目的 明确前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)对滑膜细胞有机阴离子转运体1(organic anion transporter 1,OAT1)膜表达的调控机制及芍药苷6'-O-苯磺酸酯(CP-25)的作用.方法 免疫荧光法检测不同浓度CP-25对PGE2处理后滑膜细胞OAT1和前列腺素E受体4(prostaglandin E receptor 4,EP4)表达的影响;使用EP4激动剂(TCS2510)与拮抗剂(GW627368X),探究EP4在OAT1调节中的作用;使用 CP-25 和蛋白激酶 A(protein kinase A,PKA)抑制剂 H-89,探究CP-25和PKA对滑膜细胞OAT1表达的影响.结果 PGE2在0～10 min内明显下调EP4与OAT1的膜表达,20～60 min后明显上调(P＜0.05);CP-25明显上调PGE2处理后细胞膜OAT1和EP4的表达(P＜0.05);EP4激动剂TCS2510明显上调细胞膜OAT1的表达(P＜0.01);CP-25上调PGE2处理的细胞中OAT1的表达,GW627368X和H-89均能下调PGE2和CP-25处理的滑膜细胞中OAT1的表达(P＜0.01).结论 PGE2介导的EP4/PKA信号通路可以调控OAT1在滑膜细胞膜上的表达,CP-25可以通过活化EP4/PKA信号通路明显上调滑膜细胞中OAT1的膜表达.

前列腺素E2(PGE2)由花生四烯酸代谢而成，含有4个碳-碳双键，为高级不饱和脂肪酸。PGE2能在多种细胞中产生并作用于不同类型的前列环素受体(EP)，在调节心血管系统及维持水盐内环境稳态中起重要作用。近年来，越来越多的研究表明PGE2/EP信号通路在慢性阻塞性肺疾病中发挥着重要作用，且其在哮喘、肺癌以及急性肺损伤中可能均起到一定的作用。本文将对PGE2/EP信号通路在各种肺部疾病中的作用进行综述。

目的:评价大鼠炎性痛形成时脊髓神经元P2X 7受体与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/IL-1β信号通路的关系。 方法:SPF级健康成年雄性Wistar大鼠，体重180～220 g，取鞘内置管成功的大鼠40只，采用随机数字表法分为5组( n＝8)：对照组(CON组)、炎性痛组(IP组)、炎性痛＋二甲基亚砜组(IP-DMSO组)、炎性痛＋P2X 7受体拮抗剂A740003组(IP-A组)和炎性痛＋P2X 7受体激动剂ATP组(IP-ATP组)。采用右后足踝关节腔内注射完全弗氏佐剂50 μl的方法制备炎性痛模型，CON组于右后足踝关节腔内注射等容量生理盐水。于造模前1 d、造模后即刻、1、2和3 d时，IP-DMSO组鞘内注射1%二甲基亚砜10 μl，IP-A组鞘内注射A740003 0.1 nmol(溶于10 μl二甲基亚砜中)，IP-ATP组鞘内注射ATP 150 nmol(溶于10 μl二甲基亚砜中)。于造模后3 d时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。采用ELISA法检测右后足踝关节组织前列腺素E2(PGE2)含量和脑脊液IL-1β浓度。然后处死大鼠，取L 4-6脊髓组织，采用Western blot法检测NLRP3、casepase-1和IL-1β的表达，采用免疫荧光法检测P2X 7与神经元特异性核蛋白(NeuN)、NLRP3与NeuN的共表达情况。 结果:与CON组比较，IP组关节组织PGE2含量升高，其余4组MWT降低，TWL缩短，脑脊液IL-1β浓度升高，脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达上调( P<0.05)；与IP组比较，IP-A组MWT升高，TWL延长，脑脊液IL-1β浓度降低，脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达下调，IP-ATP组MWT降低，TWL缩短，脑脊液IL-1β浓度升高，脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达上调( P<0.05)，IP-DMSO组上述各指标差异无统计学意义( P>0.05)。脊髓P2X 7与NeuN存在共表达，NLRP3与NeuN存在共表达。 结论:脊髓神经元P2X 7受体可通过激活NLRP3/IL-1β信号通路，参与了大鼠炎性痛的形成。

