目的:探讨改良兰氏+反向双Z法腭裂手术对患儿发音的影响.方法:选取2013年2月-2016年1月行改良兰氏法+软腭双层"Z"形三角瓣修复法的30例腭裂患儿为观察组,选取既往予以兰氏两瓣法进行治疗的30例腭裂患儿为对照组.比较两组患儿手术前后腭咽闭合不全率、元音[i]的第二共振峰(F2)、第三共振峰(F3)、F1振幅能量值(A1)、辅音样本冲直条、擦音乱纹出现率以及语音清晰度.结果:两组患儿术后腭咽闭合不全率均低于术前(P<0.05);观察组患儿术后腭咽闭合不全率低于对照组(P<0.05).与手术前相比,两组患儿术后F2、F3高于术前,A1低于术前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿术后F2、F3高于对照组,A1低于对照组(P<0.05).观察组患儿术后辅音样本冲直条、擦音乱纹出现率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).两组患儿术后语音清晰度均高于手术前(P<0.05);观察组患儿术后语音清晰度优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:腭裂手术软腭延长能有效改善腭裂患儿腭咽闭合功能,改善发音.

内眦赘皮表现为内眼角处垂直的半月形皮肤皱襞,遮盖了生理内眼角形态,严重者可使两内眦间距加宽,影响眼部美观.若只行单纯重睑成形术,重睑只能形成“半双”,效果不理想.我们曾采用一种改良的正向Z改形法进行内眦赘皮的矫正,取得了较好效果,但术后早期内眦部瘢痕较明显,恢复时间较长,有的患者难以接受[1].我们根据内眦赘皮的解剖特点,在重睑同时,设计包含内眦角的反向Z成形术矫正内眦赘皮,取得了满意的效果.

目的 探讨孕周＞26周单绒毛膜性双胎妊娠行射频消融减胎术的有效性及安全性.方法 回顾性分析2013年5月至2018年7月在重庆医科大学附属第一医院产科行射频消融减胎术的单绒毛膜性双胎妊娠孕妇51例,收集孕妇基本资料、减胎术情况(包括消融时间、功率、循环次数等)、围产期母胎并发症、妊娠结局等临床资料.以减胎孕周为分组依据,将孕妇分为＞26周组(17例)与≤26周组(34例),比较2组孕妇术后妊娠结局.采用t检验、秩和检验、χ2检验或Fisher精确概率法对数据进行统计学分析. 结果 (1)51例孕妇减胎手术指征包括双胎之一畸形、双胎输血综合征、双胎反向动脉灌注序列征和选择性胎儿生长受限[45.1%(23/51)、15.7%(8/51)、19.6%(10/51)和19.6%(10/51)],其中＞26周组手术指征构成(12/17、1/17、0/17和4/17)与≤26周组[32.4%(11/34)、20.6%(7/34)、29.4%(10/34)和17.7%(6/34)]比较差异具有统计学意义(P=0.009).＞26周组孕妇术中消融时间长于≤26周组[M(min～max),20(7～40)与15(3～29) min,Z=2.550,P=0.011].(2)51例孕妇减胎孕周(23.7±4.7)周,范围为15周 +1～32周 +6;术后保留胎儿总存活率为86.3%(44/51),早产的发生率为50.0%(22/44).＞26周组与≤26周组减胎孕周分别为(28.9±2.5)和(21.1±3.1)周,范围分别为26周 +1～32周 +6和15周 +1～25周 +2.减胎孕周＞26周组术后保留胎儿存活率[17/17与79.4%(27/34)]及早产的发生率[12/17与37.0%(10/27),χ2=4.697]均高于≤26周组(P值均＜0.05). 结论 与减胎孕周≤26周的孕妇相比,减胎孕周＞26周的孕妇手术指征主要为双胎之一畸形,尽管可能增加早产的风险,但保留胎儿的存活率较高,术后母婴并发症并未明显增加.因此,射频消融减胎术应用于减胎孕周＞26周的孕妇是相对安全有效的.

