目的:探讨Masquelet技术联合组织瓣移植治疗胫骨骨折内固定术后中早期感染性骨软组织复合缺损的临床疗效。方法:2017年10月-2020年11月,中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院骨科对12例13侧胫骨骨折内固定术后中、早期感染性骨软组织缺损患者,采取保留内固定的两阶段治疗。Ⅰ期彻底清除感染病灶,拆除失效螺钉,尽可能保留内植物,将可吸收硫酸钙抗生素链珠植入骨折远、近端髓腔,载抗生素骨水泥填充骨缺损并包裹内植物,同期采用组织瓣覆盖创面,创面缺损面积3.5 cm×5.0 cm~7.5 cm×14.5 cm,组织瓣切取面积为4.0 cm×5.5 cm~8.0 cm×15.0 cm。供区8侧直接拉拢缝合，5侧因无法完全闭合，拉拢缝合之后剩余创面行植皮覆盖。在感染指标和临床体征控制良好的前提下,于Ⅰ期术后6~9周Ⅱ期取出骨水泥,在利用Masquelet技术形成的诱导膜周围充分植入自体松质骨粒或复合同种异体骨,对于骨折不稳定者植入辅助钢板。出院后定期来院门诊复诊，之后采用门诊或微信方式随访，观察皮瓣的质地、颜色和骨愈合情况,末次随访时患肢功能参照Johner-Wruhs评定标准进行评定。结果:Ⅰ期术后12例13侧皮瓣均顺利成活,无血管危象发生,伤口Ⅰ期愈合,仅2例2侧感染复发,经再次清创、取出内固定改换为外固定。Ⅱ期术后所有患者均获得12~26个月随访,平均18个月,13侧肢体骨折愈合良好,骨缺损愈合时间16~25（平均19.5）周,患肢功能参照Johner-Wruhs评定标准,优6侧、良5侧、中2侧。结论:采用Masquelet技术联合组织瓣移植技术,将可吸收硫酸钙抗生素缓释剂链珠作为载体,在保留内植物的前提下,分阶段治疗胫骨内固定术后中、早期感染性骨缺损、骨外露具有可行性和较高的优良率,初步探索出程序化治疗创伤性骨感染复合缺损的方案。

各种严重外伤、肿瘤以及先天畸形常常可导致患者面容毁损，而异体面部移植可以在一次手术中矫正所有严重畸形，并且能达到兼顾功能和美观的效果。截至2018年，全世界实施的部分或全面部移植手术达到44例，此项手术属于非挽救生命的手术，存在很多问题和争议。作者结合以往经验，对手术适应证选择、手术原则和细节、术后并发症的防治、免疫抑制方案、术后功能恢复、伦理学问题、社会经济学问题等方面进行分析讨论。

目的:探讨抑制树突状细胞相关RIG-1的表达从而抑制小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)成熟并促进免疫耐受的作用及其机制。方法:体外培养BMDC，并于第5天转染慢病毒载体Lv-RIG-1-RNA干扰(RNAi)(MOI＝100)，将其分为未成熟DC组，DC-绿色荧光蛋白(DC-GFP)组和DC-RIG-1-RNAi组，检测树突状细胞(DC)转染前后细胞表型[白细胞分化抗原(CD)40、CD80、CD86和主要组织相容性复合体 (MHC)Ⅱ]和功能变化；建立小鼠同种异体胰岛移植模型，术前3 d和1 d受体分别通过尾静脉注射1×10 6个DC-RIG-1-RNAi、DC-绿色荧光蛋白(GFP)和100 μl磷酸盐缓冲液(PBS)，观察各组移植术后胰岛存活时间，于术后第7天收集并比较受体糖耐量、胰岛移植物的病理学改变、脾脏T细胞亚群含量的变化。所有数据使用SPSS 22.0软件进行统计学分析，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用 t检验。 结果:Lv-RIG-1-RNAi组DC中等水平表达CD80、CD86，低水平表达CD40、MHC Ⅱ，脂多糖(LPS) 刺激后白细胞介素(IL)-12分泌水平[(135.4±7.3) ng/L]低于imDC组[(823.0±30.9) ng/L， t＝68.483， P<0.05]和DC-GFP组[(896.4±47.7) ng/L， t＝49.870， P<0.05]，差异均有统计学意义，IL-10分泌水平[(556.6±50.4) ng/L]高于imDC组[(279.4±66.2) ng/L， t＝10.535， P<0.05]和DC-GFP组[(291.8±65.6) ng/L， t＝10.122， P<0.05]，差异均有统计学意义，并且其抗原提呈功能被有效抑制，具有一定程度的未成熟属性。DC-RIG-1-RNAi组胰岛生存时间[(38.5±3.8) d]高于对照组[(22.0±3.1) d， t＝8.241， P<0.05]和DC-GFP组[(9.5±2.1) d， t＝16.361， P<0.05]，差异均有统计学意义。术后第7天，DC-RIG-1-RNAi组胰岛移植受体葡萄糖耐量较其他两组好，病理学检测结果提示DC-RIG-1-RNAi组胰岛活性更好。DC-RIG-1-RNAi组辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)比值(0.08±0.02)低于DC-GFP组(0.28±0.02， t＝11.670， P<0.01)和对照组(0.48±0.08， t＝20.110， P<0.01)，差异均有统计学意义。 结论:抑制RIG-1表达的DC表现出一定程度的未成熟表型和功能，保护小鼠胰岛移植物，诱导免疫耐受。

