目的:通过观察薯蓣多糖体外对精子膜及DNA完整性的影响.为少弱精子症的治疗提供新的途径. 方法:正常已生育成年男性,禁欲3～5d手淫法取精液.分为6组,每组各取0.2ml精液;对照组为精液原液,其他5组分别加入等量的生理盐水、维生素C溶液及不同浓度薯蓣多糖溶液(0.25、1.0、5.0 mg/ml).通过伊红-Y染色试验、精子低渗肿胀实验(HOS)以及精子染色质扩散(SCD)实验,观察不同浓度薯蓣多糖体外对精子存活率、精子膜完整性以及精子核DNA的影响. 结果:6份精液样本孵育24 h及48 h后各组的精子存活率均有降低.维生素C组精子存活率分别为(28.5±3.1)％、(6.5±1.2)％;薯蓣多糖低、中、高剂量组的精子存活率分别为(31.3±3.5)％、(6.5±2.2)％,(37.1±3.5)％、(9.5±2.8)％,(38.3±3.3)％、(9.0±3.2)％,均显著高于生理盐水组[(13.4±4.1)％、(3.1±2.0)％,P＜0.01],中、高剂量薯蓣多糖组显著高于维生素C组(P＜0.05及P＜0.01).精子DNA碎片率低剂量薯蓣多糖组为(29.4±2.6)％,与维生素C组[(30.5±2.5)％]无明显差异,但显著低于对照组[(41.7±2.2)％]和生理盐水组[(42.1±3.3)％];中、高剂量薯蓣多糖组精子DNA碎片率分别为(28.5±2.3)％和(27.9±1.9)％,显著低于对照组、生理盐水组及维生素C组(P＜0.05及P＜0.01). 结论:薯蓣多糖具有体外提高精子存活率和保护精子DNA完整性的作用.

目的 通过对低渗肿胀实验(HOST)、苯胺蓝(AB)染色实验、染色质扩散(SCD)实验、脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)实验、AB/HOST实验,SCD/HOST实验、HOST/TUNEL实验的检测结果中精子活性分级进行比较,探索优化精子活性的检验方法. 方法 选取2012年5月-2016年10月已育成年健康男性志愿者30例.每例样本分为7组,分别为:HOST组、AB组、SCD组、TUNEL组、HOST/AB组和HOST/SCD组、HOST/TUNEL组.分别进行相应方法的染色,观察精子尾部肿胀及核蛋白、DNA受损情况,计算各级活力精子的比例. 结果 单独AB和单独HOST与HOST/AB比较,精子分级差异有统计学意义;单独SCD和单独HOST与HOST/SCD比较,精子分级差异有统计学意义;单独TUNEL和单独HOST与HOST/TUNEL比较,精子分级差异有统计学意义. 结论 HOST/AB联合染色及HOST/SCD联合染色是对精子的核蛋白、DNA及膜完整性判断更为准确和实用的方法.

卵胞浆内单精子注射技术(ICSI)已成为帮助男性不育患者获得后代的一项革命性技术,对于无精子症患者,外科取精术能帮助获得精子,但是如何有效处理组织且选择具有受精潜力的精子是目前面临的挑战之一.本文综述了目前外科常用的5种选取活的不动精子的技术方法(包括机械接触技术、低渗肿胀试验、化学活性增强剂、激光辅助不动精子选择及双折射偏振显微镜),并分析了其在临床应用和实验室研究方向中的发展动态,将胚胎干细胞或诱导多能干细胞在体外诱导生成精子可能成为未来的发展方向,但尚存在诸多尚未解决的生物学问题和安全性及伦理问题.

目的:研究一种新型人精子冷冻方法对精子复苏率的影响,以探索人附睾精子、睾丸穿刺精子的最佳冷冻方法. 方法:选取76例梗阻性无精子症患者的附睾穿刺(PESA)标本,按照自制金属冷冻板法和传统冷冻法分两组冷冻.采用计算机辅助精液分析系统检测冷冻前、后前向运动精子百分率,并对比两种方法对精子膜功能、DNA碎片指数(DFI)、顶体酶活性和精子畸形百分率的影响. 结果:复苏后自制金属冷冻板法和传统冷冻法前向运动精子百分率[(12.0±7.5)％ vs(8.0±5.1)％,P＜0.05]和低渗肿胀精子百分率[(22.0±17.5)％ vs(18.0±20.5)％]比较有显著性差异(P＜0.05),均较冷冻前[(20.7±8.8)％和(30.0±13.5)％]显著下降(P＜0.05).自制金属冷冻板法复苏后精子顶体酶活性显著高于传统冷冻法[(75.2±9.5) μIU/106精子 vs(55.7±8.3) μIU/106精子,P＜0.05],均较冷冻前(120.0±10.5)μIU/106精子显著下降(P＜0.05).两种方法复苏后畸形精子百分率和DFI无显著差异[(98.7±8.8)％ vs(98.5±9.2)％,P＞0.05]和[(38.2±8.5)％ vs(39.5±10.2)％,P＞0.05],并均较冷冻前[(97.2±9.5)％和(30.8±9.7)％]显著升高(P＜0.05).自制金属冷冻板法和传统冷冻法冷冻复苏率[(65.2±12.0)％ vs(52.3±18.0)％]有显著性差异(P＜0.05). 结论:自制金属冷冻板法是一种经济高效、操作简单的精子冷冻方法且能最大限度的节约精子;复苏后可以保证较好的精子复苏率、活动力和顶体酶活性.

卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术是针对男性因素不育最为有效的方法之一,而男性因素不育主要涉及到少、弱、畸精子症等.不同质量的精子与ICSI受精、胚胎质量、着床以及临床妊娠均有着直接的关联,选择形态结构以及功能正常的精子是提高临床结局的有效方法.在精液分析结果的基础上,必须选择和应用正确的精子选择技术.本文就精子的优选方法如低渗肿胀试验、激光辅助的不动精子选择、偏振光显微镜选择、运动精子细胞器形态学检查、透明质酸介导的精子选择、磁性活化细胞分选法等方法作一综述,探讨不同精子选择策略及其对辅助生殖技术(ART)结果的影响以及每种方法的优缺点,以便为胚胎实验室进行ICSI提供最优质的精子,改善临床结局.

星形胶质细胞中的大部分Ca2+活性在空间上仅限于微区,并发生在形成复杂解剖网状结构的细小突起中,即所谓的海绵状结构域.越来越多的文献表明,这些星形细胞Ca2+信号可以影响神经元突触的活动,从而调节通过神经元回路的信息流.局限于获取所涉及的小空间尺度方面存在技术困难,关于星形胶质细胞形态对Ca2+微区活性的作用仍然知之甚少.本研究使用计算机技术和基于最近的超分辨率显微镜数据的细小突起的理想化3D几何形状来研究星形胶质细胞纳米级形态与局部Ca2+活性之间的关联机制.模拟表明,星形细胞突起的纳米形态强有力地塑造了Ca2+信号的时空特性并促进了局部Ca2+活性.该模型预测,这种效应在星形胶质细胞肿胀时会减弱,这是脑部疾病的标志,并在低渗透条件下通过实验证实了这一点.该模型还预测,在重复的神经递质释放事件后,肿胀会阻碍星形胶质细胞的信号传播.总而言之,三联突触中星形胶质细胞的突起与突触前和突触后结构密切接触;本研究强调了星形胶质细胞在纳米尺度上的复杂形态及其在病理条件下的重塑对所谓的三联突触的神经元-星形胶质细胞通讯的影响.