目的:探讨囊泡胺转运蛋白1(VAT1)的表达与胶质母细胞瘤(GBM)免疫微环境的相关性。方法:回顾性分析中国脑胶质瘤基因图谱(CGGA)计划数据库中135例GBM患者的临床资料及转录组数据。采用CIBERSORT反卷积算法分析135例肿瘤组织中不同免疫细胞的占比。根据VAT1基因表达量的中位数分为高表达组(基因表达量大于或等于中位数； n＝68)和低表达组(基因表达量小于中位数； n＝67)。对两组间的差异基因进行基因富集分析(GSEA)。随机选取2018年11月至2019年4月首都医科大学附属北京天坛医院神经外科行开颅肿瘤切除术治疗的9例GBM患者的肿瘤组织样本，应用免疫组织化学染色技术检测VAT1、p65及CD80蛋白表达情况，并采用半定量方法判断蛋白染色结果。 结果:免疫细胞浸润分析结果显示，与VAT1低表达组比较，VAT1高表达组的滤泡辅助性T细胞和活化自然杀伤细胞占比均低，差异均具有统计学意义( P＝0.019和 P＝0.045)。GSEA分析结果显示，与VAT1高表达呈正相关的基因功能主要富集在免疫系统过程、免疫反应调节和炎性反应(均 P<0.001)，且VAT1高表达与核因子κB(NF-κB)抑制物(IκB)激酶/NF-κB信号的调控和IκB激酶/NF-κB信号的正向调控密切相关(均 P＝0.001)。随着VAT1表达量的升高，多种NF-κB信号通路特异性基因表达呈正相关趋势(均 P<0.001)。9例GBM的免疫组织化学染色结果显示，p65蛋白和CD80蛋白均与VAT1蛋白表达呈正相关( r值分别为0.92和0.93，均 P＝0.004)。 结论:初步研究发现，GBM患者中VAT1高表达可能会影响肿瘤免疫反应，并可能通过调控NF-κB信号通路影响肿瘤免疫细胞的浸润。

目的:探讨白细胞介素（interleukin，IL）-7受体α抗体对MRL/lpr狼疮小鼠免疫炎症和肾脏损伤的作用。方法:15只体重15~16 g无特定病原体3~4周龄雌性MRL/lpr小鼠饲养至14周龄，随机分为IL-7受体α抗体干预组、IL-7受体α同型抗体组（阳性对照组）和生理盐水组（阴性对照组），分别腹腔注射IL-7受体α抗体、同型抗体和生理盐水，每周3次，每次100 μg，共4周。18周龄时处死小鼠，考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白量；过氧化物酶法检测血清肌酐；酶联免疫吸附测定法检测自身抗体（抗双链DNA抗体）、炎性因子肿瘤坏死因子α、γ干扰素、IL-21的表达；PAS染色和天狼星红染色检测肾组织病理；免疫组化法检测肾组织CD3、F4/80的表达；流式细胞术检测调节性T细胞、囊泡样辅助性T细胞（follicular helper T cells，Tfh）和囊泡样调节性T细胞（follicular regulatory T cells，Tfr）亚群并计数。结果:与生理盐水组和IL-7受体α同型抗体组比较，IL-7受体α抗体干预组24 h尿蛋白量及血清肌酐、抗双链DNA抗体、γ干扰素、IL-21均降低（均 P<0.01），但三组间血清肿瘤坏死因子α的差异无统计学意义（ F=0.39， P>0.05）。与生理盐水组和IL-7受体α同型抗体组比较，IL-7受体α抗体干预组肾脏组织CD3和F4/80阳性浸润细胞减少，Ⅰ/Ⅲ型胶原纤维比值下降（ F=41.11， P<0.01）；血液中调节性T细胞（CD4 +CD25 +Foxp3 +）/效应T细胞（CD4 +CD25 +）比值增高（ F=21.64， P<0.01），且外周血和脾脏中Tfr（CD4 +CXCR5 +Foxp3 +）/Tfh（CD4 +CXCR5 +）比值均升高（ F=38.95， P<0.01； F=12.90， P<0.01）。 结论:IL-7受体α抗体可能通过升高调节性T细胞比例、Tfr/Tfh比值，降低自身抗体如抗双链DNA抗体生成，减少炎性因子生成，从而减轻MRL/lpr狼疮小鼠的免疫炎症和肾脏损害。

