富血小板纤维蛋白(PRF)是一种具有立体纤维蛋白结构、富含大量白细胞和血小板的第二代血小板浓缩物，可持续释放各种促进伤口愈合的细胞因子及生长因子。PRF已在创伤外科、整形外科及口腔科等临床科室广泛用于治疗患者各种急慢性创面。对创伤外科中常见的慢性难愈合创面，常规的外科处理常效果不佳。大量的研究已证实PRF对慢性创面具有良好的治疗效果。根据标本选择、离心方法、离心管材质、冻干保存技术等多种方法，研究者尝试对PRF进行改良增效，并已取得巨大进展。本文就PRF制备和保存技术研究现状进展作一综述。

目的:探讨超活化血小板裂解液(sPL)对类风湿关节炎患者成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)的影响。方法:选取哈尔滨医科大学附属第一医院2018年1月—2019年3月6例类风湿关节炎患者作为研究对象，其中男3例、女3例，年龄26~49岁、中位年龄33岁，受累关节功能分级均为Ⅱ级。收集患者静脉血标本，先进行两次离心分离获得富血小板血浆(PRP)；再加入0.08 mmol/L CaCl 2, 37 ℃孵育激活血小板；然后经过冷冻、融化、离心、过滤除菌、去除纤维蛋白原，获得sPL。培养RA-FLS，分为对照组和2.5%、5%、10% sPL组，分别与含有0、2.5%、5%、10% sPL的培养液培养48 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞中炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β的浓度；细胞计数试剂盒(CCK)-8法测定各组细胞增殖活性；流式细胞术测定各组细胞的凋亡率；体外小管生成实验检测各组细胞血管生成能力；Transwell实验检测各组细胞迁移能力和侵袭能力；Western blot法测定各组细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)和VEGF受体-2 (VEGFR2)的表达情况。 结果:(1)对照组、2.5%sPL组、5%sPL组、10%sPL组细胞培养基中IL-6浓度分别为(80.18±11.67)、(59.94±9.50)、(46.60±8.04)、(60.67±9.24)pg/mL，TNF-α浓度分别为(70.75±9.14)、(54.56±7.81)、(43.27±6.30)、(53.99±8.60)pg/mL，IL-1β浓度分别为(64.18±9.90)、(46.97±8.79)、(36.28±7.44)、(47.66±8.15)pg/mL，组间比较差异均有统计学意义( F＝12.186、11.934、10.709， P值均<0.01)；2.5%sPL组、5%sPL组、10% sPL组细胞中IL-6、TNF-α、IL-1β的表达水平均明显低于对照组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；5% sPL组炎症因子表达水平低于2.5% sPL组和10% sPL组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。(2)对照组、2.5%sPL组、5%sPL组、10%sPL组RA-FLS增殖率分别为87.33%±10.98%、76.17%±8.18%、60.83%±7.99%、75.83%±8.45%，细胞凋亡率分别为6.51%±1.16%、16.23%±2.75%、29.69%±3.80%、16.37%±2.29%，小管形成数分别为(41.00±7.55)、(26.67±4.16)、(11.67±3.51)、(26.00±6.56)个，迁移细胞数目分别为(443.00±54.06)、(282.33±31.66)、(154.64±23.18)、(292.00±35.03)个，侵袭细胞数目分别为(243.30±27.39)、(67.00±12.53)、(22.33±8.74)、(79.33±14.98)个，组间比较差异均有统计学意义( F＝8.795、38.095、34.278、29.352、94.772, P值均<0.05)；2.5%sPL组、5%sPL组、10% sPL组RA-FLS细胞增殖率、血管管腔形成数量、迁移细胞数目和侵袭细胞数目均低于对照组，细胞凋亡率均高于对照组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；5% sPL组中细胞增殖率、小管形成数、迁移细胞数目和侵袭细胞数目均明显低于2.5% sPL组和10% sPL组，细胞凋亡率则高于2.5% sPL组和10% sPL组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。(3)对照组、2.5%sPL组、5%sPL组、10%sPL组RA-FLS PCNA、CyclinD1、Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、VEGF和VEGFR2蛋白相对表达量比较，差异均有统计学意义( P值均<0.01)；2.5%sPL组、5%sPL组、10% sPL组细胞中PCNA、CyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、VEGF和VEGFR2蛋白相对表达量均低于对照组，Bax蛋白相对表达量均高于对照组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；5% sPL组PCNA、CyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、VEGF和VEGFR2蛋白相对表达量均低于2.5% sPL组和10% sPL组，而Bax蛋白相对表达量则高于2.5% sPL组和10% sPL组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。 结论:sPL对RA-FLS的增殖、迁移、侵袭、血管生成以及炎症因子的产生具有抑制作用，对RA-FLS凋亡具有促进作用，且SPL对RA-FLS的生长抑制效果与SPL浓度有关。

