目的:基于呼出气在线分析系统筛查苯暴露小鼠呼出气中的生物标志物。方法:30只8周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（0 mg/m 3）、3、32、324、648、1 296 mg/m 3六个组，采用静式吸入法进行苯染毒28 d。染毒结束后检测小鼠外周血血常规和全血还原型谷胱甘肽（GSH）含量，并利用体外细胞实验检测小鼠血浆染毒HL60细胞的丙二醛（MDA）含量；采用二次电喷雾电离源高分辨质谱（SESI-HRMS）收集小鼠呼出气数据，进行苯代谢产物和氧化应激小分子代谢物的靶向分析，并筛查呼出气中苯暴露及毒效应的生物标志物。 结果:苯暴露小鼠的外周血细胞数目出现了不同程度的降低，其中白细胞（WBC）的下降最为显著，32和324 mg/m 3组的WBC与对照组相比分别下降了27.76%和52.87%（ P<0.05）。同时，与对照组相比，324 mg/m 3组中小鼠外周血细胞的GSH含量降低了13.16%（ P<0.05），324 mg/m 3组小鼠的血浆处理HL60细胞后MDA含量增加了18.11%（ P<0.05）。小鼠呼出气中的苯酚、氢醌/儿茶酚、苯三酚和反-反式粘康酸（ t， t-MA）4种苯代谢产物，可作为苯暴露生物标志物（ R 2>0.8， P<0.001）；5种氧化应激相关的小分子代谢产物（ω-羧脂肪酸C 5H 10O 3、ω-羧脂肪酸C 6H 12O 3、谷氨酸、半胱氨酸和MDA）的峰值强度随着苯浓度的增加而增加（ P<0.05），且与WBC数量降低呈负相关（ P<0.001），可作为苯毒效应的生物标志物。 结论:呼出气中的苯酚、氢醌/儿茶酚、苯三酚和 t， t-MA可作为苯暴露标志物；ω-羧脂肪酸C 5H 10O 3、ω-羧脂肪酸C 6H 12O 3、谷氨酸、半胱氨酸和MDA可能作为苯效应标志物。

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）C9ORF139靶向微小RNA（miR）-24-3P/TAOK1调控急性髓系白血病（AML）细胞增殖的作用和机制。方法:AML细胞株（人急性早幼粒白血病细胞株HL-60以及人单核白血病细胞株THP-1）购自中国科学院，分为4组：A组为阴性对照（siNC）组，B组为干扰C9ORF139（siC9ORF139）组，C组为siC9ORF139+miR-24-3P抑制剂组，D组为miR-24-3P+TAOK1过表达（oe-TAOK1）组。采用实时荧光定量逆转录（qRT）-PCR检测4组AML细胞株HL-60、THP-1中的表达水平。细胞计数试剂盒-8（CCK8）法检测细胞增殖，流式细胞仪分析细胞的凋亡情况，Transwell实验检测4组细胞的迁移、侵袭能力，Western印迹法检测p-丝氨酸/苏氨酸激酶（p-raf）、p-丝裂原活化蛋白激酶（p-MEK）、p-细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）表达。构建荧光素酶报告基因质粒，验证C9ORF139、miR-24-3P、TAOK1的结合能力。裸鼠皮下肿瘤细胞接种分为HL-60（A组）和HL-60（B组）。结果:敲减细胞中C9ORF139基因并培养120 h后，在HL-60及THP-1细胞中，B组细胞增殖能力（0.62±0.02、0.82±0.02）、迁移能力（0.22±0.03、0.05±0.01）、侵袭能力（0.20±0.02、0.13±0.03）均低于A组（1.30±0.02、1.83±0.07；0.99±0.02、0.99±0.02；1.00±0.01、1.00±0.01）（均 P<0.05）。共转染miR-24-3抑制剂后，细胞增殖能力、迁移能力、侵袭能力均高于B组（均 P<0.05）。共转染miR-24-3P与oe-TAOK1质粒后，细胞增殖能力、迁移能力、侵袭能力均高于B组（均 P<0.05）。当干扰细胞中C9ORF139基因后，与A组凋亡水平（0.31±0.27、2.49±0.33）相比，B组（28.56±8.07、17.74±1.91）均较高（均 P<0.05）；当共转染miR-24-3P抑制剂后，C组细胞凋亡水平（2.34±0.09、3.06±0.06）均低于B组（均 P<0.05）；在共转染miR-24-3P与oe-TAOK1质粒组中，D组细胞凋亡水平（2.16±1.29、4.80±0.37）均低于B组（均 P<0.05）。