目的 探究右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)调控自噬受体蛋白p62/Kelch样ECH 相关蛋白-1(Kelch-like ECH-associated protein1,Keap1)/核因子 E2 相关因子 2(Nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2(p62/Keap1/Nrf2)通路对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肝脏损伤的保护作用机制.方法 选取SD大鼠50只,随机将大鼠分为5组,分别为空白对照组(Sham组)、LPS诱导肝脏损伤模型组(LPS组)、LPS诱导+Dex干预组(Dex组)、Keap1/Nrf2信号轴抑制剂组(KI696组)、LPS诱导+Dex干预+KI696组(Dex+KI696组).统计各组大鼠干预后血清、肝功能因子,包括总胆固醇(Total cholesterol,TC)、总血脂(Total glyceride,TG)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine transaminase,ALT)、天门 冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotrans-ferase,AST),肝组织炎症因子白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α),氧化应激指标丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)水平差异.HE染色分析各组大鼠肝脏组织病理形 态;Western-blot检测各组 大鼠肝脏组织p62/Keap1/Nrf2信号轴关键蛋白p62、Keap1、Nrf2,铁死亡关键蛋白前列腺素内过氧化物合酶(Prostaglandin endoperoxide synthase,PTGS2)、谷胱甘肽过氧化物酶 4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)、铁蛋白基因(Recombinant hu-man ferritin heavy chain,FTH1)表达.结果 与 Sham 组相比,LPS 组 p62、TC、TG、ALT、AST、IL-6、IL-8、IL-1 β、TNF-α、MDA、PTGS2 表达升高,Keap1、Nrf2、SOD、GSH、CAT、GPx4、FTH1 表达降低(P＜0.05).与 LPS 组相比,Dex 组 p62、TC、TG、ALT、AST、IL-6、IL-8、IL1β、TNF-α、MDA、PTGS2 表达降低,Keap1、Nrf2、SOD、GSH、CAT、GPx4、FTH1 表达升高(P＜0.05);KI696 组 Keap1、PTGS2、SOD、GSH、CAT、GPx4、FTH1 表达降低,Nrf2、TC、TG、ALT、AST、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、MDA 表达升高(P＜0.05).与 KI696 组相比,Dex+KI696 组Keap1、PTGS2、SOD、GSH、CAT、GPx4、FTH1 表达升高(P＜0.05).结论 右美托咪定通过抑制p62活性,激活Keap1/Nrf2通路活性发挥抗氧化应激损伤、抗炎症反应作用,减缓铁死亡程度,达到保护肝组织的作用.

