目的:观察大鼠多系分化持续应激(Muse)细胞对肠上皮细胞间紧密连接结构的保护作用。方法:贴壁筛选法自大鼠(6只，购自中国食品药品检定院)股骨内分离大骨髓间充质干细胞(BMMSCs)，长时间胰蛋白酶孵育法(LTi)自BMMSCs中分离大鼠Muse细胞，流式细胞术标记如白细胞分化抗原(CD)29、CD34、CD90等及特异阶段胚胎抗原-3(SSEA-3)抗体；免疫组织化学法标记Nanog同框蛋白(NANOG)等抗体，定向诱导分化后标记α-甲胎蛋白(AFP)等鉴定其多能分化能力；重组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)建立体外肠上皮细胞损伤损伤模型；与Muse细胞共培养后检测细胞增殖能力及桥接蛋白-1(ZO-1)的表达水平及形态，组间比较采用 t检验。 结果:LTi后，大鼠BMMSCs中(2.57±0.57)%能够形成特征性的Muse细胞簇；流式细胞术结果表明，Muse细胞保留了BMMSCs表面分子特征，SSEA-3的阳性细胞比例[(73.2±1.4)%]显著高于BMMSCs[(2.3±0.3)%]；免疫荧光实验表明，培养的Muse细胞阳性表达NANOG等多能分化标记，定向诱导分化后分别能够表达AFP等分化标记；Muse细胞与TNF-α炎症损伤的肠上皮细胞共培养后，其增殖细胞比例[(40.06±1.04)%]高于损伤[(23.10±2.05)%]组的细胞( t＝12.79， P<0.05)及ZO-1蛋白的相对表达水平(0.55±0.03、0.27±0.01， t＝13.03， P<0.05)。 结论:大鼠Muse细胞具有更加理想的保护炎症损伤肠上皮细胞紧密连接结构的作用。

胰岛α细胞、β细胞分别通过分泌胰高糖素和胰岛素,共同维持体内糖代谢稳态平衡.在糖尿病发生胰岛β细胞功能障碍及数量减少的同时,常伴随胰岛α细胞的增生和高胰高糖素血症[1].传统观点认为,后者是造成糖尿病"高糖毒性"、从而持续损伤胰岛β细胞功能的重要因素.随着胰岛内源性胰高糖素样肽-1(GLP-1)及其受体(GLP-1 receptor,GLP-1R)信号系统以及代谢应激下胰岛β细胞去分化现象的发现,人们对胰岛α细胞的功能作用有了全新的认识[2].近年来多项研究表明,胰岛α细胞具有高度可塑性,在特定条件下可自发或被诱导转分化为β细胞,从而成为重获功能性胰岛β细胞群的可能来源[3].胰岛内除了经典的胰岛素、胰高糖素旁分泌调节途径外,α细胞介导的胰岛内源性GLP-1/GLP-1R系统的激活是机体应对代谢应激损伤的重要适应性代偿反应,体现了α细胞对β细胞的调节保护[4].本文主要叙述胰岛α细胞的功能及其研究进展,以期为糖尿病时胰岛β细胞的调控保护策略并重获功能性胰岛β细胞群提供新的研究方向.

成年神经发生是指成年大脑中存在的干细胞持续产生新的神经元直到老年期.成年海马不断产生新的细胞,并发育成神经元,最终功能性整合到齿状回环路,从而在行为方面发挥了重要的作用.成年产生的海马神经元对应激和运动的影响非常敏感,应激可抑制新神经元的增殖、分化和存活,并损害多种形式的海马依赖性记忆;而运动具有相反的效果,可增强海马神经发生和认知能力[1-2].研究表明,运动可以削弱应激或皮质酮注射对海马细胞增殖的抑制效应[3-5].成年神经发生可能是运动削弱应激有害效应的部分机制.

