目的:分析甲苯二异氰酸酯（TDI）职业暴露工人肺功能的改变与血清促炎细胞因子的相关性，探索TDI呼吸系统毒作用的效应评价指标。方法:于2014年10月，以中国西部地区某TDI生产厂中从事TDI合成工序、提纯工序、包装工序及上述生产过程的巡检工序的61名男性作业工人为TDI暴露组，主要经吸入蒸汽和气溶胶暴露；以该工厂中不接触TDI及其他已知致敏性化学物的62名男性企业管理人员作为对照组，与暴露组工人年龄匹配。问卷调查获得性别、工龄、年龄、职业史、暴露工龄等信息，检测工人肺功能指标[第一秒用力呼吸容积（FEV 1）、用力肺活量（FVC）、FEV 1/FVC]及血清中细胞因子[白细胞介素（IL）-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α等]水平；收集周末班后尿，测定尿液中TDI的代谢物甲苯二胺（TDA）浓度作为内暴露指标。采用Spearman秩相关分析细胞因子与肺功能指标的相关性；采用多重线性回归分析肺功能指标、细胞因子随TDI暴露浓度和时间变化的趋势。 结果:暴露组和对照组工人年龄 M（ P5~ P95）分别为36.5（24.0~51.0）和38.0（24.0~50.0）岁，暴露组工龄 M（ P5~ P95）为6.94（0.97~26.33）年，尿液TDA浓度 M（ P5 ~ P95）为15.56（2.28~112.16）ng/ml。与对照组比较，暴露组肺功能3项指标FVC、FEV 1、FEV 1/FVC以及血清中IL-8和TNF-α水平均明显降低（ P值均<0.05）。随着暴露浓度的增加和暴露时间的延长，血清TNF-α水平及FVC、FEV 1均呈降低的趋势，且呈剂量-效应和时间-效应关系（ P趋势值均< 0.05）。血清IL-8、TNF-α均与FVC、FEV 1、FEV 1/FVC呈正相关（ P值均<0.05）。 结论:TDI暴露工人血清炎性因子IL-8和 TNF-α水平与肺功能指标有关联，可作为TDI致呼吸系统毒作用的早期效应评价指标。

目的 观察亚慢性吸入染毒甲苯二异氰酸酯(toluene diisocyanate,TDI)对大鼠肺脏组织的氧化应激损伤影响.方法 无特定病原体级健康SD雄性大鼠随机分组,对照组大鼠予新鲜空气,低、中和高剂量组大鼠以动式染毒的方式暴露于TDI环境.观察大鼠肺脏组织的超微结构和组织病理学改变;采用化学比色法检测肺脏组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平;采用Real-time PCR检测法检测HO-1 mRNA相对表达水平,蛋白质免疫印迹法检测HO-1蛋白表达水平.结果 各剂量组大鼠体质量、肺组织质量和肺脏脏器系数均低于对照组(P＜0.05),各组大鼠体质量均随染毒时间的增加而增加(P＜0.05);肺组织病理学检查结果显示:TDI染毒后高剂量组大鼠肺组织见肺泡壁明显充血、水肿,肺泡壁明显增厚,肺泡腔内可见大量红细胞淤积等病理变化.肺组织超微结构检查结果显示:TDI染毒后高剂量组大鼠肺泡细胞肿胀、数量减少,细胞边界不清晰、形态不规则等.各剂量TDI染毒组大鼠肺组织中MDA水平分别高于对照组(P值均＜0.05),而GSH、GSH-Px、SOD和CAT水平分别低于对照组(P＜0.05);各组大鼠的HO-1基因和蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 亚慢性TDI染毒可导致大鼠肺脏组织的病理结构和超微结构发生改变,导致肺功能代谢酶水平的异常,从而诱导肺脏发生氧化应激损伤;但HO-1在肺脏氧化应激损伤中无明显变化.

上世纪70年代初期,Pepys等学者[1]最早提出特异性吸入试验(specific inhalation challenge,SIC),并将其成功应用于接触铂复合盐、抗菌药物、哌嗪、木尘、甲苯二异氰酸酯(TDI)、合成树脂所致哮喘患者的诊断过程中,认为SIC对哮喘的病因学诊断非常实用,能够再现或部分再现患者的临床特点,同时也可适用于过敏性肺炎的病因学诊断.之后SIC得到广泛应用,并被大多数国家或机构作为职业性变应性哮喘诊断的主要方法之一,被普遍认为是判断职业接触和哮喘发病关系的“金标准”.SIC也被称为变应原支气管激发试验(allergen bronchial provocation testing,A-BPT).

