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二烯丙基三硫化物对人胃癌细胞株BGC823和AGS叶酸受体α表达的影响及相关调控机制
编辑人员丨5天前
目的:探讨二烯丙基三硫化物(DATS)对人胃癌细胞叶酸受体α(FRα)表达的影响及相关调控机制。方法:选择人胃癌细胞株BGC823、AGS,用10、20、40、80 μmol/L DATS处理BGC823细胞48 h,5、10、20、40 μmol/L DATS处理AGS细胞48 h,以6 μmol/L组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)处理细胞作为表观遗传研究的阳性对照,以未经DATS处理的细胞作为阴性对照。采用流式细胞术检测DATS诱导胃癌细胞凋亡情况。在DATS处理BGC823、AGS细胞48 h后,换无DATS细胞培养液培养不同时间,检测FRα蛋白表达变化。采用6 μmol/L TSA或40 μmol/L DATS处理BGC823细胞和AGS细胞,蛋白质印迹法检测FRα、HDAC1和HDAC2以及组蛋白H3赖氨酸9位点乙酰化修饰(H3K9ac)和组蛋白H4赖氨酸5位点乙酰化修饰(H4K5ac)蛋白表达水平。应用BGC823细胞接种BALB/c裸鼠,建立移植瘤模型,DATS组裸鼠腹腔注射10 mg/kg DATS 16 d后,提取荷瘤组织蛋白,进行靶蛋白表达的检测;对照组注射等量0.9% NaCl溶液。结果:BGC823和AGS细胞经梯度浓度DATS处理后细胞FRα蛋白表达均呈剂量依赖性上调( F=65.68, P<0.01; F=26.65, P<0.01)。撤除DATS后,BGC823和AGS细胞FRα蛋白表达逐渐降低并恢复至初始水平( F=74.57, P<0.01; F=30.92, P<0.01)。随着DATS处理浓度的增加,BGC823、AGS细胞凋亡率均增加( F=32.95, P<0.01; F=38.97, P<0.01)。BGC823、AGS细胞经TSA处理后FRα蛋白表达分别上调约4.5倍( t=-12.62, P<0.01)和3.6倍( t=-10.00, P<0.01)。分别经40、20 μmol/L DATS作用后,BGC823和AGS细胞FRα蛋白表达水平上调(均 P<0.01),HDAC1、HDAC2的表达受抑制(均 P<0.01),H3K9ac和H4K5ac的乙酰化修饰水平升高(均 P<0.01)。裸鼠荷瘤实验显示,给药后第16天,DATS组移植瘤体积小于对照组[(214±39)mm 3比(577±98)mm 3],差异有统计学意义( t=4.86, P<0.01)。与对照组相比,DATS组移植瘤组织FRα蛋白表达上调约2倍( t=-5.29, P<0.01),HDAC1和HDAC2蛋白表达水平均下调( t=9.36, P<0.01; t=9.88, P<0.01)。 结论:DATS以剂量依赖和可逆性方式上调人胃癌BGC823、AGS细胞FRα蛋白表达,其机制可能与DATS影响肿瘤细胞组蛋白乙酰化修饰有关。
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编辑人员丨5天前
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二烯丙基硫化物在百草枯中毒大鼠肺组织中的作用
编辑人员丨5天前
目的:探讨二烯丙基硫化物(DAS)对百草枯(PQ)中毒所致大鼠急性肺损伤的作用机制。方法:于2016年5月,将成年清洁级雄性Wistar大鼠32只,按随机数字表法分为对照组、模型(PQ)组、DAS治疗组及地塞米松(DXM)治疗组,每组8只。一次性灌胃PQ溶液(70 mg/kg)制备PQ中毒大鼠模型;制模前后分别经腹腔注射DAS 100 mg/kg(DAS治疗组)、生理盐水(对照组和PQ组)及DXM 1 mg/kg(DXM治疗组)。24 h后处死大鼠,观察肺组织损伤程度并进行病理学评分;测定肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达;分离获取肺泡巨噬细胞并培养,取其上清液测定NO含量;测定大鼠肺泡巨噬细胞中iNOS mRNA表达。结果:与对照组比较,PQ组大鼠肺组织病理损伤评分和iNOS表达明显增加,并且肺泡巨噬细胞分泌NO含量及iNOS mRNA表达明显增加,差异均有统计学意义( P<0.05)。与PQ组比较,DAS治疗组和DXM治疗组大鼠肺组织病理损伤评分和iNOS表达明显降低,肺泡巨噬细胞分泌NO含量及iNOS mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义( P<0.05)。DXM治疗组和DAS治疗组间上述指标差异均无统计学意义( P>0.05)。 结论:DAS可能对PQ中毒大鼠的急性肺损伤具有保护作用。
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编辑人员丨5天前
