目的:探寻理想的慢性萎缩性胃炎(CAG)小鼠模型建立方法。方法:分别使用BALB/c和C57小鼠，采用5种不同的建模方法[1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)、水杨酸钠、脱氧胆酸钠诱变、幽门螺杆菌感染及其组合]建立CAG小鼠模型。通过胃黏膜组织学观察、血浆生物化学指标检测、炎症反应评分、抗炎因子表达检测判断各建模方法的效果。结果:胃黏膜组织学观察可见5种造模方法均成功建立CAG小鼠模型。对于BALB/c小鼠，与健康对照组相比，MNNG自由饮用+2%水杨酸钠+20 mmol脱氧胆酸钠模型组小鼠显示出显著的CAG特征伴随肠化生；从血清学检测角度来说，与健康对照组相比，各模型组的相关抗炎因子白细胞介素-2、白细胞介素-10、白细胞介素-13、生长分化因子-15的mRNA表达水平均有所降低，说明各CAG模型组小鼠均有不同程度的炎症反应；血浆生物化学指标检测结果显示，各模型组血浆中胃泌素含量均降低，模型三组胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ比值下降显著；以上结果表明对于BLAB/c小鼠，MNNG自由饮用+2%水杨酸钠+20 mmol脱氧胆酸钠模型组优于其他4种方法。对于C57小鼠，同样发现单纯的化学药物诱变和幽门螺杆菌复制法均能成功建立CAG模型，但无论从病理观察和抗炎因子相对表达量的分析，还是从血浆生物化学指标分析来看，将两种方法结合后的效果更好。结论:采用MNNG自由饮用+2%水杨酸钠+20 mmol脱氧胆酸钠建立的CAG小鼠模型，可为今后药理研究CAG实验中小鼠动物模型的建立和应用提供一定参考。

'浙金 102'是'ZAASFy006'通过多孢自交、系统选育的适宜工厂化栽培的浅黄色金针菇新品种,子实体丛生,菌盖圆形、光滑,菌柄直,基部绒毛少,平均产量达到 394 g/瓶,栽培周期61-66 d.'L901'是'LTH'通过多孢自交、系统选育的适宜工厂化及设施栽培的香菇新品种,菇盖圆整、厚实、褐色,表面鳞片明显,菇柄细短,柄盖比小,口感好,优质菇比例高,前三潮子实体平均产量 941.7 g/棒,三潮栽培周期 160 d.'浙林猴 2 号'是'常山猴头 99 号'经化学诱变选育的适宜设施栽培的猴头菇新品种,子实体肉质、无分枝,头状或倒卵形,无柄,菌刺下垂,粗多糖、粗纤维含量高,平均产量达 562 g/袋,适宜浙江省自然气候栽培.

根据模仿葡萄球菌(Staphylococcus simulans)的溶葡球菌酶基因序列以及乳酸克鲁维酵母密码子偏好性设计引物扩增溶葡球菌酶基因表达片段,构建溶葡球菌酶(lysostaphin,Lys)基因表达载体(pKLAC1-Lys),转化乳酸克鲁维酵母(K.lactis GG799),实现了Lys基因的分泌表达.对重组菌株(K.lactis GG799/pKLACl-Lys)进行NTG随机化学诱变,优化表达条件,筛选获得高表达菌株,并通过Ni-NTA亲和层析纯化蛋白并研究其酶学性质.结果表明:通过诱变重组溶葡球菌酶乳酸克鲁维菌株,Lys酶比活性提高了约5.2倍(约8 000U/L).最适接种量为40g/L,诱导过程中每24h添加一次终浓度为20g/L的半乳糖和NH4NO3可提高酶比活性,最适表达pH为7.0～7.5,最适反应pH为7.0 ～8.0,最适反应温度为37℃.实验表明,低于40℃,pH 3～6之间时,重组溶葡球菌酶较稳定.Sr2+对其酶活性有明显的促进作用,Ba2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+、Mn2+、Mg2+对其有明显的抑制作用.

目的:选育优良广金钱草品种(系).方法:采用迭氮钠(NaN3),甲基磺酸乙酯(EMS)和秋水仙素最佳剂量对广金钱草种子进行诱变处理,初步筛选出13株表型变异的广金钱草植株,对广金钱草变异植株及对照基因组DNA进行相关序列扩增多态性(SRAP)分析.结果:广金钱草在株高、地茎、分枝状况等方面发生大量变异;10对SRAP引物扩增出多态性条带3 285个,平均每对引物扩增出328.5条带,多态性比例平均为96.45％,广金钱草化学诱变植株遗传相似系数范围0.326～0.476,遗传相似系数较低,表明经化学诱变剂处理后广金钱草在基因组水平上存在真实的遗传差异;相似性差异程度大小顺序为V-13＞V-7＞ V-6＞ V-1 1＞V-10＞ V-12＞ V-9＞ V-8＞ V-4＞ V-5＞ V-3＞V-2＞ V-1,表明NaN3在分子水平上对广金钱草的影响比EMS和秋水仙素小;化学诱变处理后广金钱草变异程度高于不同种源地的变异,进一步表明人工诱变育种可以缩短育种年限,提高突变率.结论:该研究揭示了广金钱草化学诱变株表型特异性和遗传多样性,筛选了一些特异资源,为高产优质广金钱草新品种(系)的选育提供重要的科学依据.