采用定性评估法、 综合指数法和国际采矿与金属委员会法(ICMM)矩阵法对涂料生产企业进行职业健康风险评估,探索其适用条件和适用范围.方法采用职业卫生学调查法调查4家涂料生产企业有机溶剂巡检岗位接触的有机溶剂种类、 接触情况和职业病防护措施;采用检测检验法检测岗位8小时平均接触浓度(CTWA);采用定性评估法、 综合指数法和ICMM矩阵法评估巡检工职业健康风险等级.采用比值法对评估结果进行转化,比较三种方法所得的评估结果.结果4家涂料生产企业巡检岗位接触的有机溶剂有苯、 甲苯、 二甲苯、 苯乙烯、 乙酸乙酯、 乙酸丁酯、 甲苯二异氰酸酯(TDI)、 甲基丙烯酸甲酯、 异丙醇、 正丁醇和丙酮.定性评估法中危害因素的危害等级为B～E级,接触等级为2～3级,风险等级为2～4级;综合指数法中危害等级为2～5级,接触等级为2～3级,风险等级为2～4级;ICMM矩阵法中健康后果描述为2～4级,暴露发生可能为高、 中、 低,风险等级为1～4级.定性评估法评估结果高于或等于综合指数法和ICMM矩阵法;CTWA高于职业接触限值(OELs)时,ICMM矩阵法评估结果高于或等于综合指数法;CTWA低于行动水平(1/2 OELs)时,ICMM矩阵法评估结果低于或等于综合指数法;高毒物在CTWA超过OELs时,低毒物在CTWA低于1/2 OELs时,三种方法的评估结果一致.结论三种方法针对某一危害因素的职业健康风险评估结果不完全一致,接触浓度超标时选用ICMM矩阵法和定性评估法更保守,接触浓度低于1/2 OELs时选用综合指数法和定性评估法更保守.

目的 识别、分析与评价某聚氨酯固化剂生产建设项目中可能存在的职业病危害因素,并提出相应的防护补充措施.方法 采用类比法、工程分析法、检查表法相结合的原则,对拟建工程可能产生的职业病危害因素及防护措施进行定性及定量评价.结果 类比项目生产过程中产生的主要职业病危害因素为苯、甲苯、乙苯、二甲苯、乙酸丁酯、二异氰酸甲苯酯(TDI)、邻苯二甲酸酐、甲基丙二醇、二甘醇、新戊二醇、三羟甲基丙烷、乙二醇、噪声,类比检测的结果均符合职业接触限值的要求.结论 本项目为职业病危害严重的建设项目,若能落实本报告中所提的补充措施及建议,从职业病防护角度分析,该建设项目是可行的.

目的 探讨JAK／STAT信号通路在大鼠变应性鼻炎(AR)鼻黏膜中的表达,探讨其在变应性鼻炎中的作用.方法 40只大鼠分为两组:对照组和变应性鼻炎组.变应性鼻炎组采用二异氰酸甲苯酯(TDI)制作大鼠实验性AR模型;对照组则给予TDI溶剂醋酸乙酯滴鼻.取两组大鼠下鼻甲组织,利用实时荧光定量PCR(q－PCR)检测JAK1、JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达,利用Western blot检测p－JAK1、p－JAK2、p－STAT1和p－STAT3蛋白表达.结果q－PCR结果显示,变应性鼻炎组JAK1、JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达均显著高于对照组(P ＜0.05);Western blot结果显示,变应性鼻炎组p－JAK1、p－JAK2、p－STAT1和p－STAT3蛋白表达均显著高于对照组(P ＜0.05).结论 变应性鼻炎发生后JAK／STAT信号通路被激活,可能是变应性鼻炎治疗的靶点.

目的 分析槲皮素(QUE)对大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)血清T细胞辅助因子Th1/Th2表达的影响.方法 采用二异氰酸甲苯酯(TDI)制作大鼠实验性AR模型并进行评分,45只大鼠按照数字随机法平分为3组:正常对照组、模型组和实验组,正常对照组为正常大鼠,模型组和实验组大鼠进行变应性鼻炎造模.实验组利用QUE 80 mg/kg腹腔注射治疗2周,而正常对照组和模型组均注射等量生理盐水.2周后HE染色观察各组大鼠鼻黏膜组织学变化;ELISA法检测血清中细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)以及IL-4、IL-5水平;实时荧光定量PCR (q-PCR)检测基因Tim1、Tim3表达.结果 2周后实验组评分显著低于正常对照组与模型组(P＜0.05);ELISA检测显示模型组IL-2、IFN-γ显著低于正常对照组(P＜0.05),IL-4,IL-5显著高于正常对照组(P＜0.05);实验组IL-2、IFN-γ显著高于模型组(P＜0.05),IL-4,IL-5显著低于模型组(P ＜0.05);q-PCR检测显示实验组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显低于模型组(P＜0.05),模型组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显高于正常对照组(P＜0.05),实验组大鼠鼻黏膜组织Tim1、Tim3表达明显高于正常对照组(P＜0.05).结论 QUE能不同程度减轻大鼠变应性鼻炎鼻部症状,改善鼻黏膜炎症程度;通过调节Th1和Th2细胞因子表达,从而调节大鼠变应性鼻炎Th 1/Th2细胞因子平衡,对变应性鼻炎具有一定保护作用.