在HL-60、THP-1细胞中，当C9ORF139未突变时，miR-24-3P组荧光素酶活性均低于miR-NC组（均 P<0.05）。当C9ORF139序列中与miR-24-3P结合位点突变后，miR-24-3P组荧光素酶活性与miR-NC组差异无统计学意义（ P>0.05）。当TAOK1未突变时，miR-24-3P组荧光素酶活性低于miR-NC组（ P<0.05）；当TAOK1序列中与miR-24-3P结合位点突变后，miR-24-3P组荧光素酶活性与miR-NC组差异无统计学意义（ P>0.05）。当干扰HL-60细胞中C9ORF139基因并培养72 h后，B组Raf、MEK及ERK分子磷酸化表达水平均低于A组（均 P<0.05）。第14天，A组肿瘤体积高于B组［（284.49±57.61）比（125.70±18.64）mm 3， P=0.017］。HL-60 A组肿瘤重量高于B组［（847.80±159.36）比（408.40±113.16）mg， P=0.001］。 结论:lncRNA C9ORF139通过调控miR-24-3P上调TAOK1促进AML细胞的增殖、侵袭、迁移，C9ORF139表达具有促进AML裸鼠皮下肿瘤生长的作用。

目的:从调控中性粒细胞（PMN）凋亡探讨血必净注射液对体外循环（CPB）所致急性肺损伤（ALI）的防治作用。方法:按随机数字表法将30只雄性SD大鼠分为假手术组（Sham组）、CPB模型组（CPB组）、血必净预处理组（XBJ组），每组10只。CPB组和XBJ组CPB 60 min后停机；Sham组不行CPB。XBJ组CPB前2 h腹腔注射4 mL/kg血必净注射液；Sham组和CPB组注射等量生理盐水。CPB后4 h，取动脉血进行血气分析，计算呼吸指数（RI）；取肺组织测定肺系数（LI）和肺含水率。收集支气管肺泡灌洗液（BALF）获取PMN，检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）活性，并用流式细胞仪检测细胞凋亡率；实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测微小RNA-142-3p（miR-142-3p）、FoxO1 mRNA表达；蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测FoxO1蛋白表达。此外，将HL-60细胞分为对照寡核苷酸转染组、miR-142-3p模拟物转染组和miR-142-3p拮抗物转染组，转染48 h后双荧光素酶报告基因检测miR-142-3p与FoxO1结合的活性。结果:与Sham组相比，CPB组大鼠RI、LI及肺含水率显著升高，BALF获取PMN中caspase-3活性和细胞凋亡率显著降低，miR-142-3p表达下降，FoxO1蛋白表达增加。与CPB组比较，XBJ组大鼠RI、LI、肺含水率显著降低〔RI：0.281±0.066比0.379±0.071，LI：4.50±0.26比5.71±0.42，肺含水率：（80.31±3.25）%比（84.59±3.41）%，均 P<0.01〕，BALF获取PMN中caspase-3活性和细胞凋亡率显著升高〔caspase-3活性：0.350±0.021比0.210±0.014，凋亡率：（15.490±1.382）%比（8.700±0.701）%，均 P<0.01〕，miR-142-3p表达显著上调（2 -ΔΔCt：2.61±0.17比0.62±0.05， P<0.01），FoxO1蛋白表达显著降低〔FoxO1/GAPDH（相对表达量）：0.81±0.04比1.22±0.06， P<0.01〕。而3组间FoxO1 mRNA表达差异无统计学意义。生物信息学分析结果表明，miR-142-3p可以结合FoxO1 3'非翻译区（3'UTR）。与转染无关对照寡核苷酸序列比较，转染miR-142-3p模拟物可以降低HL-60细胞FoxO1蛋白表达〔FoxO1/GAPDH（相对表达量）：0.48±0.06比1.00±0.05， P<0.01〕，而转染miR-142-3p拮抗物后FoxO1蛋白表达上升〔FoxO1/GAPDH（相对表达量）：1.37±0.21比1.00±0.05， P<0.05〕，但转染miR-142-3p模拟物或拮抗物对FoxO1 mRNA表达均无影响。荧光素酶报告基因显示，miR-142-3p可以与FoxO1 3'UTR结合抑制FoxO1表达。 结论:血必净注射液可能通过miR-142-3p/FoxO1轴促进肺泡PMN凋亡，发挥防治CPB所致ALI的作用。

