目的:通过胚胎时差成像技术（TLT）结合人工智能（AI）探索体外胚胎发育曲线（EDM）中的卵裂球计数曲线“跳变值”与胚胎形态学特征的相关性，并探讨其在体外受精（IVF）胚胎评估中应用的可行性。方法:本研究为自主研发的AI胚胎评估软件的诊断性试验，即临床数据AI再评估，为回顾性研究。收集2020年12月至2021年12月于重庆医科大学附属妇女儿童医院生殖医学中心行IVF的1 226例患者共6 545个胚胎，其中2 869个胚胎进行囊胚培养。所有胚胎通过TLT培养并进行观察，由TLT记录软件Embryo Viewer依据胚胎发育动力学绘制EDM。本课题组自主研发的AI胚胎评估软件对胚胎发育过程中的卵裂球数目进行实时识别、记录，并与EDM进行比较，分析由卵裂球计数变化而形成的跳变值与胚胎结局的相关性。采用Spearman相关性及logistic回归分析跳变值与胚胎形态学评估、胚胎着床及活产的相关性，使用受试者工作特征（ROC）曲线评估各指标对胚胎着床、活产的预测价值。结果:Spearman相关性分析显示，受精卵受精后72 h卵裂球计数曲线提取的总跳变值与卵裂模式、囊胚形成、培养至第3天胚胎（D3胚胎）的形态学评级、D3胚胎的细胞均一度、D3胚胎的细胞碎片率均呈显著负相关（ β值分别为-0.268、-0.116、-0.213、-0.159、-0.222； P均<0.001），与D3胚胎的细胞数呈显著正相关（ β=0.034； P<0.001）。多因素logistic回归分析显示，胚胎总跳变值排序与囊胚形成（ OR=0.97，95% CI为0.93~0.99； P=0.034）、胚胎着床（ OR=0.96，95% CI为0.93~0.98； P=0.044）呈显著负相关；ROC曲线分析显示，胚胎总跳变值排序预测胚胎着床能力与传统胚胎形态学评估方法相近［其曲线下面积（AUC）分别为0.679、0.620］。多因素logistic回归分析显示，活产与患者年龄（ OR=0.91，95% CI为0.88~0.93； P<0.001）、D3胚胎形态学评级（ OR=0.77，95% CI为0.59~0.99； P=0.045）及胚胎总跳变值排序（ OR=0.98，95% CI为0.96~0.99； P=0.038）呈显著负相关，而与获卵数（ OR=1.08，95% CI为1.05~1.11； P<0.001）及移植日子宫内膜厚度（ OR=1.09，95% CI为1.06~1.12； P<0.001）呈显著正相关；ROC曲线分析显示，纳入建模的以上多个因素预测活产的AUC值为0.666。 结论:跳变值及其排序是对体外胚胎卵裂期发育的系统量化，其与胚胎发育质量及临床结局相关，可能是胚胎体外评估及选择的有益补充。

目的:探讨不同评级的卵裂期胚胎发育而成的优质囊胚移植后的妊娠结局，分析卵裂期胚胎的评级对选择性单囊胚移植的指导价值。方法:回顾性分析2017年1月至2021年5月期间在河南省人民医院生殖中心行单优质囊胚移植患者（共3 059个周期）的临床资料，根据卵裂期胚胎卵裂球数目及碎片的多少分为优D3-优囊组（8细胞，≤5%碎片），次优D3-优囊组（8细胞，碎片>5%但≤10%；7细胞或9细胞，碎片≤10%）、非优D3-优囊组（非优D3及非次优D3外的其他D3可用胚胎）。通过单因素分析、多元logistic回归分析比较不同评级的卵裂期胚胎发育为优质囊胚移植后的临床结局，曲线拟合和阈值效应分析年龄对单优质囊胚移植后临床妊娠率和早期流产率的影响。结果:优D3-优囊组（1 326个周期）、次优D3-优囊组（830个周期）、非优D3-优囊组（903个周期）的临床妊娠率分别为69.53%、70.12%、66.67%，早期流产率分别为10.74%、12.54%、12.62%，分别比较，差异均无统计学意义（ P均>0.05）。多元logistic回归调整混杂因素后分析显示，以优D3-优囊组作为对照，移植不同评级卵裂期胚胎来源的单优质囊胚，其余两组的临床妊娠率（ OR=1.02，95% CI为0.76~1.38， P=0.879； OR=0.84，95% CI为0.61~1.14， P=0.262）和早期流产率（ OR=1.18，95% CI为0.77~1.82， P=0.445； OR=1.26，95% CI为0.81~1.98， P=0.309）无明显差异。阈值效应分析显示，当移植单个优质囊胚时，年龄对临床妊娠率的影响呈曲线关系，当年龄≥33岁时，随着年龄的增加临床妊娠率显著下降（ OR=0.89，95% CI为0.83~0.95， P=0.007），早期流产率有增加趋势，但无显著差异（ OR=1.01，95% CI为0.97~1.06， P=0.628）。 结论:卵裂期胚胎的评级不影响选择性优质单囊胚移植患者的妊娠结局。在进行囊胚选择时建议以囊胚质量评级作为主要的参考指标，也应考虑年龄对单囊胚移植妊娠结局的影响。

