氧化应激(OS)是导致血管性认知障碍(VCI)的因素之一。尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)产生的活性氧(ROS)是VCI重要的致病分子。VCI的危险因素如高血糖及缺血/再灌注等在上游增加NOX的活化；其他危险因素如高龄、高血压及卒中是NOX依赖ROS产生的下游损伤。VCI的成因包括与NOX相关的危险因素及NOX依赖的ROS导致的细胞损伤。研究表明，抑制NOX活性可减轻认知障碍、降低其发生的危险因素。本文对NOX在VCI中的作用及其机制的研究进展进行综述。

目的:评价菊苣酸对脓毒症大鼠心肌损伤时氧化应激的影响及其与核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的关系。方法:健康雄性SD大鼠40只，8～12周龄，体重220～250 g，采用随机数字表法分为5组( n＝8)：对照组(C组)、LPS组、LPS+菊苣酸组(LPS+CA组)、LPS+Nrf2抑制剂ML385组(LPS+ML组)和LPS+菊苣酸+ML385组(LPS+CA+ML组)。腹腔注射LPS 15 mg/kg制备大鼠脓毒症心肌损伤模型。腹腔注射LPS即刻，LPS+CA组和LPS+ML组分别腹腔注射菊苣酸10 mg/kg或ML385 15 mg/kg(均用DMSO溶解)，LPS+CA+ML组腹腔注射ML385 15 mg/kg和菊苣酸10 mg/kg，C组腹腔注射等容量DMSO。造模后48 h时，取主动脉血样，采用ELISA法测定血清IL-6浓度、LDH和CK-MB活性。然后处死大鼠，取心肌组织，HE染色后光镜下观察病理学结果，采用化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和SOD活性、ROS和铁含量，计算NAD +/NADH比值，采用Western blot法测定Nrf2、醌氧化还原酶1(NOQ1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)的表达水平。 结果:与C组相比，其余4组血清LDH、CK-MB活性和IL-6浓度升高，心肌组织ROS和铁含量及NAD +/NADH比值升高，GSH-Px和SOD活性降低，Nrf2、NQO1和GPX4表达下调，NOX1表达上调( P<0.05)；与LPS组相比，LPS+CA组血清LDH、CK-MB含量和IL-6浓度降低，心肌组织ROS和铁含量及NAD +/NADH比值降低，GSH-Px和SOD活性升高，Nrf2、NQO1和GPX4表达上调，NOX1表达下调( P<0.05)，心肌细胞病理学损伤明显减轻，LPS+ML组血清LDH、CK-MB含量和IL-6浓度升高，心肌组织NAD +/NADH比值升高，GSH-Px和SOD活性降低，NQO1和GPX4表达下调，NOX1表达上调( P<0.05)，心肌细胞病理学损伤进一步加重；与LPS+CA组相比，LPS+CA+ML组血清LDH、CK-MB活性和IL-6浓度升高，心肌组织ROS和铁含量及NAD +/NADH比值升高，GSH-Px和SOD活性降低，Nrf2、GPX4和NQO1表达下调，NOX1表达上调( P<0.05)，心肌细胞病理学损伤明显加重。 结论:菊苣酸减轻脓毒症大鼠心肌损伤的机制可能与激活Nrf2信号通路，抑制氧化应激有关。

目的:研究健脾益肾愈呆方对血管性痴呆(VD)大鼠记忆学习能力及氧化应激的改善作用机制.方法:采用双侧颈总动脉永久性结扎构建血管性痴呆大鼠模型,60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、健脾益肾愈呆方高(YD-H组)、低(YD-L组)剂量组和多奈哌齐组(DON组).利用Morris水迷宫方法测试大鼠学习记忆能力,检测脑中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醇(MDA)含量;显微镜观察海马病理学组织形态变化;检测脑组织中核因子E2相关因子2(Nuclea factor erythroid-2-related factor2,Nrf2)、犬尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)和血红素加氧酶1(Heme oxygenase-1,HO-1) mRNA的表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P＜ 0.05);60 s内穿越平台所在位置的次数降低(P＜0.05),脑组织中SOD和GSH-PX含量、Nrf2和HO-1 mRNA表达量降低,MDA含量和NOX1mRNA表达量升高(P＜0.05).与模型组比较,多奈哌齐和健脾益肾愈呆方能显著缩短VD大鼠逃避潜伏期(P＜0.05),增加大鼠在目标象限停留时间和穿越平台的次数(P＜0.01);明显改善大鼠海马组织病理形态学异常,显著提高大鼠脑皮质中SOD和GSH-PX含量,降低MDA含量(P＜0.01);同时明显升高大鼠脑组织中Nrf2和HO-1 mRNA表达,降低NOX1mRNA表达(P＜0.01).结论:健脾益肾愈呆方能明显改善VD大鼠的学习、记忆能力,其作用机制可能与减轻大鼠海马神经元损伤和氧化应激,进而产生神经保护作用有关.

