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假单胞菌Pseudomonas sp.AT39反式茴脑氧化酶基因(tao)对产茴香酸的影响
编辑人员丨2023/8/5
tao基因编码反式茴脑氧化酶,参与反式茴脑的降解过程.通过自杀质粒pK18mob及广宿主表达质粒pBBR1 MCS-5分别构建突变菌AT39/btao、重组菌AT39/tao-pBBR1 MCS5及互补菌HAT39/btao.对构建的菌株进行TAO酶比活力测定,结果发现重组菌AT39/tao-pBBR1 MCS5的酶比活力显著增加,比野生菌AT39提升了35.23％.茴香酸转化量检测结果显示,重组菌AT39/tao-pBBR1MCS5代谢生成的茴香酸产量为3.55 g/L,同比野生菌AT39增加了约4倍.结果为下一步利用和改造tao基因构建工程菌生产茴香酸奠定了基础.
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编辑人员丨2023/8/5
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假单胞菌(Pseudomonas sp.)AT39突变体库的构建及反式茴脑利用相关基因(tao)的克隆
编辑人员丨2023/8/5
生物转化反式茴脑生成的苯丙素类芳香物质被视为天然原料,能广泛应用于食品加工、香料生产及医药等领域.以能代谢反式茴脑的假单胞菌(Pseudomonas sp.)AT39为出发菌株,采用转座子(pTnMod?RKm')插入突变构建了含有6137个突变体的突变体库,筛选出44株反式茴脑代谢受影响的突变株.检测突变菌及野生菌的反式茴脑利用能力,发现突变菌AT39?15的反式茴脑代谢能力是野生菌的14％.利用hiTAIL?PCR技术对突变菌AT39?15转座子侧翼序列扩增,获得插入突变的基因,测序结果显示基因大小为1047 bp,基因序列与恶臭假单胞菌(Pseudomonas sp.)JYR?1的反式茴脑氧化酶基因(tao)一致性达100％.研究结果为下一步构建基因工程菌提供了基因资源.
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编辑人员丨2023/8/5
