目的:观察两切口无玻璃体切除的视网膜下注射（SRI）治疗Bietti结晶样视网膜营养不良（BCD）的安全性。方法:探索性临床研究。2023年2~ 5月于厦门大学附属厦门眼科中心检查确诊并接受SRI腺相关病毒载体转基因药物治疗的BCD患者6例6只眼纳入研究。其中，男性2例2只眼，女性4例4只眼；年龄34 ～60岁。患眼均行两切口无玻璃体切除SRI腺相关病毒载体转基因药物治疗。25G玻璃体切割管件做2个巩膜切口，分别用于置入光纤和38G SRI针。进入玻璃体前，先行前房穿刺引流房水降低眼压。硅油注入模式下，38G注射套管穿透视网膜到达视网膜下腔，玻璃体切割机脚踏控制注射速度，缓慢注入基因治疗药物，形成视网膜下泡状脱离区。注射完毕时手指触诊进行眼压评估，若偏高通过按压角膜切口行房水引流直至眼压正常。SRI后随访时间9~ 12个月。随访时采用SRI前相同设备和方法行相关检查。结果:6例患者6只眼眼底均可见视网膜色素上皮和脉络膜萎缩，伴或不伴视网膜黄白色细小颗粒样结晶沉积；临床分期均为Ⅲ期。SRI均顺利完成；手术时长9~ 14 min。手术中未见玻璃体脱出、视网膜出血或视网膜裂孔。套管针头无阻塞，拔出时无玻璃体脱出。SRI后24 h，所有患眼视网膜隆起泡完全吸收，视网膜复位；SRI后9个月时，患眼均无角膜后沉着，未见前房、玻璃体细胞等炎症反应，无高眼压、白内障、视网膜裂孔等并发症发生。结论:两切口无玻璃体切除SRI治疗BCD安全，且可缩短手术时间。

脑胶质瘤因其浸润性生长、恶性程度高等特点，临床治疗效果差。在过去的20多年间，基因治疗作为治疗脑胶质瘤的一种新方式，已经成为研究热点。但是，因中枢神经系统解剖结构复杂以及血脑屏障的作用，使得核酸分子的递送成为一大难题。因此，迫切需要开发更加高效而安全的中枢神经系统递送载体，将目的基因转运至肿瘤细胞内而达到治疗的作用。本文主要就脑胶质瘤基因治疗载体的研究现状进行综述。

基因治疗是指将遗传物质引入患者细胞，通过增强、抑制、编辑或引入目标基因以产生治疗或预防的效果。基因治疗为遗传性及获得性视网膜疾病的治疗带来了积极的影响和巨大的潜力。在不断优化基因载体的同时，各种递送方式的探索也为视网膜疾病的基因治疗带来了不同的治疗效果。目前主要采用的递送方式为视网膜下注射、玻璃体腔注射和脉络膜上腔注射；考虑到转染效率和递送方式的安全性，新兴的内界膜下注射和无创基因传递正在研究中。基因递送方式的选择对视网膜疾病基因治疗的安全性及有效性至关重要，其不仅与器械、技术发展有关，更重要的是与腺相关病毒的改造、启动子的选择以及目的基因转染的视网膜特定细胞有关。因此，应当综合考虑上述因素，根据最终基因治疗药物和特定转染细胞进行综合考虑，选择最为合适的基因递送方式。

遗传性视网膜病变的治疗有赖于基因的替代或编辑治疗，而腺相关病毒（AAV）载体是应用最广泛的基因转移载体之一。目前将AAV载体介导的目标基因递送到视网膜的方式包括玻璃体腔注射、视网膜下注射、脉络膜上腔注射。玻璃体腔注射AAV载体是目前最常用的递送方式，可有效改善小鼠致盲性视网膜营养不良等眼底病变。而视网膜下注射AAV，可将目的基因靶向递送至局部视网膜，达到更强的转染效率和基因表达效果，但操作技术要求较高。近些年，作为备受瞩目的递送新途径，脉络膜上腔注射AAV载体，可使目的基因在兔和大鼠视网膜上更为广泛的转染。目前AAV载体在视网膜上的转导效率受到递送模式的影响。未来需进一步探索AAV载体的递送模式对转导效率的影响，以期寻找介导基因治疗视网膜疾病的重要递送途径。

基因治疗在眼部疾病中的应用逐渐从单基因遗传性疾病扩展至多基因、多因素、常见病和慢性疾病中，这一新兴治疗方式仍处于早期探索阶段，预期获益和风险仍然存在很大的不确定性。在基因治疗药物的递送过程中，病毒载体是目前最成熟和应用最广泛的载体之一，其相关免疫的发生程度将影响基因治疗近期和远期效果，甚至造成永久性的视功能严重损伤。由此，载体相关免疫反应是基因治疗中安全性和长期疗效维持的重点和挑战，因此在基因治疗的围手术期和随访中应该重视载体相关免疫炎症监测，并采取积极、恰当的处理措施，从而取得最佳视功能获益。

