病例1,患者男,44岁,农民.因"寒战、发热、头痛1周"于2012年12月18日入院,病程中伴有恶心、呕吐.患者2012年12月6日自非洲安哥拉回国,12月11日起出现寒战、发热,体温最高40℃,发热无规律,出汗明显.病初拟"呼吸道感染"于某卫生院就诊,病情无明显好转,并开始出现恶心、呕吐,12月18日转我院就诊,并收治入院,查体:体温37.4℃,脉搏80次/min,呼吸20次/min,血压113/70 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),神志清,精神软,颈抵抗,脾肋缘下可及,病理征阴性.既往体健,否认肝炎病史,不饮酒.查血常规:白细胞(WBC) 6.2 ×109/L,中性粒细胞0.646,红细胞(RBC) 4.73×1012/L,血红蛋白(Hb)142 g/L,血小板(PLT)53 ×109/L.肝功能:丙氨酸转氨酸(ALT) 90 U/L,天冬氨酸转氨酶(AST)85 U/L,总胆红素(Tbil)22.9 μmol/L.急查血疟原虫阳性,腰穿查脑脊液压力330 mmH2O.脑脊液蛋白、细胞、糖、氯化物正常.肝胆脾胰彩超:脾肿大.骨髓常规:巨核细胞数量增多,产板功能差.血涂片发现恶性疟原虫,并经当地疾控部门确认,诊断为恶性疟(脑型).即予青蒿琥酯针(60 mg/支)抗疟治疗,首剂加倍,后60 mg/d,1次/d,疗程一周后改用双氢青蒿琥酯哌喹片口服2d,同时予糖皮质激素减轻炎性反应,甘露醇脱水降颅压,低分子右旋糖酐改善微循环及护肝等治疗.治疗过程中,患者PLT曾明显下降,最低降至31 ×109/L,经过治疗,患者体温逐渐下降,头痛缓解,复查血涂片未再发现疟原虫,腰椎穿刺复查脑脊液压力复常,血小板指标恢复正常,肝功能好转.

变异链球菌是口腔主要的龋病病原菌.丙氨酸消旋酶通过合成右旋丙氨酸(D-alanine,D-ala)参与细菌细胞壁肽聚糖的生物合成过程,与细菌性疾病密切相关,近年来成为抗菌药物的又一理想靶位.D-环丝氨酸(D-cycloserine,DCS)是丙氨酸消旋酶不可逆性抑制剂.本研究通过聚合酶链反应克隆变异链球菌UA159的smu.1834c基因,经过酶切、连接,构建重组表达质粒pET-smu.1834c,诱导表达重组,纯化蛋白.测定DCS对丙氨酸消旋酶活性的抑制作用.成功诱导表达纯化smu.1834c基因编码蛋白,具有体外催化L-丙氨酸生成D-丙氨酸的活性.发现DCS能够抑制该蛋白的活性.本研究证实变异链球菌smu.1834c基因编码丙氨酸消旋酶.DCS能够抑制其活性,并且呈现一定的剂量相关性.

1病例介绍患者,女,68岁.2017年7月4日因“颈肩部疼痛6年,加重伴颈部活动受限9d”入院.入院症见:颈部及双肩部疼痛,疼痛性质为针刺痛,疼痛程度较重,夜间明显,坐位休息后好转,伴有颈椎活动受限,偶有右侧头部颞区刺痛,左膝部酸痛伴活动受限.否认食物及药物过敏史.体检:体温36.1℃,心率80次·min-1,呼吸率20次·min-1,血压148/73 mmHg(1mmHg=0.133 kPa),颈部皮肤无破溃,颈胸段后凸明显,颈肩部肌肉紧张,双侧C2-4横突压痛,C2-T1棘突下按压后感酸胀不适.颈部活动受限(前屈40°,后伸10°,左侧屈0°,右侧屈10°,左旋20°,右旋25°).四肢血运、活动及感觉尚可.压顶试验及分离试验均(+),头后仰旋颈试验、双侧臂丛神经牵拉试验均阴性,四肢肌力5级,双侧生理反射存在,右侧罗索里莫征(+),余病理征阴性.血生化示:血肌酐55.50 μmol·L-1,血尿素氮4.40 mmol·L-1,丙氨酸氨基转移酶13.10 U·L-1,天冬氨酸氨基转移酶22.50 U·L-1.血常规示:白细胞(WBC)8.12×109·L-1,中性粒细胞比例(NE) 72.6％.入院诊断:颈椎病(混合型).

目的 验证高脂高铁对大鼠脂代谢及肝功能指标的影响.方法 大鼠分为正常组、高脂组、高铁组、高脂高铁组、高脂去铁组,每组24只.分别自由摄取普通饲料和高脂饲料的同时,高铁组、高脂高铁组大鼠隔日肌肉注射右旋糖酐铁50 mg/kg;高脂去铁组大鼠处死前一个月尾静脉注射甲磺酸去铁铵30 mg/kg,3次/周;分别于干预后4个月、5个月、6个月选取8只大鼠,检测血清血清总胆固(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)含量.结果 与对照组比较,干预后4个月、5个月、6个月,高脂组、高脂高铁组、高脂去铁组的血清TC、TG、LDL-C水平均显著升高,HDL-C水平降低(P均＜0.05);而高脂高铁组的TC、TG、LDL-C、ALT(4个月)、AST(5个月)水平明显高于高脂饲料组;与对照组比较高铁组ALT、AST水平显著升高;与高脂组比较,高脂高铁组ALT(4个月)、AST(5个月)水平升高.结论 高铁负荷可加剧高脂摄食所致的脂代谢异常.

