目的 研究岩藻黄质软膏剂的最佳制备方法,确定最佳基质处方、成型工艺条件.方法 以不同浓度的氮酮、丙二醇、油酸作为透皮促进剂,制备岩藻黄质软膏剂.采用改进的Franz直立式扩散池进行体外透皮实验,以离体的大鼠腹部皮肤作为透皮屏障,60％的乙醇-生理盐水作为接受介质,高效液相色谱法作为药物含量的测定方法,比较不同透皮促进剂下岩藻黄质的累积释放量(Q),扩散速率(J),以Q值和J值为指标,筛选投药量、透皮促进剂的种类(丙二醇、氮酮、油酸)和用量.结果 不同吸收促进剂都能促进岩藻黄质的经皮吸收,其中以2％氮酮的透皮促进效果最佳.单位面积累积释放量24小时内提高至2.14倍,扩散速率(J)为1.85 μg,/(cm2·h1/2).结论 岩藻黄质软膏剂可以开发为经皮给药制剂.

目的 建立东海鼠尾藻岩藻黄质含量测定的高效液相色谱法.方法 选用美国赛分Welch C18色谱柱(4.6 mm×250.0 mm,5μm),进样量20 μL,流动相用乙酸乙酯和90％甲醇水溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,波长为450 nm,柱温:室温.结果 方法的线性范围为2.7～43.2μg/mL(r=0.9997),检出限(3S/N)为0.027 μg/mL,定量限(10S/N)为0.086 μg/mL.回收率在99.6％～105.0％之间,RSD为1.78％(n=9).结论 该方法简便灵敏,其结果准确可靠,可用于岩藻黄质的质量控制.

目的 建立高效液相色谱法同时测定海胆黄中岩藻黄质及岩藻黄醇的方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil ODS C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(90∶10),检测波长为449 nm,流速1 mL/min,进样量10 μL.结果 岩藻黄质与岩藻黄醇在此色谱条件下获得良好分离,岩藻黄质在0.88～56 μg/mL范围内呈良好线性(y=102.75 x+4.407 2,r=0.999 9,平均加样回收率为97.76％,RSD1.88％),岩藻黄醇在0.88～56μg/mL范围内呈良好线性(y=92.906 x+2.231 8,r=0.999 9,平均加样回收率为95.28％,RSD 1.85％).结论 本方法准确、可靠,可用于海胆等生物样品中岩藻黄质及岩藻黄醇的含量测定.

探讨在三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)培养过程中,使用甘露醇作为有机碳源,对三角褐指藻的生长,以及多不饱和脂肪酸含量和岩藻黄质积累的影响进行分析.通过验证,选择2g/L甘露醇为最佳添加浓度.同时添加0.2 g/L茶多酚可以有效促进三角褐指藻对甘露醇的利用.经过10 d兼养培养,同光合自养培养组相比,三角褐指藻最终生物量提高了63％,岩藻黄质产量达到75.3 mg/L,提高了90％,EPA(Eicosapentaenoic acid)占总油脂的含量达到36％,提高了35％.为今后三角褐指藻的兼养生产提供了一种有效的有机碳源和活性添加剂,为提高EPA及岩藻黄质产量提供了基础.

研究岩藻黄质对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素抵抗的作用及其分子机制.将50只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组(10只)、高脂组(40只),高脂组经高脂饲料喂养12周形成肥胖胰岛素抵抗模型,将其随机分为模型组、岩藻黄质0.2％剂量组、岩藻黄质0.4％剂量组和二甲双胍组,每组10只,连续喂养含有相应药物饲料6周后,测定各组小鼠体质量和附睾脂肪质量;检测血清中空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色法观察各组小鼠肝脏病理变化;Western blot法检测肝脏组织中胰岛素受体底物1(IRS-1)/磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ(PPARγ)/胆固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)/脂肪酸合成酶(FAS)通路相关蛋白的表达.结果 显示,与模型组相比,各给药组小鼠的体质量、附睾脂肪质量以及FBG,FINS,TC,TG,LDL-C,HOMA-IR水平,肝组织中PPARγ,SREBP-1和FAS蛋白表达显著降低(P＜0.05或P＜0.01),同时HDL-C水平及肝组织中p-IRS-1,IRS-1,PI3K,p-Akt的蛋白表达显著升高(P＜0.05或P＜0.01),且肝组织病理形态明显改善.结果 表明,岩藻黄质可明显减轻肥胖小鼠的肥胖及糖脂紊乱,并改善胰岛素抵抗,其作用可能与调控IRS-1/PI3K/Akt和PPARγ/SREBP-1/FAS通路有关.

