产免疫分枝杆菌是一种罕见的非结核分枝杆菌，属于快生长型分枝杆菌，可引起皮肤感染、角膜炎、导管相关感染、慢性肺炎和脓毒症等，其感染多发生在美洲，国内诊治经验很少。本文报道1例由产免疫分枝杆菌引起的全身多发皮肤软组织感染病例，经培养、质谱鉴定和宏基因组二代测序检测明确病原体，最终参考抗菌药物敏感性试验结果，通过联合抗分枝杆菌治疗取得了良好疗效。面对罕见感染病例，临床微生物实验室采用全面的诊断方法和应用新技术对于精准诊治具有重要价值。

女，58岁，因背部红斑、皮下结节半月于2020年7月22日就诊。自诉半月前在私人美容诊所行"背部溶脂术"（注射成分不详），随后溶脂部位出现米粒至豆粒大小红色丘疹、结节，部分皮疹表面破溃后有脓性分泌物渗出，有明显压痛。于外院行脓性分泌物培养，提示浅黄色分枝杆菌，予口服抗生素治疗1周（方案不详），自觉治疗效果欠佳，皮疹及脓性分泌物仍增多，遂就诊于我院。皮肤科检查：左侧肩背部可见散在豆粒大小浸润性红斑、结节（图1），质韧，压痛明显，部分红斑表面破溃结痂，境界清楚，表面未见明显分泌物。肩背部红斑结节组织病理：表皮轻度肥厚，真皮内可见片状密集的中性粒细胞、淋巴细胞、组织细胞、浆细胞及多核巨细胞浸润，有肉芽肿形成（图2A）。抗酸染色：找见少量抗酸杆菌（图2B）；PAS染色阴性。肩背部皮损组织真菌培养阴性。肩背部皮损组织细菌培养：非结核分枝杆菌（nontuberculous mycobacteria，NTM）复合群。

目的:构建表达结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis， Mtb)潜伏期表达抗原Rv3133c，通过人群以及小鼠实验评价其免疫原性。 方法:构建重组质粒pPROEX-Rv3133c，诱导表达并纯化蛋白质，经Western blot鉴定后，用全血干扰素释放试验评价重组蛋白rRv3133c在 Mtb感染人群中的免疫原性；联合佐剂DC免疫小鼠，检测小鼠血清中rRv3133c特异性抗体分泌水平、脾细胞中抗原特异性Th1型细胞因子分泌水平以及脾细胞中多功能T细胞免疫应答水平和肺脏组织细胞因子mRNA表达水平。 结果:成功构建表达rRv3133c。rRv3133c可刺激 Mtb感染者尤其是潜伏感染者产生高水平的IFN-γ。免疫小鼠后，rRv3133c+DC组小鼠脾脏IFN-γ、TNF-α、IL-2水平，以及IFN-γ +TNF-α +CD4 +T细胞数量和肺脏组织中抗原特异性IFN-γ、TNF-α、iNOS的mRNA表达水平均高于BCG组，但低于BCG+rRv3133c+DC组；rRv3133c+DC组和BCG+rRv3133c+DC组小鼠血清中IgG2a/IgG1比值均大于1，显著高于BCG组。 结论:rRv3133c具有良好的免疫原性，可以诱发机体产生较强的Th1型免疫应答，是结核病亚单位疫苗的潜在候选靶抗原。