目的 基于免疫相关基因构建神经母细胞瘤预后模型,探讨其在神经母细胞瘤中的作用,并预测挖掘潜在的干预中药.方法 通过limma包对TARGET-NBL数据集中高危患者组和非高危组表达谱数据进行差异分析.差异基因与ImmPort数据库中的免疫相关基因取交集,对差异免疫相关基因进行富集分析.应用单因素/多因素Cox回归分析、Lasso回归分析进一步筛选预后相关免疫差异基因,据此建立预后模型.采用 CIBERSORT 和单样本基因集富集分析(single-sample gene-set enrichment analysis,ssGSEA)评估高风险评分组和低风险评分组样本中免疫细胞的丰度.通过CTD和COREMINE数据库预测与预后模型中基因高度相关的化合物和中药.结果 在高危患者中147个差异免疫相关基因显著富集在Janus激酶(Janus kinase,JAK)/信号转导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)、Ras、B细胞受体、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、Rap1、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)等多个信号通路.单因素/多因素Cox回归分析显示促甲状腺激素β亚基(thyroid stimulating hormone subunit beta,TSHB),肽脱甲酰基酶、线粒体(peptide deformylase,mitochondrial,PDF),血管生成素样蛋白 3(angiopoietin like 3,ANGPTL3),前列腺素E受体 1(prostaglandin E receptor 1,PTGER1)是高危神经母细胞瘤预后的独立影响因素.基于Lasso分析构建的免疫预后模型中,高风险评分组较低风险组评分组预后差(HR=4.49,95%CI:2.40～8.38,P＜0.001),Calibration校正曲线和决策曲线也证明了该模型具有较好的预后效能和一定的临床实用性.CIBERSORT和ssGSEA免疫分析均显示 CD8+T 细胞在预后模型低风险评分组中浸润水平较高风险评分组显著升高(P＜0.05),且与风险评分呈显著负相关(P＜0.05).此外,发现双酚A(bisphenol A)可同时调控ANGPTL3、PDF、PTGER1、甲状旁腺激素受体 2(parathyroid hormone receptor 2,PTH2R)、TSHB、神经生长因子诱导蛋白(nerve growth factor inducible,VGF)的表达,进而抑制神经母细胞瘤的进展.基于免疫预后模型基因靶点预测得到菟丝子、茶树根等 130 味核心干预中药,药味以苦、甘、辛为主,药性以寒、温为主,归经以肝、肺、脾、肾为主,功效以清热、补虚为主.结论 在高危型神经母细胞瘤中,免疫相关基因ANGPTL3、PDF、PTGER1、PTH2R、TSHB、VGF 构建了具有较好预后效能和一定临床实用性的预后模型.通过整合多个数据库预测了作用于预后模型基因的药物,为高危型神经母细胞瘤的治疗提供新的方向.

目的 探讨利多卡因(Lidocaine,Lido)通过调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(Cyclic guanosine monophosphate synthase,cGAS)-干扰素基因刺激因子(Stimulator of interferon genes,STING)信号通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞炎性损伤的影响及其作用机制.方法 0～200 μg/mL的利多卡因处理LPS诱导的BV2小胶质细胞24 h,四甲基偶氮唑蓝(Methylthiazolyl-tetrazolium,MTT)测定细胞活性,选择最佳药物水平;将BV2细胞分为对照组(Control组)、LPS诱导组(LPS组,1 μg/mL LPS)、利多卡因低水平组(Lido-L 组,2 μg/mL Lido+1 μg/mLLPS)、利多卡因中水平组(Lido-M 组,20 μg/mL Lido+1μg/mL LPS)、利多卡因高水平组(Lido-H组,200 μg/mL Lido+1 μg/mL LPS)和利多卡因高水平+STING激活剂 DMXAA 组(Lido-H+DMXAA 组,200 μg/mL Lido+1 μg/mL LPS+100 μg/mL DMXAA);Griess法检测NO水平;酶联免疫吸附法((Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte ehemoattractant protein-1,MCP-1)、前列腺素 E2(Prostaglandin E2,PGE2)、环氧化酶 2(Cyclooxy-ge-nase 2,COX-2)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(Interleukin,IL)-10 和 IL-1β水平;Hoechst染色检测细胞凋亡;免疫荧光检测钙离子结合调节因子(Ionized calcium-binding adapter molecule 1,Iba-1)和精氨酸酶-1(Arginase-1,Arg-1)表达水平;Western blot检测环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(Cy-clic guanosine monophosphate synthase,cG AS)、干扰素基因刺激因子(Stimulator of interferon genes,STING)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体 3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)蛋白水平.结果 0～200 μg/mL的利多卡因能增加LPS诱导的BV2细胞活力,选择2、20和200μg/mL的利多卡因进行后续实验.与Control组比较,LPS组BV2细胞出现大量细胞发生凋亡现象,TNF-α,IL-1β、一氧化氮(Nitric oxide,NO)、PGE2,MCP-1 和 COX-2 水平、Iba-1 阳性表达率及 Cgas,STING 和 NL-RP3蛋白表达水平显著增高,IL-10水平和Arg-1阳性表达率显著降低(P＜0.05);与LPS组比较,Lido-L组、Lido-M 组和 Lido-H 组 BV2 细胞凋亡逐渐减少,TNF-α,IL-1 β,NO,PGE2,MCP-1 和 COX-2 水平、Iba-1 阳性表达率及cGAS,STING和NLRP3蛋白表达水平显著降低,IL-10水平和Arg-1阳性表达率显著增高,且呈水平依赖性(P＜0.05);与Lido-H组比较,Lido-H+DMXAA组BV2细胞凋亡增加,TNF-α,IL-1β,NO,PGE2,MCP-1和COX-2水平、Iba-1阳性表达率及cGAS,STING和NLRP3蛋白表达水平显著增高,IL-10水平和Arg-1阳性表达率显著降低(P＜0.05).结论 利多卡因对LPS诱导的小胶质细胞炎性损伤的保护作用机制可能与抑制cGAS-STING信号通路的激活有关.

