目的:探讨通过支持接触共培养模式，小鼠前庭支持细胞体外诱导人羊水干细胞向功能性神经元分化的可行性。方法:分离培养人来源的羊水干细胞。从新生C57BL/6J小鼠获取内耳前庭组织，经酶解消化、细胞培养，选取其空心球体，制备单细胞饲养层。将标记慢病毒载体介导产生绿色荧光蛋白nGFP的羊水干细胞种植在饲养层表面，形成支持接触共培养，期间不添加任何外源性神经生长因子及神经元信号诱导因子。检测分化后的羊水干细胞中神经元标记物β微管蛋白（β-Tubulin，Tuj1）、突触后致密蛋白PSD95的表达；标记功能性突触小泡技术（FM1-43穿透）检测分化后细胞是否具有神经元离子通道。同时观察羊水干细胞单独分化、小鼠前庭支持细胞单独分化、Transwell共培养体系中羊水干细胞和饲养层细胞神经元的分化情况。结果:单细胞饲养层表达内耳支持细胞特异性标记物细胞周期蛋白激酶抑制因子P27 kip1。nGFP标记过的羊水干细胞接种于饲养层后，nGFP表达阳性的部位有（52.0±3.0）%的细胞表达Tuj1，并具有典型的神经元形态特征，突起长度平均（110.7±6.2） μm。饲养层细胞单独分化，仅有（1.1±0.6）%的细胞表达Tuj1阳性且形态典型的神经元；羊水干细胞单独分化，（92.0±1.0）%的细胞表达神经元标记物Tuj1，但无典型的神经元形态特征，突起长度平均（16.0±4.1） μm。将羊水干细胞与饲养层在Transwell中共培养，虽然（92.0±1.0）%的羊水干细胞表达Tuj1，但仍无典型的神经元形态特征，突起长度平均（17.0±4.5）μm，饲养层仅有（1.2±0.9）%的细胞Tuj1表达阳性且具有典型的神经元形态。 结论:通过支持接触共培养模式，由小鼠前庭来源的内耳支持细胞制备的饲养层，可成功将人羊水干细胞定向诱导分化为功能性神经元。

压力性尿失禁（stress urinary incontinence, SUI）是一种多种病因引起的不自主漏尿，在中年女性中发病率高，严重影响患者身心健康。SUI的治疗方式有生活方式治疗、药物治疗和手术治疗等，干细胞疗法因其可使受损组织再生的潜力，近年来在SUI的治疗中被广泛研究。本文讨论了用于治疗SUI的主要干细胞种类、相关治疗方式及临床试验进展。近年来脂肪源性干细胞、肌源性干细胞、骨髓源性干细胞和羊水源性干细胞等应用于SUI的治疗当中，多种治疗技术应用其中，实验研究和临床试验证明了干细胞的治疗效果。

唐氏综合征(Down syndrome，DS)是人类最常见的染色体遗传病，发病率为1/800～1/600，是由21号染色体重复导致的遗传物质异常疾病，大部分病例为标准型，核型为47，XX(或XY)，＋21，较少病例为易位型或嵌合体型。唐氏综合征患者主要特征为智能落后、特殊面容和生长发育迟缓，可表现为先天性心脏病、十二指肠狭窄、阿尔茨海默病、白血病、免疫缺陷病等。21号染色体上基因的数量变化导致了唐氏综合征的性状。虽然新的研究表明其与表观遗传学的机制有关，但其分子层面上的致病机制仍未知。伦理因素限制了对唐氏综合征和人类其他三体疾病患者的研究，且目前常用的小鼠模型并不能完全模拟唐氏综合征的基本性状。将来自唐氏综合征患胎细胞或组织诱导为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)，可获得个体化、含有相同遗传物质的细胞模型，这为研究唐氏综合征发病机制和定制细胞治疗及基因治疗方案提供了一种有价值的材料。

目的:分析黏多糖贮积症ⅣA(MPS ⅣA)重型家系患者的临床特点及诊治过程，探讨MPS ⅣA重型的治疗方法。方法:选取郑州大学附属儿童医院2021年8月至2022年4月收治的2例MPS ⅣA重型患儿作为研究对象。回顾性分析以身材矮小、骨骼畸形为主要表现的2个家系患儿的临床表现、生化指标、骨影像学结果等，取外周血白细胞进行溶酶体酶活性和基因分析，并对家系2母亲第2次妊娠18周时羊水细胞基因分析进行产前诊断。分别对2家系患儿进行异基因造血干细胞移植。结果:两家系患儿均有生长迟缓、关节松弛、鸡胸、膝外翻等MPS ⅣA严重表型临床表现。影像学以骨质密度减低、尺桡骨呈"V"样改变、脊柱生理弯曲异常为主要特点。两家系患儿均有呼吸系统、骨骼系统受累，视神经可疑受累。患者外周血白细胞溶酶体酶活性分析均显示N-乙酰半乳糖胺-6-硫酸酯酶(GALNS)活性显著降低，符合MPS ⅣA型。 GALNS基因分析显示，家系1患儿存在c.1019G>A(p.G340D)和c.706C>G(p.H236D)(错义)2个突变，家系2患儿存在c.425A>G(p.H142R)和c.463G>A(p.G155R)(错义)2个突变，均来自父母双方。2家系均为未报道过的新突变家系。家系2患儿母亲羊水细胞 GALNS基因仅存在c.463G>A突变，明确胎儿为携带者，来自母亲，未患与先证者相同的疾病。2家系患儿均接受了异基因造血干细胞移植，全供体嵌合，无严重移植并发症，GALNS活性位于正常范围，日常生活活动评分较移植前升高。 结论:MPS ⅣA重型是 GALNS突变引起的罕见的常染色体隐性遗传性疾病，诊断困难，预后不良，早期识别、早期诊断、有效治疗可改善患者长期生活质量。异基因造血干细胞移植是治疗重型MPS ⅣA的有效方法。