将40只健康3周龄SPF级Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为4组(对照组及染毒低、中、高剂量组),每组10只.大鼠以笼养方式放入HOPE-MED 8050A型动式染毒柜内,各剂量组分别以3.06、12.25、49.00 mg/m3剂量的甲苯二异氰酸酯(TDI)吸入染毒,对照组予新鲜空气处理,6 h/d,5d/周,连续染毒13周.末次染毒后进行肝功能及氧化损伤指标的测定.在常规和超微显微镜下观察肝组织结构变化.与对照组相比,各剂量组大鼠血清生化酶中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和γ-谷氨酰基转移酶(GGT)均有不同程度的升高,碱性磷酸酶(ALP)有所降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);各剂量组大鼠肝组织丙二醛(MDA)含量升高,还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)含量均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,TDI染毒大鼠肝组织出现肿胀、坏死、部分组织溶解等病理变化;肝细胞呈现核皱缩、线粒体空泡等凋亡形态学特征.提示亚慢性吸入染毒TDI可诱导大鼠肝组织氧化损伤和细胞凋亡.

目的 探讨甲苯二异氰酸酯(TDI)对人支气管上皮细胞(16HBE)自噬的活化及炎性因子人白细胞介素(IL)-4、IL-6表达的影响.方法 ①制备TDI-人血清白蛋白(HSA),测定TDI-HAS中TDI的质量浓度.②分别以剂量为0.00 ～400.00 mg/L的TDI-HSA和HSA处理细胞12h后,以CCK-8实验测定细胞存活率,选择后续实验的TDI-HSA和HSA处理剂量.③分别以剂量为0.00～120.00 mg/L的TDI-HSA和HSA处理细胞12h后,以流式细胞仪检测细胞中活性氧(ROS)水平,以酶联免疫吸附法检测细胞上清液中IL-4和IL-6的水平.④以剂量为0.00～120.00 mg/L的TDI-HSA处理细胞12 h后,在透射电子显微镜下观察细胞自噬活动,以蛋白免疫印迹法测定酵母自噬相关基因6(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3β)和泛素结合蛋白P62的蛋白相对表达水平.结果 ①40.00、80.00、120.00 mg/L TDI-HSA组中TDI的质量浓度分别为0.44、0.89、1.33 mg/L.②CCK-8实验结果显示,剂量为120.00 mg/L以下的TDI-HSA和HSA不影响细胞存活率,选择0.00～ 120.00 mg/L为后续实验的TDI-HSA和HAS处理剂量.③40.00、80.00、120.00 mg/L TDI-HSA组16HBE细胞中ROS水平和细胞上清液中IL-4、IL-6的水平均高于同剂量HSA组(P＜0.01);16HBE细胞中ROS水平和细胞上清液中IL-4、IL-6的水平均随着TDI-HSA剂量的增加而增加(P＜0.01).④透射电镜观察显示,与0.00 mg/L组比较,40.00、80.00、120.00 mg/LTDI-HSA组16HBE细胞内自噬溶酶体数量明显增多,线粒体空泡化数量增加.随着TDI-HSA剂量的增加,16HBE细胞上清液中Beclin1蛋白相对表达水平及LC3β-Ⅱ/Ⅰ比值逐渐升高(P＜0.05),P62蛋白相对表达水平逐渐下降(P＜0.01).结论 TDI-HSA可诱导16HBE细胞ROS及炎性因子表达水平升高并诱导自噬的活化;细胞自噬可能是TDI诱导职业性哮喘发生中气道炎症反应的重要因素.

[目的]建立工作场所空气中甲苯二异氰酸酯(TDI)的浸渍滤纸采集-高效液相色谱测定方法,以解决甲苯二胺假阳性干扰的问题.[方法]空气中甲苯二异氰酸酯与浸渍滤纸上的1-(2-吡啶基)哌嗪反应生成TDI-脲衍生物而被吸附于滤纸上,经洗脱、过滤后,采用高效液相色谱仪测定.[结果]甲苯二异氰酸酯的检出限为0.003 μg/mL,定量限为0.010μg/mL,在0.010～5.000 μg/mL范围内线性良好(r=0.999 9),滤膜采用滴加法制备,采集效率大于96.2％,洗脱效率为93.8％～97.6％,方法精密度为1.22％～4.08％(n=6),回收率为96.7％～99.1％,滤纸吸附容量为45μgTDI.[结论]本法优化了TDI标准曲线的配制方法,可避免共存甲苯二胺的干扰,可应用于空气中TDI的高效、快速检测.