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DATS对缝线诱导的大鼠角膜新生血管的影响及机制研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:探讨二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)抑制缝线诱导的大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的生长情况,检测大鼠新生血管化角膜中VEGF、p-AKT的表达量,初步探讨其抑制CNV的可能机制.方法:缝线法诱导大鼠CNV模型,随机分为A组:含DMSO的生理盐水对照组(10只);B组:25μmol/L DATS治疗组(10只);C组:50μmol/L DATS治疗组(10只);D组:100μmol/L DATS治疗组(10只);E组:200 μmol/LDATS治疗组(10只).缝线后第7d裂隙灯下观察各组CNV的生长情况并计算面积.缝线后第14d取各组大鼠角膜组织行HE染色,光镜下观察各组角膜病理组织形态,并采用RT-PCR法检测VEGF mRNA的表达情况,Western-blot法检测VEGF、p-AKT蛋白表达情况.结果:C、D、E组的CNV面积分别与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).HE切片显示,与A组相比,B、C、D组角膜水肿、新生血管、炎症细胞浸润情况逐渐减轻.与A组相比,B、C、D、E组的VEGF mRNA的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与A组相比,C、D、E组的VEGF、p-AKT蛋白的表达逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:DATS能够抑制缝线诱导的大鼠CNV的形成,其机制可能与抑制VEGF的表达及使得p-AKT的失活有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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AD模型小鼠脑组织AQP4、SNTA1表达水平的变化及DADS的干预研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的干预作用,为AD的防治提供理论依据.方法 将20只5月龄APPswe/PS1 dE9双转基因鼠按窝别和体质量分为AD模型组和AD干预组,同时将野生型小鼠分为野生对照组和野生干预组,每组10只.干预组小鼠每日1次灌胃给予50 mg/kg DADS,AD模型组小鼠和野生对照组小鼠每日1次灌胃等量溶媒,连续处理6月.采用水迷宫和旷场实验测定小鼠神经行为学变化.免疫组化法分析大脑皮质β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积情况,qRT-PCR和Western blot法分别检测大脑皮质水通道蛋白4(AQP4)、α-互养蛋白(SNTA1) mRNA及蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,AD模型组小鼠水迷宫实验中定位航行逃避潜伏期延长、穿越平台次数减少,在旷场实验中中央停留时间延长、穿格次数和直立次数减少,大脑皮质Aβ沉积数量增多,AQP4mRNA及蛋白表达升高,SNTA1mRNA及蛋白的表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05或P< 0.01).与AD模型组相比,DADS干预组小鼠的定位航行逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增多,中央停留时间缩短、穿格次数和直立次数增多,大脑皮质Aβ沉积数量减少,AQP4及SNTA1 mRNA及蛋白的表达水平上调,差异均有统计学意义(P< 0.05或P< 0.01).结论 AD模型小鼠大脑皮质AQP4表达升高,但SNTA1表达的降低可改变AQP4极性分布而影响AQP4的功能.DADS可明显减少AD模型小鼠大脑皮质Aβ沉积,改善认知能力,其作用机制可能与DADS调节AQP4表达及其极性分布有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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大蒜辣素和阿藿烯的制备工艺研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究制备大蒜辣素和阿藿烯的化学合成和纯化工艺.方法 用过氧化氢氧化烯丙基二硫化物合成大蒜辣素,用液-液萃取法纯化产物.大蒜辣素溶解于甲醇,通过加热生成阿藿烯,再用RP-HPLC纯化产物.结果 于20℃将烯丙基二硫化物氧化成大蒜辣素的反应呈零级反应动力学.用液-液萃取方法纯化大蒜辣素,取得较佳纯化效果,纯度可达92.2%(HPLC).以甲醇为溶剂加热制大蒜辣素,阿藿烯为主要产物,经过RP-HPLC制备,得到纯度为98.8%(HPLC)的阿藿烯.结论 以烯丙基二硫化物合成大蒜辣素并进一步合成阿藿烯,易于在实验室开展,此法可用于为研究大蒜及其制品的质量控制和药理研究提供标准物质.
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编辑人员丨2023/8/6
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大蒜素药理学作用机制及研究进展
编辑人员丨2023/8/6
大蒜载于《神农本草经》,为百合科植物大蒜(A11ium sativum L.)的鳞茎,别名独蒜、独头蒜、胡蒜.大蒜味辛,性温;归脾、胃、肺经,具有暖脾胃、行滞气、解毒功能.大蒜素是大蒜中含硫有机化合物的主要有效成分,化学名为二烯丙基三硫化物,其分子式为C6H9S3,结构式为CH2 =CH-CH2-S-S-S-CH2-CH=CH2.近年来大量国内外研究表明,大蒜素具有多种药理学作用,对肿瘤、心血管系统疾病有良好的治疗作用[1].此外,还具有抗炎、抗菌、抗氧化作用.本文基于目前国内外关于大蒜素的研究综述其在各种疾病中的药理学作用机制.
