目的:研制人血管内皮生长因子（hVEGF）放射免疫测定（RIA）试剂盒和化学发光免疫测定（CLIA）试剂盒，探讨其在早期肺癌和结直肠癌诊断中的价值。方法:以2种试剂盒的技术指标为参考依据建立检测方法，确定磁微粒包被抗体的工艺方法及 125I和吖啶酯标记抗体的工艺方法，并评价2种试剂盒的分析灵敏度、精密度、回收率。通过检测临床癌症（早期肺癌和结直肠癌）患者和正常人血清样本中的hVEGF，评价2种试剂盒对早期肿瘤诊断的灵敏度和特异度。2组间的比较采用两独立样本 t检验。 结果:磁微粒与包被抗体的最佳比例为1 ml磁微粒∶1 mg抗体； 125I与标记抗体的最佳比例为55.5 MBq 125I∶0.1 mg抗体，吖啶酯与标记抗体的最佳比例为25 μg吖啶酯∶0.2 mg抗体。RIA和CLIA试剂盒的分析灵敏度分别为17.6、9.2 pg/ml。在精密度方面，CLIA试剂盒的批内变异性略高于RIA试剂盒，而批间变异性略低于RIA试剂盒。RIA和CLIA试剂盒的平均回收率分别为103.28%和101.85%，说明CLIA试剂盒检测的准确率更高。在临床样本检测方面，2种试剂盒对早期肺癌和结直肠癌的临床诊断灵敏度和特异度均可达90%以上。RIA试剂盒和CLIA试剂盒检测出正常人血清样本的特异度分别为98.11%（104/106）和99.06%（105/106）。癌症患者与正常人hVEGF测定值相比，差异均有统计学意义（ t=-16.695~-14.920，均 P<0.01）。 结论:2种试剂盒各项技术指标较好，其中CLIA试剂盒的分析灵敏度和特异度更高，在早期肺癌和结直肠癌的诊断中具有一定的临床价值。

目的:采用间接法建立适合本实验室的反三碘甲状腺原氨酸(rT 3)生物参考区间。 方法:回顾性分析2019年4月至2019年9月间北京中医药大学东直门医院住院患者797例(男332例，女465例，年龄12~95岁)，筛选甲状腺激素及相关抗体均正常且无甲状腺结节或明显甲状腺肿的人群，并进一步排除各种急慢性疾病、相关药物等影响rT 3检测值的参考个体。rT 3检测采用化学发光免疫分析法。筛选出的参考个体按年龄进行分组，采用两独立样本 t检验、单因素方差分析和最小显著差异 t检验分析数据。非参数排序法建立rT 3生物参考区间，选取rT 3数据分布的2.5%和97.5%百分位值作为上、下参考限的取值。采用简单随机抽样法抽取符合研究纳入及排除标准的健康体格检查者和住院患者各20例，验证参考区间。 结果:共有159例符合纳入及排除标准的参考个体入组，其中男66例，女93例，年龄23~87岁。23~29岁(4例)、30~39岁(18例)、40~49岁(29例)、50~59岁(43例)、60~69岁(40例)、70~79岁(19例)和80岁以上(6例)组的rT 3值分别为(0.62±0.16)、(0.63±0.12)、(0.64±0.11)、(0.61±0.11)、(0.65±0.14)、(0.65±0.11)和(0.79±0.10) μg/L，不同年龄组rT 3的差异有统计学意义( F＝2.17， P＝0.049)，80岁以上组与其他各年龄组rT 3差异均有统计学意义(均 P<0.05)，其余各组间差异均无统计学意义(均 P>0.05)。80岁以下参考个体男性和女性的rT 3值分别为(0.62±0.11)和(0.64±0.12)μg/L，差异无统计学意义( t＝－0.81, P＝0.420)。新建立适合20岁以上、80岁以下人群的rT 3生物参考区间为0.47~0.92 μg/L，与试剂说明书参考区间(0.20~0.95 μg/L)比较，参考下限数值明显提高。20名健康体格检查者和20例住院患者rT 3检测值分别为0.57~0.82 μg/L、0.48~0.77 μg/L，均在该参考范围内。 结论:本研究建立的rT 3生物参考区间具有临床实际应用价值，但其年龄适用范围还需进一步完善。