目的:应用基于多次退火环状循环扩增(multiple annealing and looping-based amplification cycles，MALBAC)的单细胞测序技术分析卵裂期优质胚胎的嵌合体率及类型。方法:收集接受卵胞浆内单精子显微注射治疗并生育正常后代的夫妇捐献的卵裂期冷冻优质胚胎，解冻，消化透明带，收集卵裂球，进行单细胞全基因组扩增及二代测序。结果:共解冻胚胎23枚，收集184个卵裂球。175个(95.1%)卵裂球获得了测序结果，其中100个(57.1%)为非整倍体。在23枚胚胎中，3个(13.0%)为正常的二倍体，20个(87.0%)为嵌合体，其中包括5个(21.7%)非整倍体嵌合型、7个(30.4%)为二倍体-非整倍体嵌合型、5个(21.7%)为异常嵌合型、3个(13.0%)为无规律分离型。结论:卵裂期优质胚胎中存在较高的染色体嵌合体率。复杂染色体异常或高比例异常细胞的嵌合体可能是影响胚胎发育潜能的重要因素。

随着辅助生殖技术（assisted reproductive technology，ART）的发展，越来越多的不孕症夫妇拥有了自己的孩子。据不完全统计，截止到2010年，全球大约有500万婴儿经过ART治疗后出生。ART是否会对子代出生性别产生影响，会产生何种影响，至今尚不明确。而随着ART新生儿数量的增加，未来可能会对人口构成产生深远影响。目前已知的可能影响ART新生儿性别比的因素有：双亲年龄、授精方式、胚胎移植阶段（卵裂期/囊胚期）、移植胚胎类型（新鲜胚胎/冷冻胚胎）等，本文拟就目前已知可能影响ART新生儿性别比的因素展开综述。

先天性心脏病（congenital heart diseases，CHDs）严重影响人类健康，遗传因素与CHDs的发生密切相关。在辅助生育过程中，利用极体活检、卵裂球活检和囊胚活检等方法，结合单细胞DNA扩增及高通量测序技术，能够准确检测出着床前胚胎中与单基因遗传疾病相关的致病突变。T盒转录因子5（T-box transcription factor 5，TBX5）是心脏和上肢发育的重要转录因子，已报道有227种 TBX5突变与CHDs相关。通过植入前单基因遗传病检测（preimplantation genetic testing for monogenic disease，PGT-M），检测胚胎中是否存在CHDs相关性 TBX5突变，对于预防CHDs的发生有重要意义。本文系统整理了已报道的 TBX5突变相关信息，并结合家族性遗传数据、动物模型、诱导多潜能干细胞疾病模型和预测软件，对 TBX5错义突变进行了综合分析，以期为CHDs相关 TBX5突变的PGT-M提供参考。

目的:探讨胚胎早期发育动态表型和动力学参数是否受培养液组分差异的影响。方法:回顾性队列研究分析广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心2016年10月至2018年12月期间收治的体外受精（ in vitro fertilization，IVF）周期患者的临床资料，根据使用的培养液品牌不同，将IVF周期分为Cook组和Vitrolife组，经1∶1倾向性评分匹配后，每组纳入59个，采用延时成像技术分析正常受精卵裂胚胎授精后68 h内的早期发育形态动力学。记录胚胎发育动态表型，比较两组胚胎7种发育动态表型构成的差异；计算正常表型胚胎的13个早期发育动力学参数，比较两组之间动力学参数的差异；基于两个已发表的time-lapse胚胎筛选模型，比较两组正常动态表型胚胎的等级分布差异。 结果:①Cook组胚胎发育动态表型构成如下：正常表型54.0%、胞质异常波动（abnormal first cytokinesis，A1 cyt）3.0%、不规则卵裂（abnormal cleavage，AC）17.4%、逆向卵裂（reverse cleavage，RC）5.2%、无序卵裂（chaotic cleavage，CC）3.2%、多核（multinucleation，Mn）3.5%以及混合表型13.7%；Vitrolife组胚胎发育动态表型构成如下：正常表型49.3%、A1 cyt 4.0%、AC 19.1%、RC 7.5%、CC 2.1%、Mn 6.4%以及混合表型11.6%，两组间表型构成差异没有统计学意义（ P>0.05）。②相较于Vitrolife组，Cook组正常动态表型胚胎13个发育动力学参数（tPNa、tPNf、t2、t3、t4、t5、t6、t7、t8、cc2、s2、t5_PNf和t8_PNf）均略长，授精后68 h胚胎平均卵裂球数略少，但差异均无统计学意义（均 P>0.05）。③基于模型A，Vitrolife组与Cook组胚胎等级分布差异没有统计学意义（ P>0.05）；基于模型B，两组胚胎等级分布差异存在统计学意义（ P=0.040），其中Vitrolife组A +级胚胎比例较Cook组高［59.8%（125/209）比43.3%（94/217）］，而C级胚胎比例较Cook组低［9.6%（20/209）比20.3%（44/217）］。 结论:胚胎早期发育动态表型及动力学参数不受Cook与Vitrolife序贯培养液差异的影响，但不同time-lapse胚胎筛选模型对不同培养液体系的适用性存在差异，选择或建立模型时应充分考虑所使用的胚胎培养液体系。

