间总体呈下降趋势.前3 位的蚊种为淡色/致倦库蚊、三带喙库蚊和中华按蚊,分别占总捕蚊数的 64.14%、19.59%和 11.12%.6 种生境中湿地公园蚊密度最高,达 76.69只/(灯·夜);农村民房、稻田次之,分别为 22.87、37.29 只/(灯·夜).不同蚊种和不同生境均呈现以夏季为高峰的单峰曲线季节消长.结论 盐城市盐都区蚊虫密度总体呈下降趋势,优势蚊种为淡色/致倦库蚊;农村地区和湿地公园等野外环境是蚊虫防治重点区域,需要在夏、秋季高峰期到来前既采取综合治理措施.