早发性卵巢功能不全已成为困扰育龄妇女的主要问题，到目前为止，尚无有效的治疗方法。干细胞具有自我更新和多向分化潜能，越来越被考虑用于卵巢功能不全的治疗。从骨髓、脐带、外周血和羊水中等提取的干细胞可以迁移到卵巢并增殖，在特定的卵巢环境下分化成熟，分泌相关因子，促进卵巢功能修复，增加卵巢各级卵泡质量和颗粒细胞的数量，改善内分泌功能，在一定程度上恢复生育能力。本文就各类干细胞治疗早发性卵巢功能不全的相关研究进展进行综述。

坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis，NEC)是新生儿最具破坏性的肠道炎症性疾病之一，目前其发病率及病死率居高不下。本文总结近年来关于NEC诊治方面的研究进展，提出单一或多组学研究可能有助于NEC的预测与早期诊断，肠道超声在提高NEC的诊断准确性方面显示出新希望；强调要重视NEC小肠造瘘术后的营养支持；羊水干细胞(amniotic fluid-derived stem cells，AFSCs)治疗有望成为预防新生儿NEC的新策略。

目的:探讨胎儿期发病的家族性噬血淋巴组织细胞增生症（familial hemophagocytic lymphohistiocytosis，FHL）的临床特点及基因诊断。方法:回顾性分析首都儿研所附属儿童医院2019年9月收治的1例胎儿期发病的FHL新生儿的临床资料。以“fetus”“neonate”“familial hemophagocytic lymphohistiocytosis”为关键词检索Pubmed数据库，以“家族性噬血细胞综合征”为关键词检索中国知网及万方数据库，检索时间均为建库至2021年1月3日。总结国内外胎儿期发病的FHL的病例特点。结果:（1）本例患儿，胎龄39周 +3宫内发现脾肿大、腹腔内游离液及脑室增大，生后出现发热、呼吸急促、肝脾肿大、皮肤淤斑淤点、淋巴结肿大，伴三系下降、肝功能异常、铁蛋白及甘油三酯升高、纤维蛋白原减低。CD107a激发试验示自然杀伤细胞的脱颗粒功能降低（ΔCD107a<5%）。骨髓穿刺涂片见噬血细胞。患儿 UNC13D基因存在复合杂合突变：c.118-308C>T和c.3002T>C，患儿确诊为FHL3型。入院后予地塞米松及环孢素化疗、对症治疗，未予造血干细胞移植，生后52 d死亡。（2）共检索纳入15篇胎儿期发病的FHL的相关文献，共20例患儿，并和本例患儿进行汇总分析，发现FHL患儿胎儿期以胎儿水肿、肝脾肿大为主要表现，可伴胎儿窘迫、羊水增多等，生后可出现发热、呼吸困难、皮疹及中枢神经系统受累等。实验室及影像学检查结果符合噬血淋巴组织细胞增生症的诊断标准。目前报道的胎儿期发病的FHL基因突变类型为 PRF1基因突变（FHL2型）和 UNC13D基因突变（FHL3型），可分别检测到穿孔素和颗粒酶表达减低。目前以地塞米松、环孢素、依托泊苷等化疗及对症治疗为主，也有孕晚期对胎儿行宫内化疗及生后造血干细胞移植等治疗的报告。4例患儿宫内死亡，后期随访13例患儿于生后不同时间死亡，4例患儿存活。存活的患儿中最大随访至12岁。 结论:胎儿期发病的FHL早期表现不典型，病死率极高，诊治难度大。临床发现胎儿水肿或肝脾肿大，且鉴别诊断困难时，除考虑溶血、感染、自身免疫和遗传代谢性疾病外，还应注意与FHL鉴别。可借助免疫学技术和基因测序的方法以早期诊断、早治疗，从而改善预后。