目的 探讨羊水干细胞(AFSCs)移植对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾脏微血管损伤的影响及其可能的机制.方法 选择1例孕中期需进行产前筛查的孕妇,穿刺抽取羊水后分离、培养AFSCs,制备AFSCs悬液.将36只小鼠随机分为假手术组、模型组和观察组,每组12只.模型组和观察组采用结扎的方法建立左侧UUO模型,假手术组只游离输尿管不结扎.观察组腹部缝合后经尾静脉注射150 μL AFSCs悬液,模型组和假手术组注射等量生理盐水.三组术后第3、7天分别处死6只小鼠,采用HE染色观察肾组织病理情况,免疫组化法检测肾组织管周毛细血管密度,Western blotting法检测肾组织尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(gp91-phox)、抗硝基酪氨酸(NT)蛋白表达.结果 HE染色结果显示:假手术组肾脏结构正常;模型组术后第3、7天出现不同程度的肾小管上皮细胞肿胀,空泡变性,刷状缘消失,肾间质增宽,炎性细胞浸润,肾间质纤维化程度随时间延长而逐渐加重.观察组术后第3、7天均出现肾间质纤维化,但其程度均轻于模型组同时间点.模型组、观察组术后第3、7天肾组织管周毛细血管密度均低于假手术组同时间点,gp91-phox、NT蛋白相对比表达量均高于假手术组同时间点,但模型组变化更明显(P均＜0.05).结论 AFSCs移植可减轻单侧UUO小鼠肾脏微血管损伤;通过降低gp91-phox、NT表达而减轻氧化应激是其可能的机制.

目的 验证高血糖状态结直肠癌相关基因表达并评估其诊断价值.方法 收集109例结直肠癌患者肿瘤组织、远端正常肠黏膜组织及外周血样本、30例糖尿病患者及30名健康志愿者外周血样本,采用实时荧光定量PCR法检测上述样本葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)、癌胚抗原相关的细胞黏附分子5(CEACAM5)、热休克蛋白60 (HsP60)、组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因mRNA表达,采用Pearson相关性分析基因表达与临床病理参数的关联;采用诊断试验方法计算上述基因在结直肠癌患者血清中表达的灵敏度、特异度、准确度、预测性、正确指数、似然比,绘制受试者工作特征曲线,并计算受试者工作特征曲线下面积,评价多基因联合检测的诊断效能.结果 GRP78 (P =0.001)、NOX1 (P=0.022)、CEACAM5 (P=0.000)、HSP60 (P =0.044)、HDAC1 (P =0.047)基因mRNA表达分别与空腹血糖状态呈显著正相关;与正常血糖状态结直肠癌肿瘤组织及血清相比,高血糖状态结直肠癌肿瘤组织及血清中的NOX1 (P =0.000,P=0.008)及HDAC1(P=0.000,P=0.037) mRNA表达均显著增高;NOX1mRNA表达与结直肠癌肿瘤直径呈显著正相关(P=0.013),HDAC1 mRNA表达与结直肠癌发病部位(P =0.049)、原发灶浸润深度(P=0.025)、TNM分期(P =0.042)均呈显著正相关;NOX1、CEACAM5、HDAC1的受试者工作特征曲线下面积分别为0.931、o.852、0.860(P均=0.000);NOX1、HDAC1 mRNA在高血糖状态结直肠癌患者血清中表达的特异度、准确度及阴性预测值均在90％以上.联合检测NOX1、CEACAM5、HDAC1表达的灵敏度为98.82％,特异度为99.93％.结论 联合检测高血糖状态结直肠癌相关基因可提高高血糖人群早期筛查结直肠癌的诊断效能.

