为探析黄芪四妙汤(Huangqi Simiao Decoction,HSD)治疗2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的作用机制.通过网络药理学筛选HSD的成分靶点及T2DM相关疾病靶点,构建交集靶点的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络、药物-成分-交集靶点网络,并筛选出潜在活性成分及靶点;使用AutoDock Vina软件进行分子对接验证潜在成分与核心靶点的相互作用;通过超高效液相色谱-串联质谱代谢组学技术检测血清,采用主成分分析(PCA)及偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)等多元统计分析,结合MetaboAnalyst数据库寻找各组差异代谢物与相关代谢通路,并将筛选的差异代谢物结合网络药理学筛选的交集靶点联合分析相同代谢通路.网络药理学显示,HSD治疗T2DM的9个核心成分为槲皮素、山柰酚、豆甾醇、汉黄芩素、β-谷甾醇、黄藤素、黄连素、黄连碱、小檗红碱;5个核心靶点为AKT1、TP53、TNF、IL6、VEGFA.分子对接显示,核心成分和靶点基因结合较好.代谢组学显示,共鉴定出112个共同差异代谢物,经HSD治疗后,其中88个代谢物浓度上升,24个代谢物下降.富集分析表明,HSD调节T2DM患者机体代谢主要与氨基酸代谢、三羧酸循环等7条代谢通路有关.代谢组学与网络药理学联合分析显示,二者均涉及组氨酸代谢通路、精氨酸和脯氨酸代谢通路.结果表明,HSD对T2DM具有较好的治疗作用,基于代谢组学和网络药理学分析发现其作用机制可能是HSD中槲皮素、山柰酚、豆甾醇等药效基础通过调控多种代谢物,加强对组氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢通路的影响,为进一步防治T2DM提供了依据.

目的 为复方藤芷膏开发新剂型,并考察其透皮主要成分.方法 以凝胶贴膏剂基质的感官评价、初黏力、持黏力为综合指标,以NP-700、甘羟铝、EDTA-2Na、甘油、PVPK-90、酒石酸、纯化水的使用量作为课题的主要考察因素.依次采用单因素设计实验法和正交设计实验法在不同材料用量配比下优选凝胶贴膏剂的最佳基质配方.基于超高效液相色谱-电喷雾离子源-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-ESI-QTOF-MS/MS),采用垂直Franz扩散池法进行透皮实验,检测复方藤芷凝胶贴膏剂的透皮主要成分并确定.结果 复方藤芷凝胶贴膏剂的最佳配方为NP-700 4.0 g,甘羟铝 0.5 g,EDTA-2Na 0.2 g,二氧化钛 2.0 g,甘油 40 g,PVPK-90 5.0 g,酒石酸 0.7 g,纯化水50 g,载药含量10%.透皮结果初步鉴定出3个化合物,包括大黄素、盐酸小檗碱及欧前胡素.结论 研究所得复方藤芷凝胶贴膏剂膏体均匀,表面光滑,易于涂布.成型后具有优良的初始黏力和保持黏力,易剥离,无残留,保湿性好,对皮肤无刺激性和致敏性.透皮成分的确定为寻找其药效物质基础及进一步建立全面的质量控制方法提供了依据.

目的:基于网络药理学分析左金丸治疗胃食管反流病的作用机制。方法:通过TCMSP检索左金丸的有效成分及蛋白靶点，在Uniprot数据库中将蛋白靶点名称转化为基因名，运用Cytoscape 3.7.1绘制左金丸有效成分-靶点-药物网络并进行拓扑参数分析，通过在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、GeneCards、DRUGBANK数据库查找胃食管反流病靶点，找到药物与疾病的交集靶点，在STRING 11.0中对交集靶点进行蛋白相互作用（PPI）网络分析，运用Metascape数据库对交集靶点进行富集分析，运用Cytoscape 3.7.1绘制药物有效成分-靶点-通路网络，并进行网络拓扑参数分析。结果:左金丸治疗胃食管反流病的主要有效成分为槲皮素、吴茱萸次碱、R-四氢小檗碱、1-methyl-2-nonyl-4-quinolone、小檗碱等，主要作用靶点有PTGS2、NOS3、MAPK1、EGFR、TNF、IL6、ERBB2、VEGFA、EGF、IL1B等，通过调控炎症反应、癌症、细胞增殖与凋亡、细胞连接等途径发挥作用。结论:左金丸治疗胃食管反流病是一个多成分、多靶点、多通路的复杂过程，可为今后相关作用机制研究提供参考。