胚胎植入是妊娠过程的起始阶段，囊胚必须黏附并入侵接受性母体子宫内膜，以获得氧气和营养的供应；但胎儿是一种半同种异体移植物，一旦进入子宫必然会遭到母体的免疫排斥，因此建立并维持母-胎免疫耐受对植入成功至关重要。微小RNAs（microRNAs，miRNAs）是一类内源性的非编码RNA，通过调控靶基因的转录后表达，从而参与人体内众多的生理和病理活动。目前已有大量的研究证实，miRNAs在胚胎植入中具有重要作用，同时也能调控母体免疫系统，当miRNAs表达失调时，通过调控免疫细胞和免疫分子参与妊娠并发症。此外，母-胎界面的免疫耐受性在着床中起着至关重要的作用。本文对miRNAs在胚胎植入免疫调控中的相关研究进展作一综述。

目的:探讨过表达Dectin-1基因对树突状细胞(DCs)功能的影响,阐明Dectin-1基因抑制DCs成熟活化发挥免疫学功能的机制及对小鼠心脏移植物的免疫保护作用.方法:小鼠骨髓干细胞诱导形成DCs后进行体外培养扩增,采用带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的腺病毒载体将Dectin-1基因转染至DCs,经过Dectin-1基因修饰的未成熟DCs(imDCs)为DC-Dectin-1组,同时设未经病毒转染的DCs组和转染GFP(DC-GFP)组,24 h后采用免疫荧光染色法检测腺病毒转染情况,采用Western blotting法检测各组DCs中Dectin-1 蛋白表达情况,采用流式细胞术和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脂多糖(LPS)刺激前后各组DCs表型、功能和细胞培养上清液中白细胞介素 10(IL-10)和白细胞介素 12(IL-12)水平.建立同种异体小鼠腹部异位心脏移植模型,分为DCs组、DC-GFP组和DC-Dectin-1组,于移植术后第1、3和5天分别输入DCs、DC-GFP和DC-Dectin-1,移植术后第7天HE染色观察各组小鼠心脏移植物病理形态表现,TUNEL染色观察各组小鼠心脏移植物细胞凋亡情况,观察各组小鼠心脏移植物中位存活时间(MST).结果:经基因修饰的Ad5F35载体可提高Dectin-1基因转染效率,转染后GFP可持续在DCs中表达.LPS刺激前,DCs、DC-GFP和DC-Dectin-1组细胞中CD40、CD80、CD86和人类主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)表达水平均较低,呈现imDCs表型;与LPS刺激前比较,LPS刺激后DCs组和DC-GFP组细胞中CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达水平升高,呈现成熟DC表型,而DC-Dectin-1组细胞中CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达水平仍较低.LPS刺激前,各组细胞培养上清液中IL-10和IL-12水平比较差异无统计学意义(P>0.05);LPS刺激后,与DCs组和DC-GFP组比较,DC-Dectin-1组细胞培养上清液中IL-10水平明显升高(P<0.05),IL-12水平明显降低(P<0.05).移植术后第7天,与DCs组和DC-GFP组比较,DC-Dectin-1组小鼠心脏移植物组织中炎性细胞浸润减少,排斥反应表现明显减轻,TUNEL染色呈阳性的凋亡细胞明显减少.与DCs组和DC-GFP组比较,DC-Dectin-1组小鼠术后心脏移植物MST明显延长(P<0.01).结论:Dectin-1基因可抑制未成熟DCs在LPS作用下的成熟和活化,减弱其抗原提呈功能,在一定程度上延长小鼠心脏移植物MST,诱导移植物免疫耐受形成.

近年来,皮肤移植已从开始的自体皮肤移植和同种异体移植发展到生物皮肤替代物移植.本文综述了已商品化应用于临床的角质形成细胞移植物、角质形成细胞与异体真皮、无细胞真皮基质、合成的和组织工程的真皮基质组成的复合皮及其优缺点.