目的:探讨人类免疫缺陷病毒（HIV）合并结核病（TB）患者外周血单个核细胞（PBMC）分泌细胞因子及对结核特异性抗原刺激的反应。方法:2018年1—12月，以HIV合并TB患者（HIV/TB组）为研究对象，以单纯HIV感染者（HIV组），单纯TB患者（TB组）及健康人群（HC组）为对照组。分离PBMC并用卡介菌纯蛋白衍化物（BCG-PPD）刺激。通过细胞表面分子染色、直接细胞内细胞因子染色及流式细胞术检测这些人群PBMC中分泌干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的淋巴细胞（CD3 +、CD3 -、CD4 +、CD8 +）及单核细胞（CD14 +）的比例（其中CD3 -淋巴细胞主要为B淋巴细胞及NK细胞）。两组间数据比较采用非参数检验，每组研究对象PPD刺激前后数据的比较采用配对 t检验。 结果:未经PPD刺激时，HIV/TB组（均值0.52%）IFN-γ +CD8 +/CD8 +百分比显著低于TB组（均值0.94%， P=0.010），分泌TNF-α的PBMC各亚群细胞百分比均显著低于HIV组；HIV组（均值19.2%）TNF-α +CD14 +/CD14 +百分比显著低于HC组（均值31.9%， P=0.002）；TB组（均值 0.94%）IFN-γ +CD8 +/CD8 +百分比显著高于HC组（均值0.51%， P=0.020），而分泌TNF-α的PBMC各亚群细胞百分比显著低于HC组。PPD刺激后，HIV/TB组（均值0.20%）IFN-γ +CD8 +/CD8 +百分比明显低于TB组（均值0.56%， P=0.008），且比刺激前差异更显著；HIV组（均值0.24%）IFN-γ +CD8 +/CD8 +百分比较HC组降低（均值0.52%， P=0.044）。PPD刺激后，各组间分泌TNF-α的PBMC各亚群细胞百分比与HC组差异无统计学意义。各组组内PPD刺激前后相比，HC组及TB组IFN-γ +CD4 +/CD4 +百分比显著增加，而HIV/TB组及HIV组差异无统计学意义，四组TNF-α +CD14 +/CD14 +百分比均明显增加。 结论:慢性结核分枝杆菌（MTB）感染使PBMC产生TNF-α的能力下降，而合并HIV感染加重该趋势。HIV感染时单核细胞产生TNF-α的能力下降。TB患者的CD8 +及CD3 -淋巴细胞产生IFN-γ的能力增强，而合并HIV感染时IFN-γ的产生减少主要来自CD8 +T细胞。HIV感染使机体对MTB感染的免疫反应减弱，从而给TB的临床诊断及治疗带来更多困难。

目的:研究结核分枝杆菌Rv0446c的抗原表位及其免疫原性，为结核病的免疫诊断技术及疫苗研发提供候选抗原及表位。方法:利用生物信息学软件TE-predict和IEDB的T细胞表位预测软件对结核分枝杆菌抗原Rv0446c进行T细胞表位预测，用ELISPOT实验检测表位在2019年1月到2020年12月期间来自佛山市第四人民医院和福州肺科医院的结核病患者（50例）、肺部疾病患者（39例）及健康志愿者（55例）中的免疫反应性。将60只6周龄BALB/c小鼠随机分成10组，每组6只，分别采用PBS、血蓝蛋白（KLH）、高剂量结核分枝杆菌抗原Ag85B（50 μg/只）、低剂量Ag85B（20 μg/只）、高计量P120、低剂量P120、高计量P121、低剂量P121、高剂量P123、低剂量P123（P120、P121、P123高剂量为100 μg/只、低剂量为50 μg/只）多肽对其皮下免疫，每只小鼠免疫3次，每次间隔2周，末次免疫后4周，应用ELISA方法检测各组小鼠脾细胞产生的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10细胞因子水平。结果:预测的7条表位多肽中，ELISPOT试验筛选出4条阳性T细胞表位多肽P120、P121、P122、P123，在结核病患者中检测灵敏度和特异度分别为30.0%、18.0%、6.0%、22.0%和96.8%、98.9%、100%、96.8%。与对照PBS组和KLH组比较，P120多肽能刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-4、IL-10，P121多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ和IL-4（均 P<0.05），P123多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ（均 P<0.05）。P120、P121、P123多肽刺激小鼠产生的IL-2的水平高于PBS组低于Ag85B-L组和Ag85B-H组（均 P<0.05），但与KLH组差异无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:Rv0446c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性，能刺激机体产生强烈的细胞免疫应答，可用于结核病的临床诊断技术研究和新型结核亚单位疫苗的构建。