目的 探讨影响卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏后存活的相关因素,以期提高冻融胚胎存活率.方法 回顾性分析2013年1月-2019年12月在泰安市中心医院行卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏移植的3 795个周期,所有患者每次均解冻2枚胚胎,共解冻7 590枚胚胎.按照胚胎复苏后存活程度分为3组,其中A组:2枚胚胎均完整存活;B组:2枚胚胎中有1枚胚胎非完整存活(一半以上卵裂球存活);C组:2枚胚胎中有1枚未存活(一半以下卵裂球存活).按照新鲜培养周期时的受精方式分为常规体外受精组(IVF组)和单精子卵胞浆内显微注射组(ICSI组).按照胚胎分级分为优质胚胎组(Ⅰ、Ⅱ级胚胎)和非优质胚胎组(Ⅲ级胚胎).按照冷冻液和复苏液是否使用同一种品牌分为同种品牌组和不同品牌组.结果 C组患者的年龄、不孕年限显著高于A、B两组,差异有统计学意义(P＜0.05),3组的冻融移植周期数及冷冻保存时间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),C组的临床妊娠率显著低于A、B两组,差异有统计学意义(P＜0.01).ICSI组患者胚胎复苏后完整存活率显著低于IVF组患者,差异有统计学意义(P＜0.05),未存活的胚胎数量显著增加.与I级、Ⅱ级胚胎相比,Ⅲ级胚胎复苏后存活率显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05).不同品牌的冷冻液和复苏液对胚胎复苏存活情况没有显著影响(P＞0.05).结论 患者年龄、受精方式及胚胎质量影响玻璃化冷冻胚胎复苏后存活率,进而影响临床妊娠结局.

目的 探讨第3天新鲜胚胎移植周期中卵裂球数目及助孕方式对妊娠结局的影响.方法 回顾性分析2012年1月至2020年8月海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院生殖医学中心收治的首次接受胚胎移植、采用常规体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)助孕、胚胎质量为Ⅰ级或Ⅱ级的患者资料.共1 788个第3天新鲜移植周期纳入研究,先分为单胚胎移植和双胚胎移植两大类,每类再根据卵裂球数目分为≤6个细胞组、7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组.在新鲜单胚胎移植周期中,≤6个细胞组36个(IVF 21个、ICSI 15个),7个细胞组53个(IVF 25个、ICSI 28个),8个细胞组204个(IVF 146个、ICSI 58个),9个细胞组36个(IVF 22个、ICSI 14个),≥10个细胞组50个(IVF 34个、ICSI 16个);在新鲜双胚胎移植周期中,≤6个细胞组59个(IVF 27个、ICSI 32个),7个细胞组72个(IVF 48个、ICSI 24个),8个细胞组1 178个(IVF 820个、ICSI 358个),9个细胞组44个(IVF 24个、ICSI 20个),≥10个细胞组56个(IVF 24个、ICSI 32个).比较各组的胚胎种植率、临床妊娠率、流产率和活产率.结果 在新鲜单胚胎移植周期中,8个细胞组的胚胎种植率、临床妊娠率高于≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组(均P＜0.05),活产率高于≤6个细胞组、7个细胞组(均P＜0.05),流产率与≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组比较差异无统计学意义(均P＞0.05);8个细胞组中ICSI助孕的胚胎移植后胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于IVF助孕(均P＜0.05),而≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组中IVF和ICSI 2种助孕方式的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(均P＞0.05).在新鲜双胚胎移植周期中,8个细胞组的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于≤6个细胞组、7个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组(均P＜0.05),流产率与≤6个细胞组、7个细胞组、≥10个细胞组比较差异无统计学意义(均P＞0.05),但低于9个细胞组且差异有统计学意义(P＜0.05);≤6个细胞组ICSI助孕的胚胎移植后胚胎种植率、临床妊娠率、活产率均高于IVF助孕(均P＜0.05),而7个细胞组、8个细胞组、9个细胞组、≥10个细胞组中IVF和ICSI 2种助孕方式的胚胎种植率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 在第3天新鲜胚胎移植周期中,可首选8个细胞胚胎,其次是9个细胞胚胎、≥10个细胞胚胎、7个细胞胚胎、≤6个细胞胚胎;8个细胞胚胎在ICSI助孕方式下的胚胎种植率、临床妊娠率和活产率比IVF高,可以优先选择;对于一部分ICSI助孕患者在无其他优质胚胎情况下,移植≤6个细胞的胚胎也可以获得较好的妊娠结局.

