目的:探讨二烯丙基三硫化物（DATS）对人胃癌细胞叶酸受体α（FRα）表达的影响及相关调控机制。方法:选择人胃癌细胞株BGC823、AGS，用10、20、40、80 μmol/L DATS处理BGC823细胞48 h，5、10、20、40 μmol/L DATS处理AGS细胞48 h，以6 μmol/L组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂曲古抑菌素A（TSA）处理细胞作为表观遗传研究的阳性对照，以未经DATS处理的细胞作为阴性对照。采用流式细胞术检测DATS诱导胃癌细胞凋亡情况。在DATS处理BGC823、AGS细胞48 h后，换无DATS细胞培养液培养不同时间，检测FRα蛋白表达变化。采用6 μmol/L TSA或40 μmol/L DATS处理BGC823细胞和AGS细胞，蛋白质印迹法检测FRα、HDAC1和HDAC2以及组蛋白H3赖氨酸9位点乙酰化修饰（H3K9ac）和组蛋白H4赖氨酸5位点乙酰化修饰（H4K5ac）蛋白表达水平。应用BGC823细胞接种BALB/c裸鼠，建立移植瘤模型，DATS组裸鼠腹腔注射10 mg/kg DATS 16 d后，提取荷瘤组织蛋白，进行靶蛋白表达的检测；对照组注射等量0.9% NaCl溶液。结果:BGC823和AGS细胞经梯度浓度DATS处理后细胞FRα蛋白表达均呈剂量依赖性上调（ F＝65.68， P<0.01； F＝26.65， P<0.01）。撤除DATS后，BGC823和AGS细胞FRα蛋白表达逐渐降低并恢复至初始水平（ F＝74.57， P<0.01； F＝30.92， P<0.01）。随着DATS处理浓度的增加，BGC823、AGS细胞凋亡率均增加（ F＝32.95， P<0.01； F＝38.97， P<0.01）。BGC823、AGS细胞经TSA处理后FRα蛋白表达分别上调约4.5倍（ t＝-12.62， P<0.01）和3.6倍（ t＝-10.00， P<0.01）。分别经40、20 μmol/L DATS作用后，BGC823和AGS细胞FRα蛋白表达水平上调（均 P<0.01），HDAC1、HDAC2的表达受抑制（均 P<0.01），H3K9ac和H4K5ac的乙酰化修饰水平升高（均 P<0.01）。裸鼠荷瘤实验显示，给药后第16天，DATS组移植瘤体积小于对照组[（214±39）mm 3比（577±98）mm 3]，差异有统计学意义（ t＝4.86， P<0.01）。与对照组相比，DATS组移植瘤组织FRα蛋白表达上调约2倍（ t＝-5.29， P<0.01），HDAC1和HDAC2蛋白表达水平均下调（ t＝9.36， P<0.01； t＝9.88， P<0.01）。 结论:DATS以剂量依赖和可逆性方式上调人胃癌BGC823、AGS细胞FRα蛋白表达，其机制可能与DATS影响肿瘤细胞组蛋白乙酰化修饰有关。

目的:观察大蒜素有效成分二烯丙基化三硫(DATS)对感染根管粪肠球菌生物膜的作用.方法:选取60颗健康单根管恒牙,45颗建立粪肠球菌感染根管模型.分为4组(n=15):阴性对照组(未感染组)、DATS组、氢氧化钙组和阳性对照(无抗菌处理)组.二倍稀释法测定DATS对粪肠球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).分别于实验第1天、第3天和第7天,取根管内层牙本质粉末,置于2mL BHI中培养72 h,电子比浊仪读取肉汤上层液体浊度.使用SPSS 26.0统计软件进行数据分析.结果:DATS对粪肠球菌的MIC和MBC(μg/mL)分别为2 560和5 120.第1天,DATS组、氢氧化钙组、阳性对照组与阴性对照组浑浊度,DATS组小于氢氧化钙组(P＜0.05);第3天时,DATS组与阴性对照组浑浊度无统计学差别(P=0.454),已基本杀灭细菌;第7天时,氢氧化钙糊剂组与阴性对照组有统计学差别(P＜0.05),不能完全杀灭细菌.各时间点阳性对照组浑浊度最高.结论:DATS能够有效杀灭或抑制感染根管中的粪肠球菌.