目的 探讨转化生长因子β1/尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶/活性氧(TGF-β1/NOX4/ROS)信号通路在宫颈癌细胞侵袭和迁移中的作用.方法 采用5 ng/mL TGF-β1处理培养的SiHa、CaSki、HeLa、C4-Ⅰ和C33A宫颈癌细胞4h或8h,2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色结合流式细胞术检测处理前后SiHa、CaSki、HeLa、C4-Ⅰ和C33A宫颈癌细胞ROS水平;转染NOX4小干扰RNA(NOX4-siRNA)或加入NOX4信号通路抑制剂二亚苯基碘氯化物(DPI),Western blot法检测宫颈癌HeLa细胞NOX4蛋白水平,TranswellTM侵袭和迁移实验检测TGF-β1对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响.结果 TGF-β1显著上调HPV阳性SiHa、CaSki、HeLa和C4-Ⅰ宫颈癌细胞NOX4蛋白表达,促进ROS产生,并增强宫颈癌细胞的侵袭和迁移性;敲低NOX4基因或使用NOX4通路抑制剂DPI可逆转这种作用.结论 TGF-β1激活NOX4/ROS信号通路增强宫颈癌细胞的侵袭和迁移能力.

目的 研究心房颤动时β3-肾上腺素能受体(β3-AR)是否通过作用于尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶产生氧化应激.方法 建立快速心房起搏心房颤动兔模型,将40只成年家兔随机分为4组,分别为假手术组(Con组)、起搏7 d组(P7组)、β3-AR激动剂组(BRL组)和β3-AR抑制剂组(L组).P7组、BRL组和L组在术后1周后分别给予β1-AR、β2-AR抑制剂纳多洛尔、纳多洛尔+β3-AR激动剂(BRL37344)和纳多洛尔+β3-AR抑制剂(L748337).1周后取材,分别检测各组心房组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛和NADPH氧化酶2(NOX2)含量.结果与Con组相比,P7组心房组织SOD活力降低(P<0.05),丙二醛、NOX2含量增加(P均<0.05).给予β3-AR激动剂后,BRL组SOD活力进一步降低(P<0.05),NOX2含量增加(P<0.05).给予β3-AR抑制剂后,L组SOD活力较P7组增加(P<0.05),丙二醛含量进一步降低(P<0.05),NOX2含量亦降低(P<0.05).结论家兔快速心房起搏后心房肌发生氧化应激,激动β3-AR加重氧化应激,而抑制β3-AR后可减轻氧化应激.β3-AR可能通过NADPH氧化酶途径产生氧化应激.β3-AR和NADPH氧化酶有望成为防治心房颤动的新靶点.

目的 观察两色金鸡菊黄酮成分对高糖高脂诱导大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1能量代谢紊乱的影响,探讨其保护作用机制.方法 采用高糖高脂诱导HBZY-1细胞建立体外糖尿病肾病代谢紊乱细胞模型,将HBZY-1细胞分为正常组、模型组和两色金鸡菊黄酮成分不同剂量组.采用MTS实验检测模型细胞增殖水平,倒置显微镜观察模型细胞形态变化,细胞划痕实验观察模型细胞细胞外基质分泌,Western blot检测细胞能量代谢调控因子5'腺苷-磷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)、乙酰辅酶a羧化酶1(ACC1)、甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)及氧化应激因子一氧化氮合酶(eNOS)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)的蛋白表达.结果 两色金鸡菊黄酮成分能抑制高糖高脂诱导的HBZY-1细胞增殖,细胞间隙增大、密度显著降低;两色金鸡菊黄酮成分促进模型细胞p-AMPKα、p-ACC1、eNOS的蛋白表达,抑制模型细胞SREBP1、NOX4、ACC1的蛋白表达;划痕实验结果显示,两色金鸡菊黄酮成分对模型细胞细胞外基质分泌有显著抑制作用,同时 α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达显著降低.结论 两色金鸡菊黄酮成分可能通过调控AMPK/SREBP1/ACC1能量代谢通路,抑制模型细胞增殖、氧化应激,进而改善肾脏纤维化病变.

