背景:临床上创伤性髌骨脱位合并内侧髌股韧带股骨止点或体部撕裂多采用内侧髌股韧带重建手术,为促进内侧髌股韧带重建术后的腱骨愈合,研究者采用了包括生长因子、干细胞、富血小板血浆在内的多种生物治疗技术.目的:探讨自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合腘绳肌腱重建内侧髌股韧带修复创伤性髌骨脱位的临床疗效.方法:选择2019年2月至2021年2月秦皇岛市第一医院诊治的创伤性髌骨脱位患者37例,采用随机数字表法分为试验组(n=18)与对照组(n=19),试验组接受自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合自体腘绳肌腱重建内侧髌股韧带手术,对照组接受单纯自体绳肌腱重建内侧髌股韧带手术.两组患者术后随访12个月,通过目测类比评分、Lysholm 评分、Kujala髌股关节评分及膝关节活动度评估患者膝关节疼痛及功能状态,通过MRI及CT片测量髌股关节髌骨倾斜角、髌骨适合角及髌骨外移率,评估髌股关节的稳定性及改善情况.结果与结论:①两组术后6,12个月的目测类比评分均低于术前(P<0.05),术后6,12个月的Lysholm 评分、Kujala髌股关节评分均高于术前(P<0.05);试验组术后6个月的Lysholm 评分、Kujala髌股关节评分高于对照组(P<0.05),两组间术后12个月的目测类比评分、Lysholm 评分、Kujala髌股关节评分比较差异无显著性意义(P>0.05);②两组术后12个月的髌股关节髌骨倾斜角、髌骨适合角、髌骨外移率及关节活动度测量值均较术前明显改善(P<0.05);试验组术后12个月的髌骨倾斜角小于对照组(P<0.05),两组间术后12个月的髌骨适合角、髌骨外移率及关节活动度及MRI评分比较差异无显著性意义(P>0.05);③结果表明,自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合腘绳肌腱重建内侧髌股韧带能有效治疗创伤性髌骨脱位,改善膝关节功能,恢复髌骨的运动轨迹.

目的:通过动物实验评价富血小板纤维蛋白(PRF)联合自体骨髓浓缩物(BMAC)修复骨缺损的早期效果.方法:12~16月龄日本大耳白兔6只,于颅顶制备4个直径为5 mm的圆形骨缺损,随机填入空白(A组)、自体骨沫(B组)、PRF与BMAC混合物(C组),并对PRF行组织学分析.术后6周取材,通过影像学检查及组织学分析评价骨缺损的修复效果.结果:PRF为乳白色纤维蛋白凝胶,具有弹性和韧性,组织学切片可见疏松多孔的网状胶原纤维,基底部网络少量白细胞.各组骨缺损均未见炎症反应,新骨生成率分别为:A组(7.64±1.02)%,B组(12.94±0.81)%,C组(37.19±1.26)%,C组新骨生成率显著高于A、B组(P<0.05).结论:PRF联合BMAC可以显著加快新骨再生的速度,促进兔颅骨缺损的修复.

目的 探讨富血小板纤维蛋白(platelet rich fibrin,PRF)形态学超微结构及意义.方法 选择10例健康志愿者,抽取静脉血制备PRF,对PRF分别行光学显微镜、扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察.结果 PRF为淡黄色纤维蛋白凝胶,H-E染色见胶原纤维为染色均一的淡红色网状结构,在近细胞端纤维排列较致密,含大量血小板.吉姆萨染色见淡蓝色的胶原纤维为网状结构,近细胞端见染为蓝色的白细胞.SEM发现胶原纤维排列成疏松多孔网状支架结构,含大量静止或伸出伪足的血小板及白细胞.TEM发现血小板处于静止或激活状态,α-颗粒释放于细胞和纤维之间,在细胞之间见高密度区为血小板释放的颗粒.结论 PRF胶原纤维的网状立体结构和富含血小板激活释放生长因子,对生物学作用发挥有重要意义.

背景:富白细胞-血小板血浆和富白细胞-血小板纤维蛋白是两种具有加快创面愈合功效的自体富血小板凝胶.目的:比较富白细胞-血小板纤维蛋白及富白细胞-血小板血浆在组成成分、结构、释放生长因子方面的差异?方法:抽取志愿者空腹静脉血,每份血样分别制备富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶与富白细胞-血小板血浆凝胶,采用光镜及扫描电镜观察凝胶的微观结构,计算白细胞、血小板的浓缩倍数及回收率.将两种凝胶保存于DMEM培养基中,1,3,7,14,21 d后收集含有渗出液的培养液,ELISA法检测血小板源性生长因子、转化生长因子β1、血管内皮细胞生长因子的浓度.结果与结论:①光镜下显示,富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶内的血小板?白细胞与红细胞分界清晰,可见大量白细胞及纤维蛋白簇集;富白细胞-血小板血浆凝胶的血小板、白细胞较少,散在红细胞中;②电镜下显示,富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶中含有大量纤维蛋白,形成致密的特殊3D结构,交界处血小板叠加结构清晰;富白细胞-血小板血浆凝胶交界处纤维较少且夹杂大量血小板,部分血小板已裂解;③与富白细胞-血小板血浆凝胶比较,富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶具有更高的血小板回收率(P=0)、白细胞回收率(P=0)及淋巴细胞回收率(P=0);④除血管内皮细胞生长因子外,富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶保存3,7,14,21 d的转化生长因子 β1、血小板源性生长因子浓度高于富白细胞-血小板血浆凝胶;⑤结果表明与富白细胞-血小板血浆凝胶相比,富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶制备更简单、结构更优、生长因子释放更缓慢,在治疗创面中更有优势.