目的:探讨静脉注射人脐带间充质干细胞(MSCs)源性小细胞外囊泡(sEVs)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠的治疗作用。方法:分离并培养人脐带MSCs，收集细胞培养上清液，采用超速离心法分离MSCs源性sEVs。采用Nanosight分析sEVs粒径，透射电子显微镜下鉴定sEVs形态；采用Western blot法检测sEVs表面标志物CD9、CD81和CD63蛋白的表达。取48只SPF级7周龄C57BL/6雌性小鼠，采用光感受器间维生素A类结合蛋白651-670 (IRBP 651-670)注射法制备EAU模型。采用随机数字表法将模型小鼠随机分为sEVs治疗组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组，每组24只。sEVs治疗组小鼠于EAU造模后第11天尾静脉注射MSCs源性sEVs 50 μg，PBS对照组以同样方法注射同体积PBS。造模后第8天各组分别随机选取6只小鼠扩瞳后检眼镜下观察眼底炎症情况，隔日1次，并进行炎症评分。造模后第18天采用颈椎脱臼法各组处死6只小鼠，立即摘取双眼眼球制作眼球石蜡切片并行苏木精-伊红染色，进行眼底病理炎症评分。各组分别随机选取6只小鼠，于造模后第18天颈椎脱臼法处死，立即摘取双眼眼球，采用流式细胞术检测小鼠眼球组织中辅助性T细胞1 (Th1细胞)、Th17细胞浸润情况；于造模后第14天各组分别颈椎脱臼法处死6只小鼠，立即分离脾脏及引流淋巴结中的T细胞，采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法检测终质量浓度为0、1、10和20 μg/ml IRBP 651-670条件下T细胞增生情况。另选取3只正常小鼠，采用磁珠阴选法分离脾脏初始T细胞，分为sEVs处理组和PBS对照组，根据分组加入10 μg/ml的MSCs源性sEVs或等体积PBS进行共孵育，分别在Th1/Th17细胞分化条件下培养，采用流式细胞术检测各组初始T细胞向Th1/Th17细胞分化情况。 结果:分离的人脐带MSCs源性sEVs直径平均为(102.4±33.6) nm，透射电子显微镜下sEVs呈双层膜囊泡结构，sEVs中CD9、CD63和CD81蛋白呈高表达。造模后14、16、18、20和22 d，sEVs治疗组眼底炎症评分均低于PBS对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。造模后18 d，sEVs治疗组小鼠眼球组织病理评分明显低于PBS对照组，差异有统计学意义( P<0.05)。造模后18 d，sEVs治疗组小鼠眼球组织中Th1、Th17细胞百分比分别为(15.55±2.03)%和(15.67±2.15)%，明显低于PBS对照组的(21.35±0.72)%和(20.90±1.10)%，差异均有统计学意义( t＝6.58、5.31，均 P<0.01)。在IRBP 651-670质量浓度为20 μg/ml条件下，sEVs治疗组T细胞体外增生能力显著低于PBS对照组，差异有统计学意义( P<0.05)。sEVs处理组初始T细胞分化为Th1细胞和Th17细胞的百分比分别为(28.15±1.32)%和(11.60±2.23)%，明显低于PBS对照组的(31.58±1.75)%和(23.52±1.76)%，差异均有统计学意义( t＝3.93、10.26，均 P<0.05)。 结论:尾静脉注射人脐带MSCs源性sEVs可明显减轻EAU小鼠眼底炎性反应，其机制与抑制初始T细胞向Th1和Th17细胞的分化，减少眼球中Th1和Th17细胞浸润有关。

Toll样受体(TLR)7 是TLR家族中的一员,是Ⅰ型跨膜糖蛋白,由细胞质Toll/白细胞介素-1 受体同源性(TIR)信号传导结构域和包含19～25 个串联富含亮氨酸重复基序的外部抗原识别结构域组成.人体内TLR7 主要分布在浆树突状细胞(pDC)和B细胞的胞体内体膜上,通过高尔基体的囊泡从内质网穿梭至内体.内体膜上的TLR7 与病毒来源的单链RNA分子或咪唑啉类似物结合从而被激活,进一步诱导Ⅰ型干扰素的合成,从而启动辅助性T淋巴细胞(TH)1 细胞的激活,快速招募炎症细胞到感染部分,发挥抗病毒、抗肿瘤以及抗过敏的功能.TLR7 激活后由于具有调节TH1/TH2 细胞比例的作用,其配体用于治疗过敏性疾病的研究日益受到关注.该文围绕TLR7 激动剂对过敏性哮喘、过敏性鼻炎以及过敏性脑炎的临床前研究和临床试验研究进行综述,以期为过敏性疾病的治疗提供新思路.

