目的:探讨长沙市的人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及基因型分布特点。方法:选取2019年1月至11月长沙市参加宫颈筛查的113 838例已婚妇女进行HPV感染检测和基因型分型。结果:HPV总阳性率12.04%(13 709/113 838)，高危型HPV基因感染较高的亚型分别是HPV-52、58、16、68、18；低危型HPV基因感染较高的亚型分别为HPV-6、11，其中高危型占94.99%(16 009/16 853)，低危型占5.01%(844/16 853)。HPV阳性感染单一感染为主，感染率为80.65%，双重感染率为16.16%。13 709例HPV感染妇女中细胞学异常发生率为26.70%(3 660/13 709)，宫颈病变发生率为15.10%(2 070/13 709)。目前已上市的HPV疫苗缺乏对HPV-68高危亚型的覆盖。结论:长沙市女性宫颈HPV的感染率为12.04%，主要感染的基因型为HPV-52、58、16、68、18，主要以高危型、单一感染为主。目前已上市的HPV疫苗缺乏对HPV-68高危亚型的覆盖。

目的:构建裸鼠皮肤鳞状细胞癌（CSCC）移植瘤模型，探讨紫外线（UV）损伤及人乳头瘤病毒（HPV）感染诱导、促进CSCC的协同作用机制。方法:将人CSCC细胞A431分成3组，即用HPV16 E6腺病毒转染的HPV16 E6过表达组，空白腺病毒转染的空白载体组（简称空载组），未进行腺病毒转染的空白对照组。使用无血清DMEM培养基将空载组及HPV16 E6过表达组（LV-OE-HPV16 E6组）A431细胞制成单细胞悬液，分别接种于SKH-1裸鼠左侧臀部皮下作为空载组（ n = 16）和LV-OE-HPV16 E6组（ n = 16）。每3天观察并记录小鼠肿瘤生长情况，当瘤体达到150 mm 3时，视为建模成功。建模成功后，每组取8只小鼠进行UV照射，分为4组，即空载组、空载+ UV组、LV-OE-HPV16 E6组、LV-OE-HPV16 E6 + UV组，UV照射剂量为1 440 mJ/（cm 2·d），每次12 min，持续4周后处死裸鼠，测量瘤重及体积，绘制肿瘤生长曲线，免疫组化、Western印迹和qRT-PCR检测验证Wnt1、β联蛋白mRNA及蛋白在裸鼠CSCC中的表达。数据若符合正态分布，多组间比较采用方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验；数据若不符合正态分布，采用秩和检验对数据进行统计分析。 结果:空载+ UV组瘤重为（2.90 ± 0.36）g，LV-OE-HPV16 E6组（3.19 ± 0.32）g，LV-OE-HPV16 E6 + UV组（4.41 ± 0.18）g，与空载组（2.20 ± 0.24）g比较，差异均有统计学意义（ t值分别为4.39、6.77、20.11，均 P<0.001）；空载+ UV组瘤体积为（1 033.12 ± 400.15）mm 3，LV-OE-HPV16 E6组（1 119.21 ± 447.57）mm 3，LV-OE-HPV16 E6 + UV组（1 464.29 ± 409.98）mm 3，与空载组（688.94 ± 319.31）mm 3比较差异均有统计学意义（ t值分别为1.90、2.21、4.22，均 P<0.001）。免疫组化显示，4组间Wnt1、β联蛋白表达水平差异无统计学意义（ F值分别为0.76、0.71，均 P > 0.05）；Western印迹显示，4组间Wnt1、β联蛋白水平差异有统计学意义（ F值分别为16.74、49.90，均 P<0.05），且LV-OE-HPV16 E6 + UV组Wnt1、β联蛋白水平高于空载组、空载+ UV组和LV-OE-HPV16 E6组（均 P<0.05）。mRNA水平分析显示，4组间组织中Wnt1、β联蛋白mRNA水平差异均有统计学意义（ F值分别为7.77、8.38，均 P<0.05），且LV-OE-HPV16 E6 + UV组Wnt1 mRNA水平高于空载组、空载+ UV组和LV-OE-HPV16 E6组（均 P<0.05）。 结论:UV和HPV感染在诱导、促进CSCC中具有协同作用。

