中药黄精为百合科、黄精属植物黄精Polygonatum sibiricum Red.、多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua或滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.的干燥根茎,用药历史悠久,性平、味甘,归脾、肺、肾经,具有养阴润肺、补脾益气、滋肾填精之功效,用于治疗肺虚燥咳、脾胃虚弱、体倦乏力、口干食少、精血不足、内热消渴等.本文对黄精的化学成分及现代药理研究进行综述,并基于其药理活性、药效物质、植物亲缘学、药材配伍、加工炮制和网络药理学等研究,预测分析了其质量标志物(quality markers,Q-marker).初步确定黄苓素、甘草素、β-谷甾醇、薯蓣皂苷元、5,4'-二羟基黄酮、3'-甲氧基大豆苷、新甘草苷和黄精多糖为黄精的质量标志物,为黄精质量控制和临床用药提供参考依据.

目的 借助网络药理学和分子对接的方法探讨六味地黄丸异病同治老年性聋和阿尔茨海默病(AD)的共同分子机制,并采用细胞实验进行验证.方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、成分靶点数据库(SwissADME)获取六味地黄丸有效成分,并结合基因和化学物质相互作用预测数据库(STITCH)获取作用靶点.利用人类基因综合数据库(Genecard)、人类疾病相关基因与突变位点信息数据库(DisGeNET)获取老年性聋和AD靶点.使用Cytoscape 3.7.1 软件构建"中药-成分-靶点-疾病"网络,借助蛋白互作网络分析数据库(STRING)构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,获取核心靶点.利用富集分析数据平台(Metascape)对共有靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.采用AutoDock Vina 1.1.2软件对核心靶点与相关成分进行分子对接.采用过氧化氢(H2O2)致PC12细胞氧化损伤模型,观察六味地黄丸的作用.采用细胞计数(CCK-8)法观察细胞存活率,活性氧(ROS)检测试剂盒检测ROS水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,Western blot法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化-蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达.结果 共获得六味地黄丸有效成分86种,主要来自薯蓣皂素、视黄醇、丹皮酚、软脂酸等化合物,六味地黄丸防治老年性聋和AD共有靶点49个,核心靶点为AKT1、TNF、IL-6、MMP-9等.GO分析表明这些共有靶点主要参与对氧化应激的反应、对脂多糖的反应等生物进程.KEGG通路分析显示,共有靶点主要涉及缺氧诱导因子-1(HIF-1)、核因子-κB(NF-κB)等信号通路.分子对接结果显示,TNF-α、IL-6、AKT1、MMP-9与相关成分均存在结合可能.细胞实验结果发现,六味地黄丸含药血清可以增强细胞存活率,降低细胞ROS、TNF-α、IL-6水平,增加MMP-9蛋白表达水平,降低p-AKT蛋白表达水平.结论 六味地黄丸异病同治老年性聋和AD具有物质基础,其共同的分子机制,可能是通过薯蓣皂素、视黄醇、丹皮酚等多种成分,作用于AKT、TNF-α、IL-6、MMP-9等核心靶点,抑制炎症反应和氧化应激,减少神经元死亡.

氧化应激(OS)是指机体遭受各种有害刺激时产生过多的活性氧自由基而无法及时清除,导致氧化系统和抗氧化系统平衡失调,引起组织或细胞功能紊乱和损伤的一种状态.OS与男性不育症(MI)关系密切,OS通过影响精子发生,损伤精子膜、脱氧核糖核酸(DNA)、线粒体,降低精子运动能力,加速细胞凋等途径使精子质量下降,导致MI.研究发现,单味中药的有效成分多糖类化合物(黄芪多糖、党参多糖、枸杞多糖、黄精多糖、山茱萸多糖、当归多糖、女贞子多糖、石斛多糖),黄酮类化合物(菟丝子总黄酮、槲皮素、紫云英苷、羊藿苷、金丝桃苷),皂苷类化合物(人参皂苷、蒺藜皂苷、薯蓣皂苷元),苯丙素类化合物(五味子甲素、姜黄素、白藜芦醇),环烯醚萜苷类化合物(桃叶珊瑚苷),氮苷类化合物(红景天苷),低聚糖类化合物(巴戟甲素),苯乙醇苷类化合物(肉苁蓉苯乙醇苷)多肽类化合物(牡蛎肽)具有抗氧化作用,可提升雄性动物MI模型的生殖功能.

