目的:分析4例不明原因的溶血性贫血患者的基因变异类型。方法:采集4例以溶血性贫血为表型的患者及其家系成员外周静脉血，提取基因组DNA。应用高通量测序方法对4例患者红系相关疾病基因进行筛查，并用Sanger测序验证患者及其家系成员可疑变异位点。结果:4个先证者在 SEC23B基因上均检测到2个复合杂合变异，分别来自其父母，为先天性红细胞生成异常性贫血(congenital dyserythropoietic anemia，CDA)Ⅱ型患者。先证者1携带 SEC23B基因第15外显子c.1727T>C(p.Phe576Ser)和第16外显子c.1831C>T(p.Arg611Trp)复合杂合变异；先证者2携带第2外显子c.74C>A(p.Pro25His)和第14外显子c.1588C>T(p.Arg530Trp)复合杂合变异；先证者3携带第2外显子c.74C>A(p.Pro25His)和第16外显子c.1831C>T(p.Arg611Trp)复合杂合变异；先证者4及其弟携带第14外显子c.1571C>T (p.Ala524Val)和第19外显子c.2149G>T (p.Ala717Ser)复合杂合变异；检出的6个变异中，c.1727T>C(p.Phe576Ser)和c.2149G>T (p.Ala717Ser)为未见报道过的新变异。同时检测到先证者4其 PIEZO1基因上存在c.4608_4615del(p.Gly1537Glufs*82)杂合变异。 结论:高通量测序技术可快速准确地对CDAⅡ型患者进行基因变异分析，是传统诊断方法的有效补充手段，其中新发现的变异位点丰富了 SEC23B基因的变异数据库。

报道1例以胆石症起病，后因发现铁过载而最终诊断为先天性红细胞生成异常性贫血II型致继发性血色病、胆结石。患者诊治过程曲折，通过缜密的临床思维先后经过肝穿刺、骨髓活检、基因检测、胆囊切除等得以明确诊断。该病例体现了临床医师缜密的思维，加深我们对先天性红细胞生成异常性贫血Ⅱ型临床特征多样性的认识，同时应重视胆结石与继发性血色病病因的诊治。

目的 对1个 Ⅱ型先天性红细胞生成异常性贫血(congenital dyserythropoietic anemia,CDA)家系进行致病基因的突变及表型分析.方法 应用目标序列捕获高通量二代测序技术对1例CDAⅡ型患者SEC23B基因的外显子及侧翼区进行测序,在确定先证者的致病基因型后,应用Sanger测序法进行验证,同时检测患者直系亲属的基因型,并用MutationTaster与PolyPhen-2软件预测突变对蛋白功能的影响,用SWISS-MODEL软件对蛋白结构进行模拟分析.结果 先证者SEC23B基因存在罕见的复合杂合错义突变c.1727 T>C(p.F576S)和c.1831C>T(p.R611W),导致该基因的第576位氨基酸由苯丙氨酸变为丝氨酸,第611位由精氨酸变为色氨酸.Sanger测序证实了上述双重突变.先证者之姐检出c.1727T>C杂合突变,父亲及儿子均检出c.1831C>T杂合突变.此外,在先证者中检出一血色病相关基因H FE的杂合突变c.211C>T(p.R71X),导致71位的精氨酸变为终止密码子,其父亲未检出此突变.上述3种突变的蛋白功能预测均为有害,分子模拟显示其改变了SEC23B蛋白的三维构象.先证者在脾脏切除后贫血有所好转,在祛铁治疗后铁蛋白有所下降.结论 SEC23B基因c.1727T>C与c.1831C>T复合杂合突变很可能是该CDAⅡ型家系的分子发病原因,此基因型与临床表型密切相关.

目的 评估靶向二代基因测序(NGS)在先天性贫血诊断中的价值.方法 设计含217个先天性贫血相关致病基因的NGS基因组合——BDHAP-2014,对2014年8月至2017年7月连续就诊的临床怀疑诊断先天性贫血的患者进行NGS检测和亲代验证.结果 共纳入46例患者,临床疑诊分别为范可尼贫血(FA)11例、先天性红细胞生成异常性贫血(CDA)8例、先天性铁粒幼红细胞性贫血(CSA)6例、先天性溶血性贫血(CHA)12例、先天性角化不良(DC)1例、铁剂难治性缺铁性贫血(IR-IDA)4例及未明原因的血细胞减少(Uc)4例.经靶向NGS检测,28例(60.9%)患者明确了诊断和(或)分型,累及12个基因共44种致病性突变.其中26例(56.5%)基因诊断结果与临床疑诊相符,包括FA(5/11,45.5%)、CSA(6/6,100.0%)、CDA(3/8,37.5%)及CHA(12/12,100.0%);2例(4.3%)患者的基因诊断结果与临床疑诊不一致,依据NGS纠正了诊断,包括1例DC和1例家族性噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(FHL);12例CHA依据基因检查结果进一步明确了溶血类型.18例(39.1%)患者未明确致病基因,最终未能明确诊断.结论 NGS对临床疑诊先天性贫血患者具有重要的诊断价值,可为临床治疗选择提供依据.

