目的 基于网络药理学、分子对接及实验验证探讨益气通脉散(人参、丹参、三七、水蛭、土鳖虫、大黄)抗脑缺血再灌注损伤(CIRI)的作用机制.方法 (1)通过TCMSP、TCMID、ETCM数据库筛选益气通脉散各中药活性成分及其作用靶点;通过GeneCards、OMIM、TTD疾病数据库筛选CIRI疾病相关靶点;通过Venny 2.1 在线平台获得上述靶点的交集靶点,即益气通脉散治疗CIRI的潜在作用靶点.通过Cytoscape 3.7.1 软件构建"药物-活性成分-靶点"网络,并筛选出益气通脉散治疗CIRI的潜在活性成分.通过STRING 11.0 数据库进行潜在作用靶点的蛋白互作(PPI)分析,筛选核心靶点.通过Metascape数据库对潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析.采用AutoDockTools 1.5.7 软件对关键活性成分与核心靶点进行分子对接验证.(2)采用大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)术建立CIRI大鼠模型.将SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、益气通脉散低剂量组(0.27 g·kg-1)、益气通脉散高剂量组(1.08 g·kg-1)、尼莫地平组(30 mg·kg-1),每组 10 只.造模前 3 d开始预给药,每日 1 次,连续 7 d.采用改良神经功能缺损程度评分(mNSS)法对MCAO/R大鼠的神经功能缺损进行评估;TTC染色法检测脑梗死体积;尼氏染色法观察脑组织神经元受损情况;ELISA法检测大鼠血清炎症因子及氧化应激相关指标;TUNEL染色法检测脑组织细胞凋亡情况;Western Blot法检测脑组织中Bax、Bcl-2 蛋白表达水平.结果 (1)共得到益气通脉散的 46 个有效活性成分,178 个益气通脉散治疗CIRI的潜在作用靶点.分析出槲皮素、毛地黄黄酮、山柰酚、缬氨酸、尿嘧啶等关键活性成分;TNF、IL-6、STAT3、VEGFA、AKT1、IL-1β、CASP3、TP53、MAPK3、EGFR等核心靶点;潜在作用靶点参与炎症反应、氧化应激、细胞增殖分化、细胞凋亡等生物过程,涉及cAMP、NF-κB、PI3K-Akt等信号通路.主要活性成分槲皮素、毛地黄黄酮、山柰酚、缬氨酸与TNF、IL-6、STAT3、VEGFA等靶蛋白有较好的结合活性.(2)与模型组比较,各给药组大鼠的神经功能缺损评分明显降低(P＜0.05,P＜0.01),脑梗死面积均显著缩小(P＜0.01),脑组织缺血坏死区病理变化得到改善,脑组织缺血区神经元数量显著增加(P＜0.01),神经细胞凋亡率显著降低(P＜0.01),血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及MDA含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01),SOD、GSH-Px活性显著升高(P＜0.05,P＜0.01),脑组织中Bax蛋白表达显著下调(P＜0.01),Bcl-2 蛋白表达显著上调(P＜0.01).结论 益气通脉散可能通过通过减轻炎症及氧化应激反应,抑制细胞凋亡,发挥抗CIRI的作用.

从组成、制备、服用与病症4个方面,考查《伤寒杂病论》中22首丸剂的应用规律,总结如下.①经方中土鳖虫等虫类药物主要用于丸剂和散剂,其在丸剂中的功效以活血化瘀为主,含虫类丸剂必配伍桃仁、大黄.②10首丸剂经方含有籽仁类药物;经方剂型改汤为丸时常需加入籽仁类药物,或将原方籽仁类药物加量,取其濡润之性,以化瘀、通下,兼具赋形剂的作用.③部分丸剂经方需煎煮.④丸剂经方治疗病症病位大多在里,病程较长;最常见的主治症状为腹部不适.⑤丸剂经方用于急重症、慢性发作性疾病,所治实证涉及的病理产物主要有瘀血和水饮.⑥12首丸剂经方中用到毒性药物,通过组方配伍、控制用量、制备过程中加热等方式减毒.⑦用于急重症的丸剂多含有毒性药物、虫类药物,药味数偏少,药丸重量较大,采用顿服或不下再服的方法,强调中病即止;缓图的丸剂补益药与活血行气药并行,药味数较多,药丸较小,服用时长可达数月.

国医名师饶旺福教授认为风邪是导致头痛最重要的诱因,风又有外风和内风之别,"头为诸阳之会",最易招致风邪,常常夹痰、夹瘀;风邪侵袭头部,久则损伤脑络,气血运行不畅,形成瘀滞.《素问·评热病论篇》有云:"邪之所凑,其气必虚",故饶老治疗头痛常不忘久病必虚、久病必瘀的特点,善用川芎、防风、羌活、蔓荆子等风药,尤其善用全蝎、土鳖虫等虫类药以扫除入络之顽风痼疾.文章从理论与临床实际出发,总结饶旺福教授中医治疗头痛四十年临床经验,以飨同道.