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一.中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能.而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研究人员的关注.目的:对来自外胚层和中胚层的多功能成体干细胞在周围神经损伤修复与再生中的作用及机制进行简要综述,探究不同来源成体干细胞的研究进展与应用前景,并结合临床研究,探讨成体干细胞疗法潜在的应用价值以及亟待解决的问题.方法:第一作者于2024年2月应用计算机在PubMed和SinoMed数据库检索2001年12月至2024年2月相关文献,以"ectodermal stem cells,mesenchymal stem cells,peripheral nerve injury,repair,regeneration"为英文检索词,以"外胚层干细胞、间充质干细胞、周围神经损伤、修复、再生"为中文检索词,最终纳入69篇文献进行分析论述.结果与结论:①外胚层来源成体干细胞具有优异的分化和再生潜能,尤其是毛囊神经嵴干细胞、嗅干细胞、牙外胚层干细胞等,具有神经源性,可在体外表达神经特异性标志物,但目前缺少临床试验研究.②中胚层来源成体干细胞种类多、易获得及纯化,其中骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞在周围神经损伤修复的应用疗效及安全性方面有相关临床试验支持,能改善感觉及运动神经传导,且在随访中未出现并发症和明显不良反应.骨髓间充质干细胞的获取需行侵入性外科手术且要求患者与捐赠者骨髓配型吻合,应用受到一定限制;而脐带间充质干细胞虽无需侵入性获取,但分离较困难且表型不稳定.③内胚层来源成体干细胞常难以在体外生长,应用受限,目前应用于临床的可能性低.④综合来看,骨髓间充质干细胞仍为周围神经损伤干细胞治疗的首选细胞,适用于无外科手术禁忌且符合配型要求的情况,其次为脐带间充质干细胞,辅以分离方法的改进和表型稳定性的提高策略.⑤牙外胚层干细胞以及脂肪间充质干细胞具有较高应用潜能,有待进一步临床试验,其他外胚层、中胚层来源成体干细胞各以其优异特性在动物及细胞实验研究中具有显著优势.

糖尿病膀胱功能障碍(DBD)是糖尿病(DM)在泌尿系统常见的并发症之一,能引起排尿功能障碍等诸多下尿路症状,严重影响患者的生活质量.抗胆碱能药物、β3受体激动剂、α1受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂、咖啡因、肌苷等西药是DBD的首选治疗方法,对此类药物的研究和探索也是最早最多的,已在临床上进行了一定程度的推广;以缩泉丸、木樨草素、葡萄籽提取物、车前子提取物、萝卜硫素、薄荷醇等为代表的中药方面的探索也在逐渐加快步伐,这类药物把控好使用的安全剂量后,未来有望在DBD的临床治疗上得到极大的应用;低能量冲击波、神经刺激法、电针等物理疗法是近些年来研究的热点,正在一步步地被证实是除药物疗法外很重要的一类DBD治疗方法;包含人脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、人羊水间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、新生儿膀胱间充质干细胞等在内的干细胞移植疗法的相关研究才刚刚起步,其在DBD的基础实验中表现出了不错的治疗效果,是有相当大的应用前景的;还有几种比较特殊的治疗,包括肉毒梭菌毒素A、人干细胞白血病基因、七甲川吲哚类花菁染料等,还需要更多的实验验证来说明其对DBD的疗效.各类治疗方法都在不断开展的实验研究中逐渐进步和完善,但是目前这些治疗中有很多都还只是在DM动物模型身上进行研究,未来则需要在临床上有更多更深入的验证.

目的 通过对胎儿期、围产期人羊水干细胞差异性基因生物信息学分析,课题组了解到miR-199家族(miR-199b-5p,hsa-miR-199b-3p,hsa-miR-199a-3p)在围产期羊水干细胞及生后肺组织中显著表达.通过对miR-199族进行靶基因预测,并对靶基因的信号通路富集,推论miR-199族基因在肺发育中的作用及其机制.方法 首先利用 miRDB,miRWalk,Starbase 等 3 个数据库进行 miR-199b-5p、miR-199b-3p、miR-199a-3p 的靶基因预测.其次利用基因本体(Gene Ontology,GO)功能数据库及KEGG数据库进行靶基因的信号通路的富集,并通过信号通路的富集结果推测可能在肺发育起到作用的相关通路.结果 miR-199b-5p、miR-199b-3p、miR-199a-3p调控的靶基因参与多种分子功能、细胞组分和生物学过程.在靶基因的信号通路富集结果中,涉及细胞自噬的有AMPK信号通路、P13k信号通路、RAS信号通路;涉及炎性调节的有T细胞受体调节通路、IL-7信号通路;涉及血管生成的有血管生成正性调节的相关通路;同时还有细胞对环境反应、细胞数量稳态等细胞表达调节的信号通路.结论 hsa-miR-199a-3p及hsa-miR-199b-5p的靶基因具有丰富的生物功能,对靶基因富集到的信号通路进行进一步分析得出以下结论:①hsa-miR-199a-3p及hsa-miR-199b-5p可能通过AMPK信号通路、动物自噬、P13k-Akt信号通路等通路上调细胞的自噬作用;②通过血管发育的正向调节、血管生成的正向调节促进肺发育中肺血管的生成或减轻肺损伤中肺血管重塑;③T细胞受体信号通路、ErbB信号通路及hIL-7信号通路通过对炎性介质的调节在肺损伤的过程中起到积极作用;④hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-199b-3P、hsa-miR-199a-3p 还具有 mRNA 加工的调控、DNA 损伤检查点、DNA损伤的信号转导反应等具有调控作用,对肺发育可能是有益的.