目的:报告1例类孟买血型并探讨其分子机制。方法:对1例ABO血型常规检测正反定型不相符的就诊者，采用吸收放散试验检测红细胞弱表达的ABH血型抗原，唾液酸实验检测唾液中血型物质。采用PCR产物直接测序法进行 ABO基因第6、7外显子和 FUT1和 FUT2基因序列分析。 结果:ABO血型正定型为O型，反定型为AB型，唾液中检测到有H和A、B物质，直接测序发现先证者 FUT1基因存在c.35C>T、c.328G>A、c.504delC复合杂合变异，单倍型序列分析表明先证者的 FUT1基因型为h 328A/h 35T+504delC，已上传NCBI，序列号为MW323551。 结论:本研究发现了1例由 FUT1基因复合杂合新变异c.504delC引起的类孟买表型AB mh，该变异可能影响糖基转移酶的活性，导致其酶的功能缺陷。

目的:探讨类抗-D和类抗-C抗体致婴儿自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的诊治，并且进行相关文献复习。方法:选择2017年7月31日，四川大学华西第二医院收治的1例生后60 d的AIHA女性患儿为研究对象。采用微柱凝胶法检测患儿的血浆抗体和红细胞抗原，对患儿血浆标本进行吸收放散试验，并对血浆及放散液中的不规则抗体进行鉴定。对本例患儿的临床病例资料进行回顾性分析，总结其实验室检查结果、临床特征及诊治经过。本研究对AIHA相关文献进行复习时，设定检索策略为：以"类同种抗体""mimicking antibody"为中、英文关键词，分别对万方知识服务平台、中国知网(CNKI)数据库和PubMed数据库，建库至2020年6月，收录的类同类抗体所致AIHA相关文献进行检索。根据文献复习，总结此类抗体的实验室检测方法，以及此类抗体所致AIHA患者的诊断、治疗和预后。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果:本例患儿于生后53 d出现全身皮肤黄染。患儿生后60 d入院检查：① ABO血型为B型，Rh血型表型为CcDEe型。②红细胞标本的直接抗人球蛋白试验(DAT)、抗体筛查结果均呈阳性，血清及自身红细胞放散液中均检出抗-D和抗-C特异性抗体，血清标本与B/ccdee去白细胞红细胞交叉配血主侧相合。③结合实验室检查结果及临床症状，本例患儿被确诊为类抗-D和类抗-C抗体致AIHA。患儿接受相容性去白细胞悬浮红细胞1 U输血后，其血红蛋白(Hb)值升高至88 g/L，此后逐渐下降至56 g/L，改用激素治疗后，Hb值上升至61 g/L，贫血症状缓解。④符合本研究检索及筛选策略的文献为8篇，纳入研究的本病患儿为8例，其抗体鉴定结果中，Rh血型系统的类同种抗体为5例，Kidd血型系统的类抗-Jk b合并类抗-Jk3抗体为1例，MNS血型系统的类抗-S抗体为1例，Kell血型系统的类抗-Kp b抗体为1例，患者接受的治疗方案主要为输血及药物治疗，并且疗效良好，仅1例产生同种抗体。 结论:类同种抗体在临床上较为少见，采用抗原阴性的红细胞进行吸附试验，可鉴别具有同种抗体特异性的自身抗体，从而避免漏诊和误诊。对于类同种抗体引起的AIHA患儿的治疗以糖皮质激素为主，危急情况下进行血液输注时，应选择相应抗原阴性的红细胞。

目的:探讨红细胞B抗原弱表达的分子生物学原因。方法:应用血清学方法进行血型鉴定，包括正反定型检测，抗-A1，抗-H检测，并进行吸收放散试验以检测弱B抗原。应用直接测序对第1-7外显子进行分析，并对其中1例进行克隆后测序。结果:血清学检测的23例患者红细胞均含有弱B抗原。DNA测序确定这些B亚型的等位基因，包括2例Bel型、4例B3型、14例Bw型、2例CisAB型及1例新的等位基因。其中新B等位基因，在第7外显子发生了662G>A变异，将其DNA序列上传红细胞血型抗原变异数据库，命名为Bel10。结论:血型基因DNA碱基变异导致血型亚型，表现为血清学抗原减弱，Bw表型为常见B亚型。

目的:分析2例罕见血清学放散型Ael亚型的基因测序结果。方法:选取2019年6月和2020年9月分别因"子宫腺肌瘤"和"胃炎"就诊的2例女性患者作为研究对象。采用常规盐水试管凝集法和吸收放散试验鉴定Ael亚型，用Sanger法对 ABO基因进行测序，用PyMOL软件构建蛋白预测结构模型，预测变异对于α-1，3-N-乙酰半乳糖氨基转移酶(GTA)结构稳定性的影响。 结果:2例患者血清学检测均为Ael亚型。例1测序结果为 ABO* O.01.02/ ABO* O.01.02，即存在p.Thr88Profs*31变异。例2测序结果为 ABO* Ael.06/ ABO* O.01.02，发现第7外显子存在c.425C>T(p.Met142Thr)、c.467C>T(p.Pro156Leu)变异，蛋白预测模型提示p.Met142Thr替换可能影响GTA蛋白与水分子的结合，同时改变GTA局部的氢键网络，导致酶活性下降，p.Pro156Leu替换对GTA的结构稳定性无明显影响。 结论:Ael亚型分子结构可能存在多样性的特点。例1基因型为261G缺失的 O02/ O02，例2基因型为 Ael 06/ O02。