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编辑人员丨2023/8/6
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大葱挥发油的提取工艺、GC-MS分析及抗菌活性研究
编辑人员丨2023/8/6
为优化大葱挥发油提取工艺并建立气相-质谱联用法(GC-MS)分析大葱挥发油成分,并研究大葱挥发油的抗菌活性.本研究通过单因素实验和正交实验对超声时间,料液比和提取时间的考察,采用超声辅助水蒸气蒸馏的方法提取大葱挥发油,优化出大葱挥发油提取最佳工艺为超声40 min,料液比1:3,蒸馏时间3h.大葱挥发油实际提取率为0.042 96%.运用GC-MS对其主要化学成分进行鉴定,通过NIST质谱库检索,鉴定了其中42个主要化合物,运用峰面积归一法确定各个组分的含量,其中主要物质为含硫化合物,含量较多的是氟胞嘧啶、烯丙基异丙基硫醚、丙烯基甲基硫醚,二甲基三硫化物、二丙基三硫化物、四硫化物、噻吩、噻烷和噻唑类.抗菌实验表明大葱挥发油对所选取得8种菌株均有很好的活性.本实验提取工艺优化后使提取率增加,抗菌实验表明大葱的挥发油具有抗菌作用,而成分分析鉴定出大量硫化物,可能为抑菌有效成分.
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编辑人员丨2023/8/6
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大蒜素抗妇科恶性肿瘤机制的研究进展
编辑人员丨2023/8/6
常见的妇科恶性肿瘤如宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌和乳腺癌,发病率呈现逐年上升的趋势,严重危害女性的健康. 妇科恶性肿瘤属中医学"癥瘕"范畴,就辨证而论有明显的共同性,即正虚、邪实,是全身属虚、局部属实[1]. 传统的手术、放疗和化疗虽然能够延长妇科恶性肿瘤患者的生存时间并提高患者的生存质量[2] ,但是极易损伤人体正气,导致气血不足、阴阳失调,而出现毒副反应或并发症. 另外,肿瘤细胞耐药性也是妇科肿瘤复发和预后差的重要原因[3]. 因此寻找疗效确切、毒副作用少的药物成为研究热点. 大蒜素( allicin)是百合科葱属草本植物的地下鳞茎大蒜中的主要有效成分,化学名为二烯丙基三硫化物( diallyl trisulfide,DATS) ,其结构式为 CH2 =CH -CH2 -S -S -S -CH2 -CH =CH2. 近年来研究发现,大蒜素具有活血化瘀、益气解毒、宣通温补之功效[4] ,其抗肿瘤作用在基础研究和临床试验中逐渐被证实,已作为多种癌症的辅助治疗药物投入临床使用,在妇科恶性肿瘤治疗中具有广阔的应用前景. 现就大蒜素抗妇科恶性肿瘤作用机制作一综述,为妇科恶性肿瘤的中西医结合治疗提供理论根据.