为探讨南美天胡荽对其他植物种子萌发的影响以及筛选影响其他植物的主要化合物,该文采用种子萌发试验、气相色谱-质谱联用以及液相色谱-质谱联用的方法,分析了南美天胡荽不同溶剂浸提液对种子萌发的影响、南美天胡荽植株及其根际土壤浸提液成分.结果表明:(1)南美天胡荽不同溶剂浸提物均具有一定程度的抑制种子萌发作用.(2)气相色谱-质谱分析下,南美天胡荽植株水浸提液中共分离鉴定了35种化合物,其中,邻苯二甲酸二丁酯(15.2％)、10,15-十八烷二元酸(8.58％)、2,4-二叔丁基苯酚(6.81％)相对含量最高;根际土壤水浸提液中共分离鉴定了17种化合物,其中,油酸酰胺(26.47％)、正二十七烷(9.63％)、十六酸乙酯(4.83％)相对含量最高.(3)液相色谱-质谱分析下,南美天胡荽植株水浸提液共分离鉴定了109种化合物,ESI+模式下,L-苯丙氨酸(3483.99 ng?mg-1)、木犀草素(2306.64 ng?mg-1)含量最多,ESI-模式下,右旋奎宁酸(21827.71 ng?mg-1)、绿原酸(12589.25 ng?mg-1)含量最多;根际土壤水浸提液中共分离鉴定了93种化合物,ESI+模式下,丁酸(7660.53 ng?mg-1)、棕榈酰胺(3200.36 ng?mg-1)含量最多,ESI-模式下,正二十八酸(18605.35 ng?mg-1)、蔗糖(12183.23 ng?mg-1)含量最多.(4)南美天胡荽的潜在化感物质主要为脂肪酸类、酰胺类、酯类、芳香酸类化合物,而土壤中直接起化感作用的物质可能为丁酸、正二十八酸、羟基乙酸、油酸酰胺、棕榈酰胺、十六酸乙酯、苯甲酸,其中脂肪酸类化合物输入可能来源于南美天胡荽、土壤微生物和土壤动物,酰胺类、酯类、芳香类化合物则更可能来源于南美天胡荽植株.

目的 通过制作慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化模型,观察逍遥散对肝纤维化的改善作用及对体内铁代谢过程的影响,并通过功效拆方研究,探索逍遥散中疏肝药、健脾药、养血药在整方疗效中的作用及地位.方法 通过腹腔注射右旋糖酐铁50 mg/kg/d,连续7周制作慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化模型,药物干预在造模同时每日通过灌胃的方式给予逍遥散全方、逍遥散去疏肝药、逍遥散去健脾药、逍遥散去养血药、去铁胺(DFO).使用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清铁(SI)、铁蛋白(SF)水平;肝组织进行病理组织学检测,包括HE染色、Masson染色、苦味酸-天狼星红染色等;免疫组化检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原蛋白(COL-1)的表达水平;采用火焰原子吸收光谱法检测大鼠肝组织铁含量.结果 与对照组比较,模型组大鼠肝功能ALT、AST明显升高,病理切片HE染色符合肝纤维化镜下表现,Ishak纤维化评分显著升高,Masson染色、苦味酸-天狼星红染色可见胶原纤维沉积明显,免疫组化结果提示肝组织内α-SMA、COL-1表达显著上升,血清铁、铁蛋白、肝脏总铁含量均显著升高.与模型组比较,逍遥散全方及各功效拆方组可明显降低大鼠肝功能ALT、AST,改善病理过程如Ishak评分及胶原染色半定量等均显著下降,肝组织α-SMA、COL-1表达显著降低,血清铁、铁蛋白、肝脏总铁含量亦明显下降,阳性对照药物去铁胺结果与逍遥散全方相仿.与逍遥散全方相比,逍遥散各功效拆方组均较整方疗效有显著降低.结论 逍遥散可显著改善慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化,其方中疏肝药、健脾药、养血药均对改善铁过载及纤维化有一定作用.推测逍遥散抑制铁过载维持铁稳态的作用可能是其疏肝、健脾、养血功效的核心机制.

本研究探讨c-Myc抑制剂10058-F4对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和右旋半乳糖胺(D-galac-tosamine,D-Gal)诱导的急性肝损伤的影响及其可能机制.32只雄性BALB/c小鼠(Mus musculus)分为4组:正常对照组、10058-F4组、LPS/D-Gal组和10058-F4+LPS/D-Gal组.通过腹腔注射LPS/D-Gal诱导小鼠急性肝损伤,10058-F4在注射LPS/D-Gal前0.5 h经腹腔注入.注射LPS/D-Gal 1.5 h后处死小鼠并采集样本,分别采用实时荧光定量PCR法和ELISA法检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA水平和血清中TNF-α的水平.另取32只小鼠经上述相同处理后,注射LPS/D-Gal 6 h后处死并采集样本,检测小鼠血清中转氨酶活性及白介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平、肝组织中IL-6的mRNA水平及肝组织中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase),包括Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活性,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肝组织病理学变化,TUNEL法检测肝细胞凋亡.结果显示,c-Myc抑制剂10058-F4可以显著下调LPS/D-Gal暴露小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,降低血清和肝组织中的TNF-α与IL-6水平,抑制肝组织中Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活性,减少TUNEL阳性细胞数以及肝组织病理学改变.以上结果提示,c-Myc抑制剂10058-F4可通过抑制炎症反应和减少肝细胞凋亡在LPS/D-Gal诱导的急性肝损伤中发挥保护作用.