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半乳糖凝集素-13在呼吸道和皮肤黏膜过敏性疾病中表达的研究
编辑人员丨1周前
探讨半乳糖凝集素-13(galectin-13,Gal-13)在过敏性疾病中的表达情况,为过敏性疾病的诊疗提供新途径。采用回顾性分析方法,筛查2018年3月至2021年5月于华中科技大学同济医学院附属同济医院过敏反应科和呼吸内科就诊的,以屋尘螨或曲霉为过敏原的过敏性疾病患者216例。这些过敏性疾病包括过敏性哮喘、变应性支气管肺曲霉病、过敏性鼻炎、变应性结膜炎、特应性皮炎、变应性荨麻疹。选取25例无基础疾病受试者作为健康对照。检测各组疾病血浆Gal-13含量,并采用Pearson相关判断各组疾病血浆Gal-13含量与血嗜酸性粒细胞计数、血特异性IgE、过敏性疾病相关评分量表等的相关性。结果显示,Gal-13在过敏性哮喘组(71.44±39.44)pg/ml、变应性支气管肺曲霉病组(100.10±47.62)pg/ml、过敏性鼻炎组(54.11±24.81)pg/ml、特应性皮炎组(44.12±19.51)pg/ml中表达均显著升高,在变应性荨麻疹组(32.75±10.29)pg/ml和变应性结膜炎组(30.55±9.87)pg/ml无明显升高。过敏性哮喘患者血浆Gal-13含量与血嗜酸性粒细胞计数( r s=0.54, P<0.001)、屋尘螨特异性IgE呈正相关( r s=0.51, P<0.001);变应性支气管肺曲霉病患者血浆Gal-13含量与血嗜酸性粒细胞计数( r s=0.63, P=0.025)、曲霉特异性IgE呈正相关( r s=0.58, P=0.046);过敏性鼻炎患者血浆Gal-13含量与血嗜酸性粒细胞计数( r s=0.52, P=0.000 2)、屋尘螨特异性IgE呈正相关( r s=0.41, P=0.005);变应性结膜炎患者血浆Gal-13含量与结膜炎症状评分呈正相关( r s=0.47, P=0.048);特应性皮炎患者血浆Gal-13含量与血嗜酸性粒细胞计数( r s=0.58, P<0.001)、屋尘螨特异性IgE呈正相关( r s=0.47, P=0.002);变应性荨麻疹患者血浆Gal-13含量与血嗜酸性粒细胞计数及屋尘螨特异性IgE无明显相关性。综上,Gal-13可能与过敏性疾病的发生与发展相关,且可能参与嗜酸性粒细胞炎症的发生。
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编辑人员丨1周前
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基于转录组测序分析唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15在胃癌细胞中的作用机制
编辑人员丨1周前
目的:筛选并分析唾液酸结合Ig样凝集素15(Siglec-15)在胃癌细胞中的候选靶基因及其下游信号通路并进行患者预后相关性分析。方法:构建干扰Siglec-15基因的最佳慢病毒转染至人胃腺癌AGS细胞株获得沉默组(AGS-shSiglec-15),以及空载体慢病毒转染获得的AGS细胞对照组(AGS-NC),各取三个样本进行转录组测序。根据测序数据筛选差异表达基因,通过GO分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析和GESA分析进行基因的功能注释和信号通路的鉴定。构建蛋白与蛋白相互作用网络图(PPI),进行可视化分析并获取关键互作蛋白,并对靶蛋白进行生存期分析。结果:共鉴定出符合筛选标准的255个差异表达蛋白编码基因,包括119个上调基因和136个下调基因。经GO、KEGG和GSEA分析表明,差异表达基因(DEGs)主要参与甲型流感、Toll样受体信号传导途径、钙信号传导途径、NOD样受体信号传导途径、病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体的相互作用等进程。同时筛选出10个Siglec-15相关基因的靶蛋白,其中钙黏蛋白23(CDH23)[ HR=1.31(1.05~1.63), P<0.05]、蛋白网络成分协调蛋白(USH1C)[ HR=1.25(1.05~1.48), P<0.05]、干扰素调节因子7(IRF7)[ HR=1.7(1.41~2.05), P<0.001]、MX2[ HR=1.63(1.33~2.00), P<0.01]、干扰素调节因子9(IRF9)[ HR=1.30(1.09~1.54), P<0.01]高表达的胃癌患者总生存率(OS)较差。而RSAD2(RSAD2)[ HR=0.78(0.61~1.00), P<0.05]、CC基序趋化因子配体5(CCL5)[ HR=0.66(0.55~0.78), P<0.01]、CXC趋化因子配体(CXCL8)[ HR=0.65(0.53~0.79), P<0.01]、XIAP相关因子1(XAF1)[ HR=0.77(0.65~0.92), P<0.01]、干扰素调节因子6(IRF6)[ HR=0.51(0.41~0.63), P<0.01]高表达的患者具有较好的OS。 结论:沉默Siglec-15基因在胃癌细胞中有明显差异表达基因并参与多种生物学进程和信号通路调节,可能作为胃癌的潜在新免疫检查点标志物及治疗靶点。
