骨组织虽然具有一定的自愈能力，但超出自愈极限的骨缺损仍然需要进行骨移植。羟基磷灰石、磷酸三钙等钙磷材料是目前常见的骨修复支架材料，但这些生物活性材料往往缺乏成骨诱导活性、促种子细胞黏附以及促血管生成等能力。弥补这些缺陷的传统方法是使用骨形态发生蛋白等生长调节因子对生物活性材料上的成骨过程进行调控。然而这些活性因子往往具有成本高、不能长期使用等缺点。为解决以上问题，各种小分子活性肽应运而生，并发挥了较好的成骨效应。对常见的多种诱导成骨的小分子活性肽进行介绍，并对其研究进展进行综述。

肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏经过肝切除、肝移植等外科干预或全身出血性休克后所出现的损伤，能够导致严重的术后并发症，已强烈威胁到边缘性供肝的利用和患者的临床转归。因此，如何有效干预HIRI一直是肝脏外科领域的重要话题。虽然HIRI的病理生理机制正逐渐被阐明，但目前临床上仍未出现对抗该损伤的防治措施。生物活性多肽是不具有蛋白质四级结构的小分子物质，能够在体内高效调节如应激、代谢等生理进程，同时参与疾病的发生与发展。近年来随着胰岛素等肽类制剂在临床中的成功应用，生物活性多肽在HIRI领域中的作用也得到了广泛关注。目前已有多项研究报道生物活性多肽能够对抗HIRI，展现出巨大的肝脏保护潜能。因此，本文针对近年来生物活性多肽在HIRI中的研究作一综述，以期为干预HIRI提供新视角。

蛇毒已被证明具有抗炎活性,其中包含许多免疫原性弱、活性强的短肽小分子.蛇毒腺是分泌毒液的器官,含有毒素成分及调控其分泌过程的大量生物活性成分.缓激肽2型受体(B2R)参与重要的细胞内信号通路,作为炎症的调节因子成为潜在的抗炎药物开发的靶点.为了获得特异性的B2R结合肽,利用尖吻蝮蛇Deinagkistro-don acutus毒腺T7噬菌体文库对靶点B2R进行3轮生物淘选,测序获得了多个具有潜在结合能力的序列.通过序列长度、溶解性预测、稳定性预测和分子对接等一系列生物信息学分析,最终确定1个含25个氨基酸的肽段,命名为DAvp-4.合成该肽段,通过表面等离子体共振技术验证了DAvp-4和B2R的结合能力,在脂多糖诱导的巨噬细胞模型及糖尿病视网膜病变小鼠模型中肯定了其抗炎作用.此研究不但获得了一个具有成药潜力的毒腺多肽,还显示了噬菌体展示技术在筛选天然产物成分研究中的有效性.

中药是天然药物和活性前体的丰富来源,除小分子成分外,近年来其中的活性肽/蛋白质也备受关注.快速发展的分离和纯化技术,结合先进的筛选、鉴定策略,使越来越多具有药用价值的生物活性肽被发现并报道.本文综述了近年来活性肽的发现流程和筛选新方法,旨在为研究和发现中药活性肽提供参考.

一、前言本指导原则适用的抗体偶联药物(antibody-drug Conjugate,ADC)是指通过连接子将小分子化合物偶联至靶向性抗体或抗体片段的一类生物技术药物,旨在增强药物靶向性和稳定性、减少不良反应、提高治疗指数,临床上主要应用于抗肿瘤或者其他疾病的靶向治疗.ADC结构组成包括抗体或抗体片段、连接子和小分子化合物.其中,抗体通常选用可被靶细胞内化的抗体;连接子具有一定的循环稳定性,可以支持药物在到达靶器官前不被降解或者少量降解,进入细胞后能够快速释放活性小分子化合物;小分子化合物能够对靶细胞产生药效作用.因此,ADC是生物大分子和化学小分子的结合体,具有独特的作用机制和代谢动力学特征.上述概念范畴以外的偶联药物,如抗体偶联放射性药物、多肽偶联药物也可参考本指导原则.本指导原则的起草基于当前的科学认知,随着科学研究的进展,相关内容将不断完善和适时更新.