目的:探讨人乳头瘤病毒（HPV）16早期基因E2和E6与核不均一核糖核蛋白（hnRNP）E2在宫颈癌变中的作用及其交互效应。方法:研究对象来源于课题组在山西省介休市建立的"自然人群宫颈病变队列"，以2014年6—9月经病理学确诊的正常宫颈（NC）女性、低度宫颈上皮内瘤变（CIN Ⅰ）、高度宫颈上皮内瘤变（CIN Ⅱ/Ⅲ）以及同期在山西医科大学第二医院确诊的宫颈鳞状细胞癌（SCC）病例为研究对象。共纳入257名研究对象，NC、CINⅠ、CIN Ⅱ/Ⅲ、SCC组分别为67名（26.07%）、69例（26.85%）、68例（26.46%）、53例（20.62%）。采用问卷调查收集人口学特征、生活卫生习惯及宫颈病变相关信息，并采集宫颈脱落细胞和宫颈活检组织，检测HPV16的感染、hnRNP E2、HPV16 E2和E6的蛋白表达水平。根据NC组的hnRNP E2、HPV16 E2、E6蛋白表达量及E2/E6比值的 M值，将研究对象分为高、低表达组/比值组，采用多因素logistic回归模型分析HPV16早期基因E2和E6、hnRNP E2与宫颈癌变的关联，并应用广义多因子降维模型（GMDR）评价其交互作用。 结果:NC、CIN Ⅰ、CIN Ⅱ/Ⅲ、SCC组的年龄分别为（47.00±9.07）、（47.64±7.35）、（46.37±8.67）和（51.26±8.03）岁。多因素logistic回归模型分析结果显示，HPV16 E2低表达、E6高表达及E2/E6低比值可导致CIN Ⅱ/Ⅲ[ OR（95 %CI）值分别为11.11（1.63~75.56）、8.00（1.28~50.04）、9.75（1.22~77.72）]和SCC[ OR（95 %CI）值分别为14.22（2.11~95.88）、10.33（1.67~64.00）、12.38（1.56~97.91）]的患病风险增加；hnRNP E2低表达可导致CIN Ⅱ/Ⅲ、SCC风险增加[ OR（95 %CI）值为3.35（1.39~8.10）、5.53（1.54~19.88）]。GMDR模型交互作用分析结果显示，hnRNP E2低表达、HPV16 E2低表达、HPV16 E6高表达在CIN Ⅱ/Ⅲ和SCC组均存在交互作用（ P值均<0.05）。 结论:HPV16早期基因的异常表达和hnRNP E2低表达均可能增加宫颈癌变的发病风险，且在宫颈癌变的发生发展中存在交互作用。

目的:探讨高危型人乳头瘤病毒16（HR-HPV16）阳性患者阴道灌洗液辅助性T细胞（Th）、调节性T细胞（Treg细胞）相关细胞因子变化及其对子宫颈癌发生的预测效果。方法:选择2022年1月至12月于邢台市人民医院就诊的200例HR-HPV16阳性患者作为试验组，根据病理检查结果将试验组患者分为无病变组（78例）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL）组（49例）、高级别鳞状上皮内病变（HSIL）组（39例）和子宫颈癌组（34例）。选择同期健康体检者100名作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗夹心法检测各组阴道灌洗液白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-17、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）、转化生长因子β（TGF-β）水平。采用多因素logistics回归分析子宫颈癌发生的危险因素，建立列线图模型。以病理结果为金标准，绘制受试者工作（ROC）曲线，计算曲线下面积（AUC）以评价列线图模型的预测能力。结果:试验组患者阴道灌洗液中IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α及TGF-β均高于健康对照组，IL-2、IL-12及IFN-γ水平均低于健康对照组，差异均有统计学意义（均 P<0.05），两组IL-4水平差异无统计学意义（ P>0.05）。