目的:应用免疫磁珠筛选方法从人脐带华通胶间充质基质细胞中特异性地分选多系分化持续应激细胞(multilineage-differentiatingstress-enduring,Muse),并探讨Muse细胞移植治疗大鼠亚急性脊髓损伤的安全性和有效性.方法:将捐赠的脐带华通胶剥离剪碎、胶原酶/胰酶消化、密度梯度离心获得足量间充质基质细胞,应用免疫磁珠特异性筛选SSEA3+的Muse细胞,并使用流式细胞仪及细胞免疫组织化学方法鉴定.体内实验:使用NYU-Ⅲ代大鼠脊髓损伤打击仪建立垂直打击脊髓损伤模型,分为A组(假手术组)、B组(对照组)、C组(Non-Muse细胞移植组)和D组(Muse细胞移植组).A组大鼠接受标准化的椎板切除手术,但不进行脊髓打击;B、C、D组大鼠均接受标准化的脊髓打击损伤,10g撞击杆于12.5 mm高度自由落下.脊髓损伤造模后2周进行细胞移植,A组大鼠仅打开伤口不接受移植操作,B、C、D组大鼠分别接受PBS注射、Non-Muse细胞移植、Muse细胞移植,每只大鼠脊髓接受四点注射法,共 4×105个细胞.自脊髓损伤造模术后1 d及1、2、3、4、5、6周分别进行大鼠BBB运动功能评分,造模术后6周(即细胞移植后4周)处死动物,用免疫荧光染色研究大鼠脊髓内移植细胞存活、迁移和分化情况.结果:流式细胞仪显示脐带间充质基质细胞CD105+、CD90+和CD73+的百分比均达到99.5％以上,且CD45、CD14表达均低于0.5％,而SSEA3阳性率仅有1.46％.MACS特异性筛选后的细胞群有92.0％同时表达SSEA3和CD105,且免疫组织化学显示SSEA3呈典型的膜染色、形态特别.动物实验:A组动物在各个时间点的BBB评分均为21.单因素方差分析及LSD检验BBB评分情况:细胞移植后6周,C、D组与B组比较差异均有统计学意义(P=0.004,0.002),C组和D组比较差异无统计学意义.进一步组内配对t检验表明,C组第4周与第3周比较差异有统计学意义(P=.005);D组第4周与第3周比较差异有统计学意义(P=0.016),且第6周与第5周比较差异有统计学意义(Pb0.034),说明大鼠运动功能持续改善.脊髓免疫组织化学染色显示,Muse细胞和Non-Muse细胞均由注射点向损伤区迁移,但Muse细胞存活数量明显多于 Non-Muse细胞,且在损伤区均匀分布.结论:特异性免疫磁珠筛选是获得高纯度Muse细胞的良好高效的方法,Muse细胞可在大鼠损伤脊髓内大量存活4周并向损伤区迁移,且能持续改善大鼠运动功能,Muse细胞有望成为治疗脊髓损伤的一种新的种子细胞.

急性早幼粒细胞白血病(APL)在1957年首次被描述为急性髓系白血病的一个常见亚型,占急性髓系白血病的10％ ～15％,以t(12;17)(q22;q12)易位为特征,主要表现为未成熟的粒细胞在发育早期分化阻滞.而影响APL细胞分化的因素有很多,包括基因表达异常、自噬、氧化应激、表观遗传学等.目前,通过促进APL细胞分化的治疗可降低死亡率,延长持续缓解时间.本文主要对调控APL细胞分化的因素及其机制进行综述.

核因子-κB(NF-κB)是一类具有调控基因转录活性的蛋白质核转录因子,与淋巴细胞的生长、增殖、分化、凋亡、应激反应和免疫应答等多种细胞活动有关.NF-κB信号通路与淋巴瘤的发生密切相关.了解NF-κB信号通路的生物学作用及该信号通路的异常激活与淋巴瘤发生的关系,选择性地调控NF-κB信号通路,将为淋巴瘤的靶向治疗开辟新的途径.NF-κB的生物学功能非常广泛,是调节炎性反应和免疫应答的中心枢纽,本文就NF-κB信号通路中主要信号分子的生理作用及该信号通路的异常激活与淋巴瘤发生的关系进行综述.NF-κB信号通路的异常持续激活将导致细胞过度增生、分化障碍或凋亡抑制,这与淋巴造血系统肿瘤或自身免疫性疾病的发生有关,因此,干扰NF-κB信号通路的异常激活逐渐成为相关疾病潜在的治疗靶点.

