目的:探讨瘤段骨体外射线灭活回植术在儿童四肢恶性/侵袭性骨肿瘤治疗中应用的安全性及有效性。方法:2016年6月至12月郑州大学附属肿瘤医院应用术中瘤段骨体外射线灭活回植术治疗儿童四肢骨肿瘤共8例，其中男4例，女4例；平均年龄12.75岁(11～14岁)。骨肉瘤6例，尤文氏肉瘤1例，反复复发的朗格汉斯组织细胞增生症1例。肿瘤位于股骨中下段4例，胫骨中上段2例，胫骨中段1例，肱骨中上段1例。瘤段骨切除平均长度23 cm(16～35 cm)，瘤段离体后应用直线电子加速器-X线给予一次性等中心对穿照射60 Gy，灭活后回植，应用钢板内固定重建。结果:所有病例均获得有效随访，平均随访时间20.4个月(18～24个月)，截止末次随访，均无局部复发，1例术后6个月死于肺转移，1例术后12个月发现肺转移，目前带瘤存活，其余6例未发现转移。存活病例中除1例末次随访时灭活骨尚未完全愈合，其余6例均获得愈合，平均愈合时间8.7个月(6～11个月)，美国骨骼肌肉肿瘤协会功能评分(MSTS)平均24.3分(21～29分)。出现并发症3例，其中内固定断裂1例，膝关节强直2例，经再次手术后均获得满意效果。未发生感染、回植骨骨折、吸收、骨不愈合等。结论:术中瘤段骨体外射线灭活回植是儿童四肢骨肿瘤切除后骨缺损重建的有效方式。

目的:回顾性分析酒精灭活、射线灭活、液氮灭活3种灭活方法在儿童股骨骨肉瘤保肢治疗中的临床效果及并发症情况，为临床合理选择瘤段骨体外灭活方法提供理论依据。方法:回顾性分析2008年1月至2017年12月郑州大学附属肿瘤医院骨软组织科收治的93例股骨骨肉瘤患儿的临床资料，筛选出采用自体瘤段骨体外灭活回植重建治疗的患儿40例，其中男21例，女19例；年龄8～18(13.65±2.87)岁。包括瘤段骨酒精灭活15例，射线灭活12例，液氮灭活13例。比较3种灭活方法治疗儿童股骨骨肉瘤的骨愈合时间、骨愈合率及肿瘤复发率、感染率、骨折或内固定断裂、翻修手术率等并发症情况。结果:40例患儿术后均得到有效随访：酒精灭活组随访(102.60±16.55)个月，射线灭活组随访(59.33±6.39)个月，液氮灭活组随访(36.85±6.49)个月，3组随访时间比较差异有统计学意义( P<0.05)。与其他2组比较，酒精灭活组的骨愈合时间较长，骨愈合率较低，感染率、翻修手术率均较高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；但复发率、骨折或内固定断裂率与其他2组比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。射线灭活组与液氮灭活组比较，以上随访指标比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:3种瘤段骨体外灭活方法对肿瘤灭活均安全可靠，但酒精灭活骨愈合时间长、并发症较多。射线灭活与液氮灭活均可为临床选择，但射线灭活需要专业设备，可能限制其临床应用。

目的 探讨带蒂腓骨膜转位移植覆盖灭活骨-自体骨断端以促进儿童胫骨肿瘤灭活再植后骨愈合的临床效果.方法 自2016年6月至2016年12月,在儿童胫骨恶性(侵袭性)骨肿瘤的瘤段骨体外射线灭活再植术中,应用同侧带蒂腓骨膜逆行转位覆盖灭活骨-自体骨断端,以促进灭活瘤段骨在体内的愈合,防止骨不连发生.共应用5例,男2例,女3例,平均12(9～15)岁.其中骨肉瘤3例,尤文肉瘤1例,反复复发的胫骨朗格汉斯组织细胞增生症1例;瘤段骨平均长度17.2(14.0～20.0)cm,2例瘤段骨包含膝关节面,3例为单纯骨干.瘤段骨灭活方法为术中体外射线照射灭活.术后定期随访,拍摄X线、CT观察患肢功能及瘤段骨愈合、并发症等情况.本组患儿术后12个月随访时进行MTSS评分.结果 所有病例均获得满意随访,平均随访14.2(12～18)个月,5例患者共8处灭活骨-自体骨断端均完全愈合,腓骨膜转位覆盖的胫骨远侧断端平均愈合时间7.8(6～10)个月,骨膜覆盖区域成骨明显.单纯骨干灭活病例因保留骺板未发生双下肢不等长,骨关节灭活的2例患儿因回植后骺板失去活力而在末次随访时患肢较对侧肢体分别短缩1.0cm和1.5cm.本组患肢MTSS评分平均25.8(22～28)分,MTSS％平均86％(73％～93％).结论 带蒂腓骨膜转位移植能够有效地促进儿童胫骨灭活瘤段骨在体内的愈合过程,具有操作简便、并发症少的特点.