无病变组、LSIL组、HSIL组及子宫颈癌组IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、TGF-β、IL-2、IL-12及IFN-γ水平差异均有统计学意义（均 P<0.05），其中子宫颈癌组IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、TGF-β水平均最高，IL-2、IL-12及IFN-γ水平均最低，无病变组、LSIL组、HSIL组及子宫颈癌组IL-4水平差异无统计学意义（ P>0.05）。logistics回归分析结果显示，HR-HPV16阳性患者阴道灌洗液中低IL-2、高IL-4、高IL-6、高IL-10、低IL-12、高IL-17、高TNF-α、低IFN-γ及低TGF-β表达均为发生子宫颈癌的独立危险因素（均 P<0.05）。列线图分析结果显示，患者阴道灌洗液IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α及TGF-β是预测HR-HPV16阳性患者发生子宫颈癌的因素。ROC曲线分析结果显示，列线图模型预测HR-HPV16阳性患者发生子宫颈癌的AUC为0.945（95% CI 0.901~0.988），预测效能较好。 结论:HR-HPV16阳性患者阴道灌洗液Th、Treg细胞相关细胞因子水平在子宫颈癌患者中呈现病理性改变，且具有较高的预测子宫颈癌发生的价值。

目的:观察Galectin-3及HPV16/18-E6蛋白在喉癌组织中的表达并分析其临床意义。方法:采用免疫组织化学法以及免疫印迹法，检测60例喉癌患者的癌组织及癌旁组织中Galectin-3蛋白和HPV16/18-E6蛋白的表达，并分析其与病例临床分期、病理分级等因素之间的关系。结果:免疫组织化学结果表明，Galectin-3蛋白表达的阳性率为78.3%(47/60)，免疫印迹的结果表明肿瘤组织中Galectin-3蛋白表达明显高于癌旁正常组织；统计学分析显示Glactin-3蛋白的表达与喉癌病例的临床分期、病理的分化程度以及淋巴结转移之间均具有相关性；与人乳头瘤病毒16/18-E6蛋白的表达无相关性。结论:Glactin-3蛋白的表达随着喉癌患者临床严重程度的加重呈逐渐增加的趋势，该指标的检测可为喉癌的早期诊断和治疗提供实验室参考。

目的:探讨p16和人乳头瘤病毒（HPV）分型联合检测在子宫颈上皮内瘤变（CIN）诊断中的应用价值。方法:选择2019年2月至2020年2月于陕西省宝鸡市中心医院就诊的患者8 346例，年龄25~65岁；其中经阴道镜活组织病理检查确诊存在子宫颈病变共2 882例。按照年龄段分组，分析各年龄段HPV感染情况；以活组织病理检查为金标准，按照病理分级结果，分析p16、HPV分型的检出率及其单项或联合检测对CIN的诊断效能。结果:p16和HPV阳性率最高的年龄段均为31~40岁[分别为47.42%（1 014/2 427）和36.84%（894/2 427）]，其次为41~50岁[分别为30.15%（907/2 942）和28.11%（827/2 942）]，各年龄段间p16和HPV阳性率差异均有统计学意义（均 P<0.05）。病理检查存在子宫颈病变的2 882例患者中，p16阳性2 572例（89.24%），HPV阳性2 169例（75.26%），随着病变进展，p16和HPV阳性率逐渐增高，其中炎症、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、子宫颈鳞状细胞癌（SCC）p16阳性率分别为11.68%（23/197）、94.85%（1 105/1 165）、93.57%（771/824）、96.76%（538/556）、96.43%（135/140）；HPV阳性率分别为17.77%（35/197）、77.60%（904/1 165）、80.22%（661/824）、80.40%（447/556）、87.14%（122/140），且随着CIN病程进展，HPV感染逐渐以16/18型为主。