越来越多的证据显示真皮乳头细胞(DPC)是毛囊周期性更新的组织中心.一方面它通过旁分泌的方式分泌大量的细胞因子,刺激隆突区上皮干细胞和黑素细胞干细胞(MeSC)分化、增殖和移行,启动毛发生成.另一方面DPC通过调节干细胞的微环境,譬如真皮乳头的大小、真皮乳头与隆突区的距离以及毛囊隆突区周围的淋巴引流与神经支配等协调完成对毛发生长周期的调节.最新研究显示DPC至少有4个细胞亚群,分别诱导单谱系瞬时扩增上皮细胞形成多层同心圆排列的毛干与毛鞘.还发现持续的心理应激可导致支配隆突区的交感神经过度活跃,交感神经末梢释放大量的去甲肾上腺素可诱导MeSC快速增殖,导致MeSC库耗竭和毛干色素脱失.通过对DPC促毛发生长和黑素生成的分子调节机制的认识,有望在体外大规模培养DPC用于细胞移植治疗人类秃发疾病.

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)主要发病年龄在老年前期和老年期,是以进行性认知功能障碍和行为损害为特征的神经变性疾病,是痴呆中最常见的类型.多种因素共同作用导致AD,其中炎症学说在AD中成为热点,在AD动物模型及人脑内都可以检测到炎症的存在,并可以通过分子成像检测到炎症过程.很多研究表明在AD早期病程就出现炎症反应,为清除脑内有害物质发挥有利一面,但随着疾病的进展,胶质细胞持续活化,导致炎症因子过度释放,形成慢性炎症加重AD的病理.考虑到炎症在AD中的作用,抑制炎症可能成为治疗AD的重要手段.研究表明淫羊藿及其主要活性成分具有抗衰老、抑制肿瘤、抗炎等功效.淫羊藿主要活性产物可能通过抑制中枢系统中小胶质细胞和星型胶质细胞过度激活,调节外周免疫CD4+T淋巴细胞的分化、调控TLR4及IGF-1R等介导的通路、抑制氧化应激和减少Aβ沉积等机制发挥抗炎作用,本文对上述机制进行综述,旨在为淫羊藿主要活性成分对AD临床治疗提供参考依据.

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)级联系统是真核生物细胞中高度保守的信号系统之一,参与诸多生物学过程的调控.在细胞因子、神经递质及激素等不同信号的刺激下,MAPK级联逐步激活下游靶因子,控制着多种细胞过程,包括生长、免疫、炎症和应激反应等.在不同细胞中,MAPK级联对细胞的作用随刺激物与刺激持续时间的不同而有所差异.MAPK级联诱导Th分化,参与T细胞受体信号通路和B细胞受体信号通路.MAPK级联调节癌症发生和发展相关的各种细胞活动.深入、系统地了解MAPK级联对各种细胞过程的特异性调控作用,将为多种疾病的靶向治疗提供理论指导.

膜性肾病是一类以肾小球足细胞损伤为核心机制的自身免疫性肾脏病,是成人肾病综合征常见的病理类型,已成为我国终末期肾脏病的主要病因.足细胞为终末分化细胞,在维持肾小球结构和功能稳定方面具有重要的作用,是蛋白滤过的分子屏障.足细胞损伤,从而肾小球滤过膜损伤是导致大量蛋白尿的重要原因,蛋白尿持续或加重使得膜性肾病患者病程迁延不愈.目前认为膜性肾病的足细胞破坏主要与氧化应激、自噬失调、足细胞标志蛋白表达异常、慢性炎症、上皮-间充质细胞转分化等存在密切联系.现阶段西医多依据其病理分期采用免疫抑制剂、激素类药物针对治疗,但存在一定的不良反应.中医药在防治膜性肾病上取得了一定成效,近年来,研究发现许多中药可通过作用于人体的多个靶点,在不同环节上影响膜性肾病的发生和发展具有明显的优势.该文概述了膜性肾病足细胞损伤的相关机制,并从中药单体及中药提取物、中药复方和中成药的角度干预相关靶点通路治疗膜性肾病进行总结,旨在为中医药抗膜性肾病的临床治疗、基础研究及靶向药物的研发提供一定的参考依据.