急性肺损伤(acute lung injury, ALI)是一种致死率高的严重呼吸系统疾病，常表现为肺水肿、肺泡通透性增加、炎性细胞聚集和弥漫性肺泡损伤，其最终可导致急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS) [1,2]。过度的炎症反应是ALI进展的重要危险因素，浸润到肺组织的巨噬细胞和中性粒细胞释放大量细胞因子，诱导过度炎症反应，对肺泡上皮和内皮细胞的产生快速和严重损伤 [3]。迄今为止，尽管对ALI/ARDS进行了广泛的研究，然而并没有开发出有效的药物治疗这一疾病，目前针对ALI/ARDS的最佳治疗仍然是保护性通气，其病死率在大约40%左右 [4]。因此急需开发创新的ALI/ARDS治疗策略来降低其病死率。基因治疗因其精确化、个体化优势已成为目前非常有前景的潜在疾病治疗手段，通过沉默ALI发病机制中关键基因靶标，阻止甚至逆转疾病发展，为ALI/ARDS开辟了潜在的有效治疗策略。RNA干扰（RNA interference, RNAi）是一种古老的生物机制，用于防御外源基因入侵。从理论上讲，它可以以序列特异性方式沉默任何与疾病相关的基因，其中小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)是目前被认为最有临床应用前景的RNAi [5]。然而，单纯的siRNA经气道肺部给药面临着许多障碍，无法有效的传递到靶细胞，因此需要设计有效的递送系统以克服siRNA递送的缺点，从而推动siRNA疗法用于治疗ALI的临床可行性。

皮肤穿透肽(SPP)是一类能够促进药物或活性成分通过皮肤屏障的肽类分子.SPP具有良好的生物相容性和安全性,可用于输送各种类型的药物或活性成分,包括小分子药物、蛋白质和核酸.这些特点使得SPP在医药和化妆品领域中具有广泛的应用前景.目前国内外科研人员对于SPP的结构、机制、设计和应用进行了广泛的探索和实验.按来源分类,SPP可分为3类:蛋白质来源的SPP、基因重组来源的SPP和人工设计合成的SPP;其促渗机制可以从作用于角质层和作用于皮肤附属器这2个方面来阐述;其主要的应用方式包括4种:SPP与药物的物理混合、SPP与药物形成共价连接、SPP与蛋白类药物形成融合蛋白、SPP修饰药物载体,综述SPP不同来源SPP种类、不同SPP的促渗机制及应用方式,分析其研究与应用中存在的问题,以期为SPP的开发和创新提供有价值的参考.

信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)疫苗作为一种革命性生物制品,在传染病预防和治疗领域展现出巨大潜力.与新型DNA疫苗相比,mRNA疫苗避免了基因组整合的风险,并且与已被广泛应用的蛋白质疫苗相比,其无细胞的生产方式显著加快了研发速度,提高了生产效率.mRNA疫苗能够编码多种抗原,适应多种病原体变体,同时具备编码抗原和佐剂的双重功能,有效激发强烈的免疫反应.然而,mRNA稳定性、免疫原性和安全性的进一步优化,以及递送系统的效率提升,特别是脂质纳米颗粒(LNPs)的应用,仍是该技术发展的关键挑战.在全球范围内,mRNA疫苗在新冠感染等疾病的成功应用推动了疫苗研发新方向,预示着其在更广泛疾病预防和治疗中的潜在作用.综述了 mRNA疫苗的序列优化策略、递送系统的最新进展以及其在传染病中的应用,旨在为未来研究和应用提供全面的参考.

CRISPR/Cas9系统能高效便捷的进行基因编辑,在多个领域深受青睐并广泛使用,其传递方法引起国内外大量研究学者的关注.细胞外囊泡(EVs)作为天然的纳米级载体,来源广泛,是一种极具吸引力的CRISPR/Cas9系统传递载体.与常规病毒载体或非病毒载体相比,EVs在安全性、容量、穿透力、靶向性和改造潜力等方面都具有明显优势,有望成为传递CRISPR/Cas9系统的最佳载体.总结了 CRISPR/Cas9系统常见的传递策略和加载方式,将EVs与其他载体进行比较,并对EVs传递CRISPR/Cas9系统的优势及国内外研究进展、应用等进行综述,以期为基因编辑递送领域的发展提供帮助.

CRISPR/Cas9基因编辑系统自问世以来,极大地推进了人类对生物基因功能的认识.CRISPR/Cas9通常采用显微注射昆虫胚胎的途径来递送基因编辑试剂,由于昆虫具有多种生殖方式,因此对于某些昆虫种类如具有坚硬卵鞘的蟑螂和胎生的蚜虫等,应用传统的CRISPR/Cas9系统的递送方式来了解其基因功能就难以实现.目前,在传统的CRISPR/Cas9递送方式上发展出来的不需要注射昆虫早期单细胞胚胎的方法已有相关报道:ReMOT(receptor-mediated ovary transduction)和 DIPA-CRISPR("direct parental"CRISPR),它们可以将编辑试剂直接注射到成年雌性个体的血腔中,能够有效地在发育中的卵母细胞中引入遗传突变,同时简化了基因编辑的过程,这类方法已经成功应用于埃及伊蚊、德国小蠊和赤拟谷盗等昆虫的研究.本文对CRISPR/Cas9系统的结构、作用机制、传统递送方式及其发展出的ReMOT和DIPA-CRISPR递送方法在昆虫研究中的应用现状与前景进行了综述,以期为更多物种的基因编辑研究提供参考.