2019年我国新增霍奇金淋巴瘤（HL）9 468例，新增非霍奇金淋巴瘤（NHL）91 954例。HL的发病率和死亡率分别为0.57/10万和0.15/10万，而NHL的发病率和死亡率更是达到4.99/10万和2.32/10万 [1]。弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是最常见的淋巴瘤亚型，占所有淋巴瘤的35.8% [2]。随着规范化治疗的推广和新药的不断研发，DLBCL患者的生存获得了很大的改善。中国DLBCL患者的5年总生存（OS）率达到38.4% [3]，其中一线接受利妥昔单抗联合含蒽环类药物化疗方案患者5年、10年OS率分别为69%、55.6%，接近欧美国家水平 [4]。约60%的DLBCL初治患者可通过R-CHOP免疫化疗方案治愈。然而复发/难治性DLBCL（R/R DLBCL）患者接受现有的挽救化疗方案联合自体造血干细胞移植（ASCT）巩固治疗仅有10%的治愈率 [5]，不适合行ASCT或ASCT后复发患者的预后更差，中位生存期仅6~12个月左右 [6-7]。近年来，虽然嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞治疗的出现使部分R/R DLBCL患者获得持久缓解与长期生存，但是CAR-T细胞治疗高昂的费用、较长的制备周期、特殊的不良反应等诸多因素限制了其在临床的应用。抗体药物偶联物（ADC）、单克隆抗体和双特异性抗体等抗体类新药的研发与应用为R/R DLBCL的治疗打开了新局面。本文对这些抗体类新药或治疗方案在R/R DLBCL治疗领域的临床研究进展进行归纳和总结。

目的:在类中性粒细胞模型中，探讨尿激酶型纤溶酶原激活物受体（PLAUR）基因对中性粒细胞活化及凋亡的影响。方法:采用体外培养的人急性髓系粒细胞白血病细胞株HL60作为研究对象，全反式维甲酸（ATRA）诱导HL60细胞分化为类中性粒细胞。构建干扰人PLAUR基因的慢病毒载体，转染入类中性粒细胞（siRNA组），并设置磷酸盐缓冲液（PBS）组（未转染）和空白对照（NC组，转染空白质粒）作为对照（ n=3）。饥饿培养、加入白细胞介素-17干预后，流式细胞术检测细胞膜CD11b表达，以及酶联免疫吸附法检测细胞培养液上清中髓过氧化物（MPO）、中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）水平，了解类中性粒细胞活化情况。Annexin V/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡，并用Western蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白caspase-3、bax、bcl-2表达。 结果:流式细胞术检测siRNA组HL60细胞细胞膜CD11b表达（32.37±8.17）较另两组下降（PBS组46.27±1.54，NC组53.07±8.14）（ P<0.05）。siRNA组细胞培养液上清中MPO和NETs水平（33.37±1.11、57.69±3.03）也均较PBS组（41.64±2.20、77.60±4.33）和NC组（40.84±5.11、76.15±2.10）下降，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。流式细胞术检测siRNA组凋亡率（20.42%±2.45%）较PBS组（11.91%±2.23%）和NC组（11.13%±2.56%）升高（ P<0.05）。siRNA组caspase-3和bax蛋白表达（0.84±0.05、0.83±0.04）较PBS组（0.68±0.02、0.63±0.08）和NC组（0.71±0.01、0.66±0.10）高，差异有统计学意义（ P<0.05）；抗凋亡蛋白bcl-2表达量减少（siRNA组：0.38±0.02，PBS组：0.73±0.05，NC组：0.69±0.06）（ P<0.05）。 结论:PLAUR可促进类中性粒细胞活化，抑制其凋亡。