本文通过溶胶-凝胶法制备了Fe-TiO2和Ni-TiO2纳米颗粒,并研究这两种纳米颗粒体外光动力疗法(PDT)对HL60细胞的灭活效果.通过透射电镜(TEM)、能谱仪(EDS)、X射线衍射(XRD)、紫外-可见光(UV-Vis)吸收光谱等方法对纳米颗粒进行表征.使用CCK-8法分别测定Fe-TiO2和Ni-TiO2对HL60细胞的灭活效果.结果表明,不同终值浓度及掺杂量的Fe-TiO2和Ni-TiO2纳米颗粒对HL60细胞的暗毒性较低,但是PDT效率均显著高于未掺杂的TiO2.在各自的最佳作用参数下,PDT灭活效率分别达到72.5％ ±1.6％和56.4％ ±1.2％.此外,还对这两种纳米颗粒灭活效果的差异进行了探讨.

本文采用共沉淀法制备了L-半胱氨酸(L-Cys)修饰的Fe3O4包裹TiO2(Fe3O4@TiO2/L-Cys)复合纳米粒子.通过透射电子显微镜(TEM),X射线衍射(XRD)和傅立叶变换红外光谱仪(FTIR)对复合纳米粒子进行了表征,并讨论了复合纳米粒子对HL60细胞体外光动力疗法(PDT)灭活的影响.并对其PDT灭活机制进行了初步探索.试验表明,Fe3O4@TiO2/L-Cys复合纳米粒子分散性高,生物相容性好,对细胞的暗毒性更低,并可以有效增强靶向性,提高PDT灭活效率,在410 nm波长的光激发下,光照剂量为18 J/cm2的情况下,当TiO2与Fe3O4的比例为1∶3时,整体PDT效率最高.PDT灭活效率可达69.36％.

本文通过溶胶-凝胶法制备了BiFeO3@TiO2复合纳米颗粒,利用透射电镜(TEM)、x射线衍射(XRD)、荧光发光光谱等对纳米颗粒进行表征.研究采用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)法分别检测了在暗室条件、光照条件以及不同强度的弱稳恒磁场作用下,用终值质量浓度为50 μg/mL纳米颗粒处理HL60细胞活性,试验结果表明:在暗室条件下,药物质量浓度为50 μg/mL,与HL60细胞共同孵育12 h后,BiFeO3@TiO2复合纳米颗粒随着TiO2外壳厚度增加,细胞的暗室相对存活率从78％增加到85％;在光照条件下,有弱稳恒磁场作用的BiFeO3与TiO2质量比为1∶2的BiFeO3@TiO2复合纳米颗粒对HL60细胞的PDT灭活效率最高达到78％,弱稳恒磁场环境增强了对HL60细胞的PDT灭活效率,这为对弱稳恒磁场环境下的光动力疗法治疗白血病肿瘤细胞的临床应用提供了参考.

为了增强光敏剂光动力治疗白血病的效果,研究由肿瘤靶向性分子叶酸(FA)修饰、壳聚糖纳米粒子(CS-NP)包裹Fe-TiO2形成的复合纳米颗粒FA-CS@Fe-TiO2对HL60细胞的光催化灭活作用.通过溶胶-凝胶法、两步法以及表面修饰等方法制备了FA-CS@Fe-TiO2纳米颗粒,并利用X射线衍射(XRD)、扫描电镜(SEM)、傅里叶红外光谱等分析手段对纳米颗粒进行了表征.使用CCK-8法、活性氧含量分析法对复合纳米颗粒FA-CS@Fe-TiO2光催化灭活HL60细胞的作用机理进行了分析.细胞试验结果表明,在非光照条件下,壳聚糖(CS)本身对细胞的生长无明显抑制作用,且在低质量浓度(5μg/mL)时对细胞生长有一定的促进作用.相比Fe-TiO2和FA-CS@Fe-TiO2纳米材料,CS@Fe-TiO2的毒性要明显降低,即使在160μg/mL的高质量浓度作用下,CS@Fe-TiO2(3:2)作用后的HL60细胞相对存活率仍可高达85％,说明CS的包裹能提高Fe-TiO2的生物相容性.光动力疗法(PDT)试验表明,FA的修饰可以显著提高HL60细胞对复合纳米颗粒的摄取,增强复合纳米颗粒对HL60细胞的灭活效率,FA-CS@Fe-TiO2的最高PDT灭活效率为78.75％.该研究为光动力疗法治疗白血病肿瘤细胞的临床应用提供了参考.