目的:探讨改良型富血小板纤维蛋白（A-PRF）对裸鼠深Ⅱ度烧伤创面的作用及其机制。方法:采用实验研究方法。招募苏北人民医院40名健康志愿者，包括32名女性、8名男性，年龄为60~72岁，抽取静脉血后制备富白细胞血小板纤维蛋白（L-PRF）和A-PRF膜片，采用场发射扫描电子显微镜观察2种富血小板纤维蛋白（PRF）膜片的微观结构。以下实验样本数均为3。将L-PRF、A-PRF膜片分别设为L-PRF组、A-PRF组并进行培养，采用酶联免疫吸附测定法检测培养1、3、7、14 d上清液中血小板衍生生长因子AB（PDGF-AB）和血管内皮生长因子（VEGF）的释放浓度。取小鼠L929成纤维细胞（Fb），分为L-PRF组、A-PRF组，并分别加入L-PRF或A-PRF条件培养基培养，于培养1、3、7 d采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性，采用划痕试验检测并计算划痕后24 h细胞迁移率。取36只6~8周龄雄性BALB/c裸鼠，于一侧后腿皮肤制作1个深Ⅱ度烧伤创面后，按随机数字表法分为生理盐水组、L-PRF组、A-PRF组，每组12只。生理盐水组裸鼠创面仅行生理盐水冲洗，L-PRF组、A-PRF组裸鼠创面另覆盖相应PRF膜片，3组裸鼠创面均用敷料包扎固定。治疗4、7、14 d，观察创面愈合情况并计算创面愈合率，取创面组织行Masson染色观察新生胶原情况，行免疫组织化学染色检测创面CD31阳性细胞百分比。对数据行独立样本 t检验、重复测量方差分析、析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD检验。 结果:L-PRF膜片由粗大的纤维蛋白束构成致密的网状结构，散在分布形态完整的白细胞及血小板。A-PRF膜片由细小的纤维蛋白束构成疏松的网状结构，散在分布少量变形的白细胞及血小板。培养1 d，A-PRF组PRF培养上清液中PDGF-AB释放浓度明显高于L-PRF组（ t=5.73， P<0.05），2组PRF培养上清液中VEGF释放浓度相近（ P>0.05）；培养3、7、14 d，A-PRF组PRF培养上清液中PDGF-AB、VEGF释放浓度均明显高于L-PRF组（ t值分别为6.93、7.45、5.49，6.97、8.97、13.64， P<0.05）。培养3、7、14 d，2组PRF培养上清液中PDGF-AB、VEGF释放浓度均明显高于组内前一时间点（ P<0.05）。培养1、3、7 d，A-PRF组小鼠Fb增殖活性分别为0.293±0.034、0.582±0.054、0.775±0.040，均明显强于L-PRF组的0.117±0.013、0.390±0.036、0.581±0.037（ t值分别为8.38、5.14、6.16， P<0.05）。划痕后24 h，A-PRF组小鼠Fb迁移率为（60.9±2.2）%，明显高于L-PRF组的（39.1±2.3）%（ t=11.74， P<0.05）。治疗4 d，L-PRF组和A-PRF组裸鼠创面渗液较少且未见明显感染迹象，生理盐水组裸鼠创面有较多渗液。治疗7 d，L-PRF组和A-PRF组裸鼠创面干燥结痂，生理盐水组裸鼠创面仍有少量渗液。治疗14 d，A-PRF组裸鼠创面趋于愈合，L-PRF组裸鼠仍残留小部分创面，生理盐水组裸鼠创面仍有未脱落焦痂。治疗4、7、14 d，L-PRF组裸鼠创面愈合率与CD31阳性细胞百分比均明显高于生理盐水组（ P<0.05）；与生理盐水组和L-PRF组相比，A-PRF组裸鼠创面愈合率均明显升高（ P<0.05），新生胶原排列有序、分布均匀且未见过度沉积，CD31阳性细胞百分比均明显升高（ P<0.05）。 结论:A-PRF稳定的纤维蛋白网状结构能维持生长因子持续释放、加快细胞增殖、促进细胞迁移，以缩短裸鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合时间且改善愈合质量。

