目的:探讨达芬奇机器人辅助单孔加一孔腹腔镜肾盂成形术在儿童肾盂输尿管连接处梗阻(UPJO)中的疗效。方法:回顾性分析2021年9月至2022年8月福建省立医院诊断为UPJO并行机器人辅助单孔加一孔腹腔镜肾盂成形术的13例儿童患者的临床资料。患儿年龄为60.0(1.3，108.0)个月；左侧10例，右侧3例。临床表现为腹痛3例，合并泌尿系感染2例，无症状10例。术前同位素肾图提示患肾功能(28.32±1.82)%，双侧分肾功能相差>10%者7例；机械性梗阻5例；术前超声检查提示患侧肾皮质厚度为(1.98±0.23)cm。术中于脐置入单孔多通道套管并置入机器人系统，于脐上6 cm处置入8 mm套管为加一孔；探查腹膜下扩张的肾盂，经腹壁悬吊牵引肾盂，暴露视野，切开、扩张肾盂，裁剪扩张的肾盂，置入输尿管支架，并吻合肾盂输尿管。结果:13例手术均顺利完成，无中转开放手术。手术时间180.0(165.0，190.2)min；术中出血量<5 ml；术后住院时间7.0(7.0，7.0)d，住院费用5.63(5.21，5.65)万元。术后2个月拔除输尿管支架，未出现尿路感染及腰痛等明显并发症。术后随访时间6~18个月，中位值12(8，13)个月。复查泌尿系超声提示肾皮质厚度(4.95±0.57)cm，同位素肾图提示分肾功能(38.02±1.76)%，5例机械性梗阻全部转变为不全性梗阻。结论:达芬奇机器人辅助单孔加一孔腹腔镜肾盂成形术手术操作较为精细，在更好的伤口愈合及美容效果基础上，患肾功能得到恢复，并发症少。

目的:总结顺行多镜联合微创方式治疗移植肾上尿路结石的临床经验和疗效。方法:回顾性分析清华长庚医院2018年6月至2020年8月收治的14例移植肾上尿路结石患者的病例资料。男6例，女8例。平均年龄(47.3±11.1)岁。3例合并高尿酸血症，4例合并高血压病和糖尿病。肾移植手术史分别为≥10年3例，3~5年4例，2年3例，1年3例，4个月1例。3例有输尿管软镜碎石术(RIRS)手术史，因输尿管迂曲严重致置鞘或上镜失败而终止手术；2例因结石梗阻积水行输尿管支架管置入术。7例术前血肌酐正常，4例为慢性肾功能不全代偿期，血肌酐91~139μmol/L；3例为慢性肾功能不全失代偿期或肾衰竭期，血肌酐分别为292、544、708μmol/L。术前血红蛋白平均为117.5 g/L。3例为部分鹿角形结石，4例为肾盏或肾盂单发结石，2例为肾盂或肾盏结石合并输尿管上段结石，5例为肾盂或肾盏多发结石。结石大小：1例上盏单发结石0.7 cm，3例下盏结石分别为1.5、1.6、2.0 cm，1例肾盂结石1.5 cm，2例中上盏结石分别为2.8、3.1 cm，2例中下盏结石分别为1.5、3.2 cm，3例中上盏及肾盂结石分别为2.2、2.5、2.6 cm，2例肾盂合并输尿管上段结石，其中肾盂结石分别为1.3 cm和1.7 cm，输尿管结石分别为0.7 cm和0.5 cm。术前尿常规检查示9例有尿路感染，其中5例尿培养阳性，选择敏感药物治疗好转后手术。14例均采用超声引导下建立皮肾通道的顺行多镜联合微创治疗，根据结石大小和分布情况采用单通道或不同大小口径的多通道经皮肾镜取石术(PCNL)相结合，辅以顺行输尿管软镜碎石术(FURS)的联合方式。共7种术式：单一标准通道经皮肾镜碎石术(S-PCNL)2例，结石大小分别为2.2 cm和2.6 cm；单一微通道经皮肾镜碎石术(M-PCNL)2例，结石大小均为1.5 cm；单一针状肾镜碎石术(Needle-perc)1例，结石大小0.7 cm；S-PCNL联合M-PCNL 2例，结石大小分别为2.8 cm和3.1 cm；S-PCNL联合Needle-perc 3例，结石大小分别为2.0、2.5、3.2 cm；M-PCNL联合Needle-perc 2例，结石大小分别为1.5 cm和1.6 cm；S-PCNL联合顺行FURS 2例，肾结石大小分别为1.3 cm和1.7 cm，合并输尿管结石大小分别为0.5 cm和0.7 cm。记录手术时间、血肌酐和血红蛋白变化值、手术并发症、术后住院时间等情况。结果:本研究14例手术均一期顺利完成。术后KUB检查发现1例肾下盏0.6 cm残石，行二期手术经原通道顺行FURS清石。其余13例一期完全清除结石。平均手术时间(68.2±21.6)min。平均术后住院时间(6.2±1.3)d。术后2例血肌酐轻度升高，升高值平均(12.6±0.3)μmol/L；3例显著下降，下降值平均(329.6±216.6)μmol/L；余9例无明显波动，变化范围均<10μmol/L，其中5例升高均值为(5.4±0.7)μmol/L，4例下降均值为(3.7±0.4)μmol/L。血红蛋白较术前下降均值为(9.3±4.1)g/L。2例术后发热，经对症、抗炎治疗后体温恢复正常。均未发生输血、腹腔脏器损伤和尿源性脓毒症等并发症。结论:对于移植肾上尿路结石患者，根据个体差异采用单通道PCNL、不同大小口径的多通道PCNL以及顺行FURS的单一或联合方式进行手术，能有效减少肾功能损伤，结石清除效果好，术后并发症较少。