目的:探讨ABO亚型B(A)的血型鉴定方法及其分子机制。方法:选择2015年7月，于山东省泰安市中心医院因ABO血型正反定型不符，拟行进一步血型鉴定的1例患者为先证者；以先证者、先证者丈夫及其2个儿子为研究对象。本例先证者为女性，45岁。采用常规血清学方法鉴定受试者的ABO血型。采用序列特异性引物(SSP)-PCR法对受试者ABO基因第6、7外显子进行直接测序，并且根据测序结果确定其ABO基因型。本研究遵循的程序符合山东省泰安市中心医院人体试验委员会制定的标准，经过该伦理委员会批准(批准文号：2015-018)，并与所有受试者签署临床研究知情同意书。结果:① ABO血型正反定型检测结果显示，先证者及其长子ABO血型为B(A)亚型，先证者丈夫和次子为O型。吸收放散试验结果显示，先证者与其长子血清标本中检测出A抗原，其丈夫与次子未检测出A抗原。② ABO基因测序结果显示，先证者及其长子均检出O 02等位基因，ABO基因第7外显子存在c.640A>G突变，符合B(A) 04等位基因的特征，其基因型均为B(A) 04/O 02；先证者丈夫和次子基因型为O 01/O 02。先证者长子的B(A) 04等位基因来源于先证者，B(A) 04等位基因的遗传方式为顺式遗传。 结论:分子生物学方法是鉴定罕见ABO亚型的必要方法。ABO基因第7外显子c.640A>G突变是形成B(A) 04等位基因的分子遗传学基础之一。

目的:探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生过客淋巴细胞综合征(PLS)患儿的临床特点、诊断和治疗方法，并且进行相关文献复习。方法:选择2019年6月30日，四川大学华西第二医院收治的1例ABO血型次侧不相合allo-HSCT后发生PLS男孩为研究对象。对患儿的临床病例资料进行回顾性分析，总结其临床特点。本研究设定的检索策略为：以"过客淋巴细胞综合征""passenger lymphocyte syndrome""PLS"为中、英文关键词，分别对中国知网数据库、万方知识服务平台和PubMed数据库建库至2020年4月30日收录的未成年人(<18岁)接受allo-HSCT后PLS的相关文献进行检索，并对PLS患儿的诊治经验进行总结。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果:①病史采集：本例男孩年龄为2岁6个月，因"先天性角化不良"于2019年7月9日接受allo-HSCT。allo-HSCT后第5天，患儿血红蛋白(Hb)值开始呈进行性下降，总胆红素(TB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平进行性升高；allo-HSCT后第9天Hb值下降至67 g/L, TB和LDH水平分别上升至20.5 μmol/L和240 U/L。血清学检测(2019年7月17日)结果示血型为A型RhD(+) ，直接抗人球蛋白(DAT)(1+)，吸收放散试验结果示血浆与红细胞放散液中均检出免疫球蛋白(Ig)G型抗-A，交叉配血结果示主侧相合、次侧不相合。allo-HSCT后第10天，本例男孩接受A型RhD(+)辐照红细胞1.5 U输注治疗后，Hb值短暂上升至81 g/L，但至第12天时，下降至最低(54 g/L)，患儿TB和LDH水平上升至最高(分别为37.1 μmol/L和509 U/L)。血型血清学检测(2019年7月20日)结果示血型为A型RhD(+)，DAT(3+~4+)，与同型红细胞配血结果显示主、次侧均不相合，吸收放散试验结果示血浆与红细胞放散液中检出IgG型抗-A。②诊治过程：本例患儿allo-HSCT后12 d确诊为PLS。经O型RhD(+)辐照红细胞1.5 U输注，联合免疫抑制剂和甲泼尼龙，并辅以大剂量静脉输注用免疫球蛋白(IVIG)，巴利昔单抗及对症支持治疗后，Hb值升高至79 g/L并维持稳定，TB和LDH水平下降至正常参考值范围，患儿PLS症状缓解。③文献复习结果：共检索到7篇相关文献，纳入10例allo-HSCT后发生PLS患儿，均存在ABO血型次侧不相合，PLS发生时间为allo-HSCT后7~15 d，均接受输血、糖皮质激素、利妥昔单抗等治疗。10例患儿中，4例康复，2例死亡，4例预后未提及。结论:对于ABO血型次侧不合的allo-HSCT患儿存在发生PLS风险，应提高临床医师及实验室检测人员对PLS的认识，密切监测患儿allo-HSCT后相关指标变化，警惕PLS发生。