该研究选用栽培大麦品种'西引2号',通过化学诱变剂甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate ,EMS)处理,创建了3 750个 M1及2 012个 M2突变株系.结果表明:在M2中,有115株表现黄化,98株表现矮化,101株表现极早或极晚抽穗,其他35株表现分蘖少、叶片小或者不育等性状,所有突变株系占M2群体的17 .35%;M2的基因组DNA用于突变频率的研究,用优化的CELⅠ酶切体系对M2株系进行了 EDR1基因突变体筛选,获得了EDR1基因的3个突变体,其中一个发生在外显子区域,导致了氨基酸 Pro到Ser的转换,突变频率平均为每661 kb一个点突变,这与前人研究的突变频率基本在一个范围内.该研究创建了大麦品种'西引2号'的 TILLING筛选群体,并用于 EDR1突变体的筛选.为大麦性状研究提供了不同的思路,搭建了新的资源和技术平台.

吡咯喹啉醌(PQQ)是一种细菌脱氢酶的辅酶,具有促进机体生长、调节机体自由基水平等功能,应用于食品、医药等领域.由于化学合成法成本较高,微生物发酵法生产PQQ受到关注.目前,发酵法生产PQQ产量较低,限制了其工业应用.然而,由于对PQQ菌株的合成与调控机制尚缺乏深入理解,以及对野生型菌株缺乏必要的基因工程改造手段,目前采用代谢工程强化PQQ合成菌株还缺乏相关基础.因此,本研究以扭脱甲基杆菌Methylobacterium extorquens I-F2为研究对象,整合常压室温等离子体诱变、流式细胞术分选和高通量筛选策略,对样品制备和流式分选过程进行优化,最终筛选出一株PQQ高产突变菌株1-C6,PQQ产量比出发菌株I-F2提高98.02％.本文所述的流式细胞术结合高通量筛选方法能简单、快速地获得高产突变菌株,相比于基因工程改造和传统筛选方法,具有提升效果明显且易于实施等优势.

藻类诱变育种技术是指利用物理和化学因素诱发藻体产生遗传变异,在短时期内获得有价值的突变体的育种方法.藻类是水生生态系统中主要的初级生产者,与人类生活及经济发展有着密切的关系,是发展"蓝色农业"的基础.诱变育种已经成为提高藻类育种效率,获得新种质的一个重要手段,广泛应用在生物活性物质含量高的微藻、生物能源微藻及一些大型的经济海藻中.在藻类育种中常用的诱变技术主要包括物理和化学诱变技术.物理诱变辐射源包括紫外线、γ射线、重离子束及常压室温等离子体等,化学诱变剂主要包括甲基磺酸乙酯和亚硝基胍等.主要介绍了上述诱变技术的诱变机理和生物学效应,总结了诱变技术在藻类育种中的研究进展及应用前景,以期推动藻类诱变育种的发展.

随着人们生活水平的提高,葡萄酒因其滋补、养颜、强身等保健功能越来越受到人们的重视和青睐,葡萄酒含有大量具有还原性基团的多酚物质,具有抗氧化作用;能防治退化性疾病[1-4],而葡萄酒中的白藜芦醇属于这类多酚物质中重要的一类,最初作为植物抗毒素被发现,生产于葡萄叶表皮和浆果果皮中,是植株对真菌病害感染应激产物,白藜芦醇化学名称为芪三酚,分子式C14H12O3,相对分子质量228.25,它以游离(顺式、反式)和糖苷结合态(顺式、反式)2种形式存在,都有抗氧化作用、抗菌作用,抗癌、抗诱变作用,能起到软化血管,促进血液循环,治疗心脑血管疾病之功效[5-10],鉴于白藜芦醇的这些优点,白藜芦醇的合成,提取及检测显得尤为重要.

旨在诱变选育L-异亮氨酸高产菌,并探索突变株最佳发酵条件.利用传统化学诱变结合常压室温等离子体生物诱变体系对实验室保藏的Brevibacterium flavum I-12进行逐级诱变,选育2-噻唑丙氨酸(2-TA)和磺胺胍(SG)高抗性和在琥珀酸平板上能快速生长的突变菌株.随后,在单因素实验的基础上,利用响应面设计优化出目的突变株摇瓶发酵培养基组分的最佳参数水平.结果显示,经过一系列诱变和筛选,成功选育出一株在40 g/L的2-TA和5 g/L的SG,且以琥珀酸为唯一碳源的培养基上快速生长突变株,命名为B.flavum TA-6,该菌株产酸达26.2±0.5 g/L,比出发菌株提高了44.75％,而副产物L-缬氨酸和L-亮氨酸积累量明显降低.经响应面法优化发酵条件后,突变株产酸可达27.8±0.5 g/L,比优化前提高了6.1％.通过传统化学诱变结合ARTP生物诱变体系,成功选育出一株杂酸降低的L-异亮氨酸高产菌TA-6,该菌株具有潜在生产应用价值.

植物黄绿叶突变体不但在植物的光合作用、叶绿素的合成代谢途径、叶绿体的遗传分化与发育等一系列基础研究中具有重要作用,而且还可以作为标记性状应用到育种研究上.本研究以前期化学诱变得到的一个番茄黄绿叶突变体为材料,对其主要表型与光合作用特征特性进行鉴定分析,发现突变体从第1片真叶开始变黄,植株矮小,叶片叶绿素含量和净光合速率相对野生型极显著降低,叶绿体类囊体片层结构畸形.突变体和野生型进行正反交,分析其遗传方式.发现其F2群体正常叶与黄绿叶的分离比为3∶1,表明黄绿叶是由单个基因突变引起的隐性性状.本研究为后期的基因定位研究奠定了基础.