目的:探讨洗脱前醛固酮/肾素浓度比值（ADRR）筛查中国人群原发性醛固酮增多症（PA）的切点值，降低PA筛查中洗脱药物带来的风险。方法:入选2017年1月到2019年10月在中国医学科学院阜外医院高血压病房住院的高血压患者。参照美国2016年PA诊断指南及我国2016年PA诊断共识进行PA诊断。测定药物洗脱前后的血醛固酮浓度（PAC）、肾素浓度（DRC）及ADRR。绘制ADRR的受试者工作特征（ROC）曲线并以Youden指数最大时，确定最佳切点值。结果:入选高血压患者542例，其中确诊为原发性高血压（EHT）患者467例（男297例，女170例），确诊为PA患者75例（男51例，女24例）。PA患者洗脱前后的PAC、ADRR均高于EHT患者[150.0（130.0，210.0）比120.0（80.0，170.0）ng/L，170.0（120.0，260.0）比130.0（90.0，180.0）ng/L；28.9（15.9，63.5）比4.3（1.9，11.8）（ng/L）/（mU/L）, 55.6（39.0，109.0）比9.8（4.5，21.3）（ng/L）/(mU/L),P ≤0.001]，而洗脱前后的DRC均低于EHT[4.0（2.0，10.0）比27.0（10.0，64.0）mU/L, 3.0（2.0，4.0）比12.2（5.0，27.0）mU/L, P<0.001]。EHT及PA组洗脱后均为PAC升高（ P=0.001， P<0.001），DRC降低（均 P<0.001），ADRR升高（均 P<0.001），差异有统计学意义。洗脱前ADRR的ROC曲线下面积为0.868（95 %CI：0.836~0.895）。洗脱前ADRR以7.8 (ng/L)/(mU/L）为切点值筛查PA的灵敏度、特异度分别为94.7%、66.8%，此时Youden指数最大（0.615）。 结论:洗脱前ADRR >7.8 (ng/L)/(mU/L）可作为切点，在不能进行药物洗脱条件下作为筛查PA的替代指标。

目的:探讨肝细胞铁死亡对糖尿病(DM)大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的影响。方法:采用随机数表法将40只健康雄性SD大鼠分为4组：假手术(Sham)组、HIRI组、DM组、DM+HIRI组。通过连续4周喂养高脂高糖饲料复合腹腔注射链脲佐菌素的方法建立DM模型，并在此基础上采用部分肝血流阻断法建立HIRI损伤模型。采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠胰岛素、肝功能及血脂代谢指标，化学发光法检测肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、多不饱和脂肪酸(PUFA)及脂氧合酶-1(LOX-1)含量，HE染色法评估肝组织病理学变化，蛋白质印迹法检测肝细胞铁死亡相关蛋白长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平。结果:与Sham组相比，DM组大鼠空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数、血清总胆固醇、甘油三酯及肝脏PUFA含量均显著升高，差异具有统计学意义( P<0.05)。HE染色提示DM组大鼠肝细胞呈脂肪变性，DM+HIRI组大鼠肝细胞广泛气球样变及坏死。与HIRI组相比，DM+HIRI组大鼠血清总胆固醇[(5.87±0.76)比(1.34±0.2)mmol/L]、甘油三酯[(2.93±0.47)比(0.71±0.34)mmol/L]、丙氨酸氨基转移酶[(339.5±40.09)比(155.17±18.53)U/L]、天冬氨酸氨基转移酶[(325.50±37.52)比(102.39±22.68)U/L]、PUFA[(21.58±3.01)比(8.12±0.94)mg/g]、LOX-1[(200.81±26.03)比(73.34±10.66)U/mg]含量均显著升高，差异具有统计学意义( P<0.05)。与HIRI组相比，DM+HIRI组ACSL4蛋白表达上调[(0.46±0.06)比(1.02±0.11)]，GPX4蛋白表达下调[(0.43±0.07)比(0.14±0.02)]，差异均具有统计学意义( P<0.05)。 结论:DM大鼠对HIRI的耐受性明显降低，其机制可能与肝细胞脂质代谢异常及铁死亡有关。

