目的:探讨参附益心方治疗射血分数降低的心力衰竭(阳虚水泛型)的临床效果.方法:选择六安市中医院 2020 年 4 月—2022年 4月收治的射血分数降低的心力衰竭病人 128例,根据随机数字表法分为西医基础治疗组与中药方剂组.西医基础治疗组64例(脱落 1例,最终纳入 63例),给予规范化抗心力衰竭治疗;中药方剂组 64例(脱落 1例,最终纳入 63例),在规范化抗心力衰竭治疗基础上给予参附益心方治疗.检测两组病人治疗前后左室射血分数(LVEF)、半乳糖凝集素 3(Gal-3)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、可溶性基质裂解素 2(sST2)、可溶性 CD146(sCD146)、嗜铬粒蛋白 A(CgA)、N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肌钙蛋白 I(cTnI)、二氧化碳分压(PCO2)、氧输送(DO2)、氧耗量(VO2)表达水平,评价两组病人中医证候评分、6 min步行距离(6MWD)、明尼苏达心力衰竭生活质量量表(MLHFQ)评分,并比较两组临床疗效.结果:中药方剂组 sCD146、NT-proBNP、cTnI、Gal-3、AngⅡ、CgA、sST2 含量较西医基础治疗组降低(P<0.05),PCO2、DO2、VO2、LVEF较西医基础治疗组升高(P<0.05),6MWD较西医基础治疗组延长(P<0.05),面肢浮肿、咯吐泡沫痰、心悸气喘/不得卧、尿少腹胀、口唇青紫、颜面灰白、烦躁汗出、或伴腹水、胸水、MLHFQ评分均较西医基础治疗组降低(P<0.05).中药方剂组总有效率较西医基础治疗组明显升高(98.41%与 84.13%,P<0.05).结论:参附益心方可抑制射血分数降低的心力衰竭病人机体炎症反应,促进心肌损伤修复,调节氧动力学指标,减少心肌纤维化,提高活动耐力,改善生活质量,提升临床疗效.

目的:观察参附益心方在缺氧条件下对原代心肌细胞凋亡的干预作用,并探讨其作用机制.方法:取1～3d的SD乳鼠,进行原代心肌细胞分离、培养、鉴定,用缺氧建立心肌细胞凋亡模型,参附益心方0.25、0.5mg/mL、辅酶Q10 1×10-4mol/L干预,CCK-8和Calcein-AM染色检测心肌细胞活性,流式细胞仪检测原代心肌细胞凋亡率,荧光定量PCR检测凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因的表达,试剂盒检测凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的活性.结果:与模型组比较,参附益心方高、低剂量组能提高缺氧条件下心肌细胞活性,降低心肌细胞凋亡率(P<0.05,P<0.01);下调促凋亡因子Caspase-3基因及Caspase-3、Caspase-9蛋白的活性,上调抑凋亡因子Bcl-2基因的表达量(P<0.05),参附益心方高剂量组还可下调促凋亡因子Bax、Caspase-9的基因表达(P<0.05),参附益心方对心肌细胞活性、凋亡率、凋亡相关因子的作用呈剂量依赖性.结论:参附益心方可明显干预缺氧条件下原代心肌细胞发生凋亡,其机制可能与调节通过线粒体途径的凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9有关.

目的:观察参附益心方对缺氧原代心肌细胞活性氧(ROS)和能量代谢的影响.方法:新生SD大鼠原代心肌细胞经分离、培养、鉴定后,随机分为正常组、模型组、阳性对照组(辅酶Q10,0.1 mmol/L)和参附益心方低、高剂量组(0.25、0.5 mg/mL).除正常组外,其余各组细胞均于5％O2、5％CO2、90％N2条件下培养6 h以复制缺氧损伤模型.缺氧6 h后,采用ROS探针和流式细胞术分别检测各组细胞及其线粒体中ROS的含量,采用荧光素酶发光法和Western blotting法分别检测各组细胞中腺苷三磷酸(ATP)的含量以及肌酸激酶(CK)蛋白的表达水平,并使用透射电子显微镜观察各组细胞的超微结构.结果:与正常组比较,模型组缺氧原代心肌细胞及其线粒体中ROS的表达均明显增加,其ROS含量均显著升高,ATP的含量以及CK蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05);细胞内质网、线粒体肿胀,线粒体嵴溶解甚至消失,损伤明显.与模型组比较,各给药组缺氧原代心肌细胞及其线粒体中ROS的表达均有所减少,阳性对照组和参附益心方高剂量组缺氧原代心肌细胞中ROS的含量以及各给药组缺氧原代心肌细胞线粒体中ROS的含量均显著降低,阳性对照组和参附益心方高剂量组缺氧原代心肌细胞中ATP的含量以及各给药组缺氧原代心肌细胞中CK蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05);阳性对照组和参附益心方高剂量组缺氧原代心肌细胞损伤明显减轻.