患儿,男,1岁11月.因“重度贫血待查”人院.患儿自幼面色苍白,出生当天即因“早产儿、新生儿肺炎”住院,HGB 57 g/L,输血后升至124 g/L,肺炎好转出院.此后每2～3个月接受1次红细胞输注,共输注10次.父母非近亲结婚,家族史无特殊.入院查体:发育正常,全身无皮疹及出血点,颈部可及数枚肿大淋巴结,最大1 cm×1 cm,面色苍黄,巩膜轻度黄染,腹软,肝肋缘下未触及,脾肋缘下2 cm,双下肢无水肿,神经系统检查阴性.血常规:WBC 7.29× 109/L,RBC 2.78×1012/L,HGB 86 g/L,PLT 211×109/L,网织红细胞0.8％,幼稚细胞未见,血细胞比容0.25,红细胞平均体积88.8 fl,红细胞平均血红蛋白含量30.9 pg,红细胞平均血红蛋白浓度348 g/L,超敏C反应蛋白3 mg/L.骨髓象:有核细胞增生明显活跃,红系占0.770,以中、晚幼红细胞增生为主,可见少量嗜碱性点彩红细胞,可见Howell-Jolly小体、核碎裂、多核或核畸形,约0.200幼红细胞可见细胞核形态异常,部分幼红细胞胞体偏大,未见脱核状态的幼红细胞,破碎细胞明显增多.骨髓铁染色正常,未见环形铁粒幼红细胞.染色体核型正常.

先天性红细胞生成异常性贫血(congenital dyserythropoietic anemia,CDA)是一类罕见的遗传性疾病,主要特点是慢性难治性贫血,红细胞系无效造血及幼稚红细胞典型形态学改变.患者通常存在不同程度的贫血、黄疸、肝脾大及继发血色病.根据骨髓幼稚红细胞形态学改变及实验室检查特点,Heimpel和Wendt[1]将CDA分为3种经典类型(CDA-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ).2005年Wickramasinghe和Wood[2]增加了另外4种类型(CDAⅣ-Ⅶ).现报道1例CDA-Ⅰ型患者的临床及实验室特征,并进行相关文献复习,以提高对该类疾病的认识,减少漏诊及误诊.

目的 报道1例携带SEC23B新发突变位点并经异基因全相合造血干细胞移植成功治疗的先天性红细胞生成异常性贫血(congenital dyserythropoietic anemia,CDA)Ⅱ型病例,丰富此类疾病的基因突变位点及治疗经验.方法 对1例血红蛋白降低3个月的CDA Ⅱ型婴儿及其家系进行SEC23B基因检测,报道该例患儿临床诊疗过程并对相关文献进行复习.结果 患儿,女性,5月龄,因“发现血红蛋白降低3个月”就诊.血常规示HGB 44 g/L,酸溶血试验(Ham试验)阳性.骨髓象示红系占0.690,以中晚幼红细胞为主,可见双核及奇数核红细胞,有核红细胞偶见核碎裂及核出芽;骨髓透射电镜可见有核红细胞典型的双层膜结构.SEC23B基因存在两个未报道的新发突变位点,分别为c.1504 G＞C/wt、c.2254-2255 insert A/wt,两个突变分别来源于患儿父亲与母亲.患儿接受异基因全相合造血干细胞移植治疗后原有突变转阴.结论 该例患者为国内首次报道SEC23B基因插入突变CDAⅡ型病例,异基因全相合造血干细胞移植可作为CDA Ⅱ型的治疗选择.

