目的:研究补肺壮精方对精子形态、精浆生化及精液参数的影响.方法:将120例男性不育患者随机分为2组,每组60例.方法:治疗组服用补肺壮精方(黄芪、桑白皮、天冬、麦冬、知母、桑叶、桑螵蛸、枳壳、菟丝子、制何首乌、沙苑子、茯苓)治疗,对照组服用五子衍宗方(菟丝子、覆盆子、枸杞子、车前子、五味子)治疗.2个月为1疗程.主要观察治疗前后精子活力、α-中性糖苷酶、精浆果糖及精子形态的变化.结果:治疗组总有效率为86.67%、显效15例、无效8例,对照组总有效率为68.33%、显效9例、无效19例,2组总有效率比较,差异有显著性(P <0.05);治疗后2组患者精浆果糖、糖苷酶及精子形态正常率较治疗前均有显著性升高(P <0.05),但各指标改善情况治疗组均优于对照组,差异有显著性(P <0.05);治疗后2组患者精液参数均高于治疗前(P <0.05),但各指标改善情况治疗组均优于对照组,差异有显著性(P <0.05).结论:补肺壮精方可以明显提高精子活力并改善精子形态.

目的 基于P53/P21和碱基切除修复(BER)通路研究五子衍宗方对自然衰老大鼠睾丸DNA损伤的保护作用.方法 将16月龄SPF级SD雄性大鼠随机分为3组,衰老模型组、五子衍宗方低剂量组(1 g/kg)和高剂量组(4 g/kg),另取2月龄SD雄性大鼠作为青年对照组,每组8只.给予普通饲料或含药饲料饲养4个月后,处死大鼠,取出睾丸组织.免疫荧光检测大鼠睾丸组织中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX及BER相关蛋白脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶(APE1)、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)和X线修复交错互补基因1(XRCC1)的表达和定位;ELISA法检测大鼠睾丸组织中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的量;Western blotting法检测大鼠睾丸组织中p-P53和P21蛋白的表达水平.结果 与衰老模型组相比,五子衍宗方能明显降低睾丸DNA损伤相关蛋白γ-H2AX和BER相关蛋白OGG1、APE1和XRCC1的表达水平;ELISA检测结果显示,与衰老模型组相比,五子衍宗方能显著下调8-OHdG的量;Western blotting结果显示,五子衍宗方能显著降低自然衰老大鼠睾丸-P53、P21的蛋白表达水平.结论 五子衍宗方可通过调节P53/P21和BER通路减轻自然衰老大鼠睾丸DNA损伤.

目的 探讨加味五子衍宗合剂及其组分中药对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠生殖激素水平的影响.方法 雄性SD大鼠80只,10只作为正常组,70只大鼠按20 mg· 100 g-1体重灌胃给予腺嘌呤,每日1次,连续4周,制备大鼠生精细胞损伤的少弱精模型,将造模成功的60只大鼠随机分为模型组、加味五子衍宗合剂组、五子衍宗方组、仙茅+淫羊藿水提物组、仙茅水提物组、淫羊藿水提物组,每组10只.造模成功后,各给药组按6 mL·kg-1体重灌胃给药(浓度分别为432、180、72、24、48 mg·mL-1),每日1次,连续6周,正常组、模型组每日灌胃给等体积的生理盐水.观察大鼠精子数、精子活动率和精子指数及血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)改变.结果 与正常组比较,模型组大鼠精子数、精子活动率及精子指数均显著下降(P＜0.01),血清T含量降低(P＜0.05),LH含量显著升高(P＜0.01),血清FSH含量有升高趋势,但无显著差异(P＞0.05).与模型组比较,各给药治疗组大鼠精子数、精子活动率及精子指数显著升高(P＜0.01);加味五子衍宗合剂组显著多于其他组分组(P＜0.01),与五子衍宗方组作用相近(P＞0.05).与模型组相比,除淫羊藿水提物组外,其余各组大鼠血清T含量升高、LH含量降低(P＜ 0.05或P＜ 0.01),且加味五子衍宗合剂组显著优于其他组分组(P＜0.05).结论 加味五子衍宗合剂可调节生精细胞损伤模型大鼠生殖激素T和LH水平,改善精子数和活动率.