目的 探讨参附益心方对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的H9c2心肌细胞损伤的干预作用及相关机制. 方法 采用CCK-8法筛选参附益心方、辅酶Q1O、氯沙坦钾实验药物浓度,MTT法筛选AngⅡ实验药物浓度.以H9c2心肌细胞为研究对象,以AngⅡ诱导H9c2心肌细胞损伤为模型,将细胞分为正常对照组、模型组、辅酶Q1O组、氯沙坦组和参附益心方低、高剂量组.正常对照组正常培养24h;模型组用含筛选浓度的AngⅡ的培养基培养24h;参附益心方低、高剂量组及氯沙坦组、辅酶Q10组用含筛选出相应药物浓度及AngⅡ的培养基培养24h.检测各组H9c2心肌细胞活性、线粒体含量及膜电位、活性氧簇(ROS)含量、细胞凋亡率,凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax、Bcl-2基因表达,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白活性.结果 最终选择参附益心方低、高浓度为0.25、0.5 mg/ml,辅酶Q10研究浓度为1×10-4mol/L,氯沙坦钾研究浓度为1×10-4mol/L,AngⅡ建立实验模型浓度为1×10-5mol/L.与正常对照组比较,模型组大鼠心肌细胞活性、线粒体数量及膜电位、Bcl-2基因表达降低,ROS含量、细胞凋亡率及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax基因表达升高,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白活性亦升高(P＜0.05);与模型组比较,参附益心方高剂量组和氯沙坦组、辅酶Q1O组细胞活性、线粒体数量及膜电位升高,ROS含量、细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9、Bax基因表达降低,Caspase-3、Caspase-9蛋白活性亦降低(P＜0.05).结论 参附益心方可能通过改善心肌细胞线粒体功能,降低ROS含量,从而减少AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞发生凋亡.

目的:探讨参附益心方对缺氧原代心肌细胞脂肪酸利用的影响及其可能机制.方法:取新生1～3 d的SD大鼠心尖部组织,进行原代心肌细胞的分离、培养与鉴定,并将细胞随机分为正常组、模型组、辅酶Q10组(阳性对照,1×10-4 mol/L)和参附益心方低、高剂量组(0.25、0.5 mg/mL).除正常组外,其余各组细胞均于5％O2、5％CO2、90％N2条件下培养6 h以复制缺氧损伤模型.缺氧6 h后,采用荧光素酶发光法检测各组细胞中三磷酸腺苷(ATP)的含量,采用Western blotting法检测其脂肪酸转位酶(FAT/CD36)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα、PPARβ/δ)的表达情况.结果:与正常组比较,模型组细胞中ATP含量以及FAT/CD36蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05).与模型组比较,辅酶Q10组和参附益心方高剂量组细胞中ATP含量均显著升高,而辅酶Q10组细胞中FAT/CD36、PPARα蛋白,参附益心方高剂量组细胞中FAT/CD36蛋白以及参附益心方各剂量组细胞中PPARα、PPARβ/δ蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05).结论:参附益心方可通过抑制FAT/CD36、PPARα、PPARβ/δ蛋白的表达来抑制缺氧原代心肌细胞的脂肪酸利用,改善其能量代谢.

目的:探讨参附益心方对H2O2损伤的乳大鼠心肌细胞Err-α、GLUT-4、NRF-1、NRF-2、PDH、PGC-1 α、PPAR-α表达的影响.方法:分离并培养乳大鼠心肌细胞,建立H2O2诱导的心肌细胞损伤模型.采用MTT法检测H2O2、参附益心方最佳干预浓度;采用RT-PCR及Western blot检测心肌细胞Err-α、GLUT-4、NRF-1、NRF-2、PDH、PGC-1 α、PPAR-α基因及蛋白的表达.结果:模型组中,50μmol/L H2O2作用6h能显著降低心肌细胞活性(P＜0.01),心肌细胞Err-α、GLUT-4、NRF-1、NRF-2、PGC-1 α、PPAR-a基因及蛋白表达降低(P＜0.01,P＜0.05),PDH基因及蛋白表达升高(P＜0.01);与模型组比较,参附益心方组心肌细胞活性显著升高(P＜0.01),GLUT-4、NRF-1、PGC-1 α基因及蛋白表达升高(P＜0.01,P＜0.05),PDH基因及蛋白表达降低(P＜0.01).结论:参附益心方能通过升高乳大鼠心肌细胞Err-α、GLUT-4、NRF-1、NRF-2、PGC-1 α、PPAR-α基因或蛋白表达,降低PDH基因及蛋白表达,改善心肌能量代谢.