目的 利用胚胎形态动力学联合卵母细胞减数分裂纺锤体(MS)观测,探索预测胚胎发育潜能的卵裂期胚胎筛选方法.方法 回顾性分析2020年8月至2022年6月在苏州市立医院生殖与遗传中心行卵胞浆内单精子注射(ICSI),同时行卵母细胞MS观测和胚胎实时观测培养的46个周期患者的临床资料.根据卵母细胞MS形态、胚胎是否存在异常分裂方式,以及胚胎形态学差异对卵母细胞及卵裂期胚胎进行分类研究,分析胚胎形态动力学参数及MS形态预测胚胎发育潜能的价值,建立预测囊胚形成的早期胚胎分层筛选模型,并利用受试者工作特征(ROC)曲线探讨该模型的预测价值.结果 MS正常组的囊胚形成率显著高于MS异常组(63.6％vs.46.9％,P＜0.05);直接分裂(DC)1组的囊胚形成率显著低于DC2组和无DC组(5.0％vs.46.7％、63.9％,P＜0.05);D3形态学优质胚胎的囊胚形成率显著高于D3形态学非优质胚胎(79.4％vs.24.6％,P＜0.05).采用多元Logistic回归分析发现,在D3形态学优质胚胎中,3细胞到5细胞的发育时间(cc3)、5细胞到8细胞的发育时间(s3)和MS形态对囊胚形成有预测价值(P＜0.05);在D3形态学非优质胚胎中,卵裂球数目对囊胚形成有预测价值(P＜0.05).以此建立了 D3胚胎分层筛选模型,共11级(A～K级),A级最优,K级最劣.该筛选模型对囊胚形成的ROC曲线显示,曲线下面积为0.857[95％CI(0.816,0.899),P=0.000].结论 采用胚胎形态动力学参数联合MS形态分析建立的D3胚胎分层筛选模型,对胚胎发育潜能具有较好的预测能力.

目的 通过高通量测序技术(NGS)探讨D3胚胎卵裂球数目与胚胎发育潜能和整倍性之间的关系.方法 回顾性分析2018年1月至2021年12月于本院生殖中心行胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)助孕的261个治疗周期共920枚活检囊胚的数据资料,根据D3胚胎卵裂球数目不同进行分组(4细胞组、5细胞组、6细胞组、7细胞组、8细胞组、9细胞组、10细胞组及≥11细胞组),评估各组后续获得优质囊胚和整倍体囊胚的机会,并统计分析各组间临床结局的差异.结果 (1)与8细胞组相比,5细胞、6细胞、7细胞及10细胞组优质囊胚率显著降低(P=0.00),调整女方年龄因素以后,差异仍有显著性(P=0.00);卵裂球数目合并分组后,≤7细胞组、9～10细胞组的优质囊胚率显著低于8细胞组,调整年龄因素以后,差异仍有显著性(P＜0.05);≥11细胞组优质囊胚率与8细胞组间无显著性差异(P=0.51),调整女方年龄后,仍无显著性差异(P=0.45).(2)与8细胞组相比,其他各组囊胚的整倍体率均无显著性差异(P＞0.05);调整年龄后,各组间囊胚整倍体率仍无显著性差异(P＞0.05);卵裂球数目合并分组后,各组间随着卵裂球发育速度增快,囊胚整倍体率增加,但差异尚无统计学意义(P＞0.05);调整年龄混杂因素后,各组间的囊胚整倍体率仍无显著性差异(P＞0.05).(3)随着卵裂球数目增加,各组临床妊娠率、活产率呈上升趋势;卵裂球数目合并分组后,≥11细胞组的临床妊娠率和活产率最高,≤7细胞组的临床妊娠率和活产率最低,但差异均尚无统计学意义(P＞0.05).结论 D3卵裂期胚胎的发育潜能随着卵裂球数目的增加而增加,≥11细胞的D3快速分裂胚胎具有同8细胞胚胎相似的整倍体率和活产率,为临床单胚胎移植胚胎选择策略提供一定的参考.