1例出生3 d的新生儿因感染性黄疸给予头孢吡肟0.16 g溶于5%葡萄糖注射液20 ml静脉滴注、1次/12 h。第6天，患儿左外眼角、颈部皮肤发红，双腋下皮肤发红、糜烂、表皮大片脱落，皮肤脱落面积大约为2.0 cm×2.5 cm。考虑为头孢吡肟引起的剥脱性皮炎，停用该药，给予小檗碱药浴、红霉素软膏外用。3 d后患儿皮肤糜烂明显好转，无新发皮肤剥脱，黄疸明显消退。1个月后随访，患儿黄疸完全消退，皮损已痊愈。

动脉粥样硬化通常为心血管疾病的基础病因，目前随着饮食习惯和生活环境的改变，已然成为全球范围内日益严重的健康问题，对公共卫生构成巨大的挑战。小檗碱具有清热解毒的作用，是异喹啉类季铵型生物碱，小檗碱及其衍生物具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗氧化、降糖、调血脂及预防动脉粥样硬化等作用。从调脂作用、抑制氧化应激与炎症反应、改善血管内皮功能障碍、调节肠道微生物群等角度综述小檗碱及其衍生物预防动脉粥样硬化作用机制的研究进展，以期为减少动脉粥样硬化的发生，改善患者的临床症状，以及小檗碱类药物的深度开发提供理论依据。

目的:探讨小檗碱（BBR）对糖尿病肾小球内皮细胞焦亡的影响及机制研究。方法:30只SD大鼠按照随机数字表法分为3组：正常对照组（NC组）、糖尿病肾脏病组（DKD组）、BBR干预组（DKD+BBR组），每组各10只。高糖高脂喂养联合小量链脲佐菌素注射的方法构建DKD模型，DKD+BBR组每天给予BBR 150 mg/kg治疗12周。检测空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐及尿素氮、肾脏指数（KWI）等指标。病理染色观察肾脏病理学变化。免疫组化和免疫荧光染色观察肾小球内皮细胞焦孔素D（GSDMD）的表达变化，Western blotting和实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测肾组织胶原-Ⅳ、纤维连接蛋白（FN）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-1（cleaved caspase-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达变化。体外培养大鼠肾小球内皮细胞，分为正常糖组（5.6 mmol/L葡萄糖）、高渗组（5.6 mmol/L葡萄糖+24.4 mmol/L甘露醇）、高糖组（30.0 mmol/L葡萄糖）、BBR低剂量组（30.0 mmol/L葡萄糖+1 μmol/L BBR）、BBR中剂量组（30.0 mmol/L葡萄糖+10 μmol/L BBR）、BBR高剂量组（30.0 mmol/L葡萄糖+100 μmol/L BBR）。药物作用72 h后检测肾小球内皮细胞GSDMD、NLRP3、cleaved caspase-1、IL-1β的表达变化，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞上清液IL-1β、白细胞介素-18（IL-18）含量。多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD- t检验。 结果:DKD组大鼠血糖、24 h尿蛋白、KWI较NC组显著升高（均 P<0.05）。DKD+BBR组大鼠24 h尿蛋白、KWI较DKD组显著减少（均 P<0.05）。肾组织病理检查结果显示，DKD大鼠肾小球肥大，基底膜增厚，肾小球系膜增生，BBR干预后上述病理改变明显减轻。免疫组织化学染色和免疫荧光染色显示，与NC组大鼠相比，DKD组大鼠肾小球内皮细胞中GSDMD-N蛋白表达增加，BBR治疗后GSDMD-N蛋白表达明显减少。Western blotting和RT-PCR结果显示，与NC组比较，DKD组大鼠肾小球内皮细胞GSDMD-N、NLRP3、cleaved caspase-1、IL-1β的蛋白表达均明显升高（ P<0.05），BBR治疗12周后GSDMD-N、NLRP3、cleaved caspase-1、IL-1β表达显著下降（均 P<0.05）。细胞实验显示，高糖组肾小球内皮细胞GSDMD-N、NLRP3、cleaved caspase-1、IL-1β的表达均明显上调（ P<0.05）；与高糖组比较，中、高剂量BBR组肾小球内皮细胞GSDMD-N、NLRP3、cleaved caspase-1、IL-1β的表达明显下调，差异均有统计学意义（ P<0.05）。ELISA结果显示，与高糖组比较，中、高剂量BBR组上清液IL-1β、IL-18的含量均明显降低，差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:BBR能减轻DKD肾小球纤维化，该作用可能与BBR抑制NLRP3炎症小体，减轻肾小球内皮细胞焦亡有关。