目的 优化酒黄精wine-processed Polygonati Rhizoma的高压蒸制工艺,确定最佳工艺参数,并对酒制前后刺激性、免疫调节及降血糖作用进行研究.方法 以润制时间、蒸制压力、蒸制时间和焖制时间作为考察因素,以性状、黄精多糖、薯蓣皂苷元、水浸出物、醇浸出物和5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)作为考察指标,运用AHP-熵权法结合 Box-Behnken 设计-响应面法(Box Behnken design-response surface methodology,BBD-RSM)确定酒黄精炮制工艺条件参数.通过家兔眼刺激性实验,评价黄精酒制前后的刺激性作用.通过ip环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型,比较黄精酒制前后对免疫调节作用的影响.通过饲喂高脂高糖饲料、ip链脲佐菌素建立糖尿病小鼠模型,比较黄精酒制前后对降血糖作用的影响.结果 酒黄精炮制最佳工艺参数为润制时间5 h、蒸制时间1h、蒸制压力0.06 MPa、焖制时间7 h.药效实验结果表明,生黄精具有刺激性,黄精酒制后对黏膜的刺激作用减弱,酒黄精提高小鼠免疫力和降血糖的作用均强于生黄精.结论 优选出的酒黄精炮制工艺稳定、合理、可行,按照此工艺制备的酒黄精,可以降低其刺激性,增强免疫调节作用和降血糖作用,为黄精的炮制工艺研究和临床用药提供参考.

目的:通过观察薯蓣多糖体外对精子膜及DNA完整性的影响.为少弱精子症的治疗提供新的途径. 方法:正常已生育成年男性,禁欲3～5d手淫法取精液.分为6组,每组各取0.2ml精液;对照组为精液原液,其他5组分别加入等量的生理盐水、维生素C溶液及不同浓度薯蓣多糖溶液(0.25、1.0、5.0 mg/ml).通过伊红-Y染色试验、精子低渗肿胀实验(HOS)以及精子染色质扩散(SCD)实验,观察不同浓度薯蓣多糖体外对精子存活率、精子膜完整性以及精子核DNA的影响. 结果:6份精液样本孵育24 h及48 h后各组的精子存活率均有降低.维生素C组精子存活率分别为(28.5±3.1)％、(6.5±1.2)％;薯蓣多糖低、中、高剂量组的精子存活率分别为(31.3±3.5)％、(6.5±2.2)％,(37.1±3.5)％、(9.5±2.8)％,(38.3±3.3)％、(9.0±3.2)％,均显著高于生理盐水组[(13.4±4.1)％、(3.1±2.0)％,P＜0.01],中、高剂量薯蓣多糖组显著高于维生素C组(P＜0.05及P＜0.01).精子DNA碎片率低剂量薯蓣多糖组为(29.4±2.6)％,与维生素C组[(30.5±2.5)％]无明显差异,但显著低于对照组[(41.7±2.2)％]和生理盐水组[(42.1±3.3)％];中、高剂量薯蓣多糖组精子DNA碎片率分别为(28.5±2.3)％和(27.9±1.9)％,显著低于对照组、生理盐水组及维生素C组(P＜0.05及P＜0.01). 结论:薯蓣多糖具有体外提高精子存活率和保护精子DNA完整性的作用.

目的:探讨膜分离与大孔树脂吸附技术对穿山龙水提液物理化学性质的影响.方法:采取煎煮2次,10倍量水,每次120 min的水煎煮工艺提取穿山龙,分别采用不同型号的大孔树脂(HP-20、HPD-600、D101、AB-8)吸附及膜分离(陶瓷微滤膜0.8μm、0.2μm、0.05μm和中空纤维超滤膜50kDa、6kDa)技术纯化穿山龙水提液,测定其电导率,黏度,浊度等物理化学参数及蛋白质、多糖、总黄酮、薯蓣皂苷等物质的含量.结果:穿山龙水提液经不同技术纯化后黏度无显著影响,电导率和浊度纯化后显著减小;通过各物质保留率可看出D101型大孔树脂适合分离纯化薯蓣皂苷,而HPD-600对于各物质的保留都相对较低,与理化参数结果一致.0.2μm微滤膜更适合主含皂苷水提液的分离纯化.结论:理化参数的改变与大分子物质的含量减小有着明显的对应关系:大分子物质含量降低,电导率与浊度减小.与大孔树脂吸附相比,膜分离技术更适合穿山龙水提液中薯蓣皂苷成分的分离纯化,微滤膜比超滤膜对薯蓣皂苷的保留率更高.