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编辑人员丨1周前
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靶向巨噬细胞免疫球蛋白样凝集素9治疗慢性阻塞性肺疾病的研究进展
编辑人员丨1周前
慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)是目前全球唯一病死率呈上升趋势的重大慢性疾病,药物治疗只能减轻症状和降低急性加重风险,其发病机制仍未明了,且缺乏有效的干预药物。唾液酸结合的免疫球蛋白样凝集素9(Siglec-9)主要表达于单核/巨噬细胞、中性粒细胞的抑制性唾液酸聚糖受体,可调控巨噬细胞极化和气道炎症,其基因多态性与慢阻肺急性加重表型有关,靶向巨噬细胞Siglec-9有望成为精准治疗慢阻肺的新途径。
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编辑人员丨1周前
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SIGLEC-1与1型糖尿病自身免疫机制:新兴研究视角
编辑人员丨1周前
Diabetologia的最新研究发现,唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1(SIGLEC-1)阳性单核细胞在1型糖尿病早期发病中扮演关键角色。这些细胞主要通过干扰素信号通路,而非传统抗原呈递方式,激活免疫效应细胞,进而引发胰岛炎症和破坏。这一发现为1型糖尿病的早期诊断与靶向治疗开辟了新的途径。
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编辑人员丨1周前
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重组磷脂酶A2受体串联显性表位免疫吸附去除原发性膜性肾病中抗磷脂酶A2受体自身抗体
编辑人员丨1周前
目的:探究重组磷脂酶A2受体(phospholipase A2 receptor,PLA2R)串联显性表位(PLA2RTD)在去除原发性膜性肾病(primary membranous nephropathy,PMN)抗PLA2R自身抗体(anti-PLA2R)中的作用。方法:在杆状病毒穿梭载体-昆虫细胞体系中表达重组蛋白分子PLA2RTD(富含半胱氨酸结构域、C型凝集素样结构域1和C型凝集素样结构域7),圆二色谱法测定PLA2RTD的二级结构,酶联免疫吸附测定法和免疫荧光法测定PLA2RTD的生物活性,环氧活化法耦联重组PLA2RTD与琼脂糖凝胶CL-6B微球以制备anti-PLA2R的特异性免疫吸附剂。结果:该研究实现了PLA2RTD在杆状病毒穿梭载体-昆虫细胞系统中的首次表达,证明了PLA2RTD具有良好的免疫原性和较高的结合特异性。PLA2RTD免疫吸附剂体外单次吸附可平均消除76.66%的anti-PLA2R[(6.66±0.30)RU/ml比(28.54±2.10)RU/ml],吸附完成后血浆中IgG、IgA、白蛋白、β2微球蛋白、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的含量变化<4%,第2~3次重复使用时仍可保持65%左右的吸附效率。结论:基于PLA2RTD的特异性免疫吸附剂能够有效地清除血浆中anti-PLA2R,为特异性清除与PMN相关的自身抗体提供了一种新途径。
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编辑人员丨1周前
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通过加权基因共表达网络分析脓毒症相关基因
编辑人员丨1周前
