膝骨关节炎的重要病机在于肾虚血瘀，临床多采用补肾活血中药治疗，可取得较好疗效。现有文献主要针对补肾活血单味药，以及中药复方，如包含补肾活血中药的经典方右归丸、独活寄生汤，或基于补肾活血思路自拟的经验方补肾活血方、补肾通络方等开展研究。补肾活血中药主要通过调控氧化应激反应、调节炎性细胞因子水平、调节NO水平、调控淋巴功能微循环、抑制软骨细胞凋亡、调节软骨代谢、保护及修复软骨、抑制基质降解酶来发挥治疗作用。

目的:观察保肾通络方对糖尿病肾病(DN)小鼠肾小管间质纤维化及上皮细胞间充质转分化(EMT)的影响.方法:选用KK-Ay小鼠作为DN模型小鼠,随机分为模型组、保肾通络方组及缬沙坦组,正常对照组小鼠选用C57 BL/6J 小鼠.保肾通络方组小鼠给予保肾通络方灌胃治疗,缬沙坦组小鼠给予缬沙坦灌胃治疗,模型组、正常对照组小鼠给予剂量相同的蒸馏水灌胃治疗;灌胃给药 12 周后检测各组血清肌酐、尿素氮水平,HE、PAS、Masson染色观察肾组织病理改变,同时进行细胞外基质蛋白Collagen Ⅰ、FN及肾小管 EMT标志蛋白α-SMA、E-cadherin表达检测.结果:模型组小鼠血清肌酐、尿素氮水平较正常对照组明显升高(均P<0.05),保肾通络方组及缬沙坦组小鼠血清肌酐、尿素氮水平较模型组明显降低(均P<0.05).与正常对照组相比,模型组小鼠肾小管出现明显的间质纤维化及上皮细胞脱落、空泡变性,而保肾通络方组及缬沙坦组小鼠上述病理改变均明显减轻.模型组小鼠肾小管Collagen Ⅰ、FN蛋白及mRNA表达较正常对照组明显上调(均P<0.05),保肾通络方组及缬沙坦组小鼠肾小管Collagen Ⅰ、FN蛋白及 mRNA表达较模型组明显下调(均P<0.05).与正常对照组相比,模型组小鼠肾小管上皮细胞α-SMA蛋白及 mRNA表达明显上调,E-cadherin蛋白及 mRNA表达明显下调(均P<0.05);与模型组相比,保肾通络方组及缬沙坦组小鼠α-SMA 蛋白及 mRNA 表达明显下调,E-cadherin蛋白及 mRNA 表达明显上调(均P<0.05).结论:保肾通络方能够改善DN小鼠肾小管间质纤维化,减轻肾小管 EMT.

目的:基于证素-组方思维及数据挖掘方法探索李建民教授辨治早期慢性肾脏病用药规律.方法:收集2016 年01 月—2021 年04 月期间经李建民教授诊治的慢性肾脏病(CKD)患者处方资料,建立数据库,运用古今医案云平台(V2.2.8)进行药物频次统计、药物性味、复杂网络分析、聚类分析、关联规则分析等.结果:共纳入处方 277 例,涉及中药178 味,其中黄芪使用频次最高;药性以寒、平、温最多;药味以甘味居首;复杂网络分析得到 8 味药物组成核心处方;聚类分析和关联规则分析得到常用证素配伍药物组分.结论:李建民教授治疗CKD1～3 期以健脾益肾、化瘀通络为基本治法,以"通络保肾复方"为核心处方,运用证素-组方思维依据不同证素特点配伍相应组方成分,达到准确辨识疾病病机,提高早期CKD中医药疗效之目的.

李建民认为任何疾病都有其独特的病机衍变规律,强调要以疾病发生、发展的全过程为线,以疾病不同阶段的证候表现为点.针对痛风性肾病病机衍变规律,李建民提出"肾络瘀痹"理论,认为其病机特点为本虚标实、正邪交争,导致肾络瘀痹;其中本虚由脾肾气虚向气阴两虚、气虚涉阳、阴阳两虚转换为主要衍变规律,标实以湿热、血瘀、浊毒逐步形成,痹阻肾络为主旋律;并据此自创通络保肾复方.李建民强调在辨病、辨证论治过程中要紧扣病机衍变规律,以证为点、以病为线,以线带点,将本病高度概括为5个证型:脾肾两虚,湿热阻络;脾肾两虚,湿热瘀阻;气阴两虚,肾络瘀痹;气虚涉阳,肾络瘀痹;阴阳两虚,肾络瘀痹.用药以通络保肾复方为基础方,根据本虚标实的侧重点不同,灵活加减,以点穿线,做到着眼全局,提早干预本虚标实变化,未病先治.