目的:探讨加味五子衍宗合剂及其组分中药对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠的丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)、α-葡糖苷酶、果糖的影响.方法:SPF级雄性SD大鼠用腺嘌呤灌胃,?每日1次,连续4周,制备大鼠生精细胞损伤的少弱精模型.造模成功的60只大鼠随机分为模型组、五子衍宗合剂组、五子衍宗方组、仙茅+淫羊藿水提物组、仙茅水提物组、淫羊藿水提物组,每组10只.另取10只正常大鼠作为正常组.除正常组、模型组给予生理盐水,其余各组分别灌胃给予相应药物,每日1次,连续6周.实验结束后,测定各组大鼠附睾匀浆组织中α-葡糖苷酶、果糖含量,睾丸、附睾匀浆组织中MDA、SOD含量.结果:模型组大鼠附睾组织中α-葡糖苷酶含量明显低于正常组(P<0.01);果糖含量降低,但与正常组比较无统计学差异.与模型组比较,除五子衍宗方组与模型组果糖含量无显著性差异外,其余各给药组大鼠附睾组织中α-葡糖苷酶、果糖含量均明显高于模型组(P<0.05,P<0.01);与加味五子衍宗合剂组比较,除五子衍宗方组果糖含量明显降低外(P<0.05),其余各组分药物组指标无统计学差异.模型组大鼠睾丸、附睾组织中MDA含量明显高于正常组(P<0.01),SOD含量明显低于正常组(P<0.01).与模型组比较,加味五子衍宗合剂组、五子衍宗方组、仙茅+淫羊藿水提物组大鼠睾丸、附睾组织中MDA含量明显降低,SOD含量明显升高(P<0.05,P<0.01);仙茅水提物组大鼠睾丸、附睾组织中SOD含量升高(P<0.05,P<0.01);淫羊藿水提物组大鼠睾丸组织中SOD含量升高(P<0.05).与加味五子衍宗合剂组比较,各组分药物组附睾组织中SOD含量明显降低(P<0.05,P<0.01),淫羊藿水提物组睾丸组织中SOD含量显著降低(P<0.01),附睾组织中MDA含量明显升高(P<0.05).结论:加味五子衍宗合剂比其他组分中药更能够改善生精细胞损伤模型大鼠抗氧化能力,降低氧化应激损伤,从而使精子活动力得到改善,其可能通过改善生殖细胞抗氧化作用和增加α-葡糖苷酶、果糖含量而提高了精子质量.

目的:研究五子衍宗方对自然衰老大鼠睾丸损伤的保护作用及其机制.方法:以SPF级雄性SD大鼠为研究对象,将18月龄大鼠随机分为自然衰老组及五子衍宗方低、中、高剂量组,每组10只.另以10只2月龄大鼠作为青年对照组.五子衍宗方低、中、高剂量组分别灌胃给药0.4、0.8、1.6 g/kg,青年对照组、自然衰老组灌胃生理盐水,每周停药2d,连续给药4个月.末次给药后称量质量并处死大鼠,称取睾丸质量,计算睾丸指数.HE染色观察睾丸组织形态学变化,电镜观察睾丸支持细胞超微结构,生化法检测睾丸组织中SOD、MDA、GSH的水平,Western blot检测睾丸中增殖分化相关蛋白GDNF、SCF、BMP4表达.结果:与自然衰老组比较,五子衍宗方各剂量能不同程度升高自然衰老大鼠的睾丸质量和睾丸指数.HE结果显示,五子衍宗方能显著改善自然衰老大鼠睾丸组织形态结构;与青年对照组比较,自然衰老组大鼠睾丸组织SOD、GSH活性显著降低,MDA含量性显著升高,五子衍宗方干预后SOD、GSH活性不同程度升高,MDA含量不同程度降低.电镜结果显示,五子衍宗方能显著改善自然衰老大鼠睾丸Sertoli细胞的超微结构.与自然衰老组比较,五子衍宗方能显著上调自然衰老大鼠睾丸GDNF、SCF、BMP4蛋白表达.结论:五子衍宗方对自然衰老大鼠睾丸损伤有显著的保护作用,其作用机制可能与提高机体抗氧化能力,进而改善Sertoli细胞结构和功能有关.