目的 探讨跟骨关节内骨折患者采用超前镇痛方案对骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路因子表达的影响.方法 回顾性选取2017年2月至2022年2月大庆油田总医院收治的跟骨关节内骨折患者100例,依据镇痛方案不同分为对照组和观察组,每组各50例.对照组患者接受常规性静脉自控镇痛方案,观察组患者接受地佐辛超前镇痛联合常规性静脉自控镇痛方案.统计分析两组围手术期指标(术中出血量、手术时间、术后引流量、术后引流时间、住院时间),麻醉前、手术前、手术后即刻的血流动力学(平均动脉压、心率),手术前、手术后1 d的应激反应[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)],手术后即刻,手术后6 h、12 h、1 d的镇静[Ramsay镇静评分(RSS)、视觉模拟评分法(VAS)评分]和镇痛效果,以及手术后1 d、手术后1周的血清OPG、RANKL含量和术后并发症发生情况.结果 两组患者的术中出血量、手术时间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);观察组患者的术后引流量为(59.86±2.54)mL,少于对照组[(110.97±9.41)mL],术后引流时间、住院时间分别为(123.23±9.82)h、(5.61±0.45)d,均短于对照组[(178.22±9.32)h、(8.01±0.31)d],差异均有统计学意义(P＜0.05).麻醉前、手术前、手术后即刻,两组患者的平均动脉压、心率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).手术后1 d,两组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6、PGE2水平均明显高于手术前,观察组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6、PGE2 水平分别为(5.11±1.47)mg/L、(43.15±7.51)μg/L、(32.52±5.31)ng/L、(138.11±12.68)pg/mL,均明显低于对照组[(21.42±3.44)mg/L、(87.60±13.56)μg/L、(75.77±21.35)ng/L、(144.60±15.20)pg/mL],差异均有统计学意义(P＜0.05).与手术后即刻比较,两组患者手术后6、12、24 h的RSS评分、VAS评分均逐渐降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);手术后6、12、24 h,两组患者的RSS评分、VAS评分比较差异均无统计学意义(P＞0.05).手术后1周,两组患者的血清O PG、RANKL含量均高于手术后1 d,且观察组患者的血清O PG、RANKL含量分别为(188.86±21.47)、(108.37±10.43)pg/mL,均高于对照组[(177.75±19.23)、(98.76±8.26)pg/mL],差异均有统计学意义(P＜0.05).观察组患者的术后并发症发生率为8.00％,明显低于对照组(32.00％),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 超前镇痛方案能够促进跟骨关节内骨折患者OPG/RANKL信号通路因子表达及患者术后康复,提高镇痛效果,减少术后并发症的发生.

肿瘤免疫治疗已成为人们对抗癌症的重要手段,但响应率低仍是目前亟需解决的关键问题.大量研究表明,逆转肿瘤免疫抑制是阻断肿瘤免疫逃逸、增强和扩大免疫疗法疗效的重要策略.前列腺素E 2(PGE2)是肿瘤微环境中的强效免疫介质,可特异性结合细胞膜上的七次跨膜蛋白EP4受体,诱导肿瘤微环境免疫抑制,驱动肿瘤免疫逃逸.特异性阻断PGE2/EP4信号通路可有效解除肿瘤微环境免疫抑制,增强抗肿瘤免疫反应,促进肿瘤消退.本文从EP4受体的结构、信号转导、调控机制及其拮抗剂开发现状等方面阐述了EP4受体在肿瘤免疫治疗领域的新进展和新发现,并展望了新的发展方向.