结核病是由结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis， Mtb)引起的严重危害人类健康的慢性传染病。 Mtb诱导宿主产生表观遗传变化并调控宿主基因组转录和免疫应答，对 Mtb的生长和复制、结核病的发生发展和转归具有重要作用。由于表观遗传调控早期发生且可逆，在多种疾病的发病机制中研究广泛，具有较高的分子靶标潜力。本文综述了 Mtb感染后宿主DNA甲基化、miRNA等表观遗传变化，总结了表观遗传学在结核病发病机制中的作用及潜在诊断标志物的研究进展。

目的:分析非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacterium, NTM)感染患者外周血免疫细胞表达率的改变以及临床意义。方法:选择2016年4月至2017年4月期间苏州市第五人民医院住院的69例NTM感染患者作为病例组，选取同期本院健康体检者66例作为对照组。采用流式细胞术对健康对照组和NTM感染患者(NTM组)外周血免疫细胞表达率进行检测，并比较各组之间的差异。进一步根据感染部位的差异将NTM组分为单侧感染组(29例)和双侧感染组(40例)，比较两组之间免疫细胞表达水平的差异。结果:与对照组相比较，NTM组的总的T淋巴细胞表达率没有显著改变，而B淋巴细胞与单核细胞表达率出现显著上调[(10.50±0.56)%比(12.26±0.57)%，(5.61±0.24)%比(6.72±0.32)%， t值分别为2.209和2.774， P值均<0.05]，自然杀伤(natural killer，NK)细胞表达率出现显著下调[(21.87±0.98)%比(18.63±0.98)%， t＝2.341， P<0.05)。对T细胞亚群的分析发现，NTM组的CD4 ＋T细胞、CD8 ＋T细胞、CD8 ＋CD28 －T细胞的表达率与对照组相比，差异无统计学意义( P>0.05)，而CD4 ＋CD25 HT细胞的表达率较对照组显著上调[(8.05±0.35)%比(3.69±0.19)%， t＝11.000， P<0.05]，CD8 ＋CD28 ＋T细胞表达率较对照组显著下调[(23.76±0.90)%比(27.07±0.74)%， t＝3.039， P<0.05]。进一步依据患者感染部位比较分析发现，单侧感染组与双侧感染组的T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞、单核细胞在外周血中表达率的差异均无统计学意义( P>0.05)。T细胞亚群的结果分析显示，CD4 ＋T细胞、CD8 ＋T细胞、CD4 ＋CD25 HT细胞在单侧感染组与双侧感染组之间的表达率差异无统计学意义( P>0.05)，而双侧感染组的CD8 ＋CD28 ＋T细胞表达比例较单侧感染组显著下降[(21.99±1.02)%比(26.21±1.52)%， t＝2.397， P<0.05]、CD8 ＋CD28 －T细胞表达比率较单侧感染组显著上调[(24.48±1.90)%比(18.19±1.60)%， t＝2.404， P<0.05]。 结论:NTM感染患者外周血中一些免疫细胞的表达率出现了显著改变，可能对疾病的发生与发展产生了重要影响。

结核病是由结核分枝杆菌引起的全球最致命的慢性疾病之一。作为一种主要寄生于巨噬细胞的兼性胞内菌，结核分枝杆菌通过对巨噬细胞的免疫逃避和免疫抑制使其能够在宿主体内保持潜伏状态，难以杀灭。因此，杀灭和抑制巨噬细胞内结核分枝杆菌对于确保结核病的治愈十分重要。传统抗结核药物治疗存在生物利用度低、用药周期长、毒性大等缺点。主动靶向巨噬细胞的抗结核药物递送系统可通过与巨噬细胞产生配体-受体相互作用来增加巨噬细胞对载药系统的吞噬，从而在巨噬细胞内达到有效的杀菌浓度。笔者将以结核分枝杆菌的致病机制及其对巨噬细胞的免疫逃避和免疫抑制为背景，对主动靶向巨噬细胞抗结核药物递送系统的研究进展进行综述。