该文探讨五子衍宗方对自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤和凋亡的保护作用及其可能机制.将SPF级16月龄SD雄性大鼠随机分为3组,衰老模型组(Ageing) 、五子衍宗方低剂量组(WZ,1 g·kg-1) 、五子衍宗方高剂量组(WZ,4 g· kg-1),2月龄SD大鼠作为青年对照组(Adult),每组10只.普通饲料或含药饲料喂养4个月后,处死大鼠,取出睾丸组织,称取睾丸质量,计算睾丸指数.HE染色观察睾丸组织形态.免疫荧光检测DNA损伤相关蛋白ATR的表达和定位.免疫印迹检测睾丸组织中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX,Chk1,p-p53及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达.TUNEL检测大鼠睾丸生殖细胞凋亡变化.结果显示,五子衍宗方能显著提高睾丸质量及睾丸指数,明显改善睾丸组织形态.免疫印迹结果显示,与青年对照组相比,衰老模型组大鼠睾丸组织γ-H2AX,Chk1,p-p53,Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著下降.五子衍宗方干预后能显著降低γ-H2AX,Chk1,p-p53,Bax蛋白表达水平,升高Bcl-2蛋白表达水平,且能升高Bcl-2/Bax的比值.免疫荧光结果显示,五子衍宗方能显著降低衰老所致睾丸组织ATR升高.TUNEL结果显示,五子衍宗方能显著减少睾丸组织生殖细胞凋亡.以上结果表明,五子衍宗方可保护自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤和凋亡,机制可能与调节p53信号通路有关.

目的:探讨五子衍宗方及其拆方对糖尿病(DM)性勃起功能障碍(ED)的作用及机制.方法:取100只SD雄性大鼠,随机选取10只作为正常对照组,余90只以链脲佐菌素(STZ)建立DM大鼠模型,然后以阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验筛选DM性ED大鼠模型.将成模大鼠随机分为模型组、涩精组、补肾组以及全方组,涩精组、补肾组、全方组分别灌服拆方Ⅰ组药液(0.23 g/kg)、拆方Ⅱ组药液(0.85 g/kg)、全方组药液(1.08 g/kg),正常对照组与模型组分别灌服等体积蒸馏水,连续30 d.灌胃结束后,观察各组大鼠血糖、精子相对计数以及睾丸组织病变变化;酶联免疫法(ELISA)检测外周血中睾酮(T)、黄体生成素(LH)、促卵泡素(FSH)的含量.结果:与模型组比较,涩精组、补肾组、全方组的血糖显著降低(P＜0.01),精子相对计数显著增高(P＜0.01),睾丸组织学观察改善,T含量显著增加(P＜0.01),而LH、FSH含量无明显差异(P＞0.05);与涩精组比较,补肾组、全方组的血糖较低(P＜0.05),但补肾组的精子相对计数与睾酮无明显差异(P＞0.05),而全方组的精子相对计数与睾酮则要明显增高(P＜0.01).结论:五子衍宗方能明显改善糖尿病性勃起功能障碍,其机制可能与降低血糖、改善睾丸组织病变以及升高睾酮水平有关.