目的:建立外周血单个核细胞诱导肝细胞样细胞的方法，初步探讨其在对乙酰氨基酚（APAP）作用下的细胞损伤反应。方法:流式细胞术和免疫荧光法检测外周血分离的单个核细胞表面标志CD45；针对诱导的肝细胞样细胞，倒置显微镜观察细胞形态，实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测肝细胞特异性基因细胞色素P450（CYP）1A2、CYP3A4、CYP2C9、白蛋白（ALB）、甲胎蛋白（AFP）、肝细胞核因子（HNF）4α mRNA的表达水平；免疫荧光法检测肝细胞标志物AFP、HNF4α、ALB在细胞中蛋白的表达水平；生化分析仪检测肝细胞特有的AFP、ALB、尿素的分泌功能；荧光素酶化学发光法检测肝细胞关键药物代谢酶CYP3A4酶活性；肝损伤药物APAP作用肝细胞样细胞后，比色测定法检测肝细胞损伤指标丙氨酸转氨酶（ALT）。采用 t检验与秩和检验比较数据间的统计学差异。 结果:外周血分离的单个核细胞表面标志CD45表达阳性率约98%，诱导第15天细胞形态出现肝细胞样变化；与分离的单个核细胞相比，CYP1A2、CYP3A4 、CYP2C9、ALB、AFP、HNF4α mRNA明显升高，AFP、ALB，HNF4α蛋白表达水平均升高，AFP、ALB、尿素的分泌功能增强；与原代肝细胞相比CYP1A2、CYP2C9、AFP、HNF4α mRNA、CYP3A4 mRNA无降低，ALB mRNA较低，AFP、ALB、HNF4α蛋白在细胞中的表达水平无降低，AFP、ALB、尿素的分泌功能无降低。此外肝细胞样细胞产生了与原代肝细胞相似的CYP3A4酶活性;APAP孵育较不含APAP孵育的肝细胞样细胞会释放更多的ALT；在APAP作用下肝细胞样细胞相比分离的单个核细胞ALT释放增加。结论:外周血单个核细胞能诱导为具有肝细胞部分特性的肝细胞样细胞，通过诱导具有了肝细胞关键药物代谢酶CYP3A4活性，肝损伤药物APAP作用下，肝细胞样细胞初步体现了肝细胞损伤时ALT分泌的特征。

目的:比较临床常用的罗氏全自动免疫分析系统（评估方法）与液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS，参比方法）检测25-羟基维生素D［25（OH）D］的一致性。方法:收集2019年5—6月解放军总医院第二医学中心及第五医学中心健康查体剩余血清标本909份，分别由评估方法及LC-MS/MS检测25（OH）D。用Passing-Bablok回归、组内相关系数（ICC）、Bland-Altman图分析2种检测方法的一致性和偏差；加权Kappa检验分析评估方法用于临床判断维生素D正常、不足、缺乏与LC-MS/MS的一致性。结果:评估方法检测结果与LC-MS/MS比较，差异有统计学意义（ P<0.001）。评估方法与LC-MS/MS的Passing-Bablok回归方程斜率为0.962（95% CI 0.919~1.007），截距为-0.185（95% CI -1.191~0.745），提示评估方法与LC-MS/MS一致性较高。ICC为0.765（95% CI 0.735~0.792）。Bland-Altman图显示评估方法与LC-MS/MS的平均偏差为-0.902 ng/ml（0.300%）。评估方法判断维生素D正常、不足、缺乏与LC-MS/MS的总符合率为83.39%（758/909），加权Kappa=0.790。 结论:评估方法检测25（OH）D与LC-MS/MS相关性可以接受，一致性较好。临床在评价维生素D营养状况时应考虑不同方法学间存在的差异，建议临床检验实验室自建方法学相对应的参考范围。