目的:探讨盐酸小檗碱对脓毒症大鼠肠黏膜屏障损伤的保护作用及其机制。方法:将48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组（Sham组，6只）、脓毒症模型组（LPS组，14只）、盐酸小檗碱干预组（Ber组，14只）和Notch信号通路抑制组（DAPT组，14只）。DAPT组于制模前2 h腹腔注射5 mg/kg Notch信号通路抑制剂DAPT。采用向大鼠腹腔注射10 mg/kg脂多糖（LPS）的方式复制脓毒症模型；Sham组注射等量生理盐水2 mL。Ber组和DAPT组于制模2 h后灌胃50 mg/kg盐酸小檗碱；Sham组和LPS组灌胃等量生理盐水2 mL。分别于制模0、6、12、24 h观察大鼠体温、体质量、行为学和存活情况。制模24 h后麻醉取腹主动脉血，处死大鼠后取回肠组织。光镜下观察回肠组织病理学改变；透射电镜下观察回肠组织超微结构；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清二胺氧化酶（DAO）、肠脂肪酸结合蛋白（iFABP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平；实时聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）分别检测回肠组织紧密连接蛋白〔闭合蛋白（Occludin）、封闭蛋白1（Claudin1）〕、Notch1及其下游靶信号的mRNA和蛋白表达。结果:制模后24 h，与Sham组比较，LPS组、Ber组和DAPT组大鼠体质量均下降，体温均有所升高，其中LPS组变化最明显，DAPT组次之，Ber组改变最轻；LPS组、Ber组和DAPT组存活率均较Sham组下降〔42.9%（6/14）、57.1%（8/14）、57.1%（8/14）比100%（6/6）〕，故每组取6只用于后续检测。肠道大体观察显示，LPS组大鼠回肠组织水肿及腹腔渗血情况最为严重，Ber组情况明显改善，DAPT组次之。光镜下显示，LPS组大鼠回肠黏膜腺体排列紊乱，杯状细胞明显减少，伴大量炎症细胞浸润；Ber组明显改善；DAPT组差于Ber组。电镜下显示，LPS组大鼠回肠微绒毛大量脱落，肠上皮细胞间连接复合体结构严重损伤；Ber组情况明显改善，DAPT组差于Ber组。LPS组大鼠血清DAO、iFABP、TNF-α、IL-6水平较Sham组明显升高，Ber组上述指标较LPS组明显降低〔DAO（μg/L）：4.94±0.44比6.53±0.49，iFABP（ng/L）：709.67±176.97比1 417.71±431.44，TNF-α（ng/L）：74.70±8.15比110.36±3.51，IL-6（ng/L）：77.34±9.80比101.65±6.92，均 P<0.01〕，而DAPT组上述指标较Ber组明显升高。RT-PCR和Western blotting检测结果显示，LPS组大鼠回肠组织Occludin、Claudin1、Notch1及Hes1的mRNA和蛋白表达均较Sham组降低；Ber组上述指标均较LPS组明显升高〔mRNA表达：Occludin mRNA（2 -ΔΔCt）：1.61±0.74比0.30±0.12，Claudin1 mRNA（2 -ΔΔCt）：1.97±0.37比0.58±0.14，Notch1 mRNA（2 -ΔΔCt）：1.29±0.29比0.36±0.10，Hes1 mRNA（2 -ΔΔCt）：1.22±0.39比0.27±0.04；蛋白表达：Occludin/GAPDH：1.17±0.14比0.74±0.04，Claudin1/GAPDH：1.14±0.06比0.58±0.10，Notch1/GAPDH：0.87±0.11比0.56±0.09，Hes1/GAPDH：1.02±0.13比0.62±0.01；均 P<0.05〕，DAPT组上述指标较Ber组降低。 结论:盐酸小檗碱早期使用可明显改善脓毒症大鼠肠黏膜屏障损伤，其机制考虑与抑制肠道炎症反应及经Notch1信号通路调控肠上皮细胞间紧密连接蛋白表达进而改善肠黏膜屏障通透性有关。