目的:初步评价自主构建的结核多组分重组蛋白疫苗EPRHP014免疫原性和保护效果，为研制结核新疫苗、有效防控结核病提供科学基础。方法:选择结核分枝杆菌全长蛋白抗原3种（EsxH、Rv2628和HspX）和经表位预测和优化的表位优势蛋白抗原2种（nPPE18和nPstS1），共5种组分构建蛋白抗原组合物EPRHP014，包括融合表达纯化的多组分蛋白抗原（EPRHP014f）和分别表达纯化单个蛋白构成多组分混合蛋白抗原（EPRHP014m）。EPRHP014f和EPRHP014m分别辅以铝佐剂制备多组分蛋白疫苗，采用卡介苗（BCG）作对照。皮下注射免疫BALB/c小鼠后，采用ELISA法检测血清特异性抗体效价，采用ELISpot和Luminex技术检测多种细胞因子分泌情况，采用结核分枝杆菌体外生长抑制试验观察其免疫保护作用。结果采用 t检验或秩和检验进行统计分析。 结果:EPRHP014m和EPRHP014f免疫小鼠后均能诱导产生高效价的IgG抗体及其亚型IgG1和IgG2a，抗体效价与BCG免疫组小鼠差异无统计学意义（ P>0.05）。EPRHP014f组诱导产生的分泌IFN-γ和IL-4的斑点形成细胞（SFC）数量均高于EPRHP014m组和BCG组（ P<0.05），而EPRHP014m组和BCG组的IFN-γ和IL-4的SFC数量差异无统计学意义（ P>0.05）。EPRHP014m组诱导分泌的GM-CSF、IL-12p70均高于BCG组（ P<0.05），而IL-6和IL-10分泌水平与BCG组的差异无统计学意义（ P>0.05）；EPRHP014f组和BCG组的IL-6、IL-10、IL-12和GM-CSF分泌水平差异无统计学意义（ P>0.05）。EPRHP014m组、EPRHP014f组和BCG组具有明显的体外抑菌作用，差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:EPRHP014f和EPRHP014m免疫后均能诱导小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫应答，且有较强的体外抑制结核分枝杆菌生长的能力，显示抗原组合物EPRHP014具有良好的结核疫苗研发和应用价值。

目的:对5个结核分枝杆菌重组蛋白及其组合物的细胞免疫进行评价。方法:88份新鲜肝素抗凝人群外周静脉血液，其中42份来自北京市昌平区结核病防治所就诊的结核病患者，46份健康志愿者由中国疾病预防控制中心传染病所提供，均为接种过卡介苗（BCG）且没有结核暴露史和任何临床症状体征的健康人。以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv DNA为模板，PCR扩增选取的5个重组蛋白Rv3874、Rv3875、Rv2031c、Rv1411c和Rv3418c的完整编码基因；通过基因重组和蛋白纯化技术，分别克隆、表达和纯化5个重组蛋白作为刺激物，采用效应T细胞酶联免疫斑点试验（ELISPOT）对人群进行细胞免疫检测。结果:成功克隆、表达和纯化了Rv3874、Rv3875、Rv2031c、Rv1411c和Rv3418c重组蛋白；灵敏度分别为50.00%、71.43%、69.04%、73.81%和76.19%；特异度分别为86.96%、76.09%、71.74%、39.13%和36.96%。阳性预测值、阴性预测值、曲线下面积及约登指数分别为52.46%~77.78%、62.96%~74.47%、0.511~0.754和0.129~0.475。除Rv1411c和Rv3418c外，Rv3874、Rv3875和Rv2031c在结核病患者中检测到的斑点形成细胞数均高于健康志愿者，差异均具有统计学意义（ P值均<0.001）。在5个重组蛋白所构成的26种组合物中，灵敏度为80.95%~95.24%，特异度为68.89%~24.44%。随着组合物中重组蛋白个数的增加其灵敏度逐渐增加，但特异度随之下降。 结论:结核分枝杆菌重组蛋白Rv3874、Rv3875和Rv2031c刺激T细胞产生免疫应答的能力较强，具有一定的抗原性。而Rv1411c和Rv3418c单独用作诊断抗原的效能并不理想，与多组分抗原联合构成的组合物具有一定应用价值。