目的 探讨芦荟苷对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞功能及尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/活性氧(ROS)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响.方法 高糖高脂饲料饲养大鼠4周,腹腔注射40 mg/kg STZ建立DN大鼠模型,随机分为模型组、阳性对照组、(低、中、高)剂量实验组;正常组大鼠不进行处理.阳性对照组灌胃9.45 mg/(kg·d)糖适平;(低、中、高)剂量实验组分别灌胃10、20、40 mg/(kg·d)芦荟苷,正常组、模型组灌胃等体积蒸馏水,连续6周.血糖仪检测空腹血糖水平;酶联免疫吸附(ELISA)检测血清中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察大鼠肾组织形态;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)试剂盒检测肾组织中SOD、MDA、ROS水平;蛋白免疫印迹检测肾组织中NOX4、p38 MAPK、phospho-p38 MAPK、肾小球足细胞裂隙跨膜蛋白Nephrin、Podocin水平.结果 给药前,与正常组相比,模型组、阳性对照组、(低、中、高)剂量实验组空腹血糖水平升高(P<0.05).给药后,模型组肾组织肾小球肥大,系膜增厚和肾小球基底膜增厚,间质炎症浸润;(低、中)剂量实验组肾小球肥大现象逐渐缓解,肾小球系膜轻-中度增生,肾小管扩张减缓;高剂量实验组肾组织形态正常,结构清晰,肾小球、肾小管形态规则.与正常组相比,模型组空腹血糖,血清中IL-1β、TNF-α,肾组织中MDA、ROS,NOX4、phospho-p38 MAPK蛋白水平升高(P<0.05),肾组织中SOD水平、SOD/MDA,Nephrin、Podocin蛋白水平降低(P<0.05).与模型组相比,阳性对照组、高剂量实验组空腹血糖,血清中IL-1β、TNF-α,肾组织中MDA、ROS,NOX4、phospho-p38 MAPK蛋白水平降低(P<0.05),肾组织中SOD水平、SOD/MDA,Nephrin、Podocin蛋白水平升高(P<0.05);中剂量实验组空腹血糖,血清中IL-1β、TNF-α,肾组织中MDA、ROS,NOX4蛋白水平降低(P<0.05),肾组织中SOD水平、SOD/MDA,Nephrin、Podocin蛋白水平升高(P<0.05);低剂量实验组空腹血糖,血清中IL-1β、TNF-α,肾组织中MDA,NOX4蛋白水平降低(P<0.05);肾组织中SOD水平水平升高(P<0.05).与给药前相比,给药后阳性对照组、(低、中、高)剂量实验组空腹血糖水平降低(P<0.05).结论 芦荟苷可能通过下调NOX4/ROS/p38信号通路,实现抗炎和对足细胞的恢复.

目的 观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fa)对脂多糖(LPS)PD模型小鼠中脑黑质多巴胺(DA)神经元的保护作用.方法 采用C57BL/6小鼠两侧鼻孔滴入LPS 20μL(1μg.μL-1),隔天1次,×60 d,制备小鼠LPS-PD模型.LPS-PD模型鼠随机分为LPS-PD+Fa治疗组(n=8,LPS滴鼻45 d起腹腔注射Fa 20 mg.kg-1.d-1,每天2次,×14 d)、LPS-PD组(n=8)和正常对照组(n=8,腹腔注射等量0.9％氯化钠注射液).采用胶布黏附移除实验评估小鼠行为学变化,Western blot测定小鼠脑组织内酪氨酸羟化酶(TH)、Rho激酶2(ROCK2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(gp91phox)、血红素加氧酶(HO)-1表达,免疫荧光技术测定小鼠黑质纹状体区TH表达.分析Fa治疗后与氧化应激反应因子表达以及黑质DA神经元丢失之间的关系.结果 与正常对照组比较,LPS-PD组黑质TH表达显著降低,ROCK2表达显著增高,iNOS和gp91phox表达显著增高(均P<0.05),而HO-1表达下降(P<0.05).与LPS-PD组比较,LPS-PD+Fa治疗组黑质TH表达显著增加,ROCK2、iNOS、gp91phox表达显著下降,HO-1表达增加(均P<0.05).LPS-PD组运动功能显著下降;LPS-PD+Fa治疗组运动评分显著改善,与TH表达呈平行关系.结论 Fa降低ROCK2表达可以抑制氧化应激反应,保护并减少黑质DA神经元丢失,改善LPS-PD模型小鼠运动协调功能.