目的 探讨小通道经皮肾镜取石术(mPCNL)术中动脉损伤的原因.方法 回顾性分析2012年1月至2017年1月我院2 980例行B超引导下mPCNL的肾结石和梗阻性输尿管上段结石患者的临床资料,男1 853例,女1 127例.年龄(45.7±24.1)岁,范围17 ～ 76岁.结石大小(2.62±1.08)cm,范围1.5 ～4.2 cm.肾结石2 478例,输尿管上段结石502例.肾积水程度:轻度727例,中度1 971例,重度282例.480例合并尿路感染,术前应用抗生素控制感染;103例合并肾积脓或急性肾衰,术前行肾造瘘或双J管引流.63例既往有心脑血管支架植入病史,术前停用抗凝药,采用低分子肝素钠替代治疗1周.214例合并糖尿病,术前血糖控制平稳.本研究2 980例均成功建立经皮肾通道.肾盏穿刺2 535例,肾盂穿刺445例.穿刺成功后,将通道扩张为F16 ～22.肾盏穿刺中F16 ～18通道1 446例,F20～22通道1 089例;肾盂穿刺中F16～18通道253例,F20 ～ 22通道192例.单通道穿刺2 653例,多通道穿刺327例.结果 术后出血117例,88例止血成功,29例肾造瘘管引流液为鲜红色,考虑为动脉损伤出血,行数字减影血管造影(DSA)检查.DSA检查示20例为急性动脉损伤、5例为假性动脉瘤、4例为动静脉瘘,予超选择性肾动脉栓塞治疗,术后29例均治愈出院.肾盏穿刺和肾盂穿刺的动脉损伤率分别为0.39％(10/2 535)和4.27％ (19/445),差异有统计学意义(P＜0.05).穿刺位置位于肾下盏、肾中盏、肾上盏的动脉损伤率分别为0.38％(1/267)、0.40％(6/1 516)、0.40％ (3/752),差异无统计学意义(P＞0.05).肾盏穿刺中F16 ～ 18通道和F20 ～ 22通道动脉损伤率分别为0.35％ (5/1446)和0.46％ (5/1 089),差异无统计学意义(P＞0.05).肾盂穿刺中F16 ～ 18通道和F20 ～ 22通道动脉损伤率分别为1.98％ (5/253)和7.29％ (14/192),差异有统计学意义(P＜0.05).单通道和多通道的动脉损伤率分别为0.94％ (25/2653)和1.22％ (4/327),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 B超引导下PCNL中,多通道、肾盏穿刺、肾盏通道大小、肾盏穿刺部位均不是动脉损伤的危险因素,肾盂穿刺及肾盂通道大小是动脉损伤的危险因素.

目的 观察聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)多通道支架联合雪旺细胞(SCs)移植对SD大鼠脊髓损伤的修复作用.方法 原代培养新生SD大鼠SCs并建立脊髓损伤动物模型,将24只动物模型分成3组,实验组包括单独PLGA多通道支架组(n=8)和PLGA多通道支架±SCs组(n=8),对照组不放支架(n=8).术后以脊髓损伤运动功能(BBB)评分法每周评估大鼠后肢运动功能恢复情况,分别于8周取材进行组织学观察.结果 术后2周后,2个实验组的大鼠的BBB评分明显高于对照组,分别为A组(0.45 ±0.69)分和B组(0.65±0.74)分,PLGA多通道支架+SCs组BBB评分优于单独PLGA多通道支架组,并且在术后第8周实验组BBB平均得分分别为(9.05±0.99)、(11.8±0.62)分,两者差异有统计学意义(P=0.004).免疫组织学结果显示三维支架限制了星型胶质细胞的侵入,再生轴突能够长入管道内并与管道长轴方向一致的线性排列,与单纯支架植入组不同,携带SCs的支架植入组,管腔内可以发现与再生轴突相伴行的星形胶质细胞.结论 新型PLGA多管道支架能够为轴突再生提供依托,联合SCs移植后具有促进脊髓损伤后神经再生和运动功能恢复的修复作用.