目的:应用Furlow腭成形术和两瓣法对腭裂患者进行修复,评估并比较其术后语音效果及腭咽闭合功能,为进一步的语音治疗或手术治疗提供依据,同时预测可能影响术后效果的因素.方法:选取2010年1月～2016年12月来武汉大学口腔医院唇腭裂专科就诊的84例腭裂患者,其中男40例,女44例,年龄8～12个月,采用Furlow腭成形术进行修复者为45例,两瓣法39例,术者均为同一资深的手术医师.术后定期随访3～5年,由专业语音师评估其语音效果,拍摄头影测量侧位片并用鼻咽纤维镜检测其腭咽闭合情况.结果:Furlow腭成形术的患者与两瓣法的患者在术后PSA评分,the need ratio(咽腔深度/软腭长度,PW/PU)、矢状位软腭运动闭合程度(BC/BD)及腭咽闭合率等指标有统计学差异(P<0.05);而在软腭上抬角度∠B2 PC2上没有统计学差异.结论:Furlow腭成形术和两瓣法均能有效修复腭裂患者,Furlow腭成形术结合腭帆提肌重建和反向双Z成形能获得更好的腭咽闭合和语音效果.

目的 观察关节镜下全内可调袢钢板双悬吊技术重建后交叉韧带的临床疗效.方法 回顾性分析2015年9月至2017年5月首都医科大学附属北京友谊医院收治的采用关节镜下全内可调袢钢板双悬吊技术治疗单纯PCL损伤患者25例.移植物为自体半腱肌腱.由内向外钻股骨隧道,反向钻由内向外钻胫骨骨隧道.股骨及胫骨端均采用可调袢悬吊固定.通过体征检查、Lysholm评分及国际膝关节文献管理委员会评分(IKDC)评分来评价手术疗效.结果 25例手术均顺利完成,无并发症发生.所有患者术后获3年以上随访.术后胫骨下陷征阳性0例,与术前阳性25例比较,差异具有统计学意义(Z=-5.000,P<0.001);术后Lachman征为阴性或I度阳性,与术前II度和III度阳性比较,差异具有统计学意义(Z=-4.716,P<0.001);术后后抽屉试验为阴性或I度阳性,与术前II度和III度阳性比较,差异具有统计学意义(Z=-4.540,P<0.001).术后Lysholm评分为78～92分,平均(85.1±4.9)分,与术前36～84分,平均(42.7±5.4)比较,差异具有统计学意义(t=-32.120,P<0.001).终末随访IKDC评分为77～90分,平均(83.1±2.7)分,与术前33～78分,平均(47.0±5.7)分比较,差异具有统计学意义(t=-39.331,P<0.001).患者运动能力提高,总满意率为92％.结论 关节镜下全内可调袢双悬吊技术重建后交叉韧带可取得较好的临床疗效.可调袢的使用可有效利用有限的移植物,减少手术创伤,有利于患者康复和提高疗效.

目前国际上治疗腭裂继发腭咽闭合不全的常用术式包括咽后壁瓣成形术、腭咽肌瓣成形术和Furlow瓣(双反向Z形瓣).多导睡眠监测(polysomnography,PSG)结合主诉症状表明,部分腭裂术后腭咽闭合不全患者在接受咽成形术后会出现不同程度的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS),轻症者可自行缓解,严重者需采用吸氧或呼吸机治疗,极少数需手术摘除或松解咽瓣.儿童与成人在咽后壁瓣成形术后发生OSAHS的概率无显著差异,但儿童的病情较成人严重.术前已有OSAHS的患者,咽成形术后症状可能加重.在对不同术式患者的短期随访(≤6个月)中发现,Furlow瓣术后发生OSAHS的概率最低,腭咽肌瓣成形术次之,咽后壁瓣成形术最高.大于1年的随访显示,3种手术后OSAHS发病率无显著差异.目前对腭裂患者腭咽闭合不全的手术治疗尚无统一术式,各种手术方法术后OSAHS的发病率仍存在争议,应将PSG检查作为咽成形术围术期常规检查,以便更准确地评估不同术式对睡眠呼吸障碍的影响.

自1987年7月至1989年1月，应用Furlow反向双“Z”成形术修复腭裂12例。计单侧完全性腭裂7例，不完全腭裂1例，软腭裂2例，双侧完全性腭裂2例。男性7，女性5。最大年龄25岁，最小3岁。效果较满意。本文详细介绍了手术方法和初步经验体会。

腭裂术后腭咽闭合不全(velopharyngeal insufficien-cy,VPI)是腭裂修复术后常见的并发症,初次接受腭裂修复术的患者中术后约有4.9％～27％存在不同程度的腭咽闭合不全,最终导致异常语音[1-8].手术矫正被认为是矫正腭裂术后VPI最有效的方法之一,其中Furlow's反向双Z法(Furlow's double opposing Z meth-od,Furlow法)被用作矫正VPI已经有30余年的历史,如今Furlow法因其可以在矫正VPI的同时,又可以明显降低诸如阻塞性睡眠呼吸暂停(obstructive sleep ap-nea,OSA)等术后并发症的几率,因而广受青睐.然而,Furlow法矫正腭裂术后VPI的手术效果受到诸多因素的影响.本文回顾过往相关研究,从主要因素及次要因素两个方面,对Furlow法矫正VPI的影响因素展开综述.