目的 探讨富白细胞-血小板纤维蛋白(leukocyte-and platelet-rich fibrin,L-PRF)作为盖髓剂对大鼠牙髓炎症调节的作用.方法 脂多糖(LPS)构建牙髓炎大鼠模型,30只大鼠随机分成5组,即正常对照组、LPS造模组、iRoot BP PLUS组、L-PRF组、L-PRF+iRoot BP PLUS组.直接盖髓14 d后取标本行显微CT(Micro-CT)扫描、苏木精-伊红(HE)及Masson染色、定量实时聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测,观察牙髓炎症及硬组织形成程度.结果 Micro-CT示:LPS组未见硬组织形成,L-PRF组冠髓内可见斑块状钙化物,BP组及联合组在穿髓孔处见较完整的钙化桥.组织学染色示:LPS组炎症最重、无硬组织形成;联合组炎症最轻,硬组织形成最完整、连续,两组差异有统计学意义(P<0.01);BP组与联合组的炎症及硬组织形成程度均差异无统计学意义(P>0.05).qRT-PCR结果示:各实验组牙髓组织中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA相对表达水平相较于LPS组均有所降低,但L-PRF组与LPS组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 L-PRF联合iRoot BP PLUS作为复合盖髓材料,可用于大鼠牙髓炎牙髓组织修复以及牙髓炎症调节.

目的 观察富血小板纤维蛋白(PRF)联合引导组织再生术(GTR)治疗牙周牙髓联合病变的疗效,并探讨其对患者牙周状况、炎症因子和组织再生指标的影响.方法 将2020年9月至2022年9月郑州大学第一附属医院收治的190例牙周牙髓联合病变患者按电脑随机数表法分为GTR组和联合组,每组95例.两组患者均予以常规治疗,在此基础上,GTR组予以GTR治疗,联合组予以PRF+GTR治疗.治疗2个月后评估两组患者临床疗效,比较两组患者治疗前、治疗1个月后和治疗2个月后的龈沟液炎症因子[白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、组织再生指标[骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)]水平,比较两组治疗前、治疗6个月后和治疗12个月后的患牙探诊深度(PD)、附着丧失水平(AL)、牙龈退缩松动度(GR)、出血指数(BI)、牙槽骨密度、牙周袋深度,同时比较两组患者的不良反应发生情况.结果 联合组患者的治疗总有效率为95.79%,明显高于GTR组的86.32%,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗1个月和2个月后,联合组患者的IL-1、IL-6和TNF-α水平明显低于GTR组,差异均有统计学意义(P＜0.05);治疗1个月和2个月后,联合组患者的BMP-2、TGF-β1和VEGF水平明显高于GTR组,差异均有统计学意义(P＜0.05);治疗6个月和12个月后,联合组患者的AL、PD、BI和牙周袋深度明显低于GTR组,而GR和牙槽骨密度明显高于GTR组,差异均有统计学意义(P＜0.05);术后门诊随访3个月,两组患者均未见其他不良反应.结论 PRF联合GTR治疗牙周牙髓联合病变可减轻炎症反应,改善牙周状况,提高牙槽骨密度,降低牙周袋深度,促进牙髓组织再生,其疗效确切且安全性较高.

背景:富血小板纤维蛋白作为第2代血小板浓缩物具有操作简单、无抗凝剂、生物活性高等优点,已在创面修复、骨缺损修复、肌腱软组织修复等领域应用,并被证实具有一定的组织修复促进作用.目的:研究富血小板纤维蛋白对膝骨关节炎大鼠关节软骨组织的修复作用.方法:36只SD大鼠随机分为正常组、模型组和富血小板纤维蛋白组,每组12只;正常组大鼠不做任何处理;模型组大鼠制备膝骨关节炎模型,术后每周给予生理盐水关节腔注射1次;富血小板纤维蛋白组大鼠制备膝骨关节炎模型,术后每周给予自体富血小板纤维蛋白关节腔注射1次;连续治疗5周后取材.采用苏木精-伊红染色观察软骨组织形态,采用Tunel染色检测软骨细胞凋亡,采用ELISA检测炎性因子含量,采用Western blot及RT-PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白和mRNA的表达.结果与结论:①模型组软骨组织受损严重,富血小板纤维蛋白组软骨组织形态较模型组有显著改善;②模型组软骨细胞凋亡较多;富血小板纤维蛋白组Tunel染色阳性染色平均吸光度值显著降低(P<0.01);③与正常组比较,模型组和富血小板纤维蛋白组的白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α含量显著增加(P<0.01);与模型组比较,富血小板纤维蛋白组的白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α含量显著减少(P<0.01);④与正常组比较,模型组和富血小板纤维蛋白组Bax和Caspase-3蛋白和mRNA的相对表达量显著增加(P<0.01),而Bcl-2蛋白和mRNA的相对表达量显著减少(P<0.01);与模型组比较,富血小板纤维蛋白组Bax和Caspase-3蛋白和mRNA的相对表达量显著减少(P<0.01),而Bcl-2蛋白和mRNA的相对表达量显著增加(P<0.01);⑤结果说明,富血小板纤维蛋白可通过抑制促炎因子表达而抑制软骨细胞凋亡,从而促进膝骨关节炎大鼠软骨组织修复.