目的:研究小檗碱对皮肤鳞状细胞癌（cSCC）-A431裸鼠移植瘤的体积、重量、细胞增殖及凋亡的影响，探索小檗碱抑制cSCC的可能机制。方法:培养A431细胞，于20只裸鼠背部皮下注射A431细胞悬液建立cSCC移植瘤裸鼠模型。接种第15天，将荷瘤裸鼠随机平均分为4组：低、中、高剂量组裸鼠腹腔分别注射10、20、25 mg/kg小檗碱溶液，对照组腹腔注射生理氯化钠溶液，每日1次，连续给药35 d。分别于给药前、给药第7、14、21、28、35天检测移植瘤体积。实验结束后，处死裸鼠并随即剥离瘤块称重，计算肿瘤生长抑制率。移植瘤行组织病理检查，免疫组化检测Ki67表达水平，TUNNEL染色检测移植瘤组织中凋亡细胞数，荧光定量PCR和Western印迹法分别检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和Ezrin mRNA和蛋白的表达。多组间比较采用单因素方差分析，各组与对照组比较采用Dunnett- t检验。 结果:随小檗碱剂量升高和作用时间延长，肿瘤生长曲线逐渐变平缓，各小檗碱组肿瘤生长受到不同程度的抑制，其中高剂量组肿瘤生长抑制作用最明显。小檗碱低、中、高剂量组肿瘤生长抑制率分别为31.05%、66.68%、76.49%，瘤重均显著低于对照组（ t = 4.07、6.33、7.26，均 P < 0.01）。移植瘤组织病理检查显示，随小檗碱剂量的增加，肿瘤细胞坏死程度和范围增加。免疫组化显示，随小檗碱剂量的增加，Ki67阳性细胞逐渐减少。此外，低、中、高剂量组Ki67阳性细胞数均显著低于对照组（均 P < 0.01），而凋亡细胞数均显著高于对照组（ P < 0.05或< 0.01）。4组Bax、Bcl-2、caspase-3、Ezrin mRNA及蛋白表达差异均有统计学意义（均 P < 0.01）。其中，小檗碱低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA的表达均显著低于对照组（均 P < 0.01），中、高剂量组Bcl-2蛋白表达显著低于对照组（均 P < 0.01）；高剂量组Bax mRNA及中、高剂量组caspase-3 mRNA的表达均显著高于对照组（ P < 0.05或< 0.01），而低、中、高剂量组Bax、caspase-3蛋白表达量均显著高于对照组（均 P < 0.01）；仅高剂量组Ezrin mRNA表达显著高于对照组（均 P < 0.01），而低、中、高剂量组Ezrin蛋白表达均显著低于对照组（均 P < 0.01）。 结论:小檗碱可抑制cSCC-A431裸鼠移植瘤细胞的增殖并促进凋亡，从而一定程度抑制cSCC-A431裸鼠移植瘤的生长，其机制可能与小檗碱上调Bax、caspase-3的表达，同时下调Bcl-2、Ezrin的表达有关。