目的:对不同炮制方法的黄精饮片质量相关指标进行分析,为今后黄精的加工炮制工作提出可供参考的根据.方法:采用硅胶G薄层板对不同炮制工艺的黄精饮片进行定性鉴别;对不同炮制工艺的黄精饮片浸出物、灰分、水分以及多糖含量进行测定;采用甲状腺素片诱导小鼠阴虚模型并评价不同黄精饮片滋阴效果.结果:黄精不同炮制品在薄层色谱系统中的行为特征和薯蓣皂苷元对照品的在色谱系统中的行为特征一致,检查项和含量测定结果均符合《中国药典》(2015年版)和《陕西省中药饮片标准》相关规定;酒蒸后黄精滋阴作用有所增强,且以先切的酒黄精饮片强于先蒸的酒黄精饮片.结论:不同炮制工艺的黄精饮片在质量上存在着一定的差异,为后续黄精产地加工与炮制一体化工艺研究提供借鉴.

目的 基于MAPK信号通路研究薯蓣皂苷元对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的影响,探讨薯蓣皂苷元干预肺间质纤维化的机制.方法 通过LPS诱导MRC-5细胞建立肺纤维化模型,利用CCK-8法检测细胞增殖水平,免疫荧光法检测α-平滑肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)表达水平,ELISA法检测TGF-β1、IL-6蛋白表达水平,Western blot测定p-38、p-p38、jnk、p-jnk表达水平.结果 以LPS诱导MRC-5细胞能够成功建立肺纤维化细胞模型,40μmol/L薯蓣皂苷元组细胞增殖水平较模型组明显降低(P<0.01),薯蓣皂苷元组α-SMA表达水平较模型组均有明显下降(P<0.01).与模型组比,10μmol/L薯蓣皂苷元组、40μmol/L薯蓣皂苷元组TGF-β1表达水平明显下降(P<0.01),20μmol/L薯蓣皂苷元组TGF-β1表达水平未见明显下降(P>0.05);与模型组比,10μmol/L薯蓣皂苷元组IL-6表达水平未见明显下降(P>0.05),而20μmol/L及40μmol/L薯蓣皂苷元组IL-6表达明显高于模型组(P<0.01);各组p-38、jnk表达水平无明显差异(P>0.05),p-p38、p-jnk表达水平薯蓣皂苷元组较模型组明显下降(P<0.01).结论 薯蓣皂苷元通过下调LPS诱导的MRC-5细胞中的TGF-β1的表达,可以抑制Smad通路及非Smad通路中诱导肺纤维化的信号通路,阻碍上皮细胞间质化(EMT)进程.并且通过下调TGF-β1表达,薯蓣皂苷元可以有效地抑制MAPK通路中的p38MAPK通路及jnk通路的磷酸化激活,降低α-SMA表达,减少炎性反应、细胞凋亡的发生,从而达到抗肺纤维化的目的.

目的 采用单因素试验及响应面法优化盐胡芦巴的炮制工艺.方法 通过单因素试验筛选出炮制温度、炮制时间及加盐量3个影响因素.以胡芦巴炮制后的4种指标性成分胡芦巴多糖、薯蓣皂苷元、胡芦巴碱和4-羟基异亮氨酸的提取率的综合评分为响应值进行Box-Behnken试验设计,优选出最佳的胡芦巴盐制工艺.结果 优选工艺为100 g胡芦巴、2g盐在158℃下烘制10 min,胡芦巴多糖、薯蓣皂苷元、胡芦巴碱、4-羟基异亮氨酸的提取率分别为0.4346％、1.221％、10.21％、0.3400％,综合评分为95.15.结论 优选的炮制工艺方法简单、稳定可行,可为盐制胡芦巴大生产提供试验数据.

山药为薯蓣科植物薯蓣(Dioscorea opposita Thunb.)的干燥根茎,具有补脾养胃、生津益肺、补肾涩精的功效.现代研究表明山药主要化学成分包括多糖、氨基酸、脂肪酸、山药素类化合物、尿囊素、微量元素、淀粉等.具有降血糖、降血脂、抗氧化、调节脾胃、抗肿瘤、免疫调节等药理作用.通过查阅近年来国内外山药的研究报道,综述山药在种属来源、真伪鉴别、化学成分及药理作用方面的研究进展,以期为其药效物质基础、质量标准及药理活性的深入研究提供参考.