目的:观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)及选择性内质网应激反应抑制剂salubrinal在全反式视黄酸(ATRA)诱导视网膜色素上皮细胞(RPE)凋亡中的作用。方法:取ARPE-19细胞系进行培养，并将其分为正常对照组、模型对照组、NAC处理组、salubrinal处理组、NAC+salubrinal组，分别采用完全培养基、含10 μmol/L ATRA、含10 μmol/L ATRA+5 mmol/L NAC、含10 μmol/L ATRA+40 μmol/L salubrinal、含10 μmol/L ATRA+5 mmol/L NAC+40 μmol/L salubrinal的完全培养基培养细胞24 h。采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡比率、多重含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Multicaspase)阳性比率、活性氧簇(ROS)水平。Western blot法检测各组细胞血管内皮生长因子A(VEGF-A)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、剪切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase 3)的表达水平。结果:流式细胞检测结果显示，各处理组细胞凋亡比率、Multicaspase阳性比率及ROS水平总体比较差异均有统计学意义( F＝113.23、602.41、160.39，均 P<0.001)，其中正常对照组、NAC处理组、salubrinal处理组及NAC+salubrinal组细胞凋亡比率、Multicaspase阳性比率、ROS水平均明显低于模型对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。Western blot检测结果显示，各组VEGF-A、CHOP、cleaved-caspase 3相对表达量总体比较，差异均有统计学意义( F＝24.62、36.35、60.25，均 P<0.001)，其中正常对照组、NAC处理组、salubrinal处理组及NAC+salubrinal组VEGF-A、CHOP、cleaved-caspase 3蛋白相对表达量明显低于模型对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:ATRA诱导RPE细胞产生氧化应激及内质网应激损伤并导致细胞凋亡，NAC及salubrinal可通过抑制应激反应，有效减轻细胞凋亡水平。

目的:探讨全反式视黄酸(ATRA)体外诱导人视网膜色素上皮(ARPE)-19细胞凋亡的信号途径。方法:采用不同浓度的ATRA处理ARPE-19细胞24 h、48 h，采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测其细胞活性；分别采用0、2.5、5、10、15和20 μmol/L ATRA处理ARPE-19细胞24 h，通过流式细胞术和Western blot法检测细胞凋亡水平和caspase相关蛋白相对表达量；分别采用0、2.5、5、10和20 μmol/L ATRA处理ARPE-19细胞24 h，通过流式细胞术检测其总活性氧簇(ROS)水平和多重半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(multicaspase)水平，通过实时荧光定量PCR法检测caspase相关基因mRNA相对表达量。其中0 μmol/L ATRA组作为空白对照。结果:CCK-8检测结果显示，ATRA处理ARPE-19细胞24 h和48 h后的半数抑制浓度(IC 50)分别为13.88 μmol/L和11.99 μmol/L，不同浓度ATRA处理ARPE-19细胞24 h和48 h后细胞存活率总体比较，差异均有统计学意义( F＝176.60、350.30，均 P<0.01)。细胞培养24 h时，2 μmol/L、6 μmol/L ATRA组细胞存活率较空白对照组高，12、14、16、18、20 μmol/L ATRA组细胞存活率较空白对照组低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。流式细胞术检测结果显示，不同浓度ATRA处理ARPE-19细胞后24 h，细胞凋亡、multicaspase及ROS水平总体比较差异均有统计学意义( F＝86.39、166.84、101.40，均 P<0.01)，其中2.5 μmol/L和5 μmol/L ATRA组细胞凋亡率较空白对照组下降，10、15和20 μmol/L ATRA组较空白对照组升高，2.5、5、10、20 μmol/L ATRA组multicaspase和ROS相对表达量较空白对照组升高，差异均有统计学意义(均 P<0.01)；Western blot检测结果显示，与空白对照组比较，2.5、5、10、15、20 μmol/L ATRA组caspase 9蛋白相对表达量升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与空白对照组比较，2.5 μmol/L ATRA组caspase 12蛋白相对表达量升高，5、10、15、20 μmol/L ATRA组逐渐降低，2.5、15、20 μmol/L ATRA组与空白对照组比较差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与空白对照组比较，5、10、20 μmol/L ATRA组caspase 3蛋白相对表达量升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与空白对照组比较，2.5、5、10、15、20 μmol/L ATRA组cleaved caspase 3蛋白相对表达量显著升高，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示，与空白对照组比较，2.5、5、10、20 μmol/L ATRA组caspase 9、caspase 12 mRNA及5 μmol/L、10 μmol/L ATRA组caspase 3 mRNA相对表达量明显升高，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。ATRA浓度小于10 μmol/L时，caspase 9和caspase 12 mRNA的相对表达量呈浓度依赖性升高，当浓度达20 μmol/L时，其相对表达量显著降低，但仍高于空白对照组。 结论:ATRA体外诱导ARPE-19细胞凋亡是通过激活ROS及内源性caspase依赖性凋亡途径导致的。