目的:探讨血清中期因子（MK）、促甲状腺激素（TSH）联合检测对分化型甲状腺癌（DTC）的辅助诊断价值。方法:选择孝感市中心医院2019年3月至2020年12月 131I治疗的术后DTC患者71例（DTC），另收集同期接受手术治疗的甲状腺良性病变患者143例（良性病变组），收集患者治疗前肝肾功能指标、抗甲状腺球蛋白抗体（TgAb）阳性率、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）阳性率等临床资料，采集空腹血样，全自动电化学发光免疫分析系统检测患者血清游离甲状腺素（FT 4）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT 3）、TSH水平，酶联免疫吸附测定法检测血清MK水平。采用二元Logistic回归模型筛选发生DTC的独立危险因素。绘制受试者工作特征（ROC）曲线评价MK、TSH、MK联合TSH辅助诊断DTC及其分期的效能。 结果:DTC组患者血清TSH、MK水平均高于良性病变组患者[（3.55 ± 0.61） mU/L比（2.97 ± 0.46） mU/L、（394.25 ± 63.36） ng/L比（311.45 ± 42.66） ng/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。血清TSH、MK水平升高为患者发生DTC的独立危险因素。MK联合TSH对DTC进行诊断，ROC曲线下面积（AUC）、灵敏度、特异度分别高于单独检测MK和TSH水平[0.925比0.859和0.783、83.10%比78.87%和73.24%、89.51%比85.31%和79.02%]，差异有统计学意义（ P<0.05）。DTC组Ⅲ、Ⅳ期患者血清TSH、MK水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者[（3.79 ± 0.65） mU/L比（3.42 ± 0.56） mU/L、（427.88 ± 52.73） ng/L比（311.45 ± 42.66） ng/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。MK联合TSH对DTC不同分期进行诊断，AUC、灵敏度、特异度分别高于单独检测MK和TSH水平（0.822比0.657和0.666、73.90%比56.52%和56.52%、83.33%比77.08%和79.17%），差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:血清TSH 、MK水平与DTC具有一定相关性，二者联合对DTC的诊断及分期具有一定的临床价值。

目的:采用纳米磁微粒化学发光免疫技术建立尘螨过敏原第1、2组分(Der p 1、Der p 2)特异性免疫球蛋白E(sIgE)的定量检测方法。方法:通过优化试剂组份和反应模式，评估纳米磁微粒化学发光免疫技术检测Der p 1、Der p 2 sIgE的各项性能指标。同时检测50例疑似尘螨过敏患者血清Der p 1、Der p 2 sIgE水平，与Phadia系统测定结果为标准进行比较，其一致性的比较采用 Kappa检验。 结果:最佳实验体系为：磁微粒用量25 μg，反应缓冲液(pH值7.4)含0.1 mol/L Tris-HCl、质量分数0.25%酪蛋白，包被液含20 mmol/L磷酸缓冲液(PB)、质量分数1%牛血清白蛋白(BSA)，发光增强液含体积分数0.05% Triton X-100，采用两步法免疫反应，样本量为20 μl，反应温度为37 ℃。检测体系最低检出限小于0.01 kU/L，线性范围0.2~100.0 kU/L，批内、批间精密度分别小于5%、7%，Der p 1和Der p 2交叉污染率分别为0.19%、0.21%。与Phadia系统测定结果比较，Der p 1阳性、阴性符合率分别为78.0%(32/41)、9/9，一致性较好( Kappa＝0.65， P＝0.008)；Der p 2阳性、阴性符合率分别为93.3%(28/30)、85.0%(17/20)，一致性也较好( Kappa＝0.79， P＝0.003)。 结论:成功建立了尘螨过敏原Der p 1、Der p 2 sIgE纳米磁微粒化学发光免疫检测方法，其各项性能指标良好，与Phadia系统有较好的一致性。

