目的 探讨血清可溶性T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(sTim-3)和半乳糖凝集素-9(Galectin-9)对重症急性肾损伤(AKI)患者连续肾脏替代治疗(CRRT)短期预后的评估价值.方法 选取2021 年3 月—2023 年3月收治的重症AKI 136 例作为研究对象.根据重症AKI患者CRRT开始90d内生存情况(短期预后),将病死患者纳入病死组(42 例),存活患者纳入生存组(94 例).采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清sTim-3 和Galectin-9 对重症AKI患者CRRT短期预后预测价值,采用多因素Logistic回归分析探讨重症AKI患者CRRT短期预后影响因素.结果 病死组血清sTim-3 和Galectin-9 均高于生存组(P<0.01);血清sTim-3 和Galectin-9 预测重症AKI患者CRRT短期预后的曲线下面积分别为0.762 和0.847,二者联合预测的曲线下面积为0.914.多因素Logistic回归分析显示,sTim-3≥17.00 ng/L、Galectin-9≥4.00 ng/L、急性生理与慢性健康状况评分系统Ⅱ评分≥20 分是重症AKI患者CRRT 90d病死的危险因素(P<0.05,P<0.01).结论 血清sTim-3 和Galectin-9 升高与重症AKI患者CRRT短期预后不良密切相关,可作为评估重症AKI患者CRRT短期预后不良的生物学指标,且二者联合预测效能更高.

该研究通过慢病毒感染的方式构建携带T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3及可结晶区域[T cell immunoglobulin and mucin domain 3 and fragment of crystallizable,TIM-3(Fc)]目的基因的稳定转染细胞株并检测TIM-3(Fc)分泌蛋白的表达.设计特异性引物PCR扩增TIM-3 (Fc)片段,重组插入慢病毒表达载体pCD513中并鉴定阳性克隆,无内毒素提取质粒pCD513-TIM-3(Fc)、pSPAX2和pMD2.G共转染293T细胞包装慢病毒,再利用慢病毒感染悬浮HEK293细胞,最后通过嘌呤霉素筛选得到稳定转染细胞株293/TIM-3.再通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot, WB)检测TIM-3(Fc)目的基因在转录和翻译水平上的表达,用时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)检测细胞产生TIM-3(Fc)分泌蛋白的能力.成功构建了pCD513-TIM-3(Fc)慢病毒表达载体,qRT-PCR、WB和TRFIA检测表明,293/TIM-3细胞株成功表达了TIM-3(Fc)分泌蛋白.成功构建了重组人可溶性TIM-3稳定转染细胞株293/TIM-3并成功表达了TIM-3(Fc)分泌蛋白,为进一步研究可溶性TIM-3蛋白的生物学功能提供基础.

目的 观察慢性乙型肝炎(CHB)患者血清DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)、可溶性血管黏附蛋白-1(sVAP-1)水平变化,并分析sVAP-1、DNMT1、Tim-3与肝功能指标及炎症因子的相关性.方法 选取2018年4月至2020年7月期间西安市第八医院肝病科收治的93例CHB患者为研究对象,将患者分为乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性组(HBV DNA>1.0×103 copy/mL,n=53)和HBV DNA阴性组(HBV DNA≤1.0×103 copy/mL,n=40),另选取同期来我院体检的50例健康志愿者为对照组.比较三组受检者的血清sVAP-1、DNMT1、Tim-3水平及肝功能指标及炎症因子水平,采用Pearson线性相关性分析患者血清sVAP-1、DNMT1、Tim-3水平与肝功能指标及炎症因子的相关性.结果 HBV DNA阳性组患者的血清sVAP-1、DNMT1、Tim-3水平分别为(762.75±102.05)ng/mL、(51.37±5.29)μg/L、(24.58±4.39)％,HBV DNA阴性组分别为(493.13±93.11)ng/mL、(38.59±4.24)μg/L、(13.28±2.35)％,两组均明显高于对照组的(184.64±54.19)ng/mL、(25.66±3.18)μg/L、(5.16±0.93)％,且HBV DNA阳性组的上述各项指标明显高于HBV DNA阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05);HBV DNA阳性组患者的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平分别为(31.53±2.87)pg/mL、(21.29±4.43)ng/L、(52.96±9.32)U/L、(49.31±6.06)U/L、(37.29±3.25)μmol/L,HBV DNA阴性组分别为(23.24±2.68)pg/mL、(13.56±3.41)ng/L、(38.25±5.26)U/L、(35.68±5.17)U/L、(19.71±4.36)μmol/L,两组均明显高于对照组的(15.18±2.77)pg/mL、(4.72±0.93)ng/L、(18.38±3.09)U/L、(16.19±3.23)U/L、(9.23±2.25)μmol/L,且HBV DNA阳性组的上述各项指标明显高于HBV DNA阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05);HBV DNA阳性组和HBV DNA阴性组患者的白蛋白(Alb)水平分别为(39.43±4.05)g/L,(51.57±5.25)g/L,明显低于对照组的(66.89±6.12)g/L,且HBV DNA阳性组明显低于HBV DNA阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson线性相关性分析结果显示,sVAP-1、DNMT1、Tim-3与TNF-α、IL-4、ALT、AST、TBIL呈正相关(P<0.05),而与Alb呈负相关(P<0.05).结论 CHB患者中的sVAP-1、DNMT1、Tim-3水平存在异常升高,且与肝功能指标及炎症因子指标存在一定的相关性,可考虑作为CHB诊断的血清学指标之一.