目的 土鳖虫为伤科要药,临床多以雌虫干燥体入药,本文旨在对比雌雄干燥体对外伤血瘀证的作用差异,为土鳖虫的临床用药提供实验依据.方法 将50 只雄性Wistar大鼠随机分为 5 组,每组 10 只.除正常组外,其余各组大鼠均用重物坠落的方法制备外伤血瘀证模型.采用治疗型给药原则,雌虫组、雄虫组、雌雄虫组大鼠每天灌胃给予雌虫水煎液(1g生药/kg)、雄虫水煎液(1g生药/kg)、雌雄虫混合水煎液(1g生药/kg),正常组和模型组大鼠给予等量纯净水(10 mL/kg).连续干预5d后,比较各组大鼠造模前后瘀肿处腿径,采用硝酸还原法(比色法)和放射免疫法检测各组大鼠血清中一氧化氮(nitricoxide,NO)、内皮素(endothelin,ET)-1、血栓素(thromboxane,TX)B2 和 6-酮-前列腺素(6-keto-protaglandin,6-K-PG)F1α的水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠瘀肿处腿径增加,血清NO和6-K-PGFlα水平下降,血清ET-1和TXB2 水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).干预后各治疗组大鼠瘀肿处腿径缩小,血清NO、ET-1、TXB2、6-K-PGFlα水平显著回调(P<0.05).雌虫组、雄虫组和雌雄虫组之间比较,各指标水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 土鳖虫雌虫和雄虫对外伤血瘀证均有较好的疗效,且二者的疗效未见明显差异.

建立土鳖虫特征离子质谱测定方法,对土鳖虫及其制剂进行真伪鉴别和质量评价.使用超高效液相色谱-三重四级杆质谱,采用多反应监测模式,选择质荷比(m/z)415.72(双电荷)→406.72、415.72(双电荷)→667.34作为检测离子对,对土鳖虫药材及其制剂进行检测.24批不同产地的土鳖虫药材、21批土鳖虫提取物、6批成方制剂均能检出该离子对色谱峰,6批不同动物药(地龙、龟甲、僵蚕、鸡内金、蝉蜕、水蛭)药材和3批土鳖虫混伪品(金边土鳖、金边龙虱、美洲大蠊)中均未检出相应的色谱峰.本研究建立的方法为有效补充土鳖虫药材及其饮片检验标准上的不足,提高其质量控制水平,及保证土鳖虫相关药品临床用药的安全性提供了参考依据.

认为各类妇科疾病多与气血的亏虚及瘀滞有关.虫类药性善走窜,具有活血祛瘀、行气止痛、搜剔通络、攻坚散结、下胎消?等功效,适当配伍可增强方剂除瘀通滞的效用.临证以全蝎、蜈蚣、土鳖虫、九香虫、水蛭、虻虫、地龙等虫类药,治疗月经失调、慢性盆腔炎、宫腔疾病、不全流产、异位妊娠等妇科疾病,且自拟经验方三黄汤、红藤汤、盆宁方、杀胚方、宫外孕方等均应用有虫类药,临床疗效较好.

老年人体质多虚实夹杂,多脏虚损,对于老年呕血患者,若但止血,恐在止血过程中由于瘀血骤然形成,发生危急重症;若但消瘀,又恐正虚难复,再次引发出血,故止血与消瘀当同时进行.但若为急性吐血,吐血量较大,则以止血为第一要务;若吐血量少,反复发作,缠绵难愈,应加用水蛭、土鳖虫、地龙等辛咸之品,此类药物需合用健脾补肾、益气养血之剂,免伤正气.再者,老年患者应尽早扶正,谨防变证.张锡纯治吐血诸方,将消瘀、宁血及补血法寓于止血一法之中,一方多用,止血而不留瘀,补虚而不壅滞,冲、胃、肝、脾、肾往往多向兼顾,药用全面而重点突出,更适用于老年患者.但张锡纯止血之后,无补血专方,应宗唐宗海之意,血止之后予人参养荣汤、大补阴丸等补血方药以善后,同时配合脏腑辨证,补其不足,泻其有余,方可避免反复发作.

消化性溃疡是临床常见病、多发病,易反复发作,严重影响患者的生活质量.葛惠男教授根据消化性溃疡的病因病机及临床表现,善于应用以下8组角药:炙黄芪、桂枝、炒白芍以健脾助阳、补中气;炒白术、茯苓、炒薏苡仁以健渗燥利、祛湿邪;柴胡、醋香附、枳壳以疏肝理脾、畅气机;黄连、煅赭石、制半夏以降逆燥湿、清胃热;北沙参、石斛、知母以清热生津、养胃阴;川楝子、延胡索、徐长卿以疏肝泻热、止疼痛;醋乳香、铁树叶、土鳖虫以活血化瘀、通络脉;黄芩、海螵蛸、仙鹤草以抑酸护胃、促修复.验之临床,疗效满意.附验案1则以佐证.

总结第三届国医大师李佃贵教授治疗慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)的常用药物——五虫五草,五虫指全蝎、蜈蚣、水蛭、土鳖虫、炮山甲,五草指飞扬草、凤尾草、鸡骨草、冬凌草、白花蛇舌草;虫草并用,标本兼治,可有效延缓或逆转CAG病变进展.

目的 建立土鳖虫中的黄曲霉毒素(AF)的亲和免疫柱净化-高效液相色谱-三重四级杆串联质谱检测方法.方法 以X-Brigde-C18(3.5 μm,3.0 mm ×50 mm)色谱柱分离,串联四级杆质谱仪检测,MRM模式进行定性定量分析,样品以60％甲醇为溶剂提取,检测土鳖虫中的AF B1、AF B2、AF G1、AF G2.结果 4种AF质谱检测的线性范围宽,相关性好,r≥0.997 9;方法精密度以6次测定值的RSD表示,为1.5％～3.4％;方法回收率用3个浓度进行添加实验,回收率范围为85.6％ ～ 98.9％;定量限范围为0.2 μg/L～0.7 μg/L;日内精密度的RSD(n=5)范围为1.1％ ～2.9％,日间精密度的RSD(n =9)范围为1.5％ ～2.8％.结论 本方法专属性强,操作简单,快捷,可作为土鳖虫中AF定量定性的有效检测方法.