患者，男，47岁，2018年11月21日因头痛、咽痛8 d于当地医院就诊，经骨髓活检及免疫组织化学、骨髓细胞形态学检查、骨髓染色体及核型分析等相关检查，确诊为急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocyte leukemia，APL)，给予亚砷酸、柔红霉素联合全反式维甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)化疗后5 d，诉双眼视力突然下降，经眼科会诊确诊为双眼玻璃体积血，考虑到患者全身情况差，白细胞28.90×10 9/L，红细胞1.88×10 12/L，血红蛋白63.0g/L，血小板13×10 9/L，双眼暂未予治疗。2019年1月1日转诊至潍坊眼科医院，全身情况可，白细胞6.91×10 9/L，红细胞3.07×10 12/L，血红蛋白111g/L，血小板211×10 9/L，双眼视物不清35 d。眼部检查：双眼最佳矫正视力(best corrected visual acuity，BCVA)为数指/15 cm；眼压17 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)；超广角眼底照相示双眼玻璃体血性混浊，仅可见周边视网膜；眼科B型超声检查双眼玻璃体腔内可见后极部团状致密回声。2019年1月2日行左眼玻璃体切割术，术中清除玻璃体积血后黄斑区内界膜下可见一边界清晰、表面光滑血红色病灶，剥除内界膜后，笛针清除"豆腐渣"样物质，见黄斑区视网膜大致正常，团块边界见线样增生嵴(图1)。术后1周左眼BCVA为0.16，黄斑区颞上方可见环状嵴样增生，随着时间延长，嵴高度有所降低(图2)。术后于当地医院继续行全身ATRA联合化疗，血小板回升至88×10 9/L。2019年1月30日再次入院行右眼玻璃体切割术，术中所见基本同左眼，病灶区完全呈白色(图1)。术后1周，右眼BCVA为0.1，眼底表现基本同左眼，随着时间延长，环形嵴线几乎不可见(图2)；双眼行联合检查示左眼黄斑区毛细血管无明显荧光素渗漏，隐约可见环状嵴痕迹，视盘无明显异常；右眼荧光素眼底血管造影(fluorescein fundus angiography，FFA)示视盘荧光素渗漏明显，黄斑区斑驳状轻度渗漏，环状嵴间断性着色，吲哚菁绿血管造影(indocyanine green angiography，ICGA)示黄斑区斑驳状低荧光，环状嵴样非连续遮蔽荧光。左眼未见明显荧光素渗漏，隐见环状嵴。光相干断层扫描(optical coherence tomography，OCT)检查示双眼术后早期黄斑中心凹呈现"压陷式"变化，随时间延长有所改善(图3)；左眼同一部位的嵴样隆起OCT检查结果显示，随时间延长，处于外丛状层的异常回声逐渐缩小(图4)。术后5个月BCVA右眼为0.3，左眼为0.5，继续行全身治疗。

目的 研究芩百清肺浓缩丸治疗支原体肺炎的作用机制.方法 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术的代谢组学方法,分析肺炎支原体感染小鼠肺组织中内源性化合物的变化.采用Progenisis QI软件进行色谱峰识别及匹配,并采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)对获得数据进行降维,通过分析对不同组间分离贡献度较大(VIP＞1,P＜0.05)化合物的串联质谱数据,经HMDB等数据库检索,确定潜在生物标志物.结果 从肺组织中共鉴定出视黄醛、全反式维甲酸、焦谷氨酸、白三烯C4、维生素A、花生四烯酸、前列腺素12等20个潜在生物标志物.与模型组比较,芩百清肺浓缩丸对20个潜在生物标志物均具有回调作用.结论 芩百清肺浓缩丸通过影响视黄醇代谢、亚油酸代谢、花生四烯酸代谢等通路发挥治疗支原体肺炎的作用.