目的:构建具有定向多通道的纤维蛋白支架,并探究该支架对外胚层间充质干细胞(ecto-mesenchymal stem cells,EMSCs)的生长行为及向神经分化的影响,为其用于脊髓损伤修复提供新思路.方法:通过人工造孔和冷冻干燥技术构建具有定向多通道的纤维蛋白支架,扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察支架内微观结构.大鼠鼻粘膜来源的EMSCs与该支架复合培养7d,倒置荧光显微镜和SEM评估该支架对EMSCs迁移的引导效果,并通过免疫荧光染色技术鉴定其对EMSCs向神经诱导分化的程度.结果:(1)SEM显示支架横截面上有若干通道空洞,支架纵截面显示通道的走向基本与支架长轴一致;(2) EMSCs粘附在定向通道的孔壁上,且沿着支架纵轴的方向延伸;(3)免疫荧光染色显示神经相关蛋白阳性.结论:EMSCs在定向多通道纤维蛋白支架上能够正常生长,且支架的定向多通道对其生长具有引导作用,利于EMSCs的粘附、迁移和向神经方向分化.

目的 将雪旺细胞(SCs)移植到聚乳酸羟基乙酸(PLGA)多通道支架材料中,观察SCs在支架中的黏附、增殖和迁移,探讨细胞和支架的生物相容性.方法 将SCs种植在PLGA多通道支架中,继续培养7d和14 d,利用钙黄绿素-AM (Calcein-AM)4 μl和胡米胺二聚体(EthD-Ⅲ)试剂盒检测细胞在支架中的活性,活细胞被Calcein-AM染成绿色,死细胞被EthD-Ⅲ染成红色.细胞死亡率由计算EthD-1阳性细胞百分比获得.每组每张切片至少5个区域被照相.最终的细胞死亡率取于3组的平均值.扫描电镜及光镜观察细胞形态和S-100蛋白免疫鉴定细胞的迁移状况.结果 倒置显微镜下显示SCs在多管道支架中于7d表现出良好的黏附能力,增殖14 d达到高峰.Viability/Cytotoxicity Assay Kit检测细胞活性发现7d后支架中细胞死亡率为(1.39±0.46)％.14d后支架中细胞死亡率为(1.43±0.51)％.免疫荧光切片及扫描电镜均显示,SCs不仅在管道壁贴附并生长,并且能在14d迁移到通道之间的空泡结构中.结论 SCs和PLGA多管道支架的三维结构之间具有良好的生物相容性.

目的 探讨可视化穿刺系统在经皮肾镜碎石术治疗无积水肾结石中安全性和有效性.方法 回顾性分析本院2017年12月至2018年11月采用可视化穿刺系统治疗的22例无积水肾结石的患者临床资料.术前行泌尿系平扫CT确认患肾无积水,截石位留置输尿管支架制造人工肾积水,俯卧位B超引导下应用可视化穿刺系统穿刺目标肾盏,根据结石大小和盏颈情况选择扩张至F12超微通道、F16/F18微通道或直接行F4.8极微通道进行碎石,必要时应用可视化穿刺系统建立多通道进行碎石.结果 22例患者进行23侧次碎石手术,共建立29个工作通道(包括第二通道),一次穿刺成功率79.3％(23/29),手术时间35～130(67.0±30.4)min,术后血红蛋白下降(6.4±4.7) g/L,无输血及栓塞止血病例,发热2例,无集合系统穿孔、腹腔脏器损伤及胸膜损伤,一期结石清除率(1个月)82.6％(19/23).结论 可视化穿刺系统可安全、快速地建立经皮肾工作通道,治疗无积水肾结石具有较高的结石清除率和安全性,尤其适合操作经验不足的年轻医师.

目的 观察大鼠神经干细胞(NSCs)在脊髓脱细胞支架(SCAS)上黏附、生长和分化情况,评价其构建脊髓组织工程的可行性.方法 新生Sprague-Dawley大鼠大脑皮质来源NSCs传代培养并鉴定;Sprague-Dawley雌性大鼠脊髓组织改良物理振荡结合化学萃取法制备SCAS,并行基础评估;将第三代NSCs种植在SCAS上,体外共培养,免疫荧光、免疫组化和扫描电镜观察支架上细胞形态.结果 共培养的细胞为能增殖、分化的NSCs.制备的SCAS孔隙率、含水率、酶解率都明显高于正常脊髓(|t|>4.679,P<0.01);SCAS基质结构呈疏松网络状,基质上可见极少量残留细胞核.NSCs在SCAS上黏附、生长良好,可分化为神经元和神经胶质细胞.结论 制备的SCAS脱细胞较彻底,具有多通道空间结构,适合NSCs黏附、生长和分化,可用于脊髓组织工程.

多炔彩虹探针(Carbow)是一种基于聚炔支架的超多路复用拉曼探针,通过受激拉曼散射(stimulated Raman scattering,SRS)显微技术可以对振动频率不同的20余种彩虹探针分子进行区分.利用探针分子的特异性修饰,Carbow可以对活细胞内的多种细胞器,以及蛋白质和脂质等大分子进行同时成像.多炔分子的高光稳定性与低细胞毒性结合SRS的多通道光学检测将使Carbow在生物学领域具有巨大的应用潜力.该文综述了基于SRS平台的拉曼标记技术和Carbow的设计合成原理与优势,并对Carbow在活细胞中不同细胞器的特异性标记成像以及在细胞与组织免疫染色、细胞分选与高通量分析中的生物学应用进行总结.最后,对拉曼标记技术的提升改进及其在植物学领域中的应用进行了展望.