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）C9ORF139对急性髓系白血病（AML）细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响及可能机制。方法:回顾性收集2017年11月至2021年8月常州市第二人民医院血液内科30例初发AML患者和30名健康对照者骨髓标本，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测各标本C9ORF139转录水平相对表达量。合成针对C9ORF139基因靶点的小干扰RNA（siRNA）序列，转染至人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞、人单核细胞白血病THP-1细胞，为C9ORF139敲减组，以转染阴性对照序列的siRNA的细胞为对照组；采用qRT-PCR检测各组细胞C9ORF139转录水平相对表达量，计算干扰效率。CCK8法检测各组细胞增殖能力（以吸光度值表示细胞增殖能力，吸光度值越高，细胞增殖能力越强），Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况。依据miRanda数据库预测miRNA-24-3p（miR-24-3p）与C9ORF139和TAOK1有结合位点，双荧光素酶报告基因实验检测miR-24-3p分别与C9ORF139、TAOK1的靶向关系。结果:qRT-PCR检测示，初发AML患者骨髓标本中C9ORF139的相对表达量高于健康对照组，差异有统计学意义（ P<0.001）。C9ORF139敲减组HL-60、THP-1细胞C9ORF139相对表达量均低于相对应的对照组细胞，差异均有统计学意义（均 P<0.01）。C9ORF139敲减组HL-60细胞和THP-1细胞增殖能力（培养72 h吸光度值：1.04±0.13比1.78±0.23，1.05±0.04比1.79±0.13）、侵袭能力（培养48 h细胞侵袭率：0.06±0.02比1.00±0.02，0.22±0.09比1.01±0.01）、迁移能力（培养48 h细胞迁移率：0.37±0.07比1.01±0.01，0.21±0.03比1.00±0.01）均低于对应的对照组，细胞凋亡率[（6.35±0.26）%比（0.58±0.55）%，（18.75±1.83%）比（2.07±0.19）%]均高于对应的对照组，差异均有统计学意义（均 P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验显示，在THP-1、HL-60细胞中，转染miR-24-3p+C9ORF139-野生型（WT）的细胞相对荧光素酶活性均低于转染miR-24-3p -阴性对照（NC）+C9ORF139-WT的细胞，差异均有统计学意义（均 P<0.001），而转染miR-24-3p+C9ORF139-突变型（MUT）的细胞与转染miR-24-3p-NC+C9ORF139-MUT的细胞相对荧光素酶活性差异均无统计学意义（均 P>0.05）；转染miR-24-3p+TAOK1 3'UTR-WT的细胞荧光素酶活性均低于miR-24-3p -NC+TAOK1 3'UTR-WT细胞，差异均有统计学意义（均 P<0.001），而转染miR-24-3p+TAOK1 3'UTR-MUT的细胞与转染miR-24-3p-NC+TAOK1 3'UTR-MUT的细胞相对荧光素酶活性差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:lncRNA C9ORF139可能通过与miR-24-3p相互作用来调控TAOK1基因表达，进而促进AML细胞增殖、侵袭和迁移，抑制AML细胞凋亡，可为AML治疗新靶点提供参考。