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编辑人员丨2023/8/6
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二烯丙基二硫化物诱导G2/M期阻滞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨二烯丙基二硫化物(DADS)诱导G2/M期阻滞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制.方法 将不同浓度的DADS分别处理卵巢癌SK-OV-3和OVCAR-3细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,裸鼠移植模型观察体内抑瘤效果.进而应用流式细胞术检测细胞周期分布的变化,Western blot检测细胞中G2/M检验点相关信号通路、增殖和凋亡相关蛋白的表达.结果 MTT法检测显示,不同浓度的DADS作用SKOV-3 (F=247.86,P=0.000)和OVCAR-3细胞(F=302.54,P=0.000)后,随着DADS浓度增高,细胞增殖抑制率明显升高,呈浓度依赖性.DADS处理24h时SK-OV-3 (F =335.12,P=0.000)和OVCAR-3细胞(F=347.43,P=0.000)的增殖抑制率明显高于处理12 h和48 h时的细胞抑制率,呈明显的时间依赖性.流式细胞术检测结果显示,不同浓度的DADS作用SK-OV-3、OVCAR-3细胞后,随着DADS浓度的增高,细胞凋亡率明显升高,呈明显的浓度依赖性(P<0.05).DADS处理24h时SK-OV-3和OVCAR-3细胞的凋亡率明显高于处理12和48h时,呈明显的时间依赖性(P<0.05).与空白处理组相比,腹腔注射DADS溶液可明显抑制卵巢癌细胞的裸鼠移植瘤体积(F=548.23,P=0.000;F=311.84,P=0.000).将30 mg/L的DADS作用于SK-OV-3和OVCAR-3细胞24h后,与空白处理细胞相比,DADS处理后的SK-OV-3和OVCAR-3细胞中处于G2期的细胞百分率明显增加(F=375.11,P=0.000;F=256.48,P=0.000).将30 mg/L DADS分别作用于SK-OV-3和OVCAR-3细胞24h后,p-Chk1 (ser345) (F=108.89,P=0.013;F=97.58,P=0.018)、p-CDC25C(ser216) (F=87.25,P=0.025;F=114.25,P=0.009)、p-P53 (ser15) (F=112.41,P=0.011;F=255.87,P=0.000)、P21WAF1(F=246.38,P=0.001;F=141.36,P=0.005)和p-CDK1(Thr14/Tyr15)蛋白(F=298.12,P=0.000;F=233.15,P=0.000)的表达明显增加,CDK1 (F=308.24,P=0.000;F=257.55,P=0.000)和CyclinB1蛋白(F =223.15,P=0.001;F=241.28,P=0.000)的表达明显减少,增殖和凋亡相关蛋白PCNA(F=77.36,P=0.031;F=157.28,P=0.001)、Ki-67(F=205.64,P=0.007;F=315.22,P=0.000)和Survivin蛋白(F=122.13,P=0.013;F=188.24,P=0.000)表达明显减少,Cleaved-caspase3蛋白表达明显增加(F=86.46,P=0.023;F=99.11,P=0.009).结论 DADS可抑制卵巢癌细胞增殖,诱导其凋亡;其分子机制可能与G2/M检验点Chk1-CDC25C和P53-P21WAF1通路激活、CDK1活性降低、CDK1和CyclinB1蛋白表达减少,最终导致卵巢癌细胞G2/M期阻滞有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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二烯丙基三硫化物对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的作用
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨二烯丙基三硫化物(DATS)对TNF-α诱导的人RA-成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖以及炎症因子、MMPs和血管内皮生长因子(VEGF)分泌的影响.方法 体外培养RA-FLS,采用不同浓度DATS处理细胞,通过CCK-8法测定细胞增殖的活性,加用TNF-α刺激后,通过实时荧光定量(q)-PCR、ELISA检测IL-1β、MMP-1、VEGF的mRNA和蛋白的表达水平,采用单因素方差分析比较多组定量资料,采用LSD-t法比较组间均数.结果 分离出的RA-FLS中CD90、CD29表达的阳性率>90%.经100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L DATS处理,细胞增殖活力分别为[(98.92±0.40)%、(95.91±0.32)%、(94.05±0.24)%],与正常对照组比较增殖活性均下降,加入200μmol/L、300μmol/L DATS的实验组差异有统计学意义(t=4.46,P<0.05;t=7.98,P<0.05).加用TNF-α刺激后,与实验对照组相比,加入100μmol/L DATS实验A组中的IL-6 mRNA相对表达量升高[(1.14±0.04)倍,t=5.74,P<0.05],但蛋白变化差异无统计学意义,MMP-1、VEGF蛋白及mRNA变化差异无统计学意义.加入200μmol/L DATS实验B组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平分别为[(108.0±4.7)ng/L,t=-63.79,P<0.05;(26.0±1.0)ng/L,t=-9.68,P<0.05;(57.9±0.7),t=-34.59,P<0.05]、mRNA较实验对照组的相对表达量分别为[(0.42±0.06)倍,t=-23.47,P<0.05;(0.14±0.03)倍,t=-36.59,P<0.05;(0.36±0.09)倍,t=-13.1,P<0.05];加入300μmol/L DATS实验C组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平[(24.2±2.3)ng/L,t=-88.69,P<0.05;(22.7±1.0)ng/L,t=-14.13,P<0.05;(34.5±1.7),t=-48.45,P<0.05],mRNA较实验组对照组的相对表达量为[(0.041±0.027)倍,t=-38.48,P<0.05;(0.027±0.027)倍,t=-41.22,P<0.05;(0.131±0.047)倍,t=-17.74,P<0.05],均较实验对照组明显降低,且2组蛋白水平间比较差异有统计学意义(t=-24.89,P<0.05;t=-4.45,P<0.05;t=-13.87,P<0.05).结论 DATS浓度≥200μmol/L时能够抑制RA-FLSs的增殖,并抑制其分泌IL-6、MMP-1、VEGF,而且呈剂量依赖关系.
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编辑人员丨2023/8/6