目的 研究参附益心方(SF)对缺氧条件下大鼠原代心肌细胞线粒体DNA相关基因表达的影响.方法 取1～3 d SD新生大鼠,分离、培养、鉴定原代心肌细胞.CCK-8检测SF、辅酶Q10(Coenzyme Q10)最适浓度.实验分为Normal(正常)组、Model(缺氧)组、SFL(参附益心方低剂量)组、SFH(参附益心方高剂量)组、Coenzyme Q10组,后三组在缺氧模型基础上分别给予SF 0.25 mg·ml-1、SF 0.5 mg·ml-1、Coenzyme Q101×10-4 mol/L对细胞进行干预,收集细胞并用相关试剂盒检测ATP含量及乳酸脱氢酶(LDH)含量,RT-PCR检测ND-1、ND-2、COX、tfam基因的表达.结果 与Normal组相比,Model组心肌细胞ATP含量显著下降,LDH含量显著升高,ND-1、ND-2、COX、tfam基因表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05).与Model相比,SFL组LDH含量下降,ND-2、COX基因表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05);SFH组ATP含量升高,LDH含量下降,ND-1、ND-2、COX基因表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 参附益心方可上调原代心肌细胞线粒体DNA相关基因COX、ND1、ND2的表达,提高心肌ATP的含量,降低LDH含量,并呈剂量依赖性.

目的 观察参附益心方在缺氧条件下对原代心肌细胞葡萄糖利用的作用.方法 取新生1～3天的SD乳鼠,进行原代心肌细胞分离、培养、鉴定,利用缺氧条件建立原代心肌细胞模型,筛选参附益心方0.25、0.5mg/ml、辅酶Q10 1×10-4 mol/L进行干预,实验共设5组:正常组,模型组,参附益心方低剂量组(0.25mg/ml)、高剂量组(0.5mg/ml)和辅酶Q10组(1×10-4mol/L),试剂盒检测各组ATP含量及乳酸脱氢酶(LDH)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测AMP激活的蛋白激酶(AMPK)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)基因表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GLUT-4蛋白的表达.结果 与正常组相比,模型组原代心肌细胞ATP含量及GLUT-4基因与蛋白表达含量明显降低,AMPK、PDH基因表达及LDH含量明显升高(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,参附益心方高剂量组可提高缺氧条件下原代心肌细胞ATP含量与GLUT-4基因和蛋白表达,降低AMPK和PDH的基因表达及LDH含量(P＜0.05,P＜0.01);参附益心方低剂量组可降低心肌细胞LDH含量,提高GLUT-4基因和蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).参附益心方对心肌细胞ATP和LDH含量、AMPK和PDH基因表达,GLUT-4基因和蛋白表达作用呈剂量依赖性.结论 参附益心方可通过提高缺氧条件下原代心肌细胞GLUT-4基因和蛋白表达,并降低LDH含量、回调心肌AMPK和PDH的基因表达,从而提高缺氧条件下原代心肌细胞葡萄糖的利用,改善心肌ATP储备.

目的观察益心方治疗气虚血瘀型不稳定型心绞痛(UAP)的临床效果及对患者血液流变学参数的影响.方法选取2017年1月至2019年9月首都医科大学附属北京中医医院收治的116例气虚血瘀型UAP患者,按随机数字表法分为对照组和观察组,各58例.对照组予常规治疗,观察组在对照组基础上加用中药益心方,2组均治疗3个月.比较2组心肌缺血参数、临床症状改善情况及疗效、血液流变学参数、不良反应.结果治疗后,观察组缺血持续时间短于对照组、缺血总负荷均低于对照组,胸闷、胸痛、心悸、气短、神疲、乏力积分均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).观察组总有效率明显高于对照组[89.5％(51/57)比71.4％(40/56)],差异有统计学意义(x2=5.867,P=0.015).观察组全血黏度、血浆黏度、血细胞比容均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).观察组与对照组不良反应发生率比较差异无统计学意义[15.8％(9/57)比19.6％(11/56)](x2 =0.288,P=0.592).结论益心方治疗气虚血瘀型UAP安全有效,且可降低血黏度.

目的:从能量代谢方面探讨参附益心方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的影响.方法:通过结扎前降支的方法建立心肌梗死后心力衰竭模型,彩色多普勒超声检测大鼠心功能,ELISA试剂盒检测大鼠血浆中BNP、COLⅠ、COLⅢ含量,Masson染色观察心肌组织胶原纤维及肌纤维的形态和分布,荧光探针JC-1检测线粒体膜电位,RT-PCR检测线粒体功能相关因子ND-1、ND-2、COX、Tfam基因表达,Western blot方法检测高能磷酸盐代谢关键酶CK、ANT蛋白表达.结果:与模型组比较,参附益心方高剂量、辅酶Q10均可显著提高心肌梗死后心力衰竭大鼠LVEF和LVFS,减小LVESD,降低血浆BNP、COL Ⅰ、COL Ⅲ含量,提高线粒体膜电位,提高线粒体DNA相关因子ND-1、ND-2、COX、Tfam基因表达及高能磷酸盐代谢关键酶CK、ANT蛋白表达(P＜0.05).结论:参附益心方能够改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体结构和功能,提高线粒体氧化磷酸化能力及高能化合物生成,进而改善心功能.