目的:获得乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)C2蛋白的HBV多肽。方法:同源重组法构建含1.2倍HBVC2全基因组表达重组体；脂质体法转染HepG2和Huh-7细胞；荧光定量PCR法检测HBV DNA水平；双抗体夹心酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)的水平；免疫荧光法检测核心抗原(HBcAg)水平和分布。电转染法转染人永生化B淋巴细胞系(B-lymphoblastoid cell line，BLCL)，液相色谱串联质谱(liquid chromatography-mass spectrography/mass spectrometry，LC-MS/MS)法分离鉴定HBV多肽，生物信息学预测亲合力，并检索已报道序列。结果:成功构建了含3881 bp目的片段的HBVC2全基因组的重组体，即pAAV/HBV1.2 C2。HepG2和Huh-7细胞转染重组体后24、48和72 h，培养上清液中HBV DNA、HBsAg和HBeAg均呈现较高水平；HBcAg多分布在细胞核，均在48 h表达水平达高峰。从5株BLCLs细胞裂解液中检出来源于HBsAg、HBeAg和HBcAg的HBV多肽(序列长度≥8aa)共95条。比较分析共同序列和包含或重叠(≥8aa)序列，67条多肽形成了11个HBV多肽热点核心区域，有92条已见报道。51(53.68%)条多肽有相应的人类白细胞表面抗原(human leukocyte antigen，HLA)等位基因分型，而与5株细胞所携带HLA等位基因一致的共有21条。 结论:成功构建和表达了pAAV/HBV1.2 C2，获得了真实世界的HBVC2多肽谱。

目的:分析恶性淋巴瘤住院患者的分布特征，为制订淋巴瘤防控策略提供科学依据。方法:采用以医院为基础的肿瘤登记（HCR）方法，从平台筛选出南通市肿瘤医院2002年至2017年恶性淋巴瘤住院患者资料，以来源于南通地区7个市、区、县的患者为研究对象，进行分组描述，包括亚部位（亚型）、性别、年龄、入院年份、患者来源（户籍）等观察指标。结果:恶性淋巴瘤住院患者数从2002年95例增加至2017年243例，住院患者数总体呈逐年上升趋势。2 361例恶性淋巴瘤患者共产生10 260例次住院记录，每例患者平均住院4.35次。恶性淋巴瘤占同期全部恶性肿瘤（74 448例）的3.17%。男性1 382例（58.53%），女性979例（41.47%），性别比为1.41∶1。根据恶性淋巴瘤国际疾病分类，霍奇金淋巴瘤（HL）119例（5.04%），非霍奇金淋巴瘤（NHL）2 108例（89.28%），多发性骨髓瘤（MM）134例（5.68%）。恶性淋巴瘤患者分布于各个年龄段，呈负偏态分布：首次入院的中位年龄为61.00岁；在45~49岁组显著上升，在65~69岁组达到高峰。按住院患者来源，来自启东市137例（5.80%），海安市153例（6.48%），海门市185例（7.84%），如东县391例（16.56%），南通市区437例（18.51%），如皋市508例（21.52%），通州区550例（23.30%）。在恶性淋巴瘤患者中未见常规检测项目如Rh血型系统、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）及人类免疫缺陷病毒（HIV）指标的异常情况。结论:南通地区恶性淋巴瘤住院患者有增多趋势，男性患者占比高于女性。恶性淋巴瘤中NHL为主要亚型，其次为MM，HL占比最低。患者来源的地区分布可能与服务半径和范围有关。

目的:分析我国急性乙型肝炎（乙肝）病例HBV基因型流行病学分布特征。方法:收集2015-2017年中国疾病预防控制信息系统报告的急性乙肝病例620例，通过巢式PCR扩增获得全长HBV基因组，构建系统发育树确定HBV基因型，结合基础资料分析HBV基因型的分布情况。结果:在620例急性乙肝病例中，成功分型519例（83.71%，519/620），包括A型（0.19%，1/519）、B型（27.17%，141/519）、C型（62.04%，322/519）、D型（9.06%，47/519）、I型（0.77%，4/519）和CD重组型（0.77%，4/519）；2个主要的基因亚型为B2（95.03%，134/141）和C2（72.67%，234/322）。基因型在我国7个地区分布不同，C型在东北（94.55%，52/55）、华北（93.85%，61/65）、华东（78.87%，56/71）和华南地区（58.14%，50/86）的比例较高，B型在华中（58.07%，36/62）和西南（52.94%，45/85）地区的比例较高，西北地区的D型（48.42%，46/95）比例较高；共有515例成功获得血清型，包括adr（57.48%，296/515）、adw（30.87%，159/515）、ayr（0.19%，1/515）、ayw（11.46%，59/515）。B型以adw血清型（92.14%，129/140）为主，C型以adr血清型（91.88%，294/320）为主，D型均为ayw血清型；不同性别、年龄组中，基因型分布差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:2015-2017年我国急性乙肝基因型以B、C和D型为主，东北、华北、华东和华南地区C型为主；华中、西南地区B、C型均有，B型为主，D型多分布于西北地区；急性乙肝基因型与血清型存在相关性，B型以adw血清型为主，C型以adr血清型为主，D型均为ayw血清型；不同性别和年龄组中急性乙肝基因型分布无差异。