目的:建立BCR：：ABL1 p210转录本荧光定量PCR（RQ-PCR）实验室自建检测方法和分析性能确认。方法:本研究采用欧洲抗癌计划（EAC）公布的BCR：：ABL1 p210转录本RQ-PCR检测的引物和探针序列建立了BCR：：ABL1 p210转录本RQ-PCR实验室自建检测（LDT）方法，通过WHO国际参考品获得转换系数（CF），并使用K562和HL60细胞系混合物构建两个不同水平的实验室内部质控品。回顾性分析慢性髓细胞性白细胞（CML）患者阳性标本，参考CLSI MM01-A3等指南评价实验室自建BCR：：ABL1 p210 RQ-PCR 方法的精密度、正确度、线性范围、分析灵敏度和分析特异性等参数。采用Bland-Altman法对LDT方法与美国FDA批准的BCR：：ABL1 p210转录本定量检测体外诊断（IVD）试剂盒检测结果进行一致性分析。结果:本中心通过WHO国际参考品校准获得的BCR：：ABL1国际标准值（BCR：：ABL1 IS）的CF为0.535。本研究建立的LDT方法在4个分子学反应（MR）水平（0.5、1.5、2.5、3.5）的BCR：：ABL1 IS 的重复性变异系数（ CV）分别为7.44%、5.33%、9.12%、18.06%，室内总不精密度 CV分别为7.99%、5.49%、10.95%、17.99%。2020至2022年本实验室所有美国病理学家协会（CAP）能力验证（PT）样本的MR值均在CAP允许的变异范围内，MR结果与CAP-PT MR 平均值强相关（ r=0.999， P<0.01），所有差值均在一致性界限范围内。本研究建立的LDT方法与Qiagen IVD试剂盒检测结果相关性高（ r=0.997， P<0.01）。e13a2转录本的BCR：：ABL1 IS线性范围为0.001%~7.454%，最大 CV值为64.09%。e14a2转录本的BCR：：ABL1 IS线性范围为0.002%~12.398%，最大 CV值为43.37%。e13a2转录本和e14a2转录本的最低检测限（LoD）分别为MR5.0（0.001% IS）和MR4.8（0.002% IS）；e13a2和e14a2转录本定量检测限（LoQ）均为MR4.7（0.002% IS）。该方法分析特异性为100%，与BCR：：ABL1 p190转录本检测无交叉反应性。 结论:本实验室自建的BCR：：ABL1 p210转录本RQ-PCR定量检测体系分析性能良好，可满足CML患者BCR：：ABL1融合基因的临床检测需求。

目的:研究雌二醇对f-MLP诱导的体外中性粒细胞活化的影响，并探讨这种作用与ERK通路及其上游蛋白MKP-1的关系。方法:将HL-60诱导分化成类中性粒细胞(dHL-60)。用MTT实验检测不同浓度梯度的E2、f-MLP、PD98059或混合液对dHL-60的影响。通过Transwell实验和超氧化物检测E2、PD98059对f-MLP诱导的dHL-60迁移和超氧化的抑制作用。Western blot检测ERK、p-ERK、MKP-1的表达水平。结果:E2、f-MLP、PD98059单独或联合使用对dHL-60细胞的存活率没有影响。f-MLP能显著诱导中性粒细胞迁移和过度氧化。生理、药理学剂量的E2和PD98059可以有效抑制f-MLP的这种作用。Western blot检测结果显示f-MLP诱导ERK磷酸化，而E2和PD98059有效抑制f-MLP的这种作用。另外，雌二醇能有效地增加MKP-1的表达。结论:雌二醇可能通过增加MKP-1蛋白降低ERK磷酸化，从而抑制f-MLP诱导的体外中性粒细胞迁移及超氧化。

目的:观察丹曲胶囊对高脂血症模型大鼠血脂以及肝脏组织病理学的影响.方法:选取100只足月SD大鼠,用高脂饲料对90只SD大鼠造模,其余10只作为空白对照组,4周后将造模成功SD大鼠择优选取60只,随机分为丹曲低剂量组(0.6 g/kg)、丹曲中剂量组(1.2 g/kg)、丹曲高剂量组(2.4 g/kg)、模型组、阿托伐他汀钙组(10 mg/kg)、血脂康组(1.2 g/kg),每组10只.