背景:富血小板纤维蛋白因其特性已在临床中广泛应用,但不同离心程序制造出的纤维蛋白结构及成分会有不同,进而影响临床效果.目的:比较两种特定离心程序制备的富血小板纤维蛋白的组织特点.方法:采集40例自愿捐献者的静脉血,随机分2组,每组20例,一组通过低速离心(1500 r/min离心14 min)程序获得改良富血小板纤维蛋白,另一组通过中速离心(3000 r/min离心10 min)程序获得传统白细胞富血小板纤维蛋白.通过苏木精-伊红染色、免疫组化技术、扫描电镜及透射电镜观察两组纤维蛋白中的白细胞、纤维蛋白基质分布情况及差异.结果 与结论:①苏木精-伊红染色:两组纤维蛋白均含有较多白细胞,多集中在中间层并偏向于红细胞端层,凝胶层大部分为纤维蛋白基质,其中改良富血小板纤维蛋白中的白细胞在凝胶层有一些散在均匀分布;②免疫组化:两组纤维蛋白在中间层区域含有大量白细胞,包括单核细胞和中性粒细胞,改良富血小板纤维蛋白中的中性粒细胞比例大于白细胞富血小板纤维蛋白(P﹤0.05),两组单核细胞比例比较差异无显著性意义(P>0.05);③扫描电镜:两组纤维蛋白的白细胞分布广泛,其中改良富血小板纤维蛋白中纤维蛋白基质空间内白细胞和血小板数量稍多,纤维基质条索排列略紧密;④透射电镜:两组纤维蛋白中间层聚集较多的中性粒细胞、单核细胞,血小板密集并含量较多,纤维蛋白基质排列致密,其中改良富血小板纤维蛋白中的纤维基质排列略密集,白细胞含量及血小板稍多;⑤结果表明:因含有的白细胞数量差别,改良富血小板纤维蛋白可能比白细胞富血小板纤维蛋白在促进组织愈合中发挥更积极的作用.

创面愈合问题一直是组织修复领域工作的重点之一。创面愈合是由多种细胞、细胞外基质及生长/细胞因子共同参与，互相高度协调，出凝血、炎症反应、增殖及重塑四个渐次发生又相互重叠的过程。目前急、慢性创面的治疗方法众多，涉及手术、物理性(光、电、磁等)、化学(药物等)，以及生物性(细胞治疗、再生材料等)多种手段，伴随近年来再生医学的迅猛发展，以细胞及衍生物的创面治疗取得令人曙目的成果。浓缩血小板是通过离心的方法从全血中提取出来的血小板浓缩液，含有高浓度的血小板、白细胞和纤维蛋白。目前的血小板浓缩制品在临床的应用主要有以下几种形式：最为常见的即富血小板血浆(platelet rich plasma，PRP)，其他有：浓缩血小板(platelet concentrate，PC)、血小板凝胶(platelet gel，PG)、富血小板凝胶(platelet rich gel，PRG)、富血小板血浆胶(凝胶)(platelet-fibrinogen-thrombin mixture)、富血小板纤维蛋白(platelet rich fibrin，PRF)、富含生长因子血浆(plasma rich in growth factors，PRGF)、浓缩生长因子(concentrate growth factors，CGF)，以及血小板裂解液(platelet lysate，PL)等。又可根据是否含有中性粒细胞、淋巴细胞分为几种亚型，如高浓度白细胞的L-PRP(leucocyte-and platelet-rich plasma)和L-PRF(leucocyte-platelet-rich fibrin)，以及低浓度白细胞或纯的P-PRP(pure platelet-rich plasma)和P-PRF(pure platelet-rich fibrin)。也有人根据是否激活、是否含有血小板外膜进行分类。甚至制备成血小板分泌的细胞外囊泡(platelet-derived extracellular vesicles，PLT-EVs)，或富血小板血浆衍生的外泌体(exosomes derived from PRP，PRP-Exos)。总之，可将它们统称为血小板浓缩衍生物。其所释放的活性蛋白、肽、细胞外囊泡等成分通过内分泌、自分泌、旁分泌等方式作用于靶细胞，或与其表面的跨膜受体结合，进而激活细胞内的信号转导途径，引起基因序列的表达，合成组织再生过程中所需的蛋白质。对损伤组织具有增加胶原沉积，刺激血管再生，调节创区炎症反应；甚至，减轻创伤后局部肿胀和疼痛，减少术后伤口渗出的作用。浓缩血小板来源于自体、无免疫排斥、制作简单，临床应用方便、安全。浓缩血小板成分不仅为组织的修复提供了"高浓度的营养"，还为组织修复搭建了更好的修复环境，能促进和加速各类组织的修复。