目的 探讨分子生物学基因突变检测对于复杂、罕见遗传性疾病诊断的重要性,以提高对先天性红细胞生成异常性贫血(CDA)的认识.方法 运用高通量二代测序技术对申请人进行血液系统疾病相关基因全外显子编码区及剪切区序列测定,在确定致病基因后,应用Sanger测序法进行验证,同时检测申请人父母的基因型.通过分析此病例资料并复习相关文献.结果 申请人为年轻女性,成年后发现贫血、黄疸,脾大,胆囊结石,血象呈正细胞轻度贫血;血片可见6％球形红细胞;光镜下骨髓形态存在双核幼红细胞,以哑铃核、花核多见,偶见点彩,占有核红细胞的12％;申请人及其父母血液系统疾病基因筛查(高通量二代测序):申请人存在SEC23B基因c.74C＞A(p.Pro25His)和c.1588C＞T(p.Arg530Trp)复合杂合变异;其母存在SEC23B基因c.74C＞A(p.Pro25His)杂合变异;其父存在SEC23B基因c.1588C＞T(p.Arg530Trp)杂合变异.未行骨髓电镜、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检查.诊断为CDAⅡ型(CDAⅡ),因其未出现严重的铁过载等并发症,观察随访.结论 SEC23B基因c.74C＞A(p.Pro25His)和c.1588C＞T(p.Arg530Trp)复合杂合变异是本例CDAⅡ患者的可能分子发病机制,积极开展与该病相关的CDAN1、C150RF41、SEC23B、KIF23、KLF1和GATA1基因检测极为重要.

目的 研究重组人促红细胞生成素(rHu-EPO)治疗早产儿贫血的临床价值及对神经行为发育的影响.方法 回顾性选取2016年1月至2017年12月出生后5 d内入住首都医科大学附属北京友谊医院儿科新生儿病房并接受促红细胞生成素治疗的早产儿为观察组,其纳入标准:胎龄28～34周,体重<2000 g,并且出生时无血液系统疾病及严重感染性及先天性疾病.按照1:1比例匹配同期住院的早产儿为对照组,匹配条件为同性别、胎龄相差不超过1周、出生体重相差不超过200 g、出生时血红蛋白相差不超过1 g/L.最终两组患儿的出生体重、早产儿的胎龄、性别比例、(Hb)、网织红细胞(Ret)等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性.对照组患儿给予常规治疗,包括补充维生素E和铁剂,必要时给予输血治疗.观察组在对照组的基础上给予rHu-EPO治疗.比较两组患儿在治疗前后不同时间点的血常规指标[血细胞比容(Hct)、血红蛋白(Hb)、网织红细胞比率(Ret)]的差异.随访过程中根据患儿纠正胎龄40周,采用新生儿神经行为测定(NBNA)评分及脑电图检查进行评估,并比较两组结果 的差异.结果观察组患儿的Hct(L/L)在治疗后1周、2周、3周、4周不同时间点指标(0.45±0.07;0.42±0.04;0.39±0.04;0.33±0.03)均较对照组(0.42±0.03;0.37±0.03;0.35±0.03;0.30±0.05)明显增高(P<0.01);观察组患儿的Hb(g/L)在治疗后1周、2周、3周、4周不同时间点指标(151.1±12.8;141.4±11.3;134.6±10.3;128.5±12.4)均较对照组(140.3±11.7;128.6±10.4;113.7±9.6;107.4±9.4)明显增高(P<0.01);观察组患儿的Ret(％)在治疗后1周、2周、3周、4周不同时间点指标(3.65±0.91;4.46±0.63;4.55±0.44;4.05±0.84)均较对照组(2.87±0.55;2.72±0.35;2.37±0.26;1.98±0.54)明显增高(P<0.01);治疗后随访3个月采用纠正胎龄满40周方法,对照组患儿的NBNA评分为(35.69±2.18)分,观察组患儿的NBNA评分为(38.52±1.59)分,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组患儿的脑电图异常发生率(16.67％)明显低于对照组(43.35％),差异具有统计学意义(P<0.05).结论 早产儿早期应用rHu-EPO能够有效地预防贫血发生,并且能够促进早产儿神经行为发育.

对214例各类贫血患者和61名正常对照的酸化甘油溶解试验（AGLT)进行了分析，结果先天性遗传性球形红细胞增多症和13例无明显临床症状及特殊溶血试验异常的首证者父或母均显示阳性。自身免疫性溶血性贫血（AIHA）有47.5%显示阳性。溶血性贫血和其它血液病均阴牲。我们还发现AGLT作用290秒时下降光密度百分率可作α-珠蛋白生成障碍性贫血（HbH)初筛试验。文中对AGLT中间值结果进行了探讨，并提出克服办法。阐述了AGLT的质量控制措施。