背景:肌萎缩侧索硬化为一种进行性神经退行性疾病,常导致大脑和脊髓神经元死亡.肌萎缩侧索硬化发病机制极为复杂,难治率、死亡率高且目前其治疗药物仅有2种,因此开发新治疗方法以改善患者预后迫在眉睫.目的:综述中药及间充质干细胞调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化的作用机制.方法:以"traditional Chinese medicine,mesenchymal stem cells,ALS,immune response"为英文检索词,以"中药,间充质干细胞,肌萎缩侧索硬化,免疫反应"为中文检索词,检索万方、中国知网、PubMed及Web of Science数据库 2010-2023年的相关文献,最终纳入69篇文献进行综述分析.结果与结论:①中药调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化可总结为5个机制:主要包括冰片和黄芪甲苷等中药促进闭锁小带蛋白1、闭合蛋白5表达重建血液中枢神经系统屏障完整性;复方扶芳藤合剂调节自然杀伤细胞表面受体分子抑制其自身毒性;半枝莲和广藿香等作用补体系统因子抑制其异常激活;雷公藤和钩藤等介导细胞外信号调节激酶1/2衰减诱导型一氧化氮合酶产生而抑制小胶质细胞活化;左归丸、栝蒌根等促进白细胞介素10表达调控T细胞改善免疫环境.②通过现有研究总结了间充质干细胞调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化可总结为5个机制:减少水通道蛋白4表达和降低内皮型一氧化氮合酶信号传导等方面修复免疫屏障完整性;释放吲哚胺2,3-双加氧酶和前列腺素E2等因子抗自然杀伤细胞毒性;分泌因子H干扰转化酶活性抑制补体系统异常激活;调控CX3CL1/CX3CR1系统轴或分泌转化生长因子β等途径改变小胶质细胞表型抑制其活性;增加白细胞介素10表达或激活STATS磷酸化通路来恢复T细胞功能.③目前中药联合间充质干细胞治疗肌萎缩侧索硬化研究较少,已知的相关研究报道显示,肌萎灵注射液可促进干细胞增殖分化以及补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞显著提高血脑屏障完整性,未来还需进一步探讨两者对难治性肌萎缩侧索硬化的协同治疗效果.

目的:研究天山雪莲总酚酸(PSI)抑制脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7 细胞炎症因子释放的作用及其作用机制.方法:采用大孔吸附树脂分离PSI,利用超高效液相色谱法(UPLC)对其进行成分分析.建立LPS诱导的RAW264.7 细胞炎症模型.采用噻唑蓝法检测细胞活力;Griess法检测一氧化氮(NO)的生成;酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎症因子释放水平;蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测Toll样受体 4(TLR4)信号通路关键蛋白的表达水平;免疫荧光技术检测核转录因子(NF)-κB亚基p65、激活子蛋白 1(AP-1)亚基c-Jun和干扰素调节因子 3(IRF3)的入核情况.结果:PSI主要含有绿原酸(23.60%),质量浓度为 12.50～100.00 μg·mL-1 时能显著抑制LPS刺激下炎症因子NO、前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10、IL-6、趋化因子单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1α和调节激活正常T细胞表达分泌因子(Rantes)的释放,并能剂量依赖性地降低TLR4 信号通路关键蛋白κB抑制因子(IκB)α、IκB激酶(IKK)α/β、p65、TANK结合激酶 1(TBK1)、IRF3、p38、胞外信号调节激酶(ERK)1/2 及c-Jun的磷酸化水平,同时抑制LPS诱导的p65、c-Jun和IRF3 的入核.结论:PSI能抑制LPS刺激下RAW264.7 细胞炎症因子的产生,其作用机制可能与抑制TLR4 信号通路有关.