本研究旨在建立一种基于双荧光素酶报告基因检测体系的法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)激动剂细胞筛选体系,以满足对FXR激动剂先导化合物的高通量筛选.通过在报告基因质粒pGL4-luc2P-Hygro中的萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,Luc)基因上游克隆并插入来自FXR靶基因的FXR反应元件(FXR response element,FXRE)片段,构建用于筛选FXR激动剂的报告基因质粒,并结合海肾荧光素酶内参质粒,建立能够有效反映药物对FXR激动效应的双荧光素酶报告基因细胞检测体系.通过一系列优化实验,比较了过表达RXR、鼠源和人源FXR、不同的FXRE片段、FXR过表达质粒与报告基因质粒的混合比对筛选体系诱导效率和灵敏度的影响.根据上述结果,最终确定了优化条件,优化后体系Z因子达到0.83.本研究建立了一种用于FXR激动剂筛选的改良的基于双荧光素酶报告基因检测体系的细胞筛选体系,其主要特征在于,使用多段FXR靶基因上的FXRE片段叠加组成一种新型的增强型FXRE元件,而非传统的反向重复序列-1(inverted repeats-1,IR-1)片段的叠加,为FXR激动剂的发现提供了更好的手段和工具.

目的 通过构建克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)模拟病毒入胞、基因转录及蛋白翻译能力的病毒样颗粒(tecVLP)并建立细胞感染模型,研究白叶藤天然衍生物抗CCHFV的效果.方法 首先通过反向遗传学系统构建CCHFV 微基因组质粒(PSMART-LCK-vL-NanoLuc)及辅助质粒(PCAGGS-LCK-L、PCAGGS-M、PCAGGS-S、PCAGGS-T7),在此基础上利用共转染方式构建包含NanoLuc荧光素酶报告基因微基因组及所有结构蛋白的CCHFV tecVLP,利用qRT-PCR和Nano-Glo? Luciferase Assay试剂盒检测被感染细胞中NanoLuc荧光强度及基因的相对表达,以此建立CCHFV tecVLP细胞感染模型.最后利用该模型研究白叶藤天然衍生物的抗CCHFV效果.结果 经PCR验证后,微基因组质粒PSMART-LCK-vL-NanoLuc在560 bp左右检测到预期大小的目的条带;辅助质粒PCAGGS-T7在2 800 bp左右检测到预期大小的目的条带;经双酶切鉴定后,辅助质粒PCAGGS-LCKF-L、PCAGGS-M以及PCAGGS-S分别在11 000、5 000和1 600 bp处检测到预期大小的目的条带.电镜结果显示,在上清及细胞中均观察到了直径大小约50 nm的CCHFV tecVLP颗粒,滴度为105 TCID50.与对照组比较,CCHFV tecVLP感染组细胞的NanoLuc荧光值和基因相对表达明显升高,差异均有统计学意义(t=80.63、28.35,P均＜0.001).上述结果表明成功建立了 CCHFV tecVLP的细胞感染模型,并利用该模型进行后续研究.qRT-PCR结果显示,白叶藤天然衍生物在浓度为50和100 μmol/L时,可显著降低已感染CCHFV tecVLP的Huh7细胞中NanoLuc基因的相对表达(t=32.59、34.43,P均＜0.001);Nano-Glo? Luciferase Assay试剂盒检测结果显示,白叶藤天然衍生物在浓度为50和100μmol/L时,亦可显著降低已感染CCHFV tecVLP的Huh7细胞中NanoLuc荧光强度(t=152.60、182.00,P均＜0.001).根据Auto Dock评分显示,白叶藤天然衍生物(Z24)与CCHFV-核衣壳蛋白(NP)结合能为-6.42 kcal/mol,绝对值＞5,结合度良好,稳定性较强.结论 白叶藤天然衍生物对CCHFV tecVLP具有明显的抑制效果,该抑制效果主要作用于病毒复制周期的转录及翻译阶段.