基于内质网应激(ERS)研究五子衍宗方对自然衰老大鼠睾丸生殖细胞凋亡的保护作用.将16月龄SPF级SD雄性大鼠随机分为3组,自然衰老组(Ageing),五子衍宗方低剂量组(WZ,1 g·kg-1)和五子衍宗方高剂量组(WZ,4 g·kg-1),另购买2月龄SD雄性大鼠作为青年对照组(Adult),每组10只.给予普通饲料或含药饲料喂养4个月后,处死大鼠,取出睾丸组织备用.苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸组织形态;Western blot法检测睾丸组织中内质网应激相关蛋白GRP78,p-PERK,p-eif2α,ATF4,p-IRE1,XBP1,ATF6及其介导的凋亡相关蛋白CHOP,caspase 12,p-JNK的表达水平.HE结果显示,五子衍宗方能明显改善自然衰老所致的睾丸组织形态变化.Western blot结果显示,与自然衰老组相比,五子衍宗方能显著升高自然衰老大鼠睾丸组织内质网应激相关蛋白GRP78,p-PERK,p-eif2α,ATF4,p-IRE1,XBP1,ATF6的表达水平;显著降低内质网应激介导的凋亡相关蛋白CHOP,caspase 12,p-JNK的表达水平.综上所述,五子衍宗方可通过调节内质网应激减轻自然衰老大鼠睾丸生殖细胞凋亡.

基于Nrf2/HO-1通路和碱基切除修复(BER)研究五子衍宗方对自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA氧化损伤的保护作用.将16月龄SPF级SD雄性大鼠随机分为3组,自然衰老组(Ageing),五子衍宗方低剂量组(WZ,1g·kg-1)和五子衍宗方高剂量组(WZ,4 g·kg-1),2月龄SD大鼠作为青年对照组(Adult),每组10只.给予普通饲料或含药饲料饲养4个月后,处死大鼠,取出睾丸组织备用.采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量;免疫荧光检测睾丸组织中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达和定位;Westernblot法检测睾丸组织中Nrf2及其下游相关蛋白血红素氧合酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶(NQO1)的表达水平,BER相关蛋白脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶(APE1)、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)和X线修复交错互补基因1(XRCC1)表达的变化情况.结果显示,五子衍宗方能显著提高睾丸SOD活力,降低MDA含量;免疫荧光结果显示,五子衍宗方能明显上调Nrf2的表达,下调8-OHdG的表达;Western blot结果显示,五子衍宗方能显著上调Nrf2,HO-1,NQO1的蛋白表达,显著下调APE1,OGG1,XRCC1的蛋白表达水平.综上所述,五子衍宗方可通过调节Nrf2/HO-1和碱基切除修复通路减轻自然衰老大鼠睾丸DNA氧化损伤.

目的:探讨五子衍宗方(Wuzi Yanzong Fang,WYF)基于磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路对老龄大鼠精原干细胞增殖的作用及其机制研究.方法:以自然衰老大鼠为研究对象,将40只18月龄SPF级SD雄性大鼠随机分为老龄模型组,WYF低、中、高剂量组,每组10只,另以10只2月龄大鼠作为青年组.WYF低、中、高剂量组分别灌胃给药0.4,0.8,1.6 g·kg-1,青年组、老龄模型组分别灌胃给予生理盐水,每周停药2d,持续给药4个月.末次给药后麻醉处死大鼠,快速取出睾丸组织.免疫荧光法检测Sertoli细胞数量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测胶质细胞源性神经营养因子(GDNF),前髓细胞锌指蛋白(PLZF),干细胞因子(SCF)和骨形态蛋白4(BMP4) mRNA表达水平,免疫荧光法检测精原干细胞数量及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫荧光法检测磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)的表达与定位.结果:与青年组比较,老龄模型组Sertoli细胞数量未见明显差异,而GDNF,PLZF,SCF和BMP4 mRNA表达水平显著降低,精原干细胞数量减少,PCNA表达下降,PI3K,p-Akt蛋白表达降低(P＜0.01);与老龄模型组比较,WYF各剂量组GDNF,PLZF,SCF和BMP4 mRNA表达水平显著升高,精原干细胞数量增多,PCNA表达上调,PI3K,p-Akt表达明显增多(P＜0.05,P＜0.01).结论:WYF能够明显促进老龄大鼠精原干细胞的增殖,其作用机制可能与调节睾丸内P13K/Akt信号通路有关.