目的:探讨二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS)抑制缝线诱导的大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的生长情况,检测大鼠新生血管化角膜中VEGF、p-AKT的表达量,初步探讨其抑制CNV的可能机制.方法:缝线法诱导大鼠CNV模型,随机分为A组:含DMSO的生理盐水对照组(10只);B组:25μmol/L DATS治疗组(10只);C组:50μmol/L DATS治疗组(10只);D组:100μmol/L DATS治疗组(10只);E组:200 μmol/LDATS治疗组(10只).缝线后第7d裂隙灯下观察各组CNV的生长情况并计算面积.缝线后第14d取各组大鼠角膜组织行HE染色,光镜下观察各组角膜病理组织形态,并采用RT-PCR法检测VEGF mRNA的表达情况,Western-blot法检测VEGF、p-AKT蛋白表达情况.结果:C、D、E组的CNV面积分别与A组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).HE切片显示,与A组相比,B、C、D组角膜水肿、新生血管、炎症细胞浸润情况逐渐减轻.与A组相比,B、C、D、E组的VEGF mRNA的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与A组相比,C、D、E组的VEGF、p-AKT蛋白的表达逐渐下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:DATS能够抑制缝线诱导的大鼠CNV的形成,其机制可能与抑制VEGF的表达及使得p-AKT的失活有关.

目的 探讨大蒜素(DATS)对骨肉瘤获得性耐药细胞株的作用及其机制.方法 体外间歇刺激法建立对阿霉素(DOX)产生获得性耐药的骨肉瘤细胞株Saos-2/DOX,MTT法检测DOX对Saos-2及Saos-2/DOX细胞的半数抑制浓度(IC50),并计算Saos-2/DOX细胞的耐药指数(RI);MTT法筛选DATS处理Saos-2/DOX细胞的非细胞毒性浓度;DATS与DOX单独或联合干预Saos-2/DOX细胞24、48、72 h后,MTT法检测细胞生存率;不同浓度DATS(0、10、50、100μmol/L)处理Saos-2/DOX细胞48 h后,Western blotting法检测细胞中pERK1/2、ERK1/2、pAKT1和AKT1蛋白表达.结果 成功建立对DOX耐药的骨肉瘤细胞株Saos-2/DOX,细胞的RI值为6.94.DATS干预Saos-2/DOX细胞的非细胞毒性浓度为10μmol/L.DOX 100μg/L与DATS 10μmol/L联合处理Saos-2/DOX耐药细胞24 h后细胞存活率显著低于DATS 10μmol/L或DOX 100μg/L单独处理,且随处理时间延长逐渐降低(P均<0.05).不同浓度DATS处理Saos-2/DOX细胞48 h后,ERK1/2、pAKT1和AKT1蛋白表达变化差异无统计学意义(P均>0.05),而pERK1/2蛋白表达水平随DATS浓度增高显著增加(P均<0.05).结论 DATS可能通过激活ERK1/2信号通路,逆转Saos-2/DOX细胞的获得性耐药.

帕金森病(PD)是一种慢性进行性神经系统变性疾病,患者黑质纹状体多巴胺能神经元的变性脱失会伴随有突触前膜多巴胺转运蛋白(DAT)数量及功能的明显下降.DAT显像剂11C-Altropane可与DAT特异性结合,且比同类药物吸收快、具有更高的亲和力,能直接、灵敏地反映突触前多巴胺能神经元的变化,是PD早期诊断的最佳手段.笔者介绍了PD诊断的现状、PET显像剂的原理及发展过程、11C-Altropane的合成及其作为PET显像剂在临床研究中的应用.

目的 探讨大蒜素(DATS)对大鼠冠状动脉微栓塞(CME)后对心肌凋亡的影响及意义.方法 经左心室注射42 μm微栓塞球建立CME模型后存活的SD大鼠20只,随机分为单纯微栓塞组(CME组)与大蒜素预处理组(DATS组),每组10只.DATS组术前连续7 d给予40 mg/(kg·d)腹腔注射.另选经左心室注射等量生理盐水后存活SD大鼠10只为假手术组(Sham组).术后6 h行心脏超声检查,TUNEL染色检测心肌凋亡,应用实时定量PCR及免疫印迹法检测各组大鼠心肌的蛋白激酶B(Akt)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达,并采集血清检测大鼠心肌酶cTnI的水平.结果 与Sham组比较,CME组和DATS组心功能明显下降(P<0.05),Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Akt mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),cTnI水平明显升高(P<0.05).与CME组比较,DATS组心功能明显改善(P<0.05),Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Akt mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),cTnI水平明显降低(P<0.05).结论 大蒜素预处理可明显减少CME后心肌细胞凋亡并改善心功能,其机制可能是通过激活Akt从而阻断心肌细胞中Caspase-3介导的死亡受体凋亡途径的激活.