HPV诊断CIN的灵敏度为75.26%，特异度为81.13%，阳性预测值为67.78%，阴性预测值为86.14%；p16诊断CIN的灵敏度为89.24%，特异度为84.74%，阳性预测值为75.51%，阴性预测值为93.72%；p16诊断效能高于HPV，差异有统计学意义（ P<0.05）；二者联合诊断CIN的灵敏度为94.10%，特异度为91.33%，阳性预测值为85.12%，阴性预测值为96.71%，均高于单项检测，差异均具有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:HPV感染的发生以31~40岁女性为主，41~50岁次之，发病有年轻化的趋势。p16诊断CIN效能、优于HPV；p16和HPV联合检测可提高CIN诊断的灵敏度和特异度，降低漏诊率，对CIN的早期诊断和治疗有重要的临床价值。

目的:评估p16/Ki-67双染检测在高危（HR）人乳头瘤病毒（HPV）阳性人群中的分流效果。方法:于2016年4—12月，选取在郑州大学第二附属医院妇科就诊，并进行阴道镜检查且HPV DNA检测结果为HR-HPV感染的女性为调查对象，收集其宫颈脱落细胞标本，并分别进行p16/Ki-67双染检测、HPV16/18检测、LBC检测和活检病理诊断。以活检病理结果为结局指标，计算和比较3种检测分流HR-HPV阳性者的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果:共发现HR-HPV阳性女性295例，年龄为（44.29±11.48）岁，其中p16/Ki-67双染检测、HPV16/18检测和LBC检测的阳性率分别为70.17%（207例）、56.95%（168例）和85.76%（253例）。以CIN2+为疾病终点指标时，3种检测方法中，p16/Ki-67双染检测的灵敏度为90.00%（95 %CI：85.06%~93.43%），高于HPV16/18检测，低于LBC检测；特异度最高，为71.58%（95 %CI:61.81%~79.67%）；阳性预测值最高，为86.96%（95 %CI:81.69%~90.88%）；阴性预测值最高，为77.27%（95 %CI:67.49%~84.78%）。以CIN3+为疾病终点指标时，p16/Ki-67双染检测的灵敏度为92.90%（95 %CI:87.74%~95.99%），低于LBC检测，高于HPV16/18检测；特异度为55.00%（95 %CI: 46.74%~63.00%），低于HPV16/18检测，高于LBC检测；阳性预测值为69.57%（95 %CI:62.99%~75.43%），低于HPV16/18检测，高于LBC检测；阴性预测值为87.50%（95 %CI:78.99%~92.87%），高于HPV16/18检测，低于LBC检测。 结论:p16/Ki-67双染检测技术作为HPV阳性妇女分流措施的效果优于HPV16/18检测和LBC检测方法。

目的:评价核酸分型定量法HPV检测（BMRT-HPV）用于子宫颈癌筛查的临床价值。方法:采用巢式抽样法，在2016年9月—2018年1月中国子宫颈癌筛查多中心研究（CHIMUST）项目5个筛查点的8 856例妇女中，选取其中医生取样或自取样标本中任一检测方法HPV阳性或HPV阴性但细胞学结果≥低级别鳞状上皮内病变（LSIL）者共1 495例行BMRT-HPV检测，同时按照1∶2比例抽取年龄和参加筛查时间相匹配的HPV与细胞学结果均为阴性的2 990例为对照。