糖尿病肾脏疾病(DKD)是导致慢性肾脏病和终末期肾病的首要病因,严重危害人类健康.中医认为血瘀是贯穿DKD全病程的重要病机,多项研究拟定了多个活血通络类方治疗DKD患者,其临床症状好转、蛋白尿减少、肾功能保护、治疗有效率提高和疾病进展延缓等方面均有成效.

目的 采用益气通络汤治疗被动型Heymann肾炎大鼠模型,观察其对蛋白尿的作用和对炎症因子[白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]的影响,初步探讨益气通络汤治疗膜性肾病(MN)的作用机制.方法 将大鼠随机分为空白对照组,模型组,阳性药对照组,低、中、高剂量益气通络汤组.给药21 d后检测大鼠24 h尿蛋白、血清白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr)及IL-6、TNF-α水平;通过PAS、Masson染色观察肾脏组织形态;采用 Western blot检测法测定相关蛋白的表达.结果 与空白对照组相比,模型组大鼠肾脏产生严重病理损伤:肾小球系膜及基底膜增生明显,肾小球硬化、结缔组织增生明显;p-IKB/IKB、p-p65/p65蛋白表达明显提高,24 h尿蛋白、Scr、IL-6与TNF-α水平上升(P＜0.05),ALB降低(P＜0.05).与模型组相比,阳性药对照组及低、中、高剂量益气通络汤组大鼠的p-IKB/IKB、p-p65/p65表达均有不同程度的下调(P＜0.05);大鼠尿蛋白定量、Scr、TNF-α、IL-6水平有明显降低(P＜0.05),ALB有明显提高(P＜0.05);肾小球硬化及结缔组织增生程度减轻.结论 益气通络汤能有效降低Heymann肾炎模型大鼠蛋白尿及Scr,提高ALB,通过下调p-IKB/IKB、p-p65/p65的表达,降低大鼠IL-6、TNF-α水平来改善肾脏组织炎症反应,保护肾脏.

马钱子为临床常用中药之一,具有通络止痛、散结消肿之功,其主要化学成分为生物碱、环烯醚萜苷、黄酮类苷和类固醇等.马钱子具有镇痛抗炎、促进骨折愈合及软骨损伤修复、兴奋神经、保护心脏、抗肿瘤、抑制微生物生长和免疫调节等多种药理作用,但也不可忽视其严重的生物毒性,包括肾脏毒性、肝脏毒性、心脏毒性、神经毒性等,可通过炮制、配伍等方法达到减毒的目的.目前关于马钱子药理、毒理机制及作用靶点的研究还不够深入,未来可通过蛋白质组学、代谢组学、网络药理学及网络毒理学等多种方法对马钱子进行全面、系统的研究,并依靠现代技术开发更加安全高效的减毒方法,为马钱子临床应用和新药研发提供科学依据.

目的 探讨固本通络方对IgA肾病小鼠肠道细菌脂多糖(LPS)和糖基化缺陷IgA1(Gd-IgA1)的干预及肾保护作用.方法 将36只雄性小鼠分为正常对照组、模型组、固本通络方低剂量组、固本通络方中剂量组、固本通络方高剂量组、依立托仑组.实验采用ddY小鼠构建IgA肾病动物模型,将模型组和各药物组进行造模,中药干预各组分别予以固本通络方免煎颗粒低(13.2 g/kg)、中(26.4 g/kg)、高(52.8 g/kg)3种不同剂量药液灌胃给药,正常对照组和模型组小鼠给予0.9％氯化钠溶液灌胃(10 mL/kg),依立托仑组予以腹腔注射依立托仑药液,各药物组每天给予药物1次,连续8周.干预4周、8周后,测定各组24 h尿蛋白定量;8周测定血清及肠道黏膜LPS、IgA、Gd-IgA1水平,观察肾脏病理染色及右肾IgA沉积情况,实时荧光定量PCR检测Cosmc基因表达,Western blot法测定Cosmc蛋白表达及IgA肠道菌群特异性,流式细胞术检测肠道B淋巴细胞活化率及分泌IgA前体B淋巴细胞比率,对肠道黏膜组织LPS水平与B细胞活化率及IgA前体B细胞比率行相关性分析.结果 固本通络方可降低24 h尿蛋白定量水平及血清肌酐水平(P＜0.05).HE染色发现,与模型组相比,固本通络方用药组肾小球系膜细胞、内皮细胞及基质增生显著减少,肾小球系膜区IgA沉积显著改善;血清及肠道黏膜LPS水平检测发现,与模型组比较,各中药干预组均能降低小鼠血清和肠道黏膜组织LPS、Gd-IgA1和IgA水平(P＜0.05);降低B细胞活化率及IgA前体B细胞比率(P＜0.05),qRT-PCR和Western blot结果显示固本通络方能够显著降低小鼠粪便培养中菌落蛋白表达水平,上调Cosmc蛋白和Cosmc基因表达水平(P＜0.05).LPS水平与B细胞活化率及IgA前体B细胞比率均呈正相关(P＜0.05).结论 固本通络方能有效降低IgA肾病小鼠蛋白尿及血清肌酐水平,减轻肾脏病理损伤及肾小球系膜区IgA沉积,其作用可能和固本通络方降低IgA肾病小鼠血清及肠道LPS水平,降低B淋巴细胞活化率,Cosmc表达上调相关.