目的 观察二丙烯三硫化物(diallyl trisulfide, DATS)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture, CLP)诱导大鼠急性肺损伤的保护作用.方法 采用CLP法制作急性肺损伤动物模型.30只雄性SD大鼠术前禁食16 h,腹腔注射10%水合氯醛4 ml/kg麻醉后,采用随机数字表法将动物分成3组(每组10只):sham手术组(Ⅰ组)、CLP+生理盐水(normal saline, NS)组(Ⅱ组)和CLP+DATS组(Ⅲ组).Ⅰ组和Ⅱ组经尾静脉注射NS 10 ml/kg,而Ⅲ组尾静脉注射DATS 10 mg/kg.模型制作完毕后0 h(T0)、6 h(T6)和12 h(T12)经大鼠左颈总动脉抽动脉血测动脉血气.术后所有30只雄性SD大鼠皮下注射生理盐水0.05 ml/g.手术后12 h处死SD大鼠留取肺组织标本,测定肺组织湿/干重比(wet/dry weight ratio, W/D)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde, MDA)和一氧化氮(nitric oxide, NO)含量,测定肺组织胞质NF-κB P65、NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB, IκB-α)和胞核NF-κB P65的水平,光镜下观察大鼠肺组织的病理变化.另取30只雄性SD大鼠,分组和实验方法同前,观察3组大鼠24 h生存率. 结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组和Ⅲ组T6和T12时PaO2及SOD活性降低(P<0.05),PaCO2、肺组织W/D、MPO活性、MDA和NO含量升高(P<0.05).与Ⅰ组比较,Ⅱ组光镜下炎症反应明显加重,胞质NF-κB P65和IκB-α减少(P<0.05),胞核NF-κB P65增加(P<0.05),24 h生存率降低(P<0.05).与Ⅱ组比较,Ⅲ组T6和T12时PaO2、SOD活性增加(P<0.05),PaCO2、肺组织W/D、MPO活性、MDA和NO含量降低(P<0.05),光镜下肺组织的炎症反应明显减轻,胞质NF-κB P65和IκB-α增加(P<0.05),胞核NF-κB P65减少(P<0.05),24 h生存率提高(P<0.05).结论 DATS对CLP诱导的SD大鼠急性肺损伤有保护作用.

常见的妇科恶性肿瘤如宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌和乳腺癌,发病率呈现逐年上升的趋势,严重危害女性的健康. 妇科恶性肿瘤属中医学"癥瘕"范畴,就辨证而论有明显的共同性,即正虚、邪实,是全身属虚、局部属实[1]. 传统的手术、放疗和化疗虽然能够延长妇科恶性肿瘤患者的生存时间并提高患者的生存质量[2] ,但是极易损伤人体正气,导致气血不足、阴阳失调,而出现毒副反应或并发症. 另外,肿瘤细胞耐药性也是妇科肿瘤复发和预后差的重要原因[3]. 因此寻找疗效确切、毒副作用少的药物成为研究热点. 大蒜素( allicin)是百合科葱属草本植物的地下鳞茎大蒜中的主要有效成分,化学名为二烯丙基三硫化物( diallyl trisulfide,DATS) ,其结构式为 CH2 =CH -CH2 -S -S -S -CH2 -CH =CH2. 近年来研究发现,大蒜素具有活血化瘀、益气解毒、宣通温补之功效[4] ,其抗肿瘤作用在基础研究和临床试验中逐渐被证实,已作为多种癌症的辅助治疗药物投入临床使用,在妇科恶性肿瘤治疗中具有广阔的应用前景. 现就大蒜素抗妇科恶性肿瘤作用机制作一综述,为妇科恶性肿瘤的中西医结合治疗提供理论根据.