目的:研究兔眼部局部应用小檗碱溶液的安全性及其对兔眼角膜上皮修复的影响。方法:实验研究。日本大耳白兔92只，随机数字表法分为一般情况组（32只兔，64只眼）和角膜损伤组（60只兔，60只眼）。一般情况组再用随机数字表法分为4个组，每组8只兔（16只眼），根据给予去离子水或0.5、1.0、1.5 mg/ml小檗碱溶液，分为一般情况对照组及一般情况A、B、C组；双眼给药，每只眼先单次给药，观察72 h后再连续4周多次给药。角膜损伤组兔右眼制作角膜上皮损伤模型后，根据给予去离子水或0.5、1.0、1.5 mg/ml小檗碱溶液，分为角膜损伤对照组及角膜损伤A、B、C组，每组15只兔（15只眼），连续给药1周。一般情况组兔进行行为学观察，并应用Draize眼刺激性评分系统，对兔角膜、结膜、虹膜受累的面积、程度和反应进行评分，测量不同时间眼压，视网膜电图（ERG）检测b波振幅。角膜损伤组兔于角膜缺损后1、2、3、4、5、6、7 d观察角膜上皮缺损修复情况。所有兔停药后进行角膜组织病理学观察。兔泪液pH值比较采用配对 t检验，Draize眼刺激性评分采用秩和检验，眼压、视网膜电图b波振幅及角膜上皮损伤面积和修复时间的多组比较采用方差分析及SNK- q检验。 结果:单次给药和多次给药后一般情况组兔均无明显异常行为。一般情况对照及A、B、C组在多次给药1、2、4周时Draize眼刺激评分差异均无统计学意义，其中一般情况C组的Draize眼刺激评分分别为7（0，12）、6（0，10）、6（0，16）分（χ 2=1.640，0.265，1.963，1.381； P>0.05）。一般情况对照及A、B、C组在多次给药前后不同时间的眼压差异均无统计学意义（ F=0.065，0.292，0.015，0.041； P>0.05）。在多次给药前及给药后2、4周一般情况对照组的b波振幅分别为（127.75±17.12）、（129.18±15.83）、（128.81±13.58）μV，一般情况A组为（130.68±18.75）、（131.38±16.96）、（130.62±12.18）μV，一般情况B组为（128.00±16.74）、（128.44±16.64）、（129.06±16.16）μV，一般情况C组为（131.81±19.37）、（132.13±18.36）、（129.94±12.60）μV，各组在给药前后不同时间b波振幅差异均无统计学意义（ F=0.037，0.011，0.017，0.702； P>0.05）。一般情况对照组与一般情况A、B、C组角膜组织病理学检查结果无明显差异。角膜损伤各组在不同时间的角膜上皮缺损面积有统计学意义（ F=5.316，25.864，127.613； P<0.05），角膜损伤对照组与角膜损伤A、B、C组之间两两比较，角膜损伤C组的角膜上皮缺损面积明显大于其他3个组，差异具有统计学意义（ q=5.153，10.313，6.976； P<0.05）。角膜损伤对照及A、B、C组的修复愈合时间为（83.0±1.85）、（82.9±2.07）、（83.7±2.09）和（101.6±2.20）h，角膜损伤C组角膜上皮缺损修复时间长，差异有统计学意义（ F=301.437， P=0.000），角膜损伤对照组及角膜损伤A、B组之间比较，角膜上皮缺损修复时间差异无统计学意义（ F=0.813， P=0.450）；修复结束后，角膜损伤组之间角膜组织的病理学检查结果无明显差异。 结论:兔眼局部应用小檗碱溶液较安全，兔眼眼表未见明显的毒性反应，对视网膜未见明显影响。1.5 mg/ml浓度小檗碱溶液可延迟兔眼角膜上皮缺损修复，但对修复后的角膜组织结构的完整性无影响。 （中华眼科杂志，2020，56：131-137）

目的:建立HPLC法同时测定甘海胃康胶囊中橙皮苷和盐酸小檗碱含量。方法:以Sepax Bio-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)为色谱柱，以甲醇-0.1%磷酸为流动相，梯度洗脱，检测波长280 nm，流速1.0 ml/min，柱温35 ℃。结果:橙皮苷和盐酸小檗碱分别在0.049 75～0.497 50 μg、0.035 42～0.354 20 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系( r＝1.000 0)；平均加样回收率分别为98.52%、97.57%， RSD分别为1.20%、1.04%。 结论:本试验建立的方法简单、方便、稳定、准确，可同时测定甘海胃康胶囊中橙皮苷和盐酸小檗碱含量。