目的 通过机器学习算法探讨甲状腺相关性眼病(TAO)的免疫相关基因.方法 从GEO数据库下载TAO相关基因芯片数据集,共获得24 例正常对照者(正常对照组)的样本和27 例TAO患者(TAO组)的样本.利用R4.2.1 软件对两组样本数据进行分析以筛选差异表达基因(DEGs),然后进行DEGs的基因本体论(GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析、疾病本体(DO)富集分析.通过基因集富集分析识别两组之间差异最显著的信号通路.利用最小绝对值收敛和选择算子(LASSO)算法及支持向量机-递归特征消除(SVM-RFE)算法在DEGs中筛选对TAO具有潜在诊断价值的特征性基因并取交集,通过受试者工作特征曲线评价最佳特征性基因的诊断效能.利用CIBERSORT反卷积算法分析22 种免疫细胞在两组样本中的浸润情况,分析诊断效能较高的最佳特征性基因与免疫细胞的相关性.结果 共得到 20 个DEGs.GO功能富集分析结果显示,DEGs涉及的生物过程包括骨骼肌细胞分化、细胞趋化过程等,涉及的细胞组分包括分泌颗粒管腔及囊腔等,涉及的分子功能包括多种受体结合等.KEGG 通路富集分析结果显示,DEGs主要富集在白细胞介素17 信号通路等.DO富集分析结果显示,DEGs富集的疾病包括关节炎、淋巴结疾病和川崎病等.基因集富集分析结果显示,与正常组相比,TAO组中的基因主要富集在与溶酶体、氧化磷酸化、氨基糖和核苷酸糖的代谢、N聚糖生物合成相关的信号通路及过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路中.对LASSO算法和SVM-RFE算法的结果取交集后,共获得6 个最佳特征性基因,其中MPEG1 的mRNA表达量对TAO的诊断效能最高(曲线下面积为0.889).TAO组的CD4+幼稚T淋巴细胞、滤泡辅助性T淋巴细胞、单核细胞、M0 型巨噬细胞、激活的肥大细胞及中性粒细胞占比均高于正常对照组,而M2 型巨噬细胞和静息的肥大细胞的占比均低于正常对照组(均P<0.05).MPEG1 的mRNA表达量与M0 型巨噬细胞、激活的肥大细胞、单核细胞、CD4+幼稚T淋巴细胞和滤泡辅助性T淋巴细胞的占比呈负相关,与M2 型巨噬细胞和静息的肥大细胞的占比呈正相关(均P<0.05).结论 MPEG1 可能可以作为TAO发病的潜在特征性基因,与免疫细胞共同参与TAO的生理病理过程.

目的 观察β-葡聚糖对免疫球蛋白A(IgA)肾炎大鼠模型的治疗作用及对辅助性T细胞1(Th1)/Th2漂移的影响.方法 选取42只大鼠建立IgA肾炎模型,分为模型组、低、中、高剂量组,12只未建模大鼠作为对照组,比较其尿红细胞计数及24h尿蛋白含量;观察大鼠肾脏组织病理学变化,检测肾脏组织IgA免疫荧光沉淀情况、脾脏组织Th1/Th2、血清及肾脏组织中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,计算IFN-γ/IL-4并进行比较分析.结果 (1)5组大鼠尿红细胞计数及24h尿蛋白水平比较,模型组＞低剂量组＞中剂量组＞高剂量组＞对照组(P＜0.05).(2)模型组大鼠肾小球增大、囊壁黏连,系膜基质增生明显、肾小管上皮细胞空泡样变化,对照组上述结构均正常,各剂量组均有所减轻,且呈剂量依赖性.(3)对照组大鼠肾小球系膜区无IgA免疫荧光沉淀,模型组大鼠有较强IgA绿色荧光沉淀,各剂量组均有所减弱,且呈剂量依赖性.(4)5组大鼠脾脏组织Th1/Th2比较,模型组＜低剂量组＜中剂量组＜高剂量组＜对照组(P＜0.05).(5)5组大鼠血清及肾脏组织中IL-4水平比较,模型组＞低剂量组＞中剂量组＞高剂量组＞对照组(P＜0.05);血清IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比较,模型组＜低剂量组＜中剂量组＜高剂量组＜对照组(P＜0.05).结论 β-葡聚糖可显著改善IgA肾炎大鼠血尿、尿蛋白及IgA沉淀情况,减轻肾损伤,可能与调节Th1/Th2平衡向Th1漂移有关.