目的 探讨内源性神经营养因子(ENTFs)对冷冻保存大鼠坐骨神经同种异体移植后神经再生的影响.方法 15 mm雌性Sprague-Dawley大鼠坐骨神经置于DMEM溶液中,37℃、5％CO2分别体外预处理1 d、3 d、7 d、14 d和21 d(A组、B组、C组、D组和E组),设置新鲜神经对照组(F组).Western blotting检测神经的胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、神经生长因子(NGF)、Bcl-2、Bax、Caspase-3、主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ、MHC-Ⅱ蛋白表达.将上述6组神经置于冷冻保存液中液氮保存4周,Calcein-AM/Propidium Iodide染色、激光共聚焦显微镜观察保存后神经活细胞和死细胞情况.用上述冷冻保存4周的坐骨神经和新鲜坐骨神经(G组),同种异体移植修复雌性Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组、F′组和G′组),设置同系移植组(H′组).移植术后1周,免疫荧光染色观察CD8+T细胞、巨噬细胞入侵移植物情况,ELISA法检测受者血清白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;移植术后20周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和神经传导速度(NCV),称重计算腓肠肌湿重比,神经丝(NF)200免疫荧光染色、甲苯胺蓝染色和透射电镜观察再生神经组织学.结果 与F组相比,C组、D组和E组GDNF、NGF蛋白表达均增加(P<0.05);B～E组Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax和Caspase-3蛋白表达均增加(P<0.05);A组～E组MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ蛋白表达均降低(P<0.05).坐骨神经冷冻保存4周后,与F组和G组相比,C组、D组和E组活细胞数量降低.同种异体移植术后1周,与F′组和G′组相比,C′组、D′组和E′组移植物CD8+T细胞、巨噬细胞减少,受者血清IL-2、TNF-α水平降低(P<0.05).移植术后20周,C′组、D′组和E′组CMAP、NCV、腓肠肌湿重比、再生有髓神经纤维数及髓鞘厚度均显著优于F′组和G′组(P<0.05),C′组、D′组和E′组移植神经NF200表达高于F′组和G′组.

背景:牙周软组织量不足带来天然牙及修复体的红白美学问题,导致牙龈炎、种植体周围炎等疾病发生.不同细胞及材料组合的细胞支架复合体可以促进牙周软组织再生,有望取代自体移植物.目的:综述自体或同种异体成纤维细胞、角质细胞、间充质干细胞结合支架材料应用于牙周软组织增量的研究进展及突破.方法:在PubMed、CNKI、万方、Sciencedirect、Medline数据库中进行相关文献检索,以"牙龈退缩,软组织增量,根面覆盖术,上皮下结缔组织移植物"及"gingival recession,soft tissue augmentation,root coverage,subepithelial connective graft"为关键词进行搜索,阅读摘要、结论进行初步筛选,排除与文章主题无关的研究及试验,最后纳入61篇文献进行结果分析.结果与结论:间充质干细胞在龈乳头增量方面展现出不小的潜力.单纯的成纤维细胞或角质细胞联合胶原蛋白、壳聚糖、脱细胞真皮基质等支架移植在软组织增量上未能取得预期角化龈增量,尽管两种细胞联合胶原蛋白基质表现出更为乐观的结果且当前的支架材料具有良好可塑性、生物相容性,然而成纤维细胞及角质细胞的共培养费时且成本高昂,加上支架材料的构象较为单一,如何解决这些问题仍是一段漫长的过程.

目的 建立前臂同种异体移植的大鼠模型.方法 在Brown Norway(BN)大鼠和Lewis大鼠间进行前臂的同种异体移植手术(n=8).供者大鼠的腋动静脉与受者大鼠的颈外静脉、颈总动脉进行吻合,同时,尺神经、桡神经、正中神经进行吻合.对其中5只受者大鼠术后给予环孢素A进行免疫抑制治疗(观察组),3只受者大鼠未给予免疫抑制治疗(对照组).术后评估移植前臂的存活情况、免疫排斥反应情况、感觉和运动的恢复情况.术后90 d进行移植物组织学观察.结果 所有大鼠均能耐受此移植手术.在接受免疫抑制治疗的大鼠中,移植物长期存活,且受者移植前臂逐渐恢复运动和感觉功能,术后90 d时未见免疫排斥反应.在未接受免疫抑制治疗的大鼠中,移植物在术后12 d起逐渐发生坏死.结论 前臂同种异体移植大鼠模型的制备是可行的.

目的:研究人脐血间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)经基因诱导成软骨后复合支架材料,构建组织工程软骨,探究软骨再生过程中,移植物在宿主体内的营养代谢及宿主免疫反应.方法:从人脐带血中分离、扩增、培养人脐血间充质干细胞并鉴定;在倒置相差显微镜观察细胞的形态,成软骨诱导后复合支架载体,体外共培养1周,植入SD大鼠体内,分时段取材(7d,14d,28d)后,进行大体形态学观察,组织化学染色、软骨特异性基质成分蛋白多糖及Ⅱ型胶原纤维的表达变化检测;对照组SD大鼠移植同种异体胸骨剑突软骨;空白对照组SD大鼠不做任何处理.结果:HE染色结果显示:实验组和对照组炎症反应未见明显差异.大体形态学观察及组织学染色结果均显示,实验组28d左右可见成熟软骨形成.糖蛋白多糖检测结果显示新生软骨组织在实验组和对照组无显著差异.宿主表现为局部的纤维囊壁包裹弱炎症反应.结论:hUCMSCs构建的组织工程软骨,软骨再生情况良好,支架材料按时吸收,宿主弱免疫反应,在干细胞治疗软骨缺损方面显示出了一定的临床潜力.