背景:临床上创伤性髌骨脱位合并内侧髌股韧带股骨止点或体部撕裂多采用内侧髌股韧带重建手术,为促进内侧髌股韧带重建术后的腱骨愈合,研究者采用了包括生长因子、干细胞、富血小板血浆在内的多种生物治疗技术.目的:探讨自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合腘绳肌腱重建内侧髌股韧带修复创伤性髌骨脱位的临床疗效.方法:选择2019年2月至2021年2月秦皇岛市第一医院诊治的创伤性髌骨脱位患者37例,采用随机数字表法分为试验组(n=18)与对照组(n=19),试验组接受自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合自体腘绳肌腱重建内侧髌股韧带手术,对照组接受单纯自体绳肌腱重建内侧髌股韧带手术.两组患者术后随访12个月,通过目测类比评分、Lysholm 评分、Kujala髌股关节评分及膝关节活动度评估患者膝关节疼痛及功能状态,通过MRI及CT片测量髌股关节髌骨倾斜角、髌骨适合角及髌骨外移率,评估髌股关节的稳定性及改善情况.结果与结论:①两组术后6,12个月的目测类比评分均低于术前(P<0.05),术后6,12个月的Lysholm 评分、Kujala髌股关节评分均高于术前(P<0.05);试验组术后6个月的Lysholm 评分、Kujala髌股关节评分高于对照组(P<0.05),两组间术后12个月的目测类比评分、Lysholm 评分、Kujala髌股关节评分比较差异无显著性意义(P>0.05);②两组术后12个月的髌股关节髌骨倾斜角、髌骨适合角、髌骨外移率及关节活动度测量值均较术前明显改善(P<0.05);试验组术后12个月的髌骨倾斜角小于对照组(P<0.05),两组间术后12个月的髌骨适合角、髌骨外移率及关节活动度及MRI评分比较差异无显著性意义(P>0.05);③结果表明,自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合腘绳肌腱重建内侧髌股韧带能有效治疗创伤性髌骨脱位,改善膝关节功能,恢复髌骨的运动轨迹.

近年来,已经开发出不同的自体血小板浓缩物,例如富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP))和富血小板纤维蛋白(Platelet-rich fibrin,PRF).注射型富血小板纤维蛋白(Injectable platelet-rich fibrin,i-PRF)作为PRF衍生物中唯一以液体形式获得的产物,不仅保留了 PRF在创面治疗中的独特优势(如:持续释放生长因子,促进新生血管生成,细胞迁移、增殖和分化),低速离心后更是显著增加了白细胞和血小板数量以及生长因子浓度.同时还可以达到最大化注射,并能够与其他生物材料联用,因此在创面修复领域受到广泛关注.本文就i-PRF在创面修复治疗中的应用现状进行综述.

目的 观察富血小板纤维蛋白(PRF)联合泡沫敷料治疗慢性感染伤口的效果及抑菌作用.方法 选取慢性伤口感染接受治疗的患者90例,以随机数字表法分为对照组和实验组,每组45例.对照组接受泡沫敷料治疗,实验组予以PRF联合泡沫敷料治疗.比较2组治疗后14 d总有效率、创面恢复情况(换药次数、创面面积减少量);比较2组治疗后3、7 d疼痛评分;比较2组治疗后7、14 d细菌转阴率及治疗后14 d血清白细胞(WBC)水平、血清C反应蛋白(CRP)水平、血清降钙素原(PCT)水平、血清白细胞介素-6(IL-6)水平.结果 治疗14d后,实验组、对照组的总有效率分别为100.00％和77.78％,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后,实验组、对照组换药次数分别为(4.39±5.48)次和(11.12±1.36)次,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组、对照组创面面积减少量分别为(14.98±1.73)cm2和(11.26±1.35)cm2,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组治疗后3、7 d疼痛评分较对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后14 d,实验组、对照组细菌转阴率分别为100.00％、58.62％,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后14d,实验组WBC、CRP、PCT、IL-6水平较对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PRF联合泡沫敷料治疗慢性感染伤口能够显著提高治疗效果,促进伤口愈合,缓解疼痛,抑制细菌感染,并减轻炎症反应.

血小板为血液系统重要组成部分.浓缩血小板及其衍生制品种类较多,其中富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)、生长因子(growth factors,GFs)以及富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)等已广泛应用于临床.冻干血小板(lyophilized platelets,Lyo-P or freeze-dried platelets,FDP)由浓缩血小板冷冻干燥制备而成,冻干后具有常温下保存时间长、质量轻、便于运输、灭活病原体等优点.Lyo-P含有高浓度GFs、纤维蛋白、白细胞以及多种细胞因子等,除具止血和促凝功能外,Lyo-P及其制品越来越多应用于创面愈合、组织修复、美容及生殖医学等领域.