CHIMUST项目中对任一HPV阳性妇女回叫行阴道镜下子宫颈病灶四象限定点活检+随机活检+子宫颈管搔刮术方案子宫颈活检，以医生取样标本的基于实时PCR技术的Cobas 4800 HPV检测（Cobas-HPV）、基于第2代基因测序技术的HPV分型检测（SEQ-HPV）为对照，以子宫颈活检病理诊断为“金标准”，分析BMRT-HPV检测的高危型HPV（HR-HPV）亚型与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测的一致性，并比较3种HPV检测方法对子宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ及以上级别病变（CIN Ⅱ +）、CIN Ⅲ及以上级别病变（CIN Ⅲ +）的筛查效率。 结果:（1）BMRT-HPV检测方法分别与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测方法比较，检测HR-HPV亚型整体的一致性分别为94.8%、94.4%，Kappa值分别为0.827、0.814。（2）BMRT-HPV、Cobas-HPV、SEQ-HPV 3种方法对CINⅡ +筛查的敏感度分别为92.62%、94.26%、93.44%，两两比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）；特异度分别为84.67%、83.25%、82.76%，BMRT-HPV检测对CINⅡ +筛查的特异度显著高于Cobas-HPV、SEQ-HPV检测（ P<0.01）。3种HPV检测方法对CIN Ⅲ +筛查的敏感度均达到100.00%，BMRT-HPV检测对CIN Ⅲ +筛查的特异度也显著高于Cobas-HPV、SEQ-HPV检测（分别为83.40%、81.95%、81.50%， P<0.01）。检出1例CINⅡ +或CIN Ⅲ +所需要行阴道镜下子宫颈活检病理检查的患者数，BMRT-HPV检测显著少于Cobas-HPV和SEQ-HPV检测（ P<0.01）。Cobas-HPV、SEQ-HPV、BMRT-HPV检测初筛阳性者分别以HPV 16和（或）18型（HPV 16/18型）阳性联合细胞学结果≥未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞（ASCUS；即为方案一、二、三）进行二次分流，3种筛查方案对CIN Ⅱ +、CIN Ⅲ +筛查的敏感度分别比较均无显著差异（ P>0.05），但方案三（即BMRT-HPV初筛阳性者）筛查CIN Ⅱ +、CIN Ⅲ +的特异度显著高于方案一（即Cobas-HPV初筛阳性者）和方案二（即SEQ-HPV初筛阳性者； P<0.05），而且阴道镜转诊率方案三也显著低于方案一、二（ P<0.05）。 结论:BMRT-HPV检测筛查子宫颈癌具有与Cobas-HPV、SEQ-HPV检测相似的敏感度，但特异度更高，可作为子宫颈癌的初筛方法，值得临床推广使用。

目的:探讨人乳头瘤病毒（HPV）16亚型感染的子宫颈鳞状细胞癌患者下生殖道菌群的分布及特征。方法:前瞻性横断面研究。选取2019年8月至2020年6月就诊于中国医学科学院肿瘤医院的6例HPV16单一型别阳性子宫颈鳞状细胞癌患者（子宫颈癌组），选取同期体检人群中液基薄层细胞学检查未见异常且HPV阴性6名健康女性为健康对照组。患者抗肿瘤治疗前、健康对照者体检时用无菌棉拭子采集子宫颈后穹窿处分泌物，采用高通量测序技术扩增细菌16S rRNA基因V1-V2高变区，分析菌群分布及特征。结果:子宫颈癌组和健康对照组年龄分别为（51±8）岁、（48±3）岁，差异无统计学意义（ t=0.63， P=0.540），两组均有孕产史，无吸烟史。α多样性分析结果显示，与健康对照组比较，子宫颈癌组sobs指数（ t=3.25， P=0.009）及chao指数（ t=2.91， P=0.016）均高，差异均有统计学意义；子宫颈癌组shannon指数高（ t=2.07， P=0.065），simpson指数低（ t=1.74， P=0.113），但差异均无统计学意义。采用基于bray-curtis距离的主坐标分析（PCoA）进行数据降维分析显示，子宫颈癌组与健康对照组间β多样性差异具有统计学意义（ R2=0.154， P=0.018）。