通过化学气相沉积法制备了g-C3N4@C-TiO2纳米颗粒,利用X射线衍射(XRD)、荧光光谱(FS)、透射电子显微镜(TEM)、紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)、能谱(EDS)等对纳米颗粒进行表征.分别研究了暗室条件及光照条件下g-C3N4@C-TiO2纳米颗粒对HL60细胞的作用效果.采用CCK-8法探究了一系列质量浓度梯度的纳米颗粒处理HL60细胞后的存活率,并且通过荧光探针标记技术检测细胞内活性氧水平.试验结果表明,在C-TiO2表面包裹g-C3N4,可将TiO2可吸收的光波长范围拓展至可见光波段.制备的g-C3N4@C-TiO2粒径在10～20 nm,满足其进入细胞的尺寸要求.暗毒性试验表明g-C3N4@C-TiO2纳米颗粒在暗室条件下对细胞的毒性较小,证明了其具有良好的生物相容性.同时,与TiO2和C-TiO2纳米颗粒处理组相比,g-C3N4@C-TiO2处理组的光动力灭活效率高达(76.5±1.9)％,表明其可能成为治疗白血病的潜在光敏剂.

为了探究聚乙二醇化黑色TiO2介导的光动力疗法体外灭活HL60细胞的潜力,先后采用水热还原法和表面修饰法制备不同质量比的聚乙二醇化黑色TiO2(PEG@B-TiO2)纳米复合材料.通过X射线衍射(XRD)、傅里叶红外光谱(FTIR)、紫外可见吸收光谱(UV-VIS)、荧光光谱(FS)、透射电子显微镜(TEM)及粒度仪研究材料的理化性质.用活性氧检测试剂盒检测材料的活性氧(ROS)产量.通过细胞增殖试验(CCK-8法)比较不同纳米颗粒对HL60细胞的暗毒性和可见光下的光毒性,探究最佳材料.结果表明:合成的PEG@B-TiO2分散性较好,结晶度较高,可见光吸收能力强,电子空穴复合率低;同时,暗毒性试验证明了药物的生物相容性好,与纯TiO2相比,PEG@B-TiO2在光照下对HL60细胞的灭活效率更高.这表明其有望成为光动力治疗白血病的有效光敏剂.

背景:脱细胞、去抗原、病毒灭活与终端灭菌工艺的组合优化是制备符合临床要求组织再生材料的关键技术.目的:系统比较分析两种脱细胞、去抗原、病毒灭活与灭菌组合工艺对猪真皮基质理化性能的影响.方法:取新鲜猪皮,分两组工艺制备猪真皮基质:①方法A:采用1％Triton X-100、DNase和RNase、1％磷酸三丁脂进行脱细胞处理,1％过氧乙酸+25％乙醇病毒灭活,伽马射线辐照终端灭菌;②方法 B:采用中性蛋白酶、0.5％Triton X-100和DNase进行脱细胞处理,α-半乳糖苷酶去除抗原,0.1％过氧乙酸病毒灭活,伽马射线辐照终端灭菌.对两种方法制备的猪真皮基质进行表征.结果 与结论:①A组胶原蛋白含量低于B组,弹性蛋白、糖含量高于B组,材料硬度值高于B组;A组基质材料的悬垂性较差,B组基质材料的柔韧性较好;②A组脱细胞处理不影响基质材料的热稳定性,B组脱细胞略降低基质材料的热稳定性;伽马射线灭菌后,A组基质材料的热稳定性大幅度下降,B组基质材料的热稳定性下降很小;③与B组相比,A组基质材料的拉伸强度和弹性较小;体外酶降解实验显示,A组基质材料对胶原酶降解具有很强的抗性,对胰蛋白酶敏感、易降解,B组基质材料则相反;④扫描电镜显示,伽马射线灭菌后,A组基质材料基本看不到胶原三维结构,胶原纤维排列致密,胶原纤维之间存在非纤维结构性凝胶样物质;B组基质材料胶原纤维结构清晰,胶原纤维之间不存在非纤维结构性胶样物质.苏木精-伊红和三色染色显示,伽马射线灭菌后,A组基质材料可见少量细胞核,胶原纤维排列紧密,材料致密;B组基质材料无细胞核,保留了较好的胶原纤维三维空间结构;⑤结果表明,不同组合的制备工艺对脱细胞基质材料的理化性能影响极大,方法B在有效脱细胞和去抗原的同时较完整地保留了天然组织结构,方法A对材料的破坏性较大,制备的基质材料胶原成分含量、柔软度、热稳定性和力学性能均不如方法B.