脾肾不足乃痛风性肾病的内在基础,始终坚持"保肾气"为治疗肾病的核心思想,并强调详查脾胃盛衰对肾病治疗的重要性,故临床治疗尤其重视补益脾肾.湿、瘀既是痛风性肾病的病理产物,又为致病因素,如此恶性循环.临床治疗以和法缓治为宗旨,常取利尿渗湿、活血通络以治之,遣方用药多喜甘缓之剂,轻灵之品,将"轻药重投"运用于临床,并根据瘀血程度的不同分别选用活血和络、活血化瘀、破血逐瘀等方法.若专于扶正,则湿瘀滞留而不易退尽;专事攻邪,则取效一时,徒伤正气.基于此,临证应标本兼治,治标不忘治本,扶正不碍祛邪,以补益肾气、健脾助运固其本,利尿渗湿、活血通络治其标,扶正祛邪兼顾,临床用之,效如桴鼓.

目的:基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路探讨芪蛭通络方对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾间质纤维化的作用机制.方法:SD大鼠予高糖高脂饲料及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作DKD模型,取50只造模成功的大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组(每日14 mg/kg)和芪蛭通络方低、中、高剂量组(每日1.215 g/kg、2.430 g/kg、4.860 g/kg),每组10只.同时取10只SD大鼠予普通饲料和腹腔注射柠檬酸缓冲液,作为正常组.造模成功后,各给药组每日予相应药物灌胃,正常组和模型组每日灌胃等体积蒸馏水,各组均连续灌胃8周.收集处死前1d各组大鼠24h尿液,检测24h尿蛋白定量(24 h-UTP);处死前尾静脉取血,测血糖(GLU);末次给药后5h,各组大鼠予异氟烷吸入麻醉,腹主动脉取血,分离血清测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);取双肾,采用苏木素-伊红(HE)染色法、马松(Masson)染色法观察各组大鼠肾脏组织病理变化;分别采用免疫组化(IHC)法、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组大鼠肾组织Wnt1、β-catenin、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达.结果:模型组大鼠GLU、Scr、BUN、24 h-UTP水平均明显高于正常组(P＜0.01),各给药组大鼠上述指标均明显低于模型组(P＜0.01),芪蛭通络方高剂量组上述指标均明显低于厄贝沙坦组(P＜0.01),芪蛭通络方对上述指标的改善作用表现出一定的剂量依赖性.病理图片显示,模型组大鼠肾小球结构遭到破坏,炎性改变明显,肾小管扩张,肾间质纤维化明显,肾组织蓝色胶原分泌增多且伴病理损伤;各给药组大鼠肾组织病理改变均有不同程度的改善,以芪蛭通络方高剂量组改善最为显著.免疫组化法及蛋白免疫印迹法结果显示,模型组大鼠Wnt1、β-catenin、CTGF、GSK-3β蛋白表达均明显高于正常组(P＜0.01);各给药组大鼠上述蛋白表达均明显低于模型组(P＜0.05,P＜0.01).免疫组化法结果显示,芪蛭通络方高剂量组上述蛋白表达均明显低于厄贝沙坦组(P＜0.05,P＜0.01);蛋白免疫印迹法结果显示,芪蛭通络方高剂量组Wnt1、GSK-3β蛋白表达明显低于厄贝沙坦组(P＜0.05,P＜0.01),β-catenin、CTGF蛋白表达与厄贝沙坦组比较差异无统计学意义(P＞0.05).芪蛭通络方对上述蛋白的表达表现出一定的剂量依赖性.结论:芪蛭通络方可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活,在一定程度上延缓肾间质纤维化,从而起到保护肾功能的作用.