目的:通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)识别脓毒症发生发展过程中的关键基因。方法:从基因表达数据库(GEO)中下载基因表达数据集GSE154918,其中包含对照40例、无症状感染12例、脓毒症39例、脓毒症随访14例,共105例芯片数据。采用R软件筛选出脓毒症差异表达基因(DEG),用分布式访问视图集成数据库(DAVID)、检索交互基因的搜索工具(STRING)和可视化软件Cytoscape进行基因功能和通路富集分析、蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析及关键基因分析,筛选出脓毒症发生发展过程中的关键基因。结果:通过WGCNA并结合DEG表达分析得到46个候选基因,对这46个基因进行基因本体(GO)、京都市基因与基因组百科全书(KEGG)途径富集分析得到基因功能和参与的信号通路。进一步使用STRING数据库构建PPI网络,通过PPI网络可视化软件Cytoscape选出5个关键基因,包括肥大细胞表达膜蛋白1基因(MCEMP1)、S100钙结合蛋白A12基因(S100A12)、脂肪因子抵抗素基因(RETN)、c型凝集素结构域家族4成员基因(CLEC4D)、过氧化酶增殖因子活化受体基因(PPARG),对这5个基因分别进行表达差异分析,结果显示,在脓毒症患者中上述5个基因的表达水平较健康对照者显著性上调。结论:本研究通过构建WGCNA方法筛选出有关脓毒症的5个关键基因,可能成为潜在的脓毒症诊疗相关候选靶点。
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编辑人员丨1周前
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甘露聚糖结合凝集素对3T3-L1脂肪细胞分化过程中自噬的调节作用及机制
编辑人员丨1周前
目的:研究甘露聚糖结合凝集素(mannose-binding lectin, MBL)对3T3-L1脂肪细胞分化过程中自噬的调节及其机制,为靶向自噬在固有免疫上预防肥胖及相关病理改变提供可行性。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞进行诱导分化。油红O染色分析细胞分化成熟及脂滴积累情况,CCK-8法检测不同浓度MBL(0、1、5、10 μg/ml)对不同分化阶段细胞增殖能力的影响,Western blot分析MBL(10 μg/ml)对不同分化阶段细胞自噬关键因子LC3B、Beclin1和p62蛋白的表达,油红O染色观察MBL干预下脂滴蓄积的改变,Western blot、qRT-PCR检测不同浓度MBL干预下自噬关键因子蛋白质及mRNA表达水平,基于自噬性降解的自噬流分析来进一步说明自噬活性,Western blot分析单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号分子的表达及磷酸化。结果:油红O染色结果显示经过10 d诱导的3T3-L1前脂肪细胞可达到完全分化状态;CCK-8结果表明实验组各浓度MBL(1~10 μg/ml)对不同分化阶段细胞增殖无影响;Western blot及qRT-PCR检测发现在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,MBL处理组自噬相关蛋白及mRNA表达水平增强,并呈一定浓度依赖关系;油红O染色显示不同分化阶段脂肪细胞内脂滴在MBL干预下呈不同程度的减少;荧光显微镜检测结果进一步证实MBL通过增加自噬体的合成增强脂肪细胞自噬活性;并且在MBL干预下,AMPK的磷酸化水平明显上调,mTOR的磷酸化水平明显下调,同样呈现浓度依赖关系。结论:MBL通过AMPK/mTOR信号通路加快3T3-L1脂肪细胞分化过程中的自噬进程,降低脂质积累,为治疗肥胖及其相关代谢疾病提供了一种潜在的功能途径。
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编辑人员丨1周前
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早期胰腺癌患者血清外泌体差异miRNA筛选及hsa-let-7f-5p的诊断价值
编辑人员丨1周前
目的:筛选早期胰腺癌患者血清外泌体差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA),并评估外泌体hsa-let-7f-5p对早期胰腺癌的诊断价值。方法:选取2019年1月至2020年1月间南京中医药大学附属医院行手术并经病理证实的19例早期胰腺癌患者(早期胰腺癌组)和16例慢性肿块型胰腺炎患者(胰腺炎组),收集两组患者的血清样本,同时选取19名健康志愿者的血清样本作为正常对照组。采用exoEasy Maxi Kit试剂盒分离血清外泌体,透射电子显微镜(TEM)下观察外泌体的结构特征,纳米颗粒追踪分析观察外泌体的粒径大小,蛋白质免疫印迹法检测外泌体表面特异性蛋白标志物CD 63、CD 81表达。