患者为青年女性，慢性病程，既往有乙肝小三阳病史，孕晚期发病，妊娠结束后尿蛋白量逐渐增多，临床表现为肾病综合征，伴镜下血尿、血肌酐轻度增高、补体C3轻度下降和中度贫血。肾脏病理光镜下主要表现为膜增生性肾小球肾炎，突出的病理改变特点为免疫荧光检查IgG亚型中只有IgG3（3+），呈融合团块状沉积于系膜区及毛细血管袢，轻链κ呈优势表达，补体C3（3+），血清免疫固定电泳未见单克隆带。诊断为单克隆IgG沉积的增生性肾小球肾炎（proliferative glomerulonephritis with monoclonal IgG deposits，PGNMID）。对血液中未检测到M蛋白及临床表现为肾病综合征的PGNMID，文献报道可采用糖皮质激素+环磷酰胺或利妥昔单抗治疗。本例为国内首例采用半剂量糖皮质激素联合霉酚酸酯治疗PGNMID的病例报道，随访2年，蛋白尿完全缓解，肝肾功能、补体C3及血红蛋白正常，乙肝病毒无复制。

目的:了解我国不同民族人群感染HBV的基因型及基因亚型分布特征。方法:利用多阶段分层整群随机抽样结合系统抽样的方法从2020年全国乙型肝炎血清流行病学调查HBsAg阳性样本库中抽取样本，利用巢式PCR扩增阳性样本HBV S区基因，构建系统发育树分析判定HBV基因型和亚型，结合社会人口学资料进行综合分析。结果:成功扩增15个民族的1 539份样本，检出B、C、D、I型和C/D重组型5种基因型。B型占比较高的民族包括汉（74.52%，623/836）、壮（49.28%，34/69）、彝（53.19%，25/47）、苗（94.12%，32/34）和布依族（81.48%，22/27）；C型占比较高的民族为瑶族（70.91%，39/55）；D型占比较高的民族为维吾尔族（83.78%，31/37）；C/D重组型占比较高的民族为藏族（92.35%，326/353）；检出I型11例中，8例来自于壮族。除藏族外，各民族的B型中B2亚型均>80.00%；在C型中，C2亚型占比较高的民族包括汉、藏、彝、维吾尔、蒙古、满、回和苗族8个民族，C5亚型占比较高的民族包括壮（55.56%，15/27）和瑶族（84.62%，33/39）；在D型中，彝族均为D3亚型，维吾尔和哈萨克族均为D1亚型。C/D1和C/D2亚型在藏族占比分别为43.06%（152/353）和49.29%（174/353）。I型均为I1亚型。结论:我国15个民族中发现HBV 5种基因型和15种基因亚型，不同民族的HBV基因型和基因亚型分布差异明显。

目的 探讨云南西双版纳地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型和基因亚型分布情况.方法 选取2012年5月至2013年4月西双版纳地区汉族和人数最多的两个少数民族(傣族和哈尼族)人群为研究对象,采用巢式PCR、基因序列测定等技术获取HBV全基因组序列后,构建系统进化树并计算遗传距离鉴定HBV基因型和基因亚型.结果 在此地区人群中共检出3种HBV基因型:B基因型139例(76.0％),其中以B2亚型为主(105例,57.4％),quasi B3亚型次之(34例,18.6％);C基因型41例(22.4％),主要为C1亚型(33例,18.0％),其次为C2(4例,2.2％)和C5(4例,2.2％)亚型;I基因型3例(1.6％).三民族人群HBV基因型与基因亚型分布比较:哈尼族人群HBV基因型分布与其他两个民族显著不同(哈尼族vs汉族:χ2=8.416,P=0.006;哈尼族vs傣族:χ2=15.636,P<0.001),其B基因型显著高于其他两个民族,同时没有发现I基因型;三民族人群HBV基因亚型组成也显著不同(汉族vs傣族:χ2=33.598,P<0.001;汉族vs哈尼族:χ2=22.102,P<0.001;哈尼族vs傣族:χ2=16.129,P=0.001),quasi B3亚型仅存在于傣族和哈尼族等少数民族人群,汉族人群中未检出;傣族C1亚型较其他两个民族人群高,且C5仅在傣族人群中发现;哈尼族人群C基因亚型全部为C1亚型.结论 此地区HBV基因型和基因亚型分布复杂且不同民族人群HBV基因型和基因亚型分布具有民族的自身特点.

目的 了解潮州市无偿献血者乙肝病毒(HBV)感染情况,分析其血清学和分子生物学特征. 方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对2013年1月至2016年12月35 184例无偿献血者的血液进行HBsAg筛查.采用荧光定量PCR、PCR-反向斑点杂交法(PCR-RDB)分析部分HBsAg阳性样本的病毒载量、HBV基因型和耐药突变基因. 结果 35 184份样本共筛查出HBsAg阳性样本824份,阳性率为2.34％.男性献血者的阳性率(2.56％)明显高于女性(1.82％),两者之间的差异有统计学意义(x2=17.16,P＜0.01).在73份乙肝基因分型的结果中,B基因型占87.7％(64/73),C基因型占8.2％(6/73),B+C混合基因型占4.1％(3/73),未检出D基因型,不同HBV亚型DNA表达量无明显差异(P＞0.05).在73份样本中,仅检测出HBV拉米夫定耐药相关突变4例,未检出任何HBV阿德福韦耐药突变基因. 结论 潮州市献血者HBV感染阳性率呈平稳趋势.献血者中存在少量乙肝耐药基因突变,我们应予以重视和进一步研究.