目的:采用化学发光免疫分析法检测健康未孕及妊娠期女性抗心磷脂抗体（anticardiolipin antibody，aCL）和抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体（anti-β2-glycoprotein Ⅰ antibody，aβ2GPⅠ）-IgA/IgG/IgM的水平，并探讨不同孕期的变化。方法:前瞻性纳入2020年4月至2021年8月于青岛大学附属山东省妇幼保健院进行孕前优生健康检查的无不良妊娠史的健康孕龄妇女（非孕组）和产前检查的妊娠经过正常的孕妇（妊娠期组）。采用BIO-FLASH化学发光免疫分析仪检测aCL和aβ2GPⅠ- IgA/IgG/IgM水平，计算 P95和 P99。采用Mann-Whitney U检验比较未孕组和妊娠期组aCL和aβ2GPⅠ- IgA/IgG/IgM的水平，采用Kruskal-Wallis H检验比较早、中、晚不同孕期各抗体的变化，并采用Spearman相关分析孕期与aCL、aβ2GPⅠ-IgA/IgG/IgM的相关性。 结果:符合纳入标准454例，因各种原因排除19例后，余435例纳入分析。未孕组110例，妊娠期组325例，其中早孕期（≤13周 +6）110例，中孕期（孕14 +0~27周 +6）110例，晚孕期（≥28周）105例。未孕组aCL-IgA/IgG/IgM和aβ2GPⅠ- IgA/IgG/IgM的 P99分别为7.31、14.70、7.92、3.58、13.60和4.95 CU，妊娠期组aCL-IgA/IgG/IgM和aβ2GPⅠ-IgA/IgG/IgM P99分别为5.90、12.78、5.70、1.60、10.65和3.90 CU，均低于试剂制造商所给出的20 CU的界值。妊娠期组aCL-IgA/IgG/IgM和aβ2GPⅠ-IgG/IgM水平均明显低于未孕组［aCL-IgA：1.90 CU（1.40~2.70 CU）与2.90 CU（2.20~3.83 CU）， Z=－7.14；aCL-IgG：3.00 CU（2.20~4.50 CU）与6.10 CU（4.20~7.83 CU）， Z=－10.26；aCL-IgM：1.40 CU（1.10~2.30 CU）与2.65 CU（2.08~3.73 CU）， Z=－8.87；aβ2GPⅠ-IgG：3.50 CU（2.60~4.90 CU）与4.75 CU（3.60~5.93 CU）， Z=－5.45；aβ2GPⅠ- IgM：0.70 CU（0.50~1.20 CU）与1.00 CU（0.60~1.53 CU）， Z=－3.73； P值均<0.001］。晚孕期aCL-IgA水平高于早孕期和中孕期；与早孕期相比，中孕期aCL-IgG/IgM水平降低，中、晚孕期aβ2GPⅠ-　IgG水平降低（ P值均<0.05）。Spearman相关分析显示，aCL-IgG/IgM、aβ2GPⅠ-IgA/IgM与孕期（早、中、晚孕期）无明显相关性（ P值均>0.05）。aCL-IgA和aβ2GPⅠ-IgG水平与孕期有相关性，但相关性较弱（ r值分别为0.28和－0.49， P值均<0.001）。 结论:正常妊娠及非孕期妇女aCL和aβ2GPⅠ- IgA/IgG/IgM的 P99低于试剂制造商所给出的20 CU的界值。妊娠后aCL-IgA/IgG/IgM和aβ2GPⅠ- IgG/IgM较非孕期降低并随孕期发生波动，但与孕期无相关性。各实验室有必要确定实验室特异的aCL、aβ2GPⅠ-IgA/IgG/IgM参考值范围。

随着现代社会信息高速传播，我国居民越来越注重科学化的育儿理念，使得儿童预防保健行业得到了快速发展。儿童生长发育规律极其复杂，需要根据不同的生长发育评估角度，检测不同的指标。人生长激素（hGH）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）、甲状腺激素（thyroid hormone）、性激素（sex hormone）、抗苗勒管激素（AMH）及25-羟基维生素D（25-OH VD）等是监测儿童生长发育情况的常用指标。本文旨在阐释生长发育常用指标的概念与特点，概述近年来研发的生长发育评估常用指标的检测方法，为儿童预防保健选择合适的检测指标提供参考。