目的 采用"分子对接-分子动力学-体外药理学"研究方法筛选并优化阻断程序性细胞死亡蛋白1/程序性细胞死亡配体 1(programmed cell death protein 1/programmed death-ligand 1,PD-1/PD-L1)结合,获得具有较高抗肿瘤活性的多肽小分子化合物.方法 利用本团队构建的5肽化合物数据库,以及从蛋白质数据库(protein databank,PDB)中下载的PD-L1蛋白质三维结构数据,采用Molecular Operating Environment软件进行柔性分子对接得到多肽化合物;对其中 GWVI/WSA(generalized Born volume integral/weighted surface area)自由能变化值(ΔG)排名最高的化合物分子进行分子动力学计算分析,包括配体重原子位置变动的均方根偏差(root mean square error,RMSD)以及相互作用能[为兰纳-琼斯势能(Lennard-Jones potential)与库伦势能(Coulombic energy)之和].通过均相时间分辨荧光(homogeneous time-re-solved fluorescence,HTRF)技术分析配体化合物对PD-1/PD-L1相互结合的阻断作用,建立Jurkat T淋巴细胞与黑色素瘤B16-F10细胞的共培养体系,探索化合物配体对T细胞杀伤肿瘤作用的影响以及对共培养上清液中IL-2分泌水平的影响.结果 在筛选的多肽化合物中,RGGHA与RGGHH与PD-L1的结合更为稳定,其中RGGHA与PD-L1存在多种相互作用力,与PD-1竞争性结合PD-L1的Asp122、Try123、Lys124等位点阻断PD-1/PD-L1信号转导.HTRF实验表明,RGGHA对PD-1和PD-L1结合抑制率为58.38％,RGGHH为42.73％.此外,在共培养体系中,RGGHA与RGGHH能够显著增加IL-2的分泌水平,提高T细胞对于肿瘤细胞的杀伤能力,激活肿瘤免疫微环境.结论 研究发现多肽化合物RGGHA与RGGHH可以有效阻断PD-1/PD-L1相互作用,重新激活有利于抗癌的免疫反应,可以将其作为先导化合物用于新药研发.

非核糖体肽(nonribosomal peptide,NRP)是由多种微生物通过非核糖体肽合成酶(nonribosomal peptide synthetase,NRPS)等催化合成的一类小分子多肽类次级代谢产物,具有抗菌、抗肿瘤、免疫抑制等多种生物活性,是一类重要的微生物药物,具有很高的临床应用价值.从目前已发现的小分子多肽类天然药物出发,综述了该类物质的生物功能、合成组装机制以及近年来在工程改造方面的进展,并提出了未来研究发展方向,对进一步通过组合生物合成等方式高效合成更多种类的小分子多肽类活性物质具有借鉴意义.

真菌感染常发生于免疫功能低下人群,近20年来免疫功能低下人群逐年增多,使得真菌感染的发病率和死亡率显著升高.目前临床可用的抗真菌药物品种非常有限,已无法满足临床需求,抗真菌新药研发迫在眉睫.近些年,新结构、新靶点、新组合、新剂型的抗真菌药物开发取得了一定的进展.新型活性小分子化合物及多肽类药物包括影响真菌细胞壁的fosmanogepix、雷扎芬净、ibrexafungerp、尼可霉素z等,影响真菌细胞膜的oteseconazole(VT-1161),影响线粒体功能的T-2307、冬青生菌素H,鞘脂合成抑制剂BHBM和D13,以及其他机制的小分子和肽类药物(turbinmicin、AR-12、VL-2397、olorofim等).联合用药的组合包括氟康唑联合小檗碱、卡泊芬净联合利巴韦林、金诺芬联合喷他脒、两性霉素B联合ent-hardwickiic酸等.抗真菌药物的新剂型包括氟康唑与纳米囊泡载体、新型卢立康唑弹性纳米载体、嵌合型口服两性霉素B等.可用于开发新型抗真菌药物的靶点或通路包括热休克蛋白90、鞘脂途径和微生物群体感应分子等.总之,抗真菌药物研发策略百花齐放,新药研发的进程才能更快,临床的抗真菌治疗才会有更多选择.

鲎素抗菌肽是存在于鲎血淋巴颗粒细胞中的一族小分子多肽,具有广谱抗菌活性.近年来,多肽中的二硫键的功能逐渐成为研究热点.而鲎素是一类典型的含有二硫键的多肽.本文对鲎素中二硫键对其结构和活性的作用和影响做了综述.

睡眠障碍是由于各种原因引起人体睡眠-觉醒机制失常,从而造成以睡眠不足和睡眠过多为主要临床表现的一系列与睡眠和觉醒状态有关的疾病,其发病机制目前尚未完全明确.脑肠肽在脑和胃肠道中双重分布,是具有神经递质和激素双重功能的小分子多肽,近年来研究发现,脑肠肽可通过神经-内分泌-免疫网络参与睡眠-觉醒的调节.本文主要对5-羟色胺、P物质、血管活性肠肽、降钙素基因相关肽神经调节肽U等在睡眠障碍中的作用进行综述.