目的:研究广西乙型肝炎病毒(HBV)基因型及基因亚型的流行病学分布特征,为广西乙肝防治提供理论依据.方法:采用巢式PCR的方法扩增广西东、南、西、北、中5个地区的乙肝病毒感染者血清HBV DNA S区,用直接测序法获取S区序列进行基因分型,构建系统进化树确定基因亚型.结果:379例标本中,C基因型占54.35％(206/379),B基因型占43.54％(165/379),G基因型占2.11％(8/379),未检测到其他基因型.各基因型在不同地区、年龄组分布差异有统计学意义(P=0.00、P=0.009),在性别上的分布差异无统计学意义(P=0.152).B基因型中有160例成功分型,其中B2亚型占96.25％(154/160),B4亚型占3.75％(6/160),B基因亚型在不同地区、年龄组及性别上的差异均无统计学意义(P=0.07、P=0,67、P=0.41).C基因型中有204例成功分型,其中C1亚型占72.06％(147/204),C5亚型占25.49％(52/204),C2亚型占2.45％(5/204),C基因亚型在不同地区的分布差异有统计学意义(P=0.00),而在不同年龄组及性别上的分布差异无统计学意义(P=0.23、P=0.49).结论:广西HBV基因型以C型为主,其次为B型,桂北、桂西地区以及40岁以下、60岁以上人群以B基因型为优势基因型,桂东、桂南、桂中以及40岁至59岁人群则以C基因型为优势基因型;基因亚型以B2、C1亚型为主.B2亚型主要分布在桂北,C1亚型主要分布在桂南.

目的:调查江西地区待产孕妇慢性感染的HBV表面抗原"α"抗原决定簇变异特征,探讨HBV母婴传播相关的病毒因素.方法:产前24～48h,收集3948例待产孕妇血清,酶免疫法筛查HBV感染者.抽提HBV阳性血清HBV DNA,PCR扩增HBV S基因并测序.应用Clustal X和Bioedit软件将不同感染者的HBV S基因核苷酸与参考序列进行多重比对,分析"α"抗原决定簇的变异与HBV血清型.在线genotyping软件分析感染的HBV基因型.结果:3948例检测出178例HBV阳性标本,从146例血清标本中成功扩增出HBV S基因,112例感染B基因型HBV,属于adw亚型,感染率为76.71％;34例感染C基因型HBV,属于adr亚型,感染率为23.29％,B基因型和C基因型HBV的感染率存在显著差异(P<0.001).18例S基因序列上检测到"α"抗原决定簇有突变(突变率12.33％),突变分为7种类型,5例T126A、2例P127T/S、2例Q129H/R、2例M132L、3例T140/I、1例T143M和3例G145R.B和C基因型HBV"α"抗原决定簇突变率和"α"抗原决定簇双环之间的突变率无显著差异(P>0.05).结论:江西地区孕妇感染的B和C基因型HBV及其"α"抗原决定簇的点突变可能是致母婴传播高度相关的病毒因素.

目的 利用第三代测序技术,探讨世居藏族人群乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)准种变异特点.方法 2016年5月至2017年7月陆军军医大学第一附属医院感染科在藏南地区进行HBV流行病学调查,采集到藏族HBsAg阳性样本24例,作为高原世居藏族组,同时在感染科门诊收集24例样本作为平原汉族对照组,提取HBV DNA并扩增病毒全长序列,构建全基因组测序文库,采用第三代测序平台PacBio RSⅡ进行测序;借助ClustalW、MEGA、SimPlot等生物信息工具进行序列准种特征分析.结果 29例样本最终成功扩增并测序,其中高原世居藏族组9例,每个样本平均获得65条准种序列;对照组20例,每个样本平均获得124条准种序列.经比对分析,高原世居藏族组发现7例(7/9,77.8％) C/D1型重组HBV,由D4亚型与C2亚型HBV在750 nt重组而成;1例C/D2型HBV,由D3亚型与C2亚型HBV在1 500 nt重组而成;1例为C2型.C/D型HBV preC/C区复杂度、非同义突变率高于平原汉族对照组.C/D型HBV核酸变异谱与对照组不同,C/D重组型HBV核酸突变以Enh Ⅱ、BCP、preS区变异为主;而对照组HBV序列除了有BCP、preS变异,还有preC、S、X基因区变异.结论 世居藏族人HBV以C/D重组型为优势毒株,且以C/D1型占多数;世居藏族人C/D型HBV preC/C区准种复杂度、非同义突变率更高,而核酸变异集中在Enh Ⅱ、BCP、preS区.