目的 探讨二烯丙基三硫化物(DATS)对TNF-α诱导的人RA-成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖以及炎症因子、MMPs和血管内皮生长因子(VEGF)分泌的影响.方法 体外培养RA-FLS,采用不同浓度DATS处理细胞,通过CCK-8法测定细胞增殖的活性,加用TNF-α刺激后,通过实时荧光定量(q)-PCR、ELISA检测IL-1β、MMP-1、VEGF的mRNA和蛋白的表达水平,采用单因素方差分析比较多组定量资料,采用LSD-t法比较组间均数.结果 分离出的RA-FLS中CD90、CD29表达的阳性率>90％.经100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L DATS处理,细胞增殖活力分别为[(98.92±0.40)％、(95.91±0.32)％、(94.05±0.24)％],与正常对照组比较增殖活性均下降,加入200μmol/L、300μmol/L DATS的实验组差异有统计学意义(t=4.46,P<0.05;t=7.98,P<0.05).加用TNF-α刺激后,与实验对照组相比,加入100μmol/L DATS实验A组中的IL-6 mRNA相对表达量升高[(1.14±0.04)倍,t=5.74,P<0.05],但蛋白变化差异无统计学意义,MMP-1、VEGF蛋白及mRNA变化差异无统计学意义.加入200μmol/L DATS实验B组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平分别为[(108.0±4.7)ng/L,t=-63.79,P<0.05;(26.0±1.0)ng/L,t=-9.68,P<0.05;(57.9±0.7),t=-34.59,P<0.05]、mRNA较实验对照组的相对表达量分别为[(0.42±0.06)倍,t=-23.47,P<0.05;(0.14±0.03)倍,t=-36.59,P<0.05;(0.36±0.09)倍,t=-13.1,P<0.05];加入300μmol/L DATS实验C组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平[(24.2±2.3)ng/L,t=-88.69,P<0.05;(22.7±1.0)ng/L,t=-14.13,P<0.05;(34.5±1.7),t=-48.45,P<0.05],mRNA较实验组对照组的相对表达量为[(0.041±0.027)倍,t=-38.48,P<0.05;(0.027±0.027)倍,t=-41.22,P<0.05;(0.131±0.047)倍,t=-17.74,P<0.05],均较实验对照组明显降低,且2组蛋白水平间比较差异有统计学意义(t=-24.89,P<0.05;t=-4.45,P<0.05;t=-13.87,P<0.05).结论 DATS浓度≥200μmol/L时能够抑制RA-FLSs的增殖,并抑制其分泌IL-6、MMP-1、VEGF,而且呈剂量依赖关系.

目的 比较二烯丙基硫化物(Diallyl sulfide,DAS)、二烯丙基二硫(Diallyl disulfide,DADS)、二烯丙基三硫(Diallyl trisulfide,DATS)和大蒜油对于饲喂高脂饲料雄性Wistar大鼠的降血脂效果.方法 70只健康雄性Wistar大鼠(200±20)g,适应性喂养7d后,随机分为溶剂对照组10只和实验组60只.实验组采用高脂饲料饲喂.7d后实验组根据大鼠血清总胆固醇(TC)水平,随机分为高脂模型组、高脂+DAS组(160 mg/kg.bw)、高脂+DADS组(60 mg/kg· bw)、高脂+DATS组(40 mg/kg.bw)、高脂+大蒜油组(100 mg/kg.bw)和高脂+辛伐他汀对照组(4 mg/kg·bw),经口灌胃,1次/d,连续28 d.处死动物后检测血清中甘油三酯(TG)、TC、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C);肝组织匀浆检测TG和TC量;油红O染色观察脂肪在肝组织的沉积情况.结果 与高脂模型组相比,DADS和DATS干预组TC、TG和LDL-C浓度下降(P＜0.01或0.05),HDL-C浓度上升(P＜0.01);大蒜油干预组TC和TG浓度下降(P＜0.01或0.05),HDL-C浓度上升(P＜0.01),差异均有统计学意义.与高脂模型组相比,DAS、DADS、DATS与大蒜油干预组肝匀浆的TG和TC浓度均下降(P＜0.01或0.05),差异均有统计学意义.油红O染色光学显微镜下观察,与高脂模型组相比,DAS、DADS、DATS和大蒜油干预组脂滴数目明显减少,脂滴面积分别减少56.10％、96.29％、90.04％和81.18％(P＜0.01或0.05),差异均有统计学意义.结论 DADS、DATS和大蒜油均有降低血脂的作用,其中以DADS效果最佳.