经口饲分别给药4周后,检测各组大鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清脂蛋白脂肪酶(LPL)、肝脂酶(HL)、脂肪酸合成酶(FAS)水平;计算大鼠肝脏系数;苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理学形态,油红O染色观察动脉组织病理学形态.结果:与空白对照组比较,模型组血清TC、LDL-C水平明显升高(P＜0.05);与模型组比较,丹曲高剂量组、中剂量组血清TC、LDL-C、HDL-C水平明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);与血脂康组比较,丹曲高剂量组、中剂量组TC、TG、LDL-C水平明显降低(P＜0.05),丹曲低剂量组TG明显降低(P＜0.01).各组血清LPL、HL、FAS水平以及肝脏系数比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).肝脏组织病理学观察显示:与模型组比较,丹曲低剂量组肝细胞空泡变性减轻,多发片状坏死消失;丹曲高剂量组、中剂量组以及阿托伐他汀钙组肝细胞空泡变性减轻,多发片状坏死、炎细胞浸润消失.结论:丹曲胶囊通过降低血清TC和LDL-C水平,及时清扫多余的胆固醇,改善肝脏组织学病理病变情况,有效调节高脂血症大鼠血脂水平.

目的:探究复元胜白方(FYSBF)对急性髓系白血病(AML)的治疗作用与JAK/STAT信号通路的关系及机制.方法:将AML细胞系HL-60细胞分为对照组、FYSBF组、IL-6组(IL-6为JAK/STAT信号通路激活剂)和FYSBF+IL-6组.对照组HL-60细胞采用正常RPMI 1640培养基培养,FYSBF组HL-60细胞的培养基中添加终浓度为200 μg/mL的FYSBF,IL-6组HL-60细胞的培养基中添加终浓度为100 ng/mL的IL-6,FYSBF+IL-6组HL-60细胞的培养基中添加终浓度为200 μg/mL的FYSBF和100 ng/mL的IL-6.采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移水平,Western blot实验分析蛋白表达水平.结果:与对照组比较,FYSBF组HL-60细胞相对活力、克隆数量、迁移和侵袭细胞数量以及S期细胞比例均降低(P＜0.05),CDK2、cyclin E、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达量均降低(P＜0.05),JAK2和STAT3蛋白的磷酸化水平均降低(P＜0.05),G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均升高(P＜0.05),p21和E-cadherin的蛋白表达量均升高(P＜0.05).与对照组比较,IL-6组HL-60细胞相对活力、克隆数量、迁移和侵袭细胞数量以及S期细胞比例均升高(P＜0.05),CDK2、cyclin E、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达量均升高(P＜0.05),JAK2和STAT3蛋白的磷酸化水平均升高(P＜0.05),G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均降低(P＜0.05),p21和E-cadherin的蛋白表达量均降低(P＜0.05).与IL-6组比较,FYSBF+IL-6组HL-60细胞相对活力、克隆数量、迁移和侵袭细胞数量以及S期细胞比例均降低(P＜0.05),CDK2、cyclinE、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达量均降低(P＜0.05),JAK2和STAT3蛋白的磷酸化水平均降低(P＜0.05),G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均升高(P＜0.05),p21和E-cadherin的蛋白表达量均升高(P＜0.05).结论:复元胜白方通过抑制JAK2/STAT3通路激活,进而抑制急性髓系白血病细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化,促进细胞凋亡和细胞周期阻滞.