阿达帕林(adapalene)是一种视黄醇类化合物,用于治疗痤疮.由法国高德美制药公司生产的0.1％阿达帕林凝胶剂(商品名达芙文凝胶,Dif-ferin Gel)现已在我国上市.阿达帕林的结构式如右:1药理作用阿达帕林为萘甲酸衍生物,是第三代维A酸类抗痤疮药.据文献报道[1],本品对细胞的增殖和分化是通过维A酸受体(RAR)结合蛋白以及转化基因激活介导的.它可以选择性结合于维A酸受体亚型RARγ受体而与RARα受体极少结合,同时不与胞浆维A酸结合蛋白(cRABP)结合,具有靶向作用.阿达帕林对于终末分化细胞内RARγ受体有高度亲和力和定向结合作用,故能选择性作用于角朊细胞的终末分化过程,从而调节毛囊、皮脂腺上皮细胞的分化,减少粉刺的形成,治疗痤疮.对Rhi-no鼠局部用药可观察到强效的溶解粉刺作用.局部使用阿达帕林可产生剂量相关性小囊数目减少,并且与全反式维A酸作用类似或更强.本品还具有抗增殖作用,显著抑制无毛小鼠胶带脱落所诱导的表皮鸟氨酸脱羧酶的活性,以减少痤疮形成.

目的:探讨视网膜中全反式视黄醛(atRal)能否代谢生成全反式维甲酸(atRA),并比较两者对视网膜色素上皮细胞(RPE)的细胞毒性作用,以阐明atRA生成的意义.创新点:建立atRA的超高效液相串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,并证明atRA的生成是视网膜中atRal的重要解毒代谢通路.方法:利用UPLC-MS/MS分别检测猪眼神经视网膜及RPE层中atRA的含量;利用ARPE-19细胞系模拟atRal在RPE中累积,用UPLC-MS/MS检测细胞内及培养基中atRA的含量,并用定量聚合酶链反应(qPCR)检测CYP26b1的表达;利用CCK8、DCFH-DA染色、qPCR、western blot等方法对比等浓度atRA和atRal在RPE细胞中所诱导的细胞毒性、氧化应激、凋亡相关蛋白表达水平;用UPLC-MS/MS检测视网膜atRal清除障碍的ABCA4?/?RDH8?/?小鼠眼球中atRA及全反式视黄醇.结论:明确atRA在正常视网膜中能够代谢产生;证明其形成有利于RPE细胞中累积的atRal迅速代谢消除;其自身诱导细胞氧化应激的能力显著低于atRal,因而能显著减弱后者的细胞毒性.

视黄醇(Rol)和视黄酯可随时间转化,缓慢提高培养的人角质形成细胞中全反式维A酸(RA)的量。已知外源性RA可限制视黄醇氧化,增加视黄醇酯化。

天然的类视黄醇(retinoids):维生素A及其重要的代谢衍生物――视黄醛与维甲酸都是脂溶性不饱和的异戊间二烯化合物,由三甲基环己基与一带有四个双链的全反式多烯链组成。这些化合物的纯结晶体在氧气、光线与高温中不稳定。类胡萝卜素是存在于蔬菜中无生理活性的维生素A二聚体。合成的类视黄醇:为了寻求具有更大生物活性与更小毒性的化合物,维生素A分子的所有三个部分均曾被置换过。一般改变类视黄醇的多烯链可明显地减低其活性,而改变维甲酸的羧基使其成为乙烯胺或乙氧羰基终末基团,则可减低其毒性并保留或增强其生物活性,如再置换以某些芳香性化合物,则可使其毒性更小且活性增强达10倍之多。

几种维A酸如全反式(全反式维A酸)、顺式(13-顺维A酸)、莫维A胺、视黄醛、阿达帕林和他扎罗汀,当外用或系统给药时治疗轻度至严重痤疮有效.然而在使用0.05%～0.1%的全反式维A酸润肤霜时,皮肤反应,如干燥、脱屑、红斑、灼热感及针刺感较为常见.在最初的2周时红斑和主观感觉(灼热感和针刺、瘙痒)最严重,以后随时间的推移而减轻,12～16周时皮肤干燥和脱屑最严重并趋于持久存在.一些患者因为这些不良反应而停止治疗.

维A酸类药是一类天然或合成的具有维生素A活性的视黄醇衍生物,异维A酸是继全反式维A酸之后合成的第一代异维A酸,它对银屑病、毛发红糠疹、毛囊角化病等一些角化性疾病以及痤疮等有较高的疗效,因此它在皮肤病的治疗领域中有广阔的前景。对异维A酸的命名、化学结构、药动学、作用机理、最佳适应证、用法、用量以及不良反应等注意事项作了介绍。