门水平上，与健康对照组相比，子宫颈癌组厚壁菌门占比低（30.21%比68.28%），拟杆菌门占比略低（6.87%比8.11%），而放线菌门（26.91%比14.42%）及变形菌门（27.33%比0.67%）占比高。属水平上，与健康对照组相比，子宫颈癌组乳杆菌属及棒状菌属占比低，失去优势菌群，而红球菌属、克雷伯菌属、气球菌属等占比明显高，且子宫颈癌组菌群种类较健康对照组多。线性判别分析（LDA）显示，属水平上，红球菌属（LDA=5.04）、克雷伯菌属（LDA=4.71）、肠杆菌属（LDA=4.29）、罗尔斯通菌属（LDA=4.28）、苍白杆菌属（LDA=4.23）、韦荣球菌属（LDA=4.14）为子宫颈癌组特征菌群；门水平上，健康对照组厚壁菌门（LDA=5.23）可为标志性物种；种水平上，子宫颈癌组红球菌（ P=0.025）、罗尔斯通菌（ P=0.045）、韦荣氏球菌（ P=0.044）、卡氏伯克霍尔德菌（ P=0.045）、假单胞菌（ P=0.043）等均较健康对照组多，差异均有统计学意义。 结论:HPV16单一型别阳性子宫颈鳞状细胞癌患者下生殖道菌群多样性、丰富度较健康女性增加，乳杆菌属丰度下降；红球菌属、克雷伯菌属可作为其标志性下生殖道菌群，但仍需进一步验证。

目的:对绝经后中老年女性宫颈病变进行筛查诊断，分析中老年女性宫颈病变特点。方法:回顾性分析2015年1月1日至2019年12月31日在北京医院妇科门诊就诊的绝经后女性1 337例宫颈病变筛查资料，年龄50~86岁。根据年龄分为50~59岁组787例，60~69岁组483例，70~79岁组60例，80~89岁组7例。分别采集宫颈脱落细胞，进行高危型人乳头瘤病毒(HPV)检测和宫颈液基细胞学(TCT)检查，以宫颈活检病理学结果确定诊断，并分析宫颈病变情况。结果:1 337例入选者因症状就诊占53.0%(708例)。其中宫颈病变666例(49.8%)，包括宫颈低级别病变(LSIL)357例，高级别病变(HSIL)252例，宫颈癌57例(4.3%)。70~79组患者HSIL发病率最高为30.0%(18/60)；50~59组患者LSIL发病率最高为30.6%(241/787)，不同宫颈病变类型在各年龄组比较差异有统计学意义( χ2＝28.919， P<0.01)。宫颈液基细胞学检查LSIL阳性率为51.6%(166/322)，HSIL阳性率为70.8%(143/202)，宫颈癌为71.4%(25/35)，LSIL与HSIL及以上病变阳性率比较差异有统计学意义( P<0.05)。在宫颈恶性肿瘤组中，细胞学高度鳞状上皮病变为51.4%(18/35)；HSIL组中上皮内病变或癌变为29.2%(59/202)，LSIL组为48.4%(156/322)，差异有统计学意义( χ2＝118.806， P<0.01)。206例未能明确意义的不典型鳞状细胞合并HPV阳性患者，52.9%(109例)为慢性宫颈炎，21例无HPV感染者76.2%(16例)为慢性宫颈炎。1 301例患者完成HPV检查，以HPV单一型感染为主占69.4%(903例)，混合型感染占比为30.6%(398例)。活检病理LSIL、HSIL、癌患者HPV感染分别为84.6%(302/357)、95.9(185/193)、100%(54/54)，不同病理结果比较差异有统计学意义( P<0.01)。HPV单一型感染中，HPV16型是最常见感染亚型。宫颈HSIL及以上病变最常见HPV感染亚型为HPV16型和HPV18型。宫颈活检病理诊断与阴道镜诊断符合率LSIL为52.4%(187/357)，HSIL为60.7%(153/252)，宫颈癌为64.9%(37/57)。不同类型宫颈病变患者阴道镜诊断与病理诊断差异有统计学意义( χ2＝550.382， P<0.01).1 310例患者完成宫颈管搔刮术，120例HSIL和39例宫颈癌，检出率为55.8%(159/285)。 结论:老年女性宫颈癌发病率高。宫颈不典型鳞状细胞合并HPV感染患者高级别病变及宫颈癌发病率高。绝经后宫颈病变患者以单一HPV亚型感染为主，16亚型最为多见。随病变程度加重阴道镜诊断准确率升高。宫颈管搔刮术是减少阴道镜漏诊的重要手段。