利用miRNeasy Serum/Plasma Kit试剂盒抽提外泌体总RNA,对其进行质检后构建小RNA文库,参照小RNA数据库,对早期胰腺癌组、胰腺炎组及正常对照组差异表达的外泌体miRNA进行筛选。通过实时荧光定量PCR法验证候选外泌体miRNA的表达量,分析各组miRNA的表达量差异。应用基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集通路分析候选miRNA的靶基因及代谢通路在早期胰腺癌发生与发展中的作用。 结果:TEM可见外泌体特征性碟形双层囊膜结构,粒径主峰在150 nm左右,外泌体特异性蛋白CD 63、CD 81表达阳性,对比早期胰腺癌组与胰腺炎组和正常对照组miRNA表达的差异,筛选获得特异性的肿瘤标志物外泌体hsa-let-7f-5p,其在早期胰腺癌组中的表达显著高于胰腺炎组及正常对照组( P值均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外泌体hsa-let-7f-5p鉴别早期胰腺癌组和胰腺炎组的AUC值为0.843(95% CI0.640~1.000),灵敏度和特异度分别为100%和81.82%,鉴别早期胰腺癌组和正常对照组的AUC值为1.000(95% CI1.000~1.000),灵敏度和特异度均为100%,其诊断早期胰腺癌效能与CA19-9相当( P>0.05)。GO分析结果显示,外泌体hsa-let-7f-5p的靶基因主要参与补体激活凝集素途径,表达蛋白主要分布于纤毛层,分子多发挥与一氧化氮合酶结合的功能。KEGG通路富集分析结果表明,外泌体hsa-let-7f-5p的靶基因与MAPK信号通路关系密切。 结论:血清外泌体hsa-let-7f-5p可作为早期胰腺癌诊断的潜在标志物。
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编辑人员丨1周前
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基于代谢组学研究电击伤所致小鼠心肌损伤的效应研究
编辑人员丨3周前
目的:基于代谢组学技术研究电击伤所致小鼠心肌损伤,并找出心脏代谢组学差异代谢物和差异代谢途径.方法:40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和电击组,每组20只.对照组仅用电击装置的声光刺激小鼠头部5s,电击组用电击装置持续电击小鼠头部5s;然后用眼球取血法收集两组小鼠血液并检测血清脑钠肽(BNP)和心肌酶谱指标;心脏灌注法取心脏组织行石蜡切片和心肌苏木精—伊红(HE)染色、普鲁士蓝(PB)染色和麦胚凝集素(WGA)染色,观察心肌病理改变;不灌注取小鼠心脏组织行代谢组学检测.结果:与对照组比较,电击组小鼠血清BNP和乳酸脱氢酶1(LDH1)含量升高(P<0.05);WGA染色显示心肌细胞平均细胞面积明显增大[(1.64±0.23)vs.(1.93±0.14),P<0.01];心脏代谢组学分析以OPLS-DA VIP>1和P<0.05为标准筛选到6个表达上调的差异代谢物和13个表达下调的差异代谢物,KEGG通路富集分析显示差异代谢物主要影响癌症中心碳代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等代谢途径.结论:电击伤可导致小鼠心肌损伤,主要表现为血清BNP、LDH1含量升高,心肌细胞肥大以及以癌症中心碳代谢为主的心肌代谢途径异常.
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编辑人员丨3周前
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血清主导的及肾小球沉积的IgG亚型和补体分子对肾小球疾病作用的研究进展
编辑人员丨1个月前
肾小球疾病患者血清主导的、肾小球沉积的IgG亚型和补体分子对疾病发生发展及其预后发挥重大作用.系统性红斑狼疮引起的狼疮肾炎患者,血清和肾小球中的IgG亚型以IgG1和IgG3为主,肾小球常见补体C1q和C3沉积,补体活化以经典途径为主,起病较急,病情较重,预后较差,补体C3、C4降低均反映疾病活动;原发性膜性肾病患者,血清和肾小球中的IgG亚型以IgG4为主,肾小球常见补体C3、C4d沉积,补体活化以凝集素途径为主,起病较慢,病情较轻,预后较好,血清特异性抗磷脂酶A2受体抗体滴度升高反映病情活动.其他肾小球疾病如IgA肾病、抗中性粒细胞胞浆抗体相关小血管炎肾损伤等,血清及肾小球IgG亚型、补体分子也有较多研究报道,而感染性、代谢性、肿瘤相关肾小球疾病,相关研究报道较少,对疾病的诊断、鉴别诊断以及预后的评估价值有待进一步探讨.
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编辑人员丨1个月前