目的 研究广州地区RhD阴性献血者D放散型(Del)分布、表型及基因型以了解本地区DEL血型分子生物学背景.方法 对 2021 年 11 月 1 日—2022 年 6 月 30 日期间广州地区献血者采用盐水法初筛为RhD阴性血液进行间接抗人球蛋白试验(IAT)血清学确认、采用RhCE分型卡确定RhCE表型,对 1 146 例确认RhD阴性所有C+(n=459)以及随机抽取部分C-标本(n=175)进行吸收放散(Del)筛查(共 634 例);提取Del阳性标本DNA进行高分辨熔解曲线分析法(HRM)实时荧光PCR检测RHD基因c.1227 位点基因情况;对HRM检测RHD* 1227 位点无突变标本采用限制性片段多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)扩增后产物作PstⅠ酶切,进行电泳分析RHD基因合子型;sanger法进行RHD基因进行外显子测序(exon 1-10),采用SeqMan软件分析基因突变情况;采用第3 代单分子测序技术对可疑Del阳性标本进行RHD全基因分析.结果 634 例确认RhD阴性标本吸收放散试验结果显示Del表型占 36.1%(229/634),占总RhD确认阴性的 20%(229/1 146);229 例DEL的RhCE分型分别为Ccee 181 例,CCee 40 例,CcEe 7 例,ccEe 1 例,HRM结合RHD盒子型分析结果显示 170 例RHD基因为RHD*1227A/01N.01、32 例为RHD*1227A/1227G,26 例为RHD*1227A/1227A、6 例为RHD*1227G/1227G(其RHD基因测序结果显示 1 例为弱D12 型、4 例为D-和 1 例RHD*01EL.02).结论 广州地区献血者DEL个体基因型以RHD*1227A/01N.01 为主且其RhCE表型均为C+的特征;HRM可作为常规筛查"亚洲型"DEL血型基因的分子生物学方法.

目的:建立可相对定量获取O型RhD+孕妇血浆IgG抗A、抗B血型抗体的吸收放散法.方法:随机选取95例O型RhD+孕妇血浆,用37 ℃温吸收、56 ℃热放散的方法获取血浆抗A、抗B血型抗体,以微柱凝胶抗人球蛋白试验分别测定放散液和血浆IgG抗A、抗B抗体效价,对比分析放散液与血浆抗体效价的差异及相关性.结果:放散液与血浆IgG抗A、抗B抗体效价分别作对数转换(Log2)后,放散液与血浆IgG抗A抗体效价差值与抗B抗体效价差值之间无统计学差异(P＞0.05),放散液IgG抗体效价与血浆IgG抗体效价呈正相关(r=0.914),经散点图拟合直线方程为Y=-3.55+0.96X.结论:本吸收放散法可相对定量获取IgG抗体效价为8以上的O型RhD+孕妇血浆IgG抗A、抗B血型抗体,同时获取IgG抗A与抗B抗体的效果无差异,且获取的IgG血型抗体浓度能够反映血浆中相应抗体浓度水平.

目的 探究 2 名血型正反定型不符且疑似O型的急性髓系白血病患者血型变化,及其与疾病治疗效果的关系.方法 血型鉴定使用微柱凝胶法、试管法、吸收放散试验对患者ABO血型做血型血清学分析;微流控芯片法检测ABO的血型基因分型,采用PCR法扩增ABO基因外显子E2～E7,扩增产物用Sanger法进行基因测序.结果 2 例的常规血型血清学检测结果,均为正定O型,反定A型,正反不符,吸收放散试验结果均有A抗原检出;2 例的ABO基因表型均为A型;基因分型结果分别为A102/A102;A102/O01,基因测序结果显示ABO血型基因SNP 位点分别为:467T/T;261G/delG、467C/T.其中 1 例,随着治疗的有效进展,与抗-A凝集反应强度出现明显地由弱到强的变化.结论 在临床中遇到正反定型不符且疑似O型的急性髓系白血病患者标本,我们应重视反定型结果的参考价值,须做吸收放散试验,并结合基因检测结果,做出正确的血型判断,为患者制定合适的输血策略.

目的 通过对ABO血型为Ax22/B型的患者及其家属因A亚型造成血清学血型鉴定错误的案例进行分析,总结ABO血型鉴定过程中的注意事项及A亚型的输血策略.方法 分别选取A、B两种不同厂家的微柱凝胶血型鉴定卡及试管法在常温和4 ℃孵育10 min两种条件下对患者及其子女进行血清学血型鉴定;对所有标本进行吸收放散试验及血型基因鉴定;分别用微柱凝胶法和聚凝胺法对同一组标本进行交叉配血.结果 B试剂卡凝集强度明显高于A试剂卡,且正定型B试剂卡可以在常温下检测到A抗原,A试剂卡仅在4℃孵育10 min后才可检测到A抗原.试管法血型可明确显示A亚型的反应格局.吸收放散试验显示所有标本红细胞表面均存在A抗原,经基因测序患者为Ax22/B.01,其子女基因型为Ax22/O.01.01.微柱凝胶法交叉配血相合,聚凝胺法镜下可见细胞凝集,交叉配血不合.结论 Ax22会造成检测结果假阴性,如正反定型不一致或者对检测结果有任何疑问,应选用试管法或其他检测系统进行复核,必要时进行基因检测;Ax22亚型在配血时有假阴性的可能,有较高的输血风险.