为了解国内外昆布有效成分岩藻黄质稳态化制剂的研究进展,通过查阅文献从岩藻黄质的体内代谢、国内制剂研究现状及新型技术应用方面进行阐述,总结具有应用前景的新型岩藻黄质稳定制剂体系有微胶囊、脂质纳米粒以及纳米乳液,并针对不同制剂提出适合规模化生产的方法,为进一步开发岩藻黄质产品,提高其稳定性与生物利用度研究提供参考.

目的 研究三七总皂苷(PNS)对脑栓塞大鼠核因子E2相关因子(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)通路的影响及保护机制.方法 选取54只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、阳性药物组和PNS组(建模后腹膜下注射给药,PNS低、中、高剂量组分别按照每天50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg注射PNS),右侧颈内动脉注射月桂酸钠造模.假手术组、模型组、阳性药物组大鼠腹腔给生理盐水每天2 mL,PNS剂量组给予对应剂量的PNS,阳性药物组饲喂岩藻黄质每天50 mg/kg.评估大鼠神经功能,检测脑脊液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫荧光鉴定大鼠皮层神经元凋亡情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western Blot)测定脑组织Nrf2、Kelch样相关蛋白1(Keap1)、HO-1的mRNA和蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组SOD水平、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1 mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05).与模型组比较,阳性药物组及PNS中、高剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1 mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.05),PNS低剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、Keap1蛋白水平明显降低(P<0.05);阳性药物组及PNS中剂量组、高剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05),PNS低剂量组MDA水平、Nrf2和HO-1的mRNA水平明显升高(P<0.05).与阳性药物组比较,PNS高剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1 mRNA及蛋白表达明显降低,低剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1的蛋白水平明显降低(P<0.05);PNS高剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05),PNS低剂量组MDA水平、Keap1蛋白水平明显升高(P<0.05).与PNS低剂量组比较,PNS高剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1的mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.05),PNS中剂量组神经功能评分、MDA水平、神经元凋亡比例明显降低(P<0.05);PNS高剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05),PNS中剂量组SOD水平、Nrf2和HO-1蛋白水平明显升高(P<0.05).与PNS中剂量组比较,PNS高剂量组神经功能损伤评分、MDA水平、神经元凋亡比例、Keap1 mRNA水平明显降低(P<0.05),HO-1 mRNA、Nrf2和HO-1的蛋白水平明显升高(P<0.05).结论 PNS能够下调脑栓塞大鼠Nrf2/HO-1通路,降低组织氧化应激,抑制神经元凋亡,发挥神经保护作用.

目的:探究岩藻黄质对肝纤维化模型大鼠氧化应激和纤维化的保护作用及可能机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为空白、模型、岩藻黄质和水飞蓟宾组.除空白组外,其余各组大鼠均皮下注射CCl4溶液,2次/周,连续8周.造模同时,各组给予相应药物,空白和模型2组均给予等体积无菌水.8周后处死大鼠,检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(T-BIL)、直接胆红素(D-BIL)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)、透明质酸(HA)、羟脯氨酸(HYP)、层粘连蛋白(LN)含量以及α-SMA、TGF-β/Smad3通路主要mRNA和蛋白表达;并检测肝组织病理变化和纤维化.结果:与空白组比较,模型组大鼠血清AST、ALT、T-BIL、D-BIL、HA、HYP、LN、MDA,肝组织α-SMA mRNA和α-SMA、TGF-β、p-Smad3蛋白水平显著上调,而SOD和GSH-Px含量降低,肝脏可见细胞结构破坏,大量炎症细胞浸润,胶原沉积和纤维增生;与模型组相比,岩藻黄质和水飞蓟宾可显著逆转大鼠血清ALT、AST、T-BIL、D-BIL、HA、HYP、LN和MDA的升高及SOD和GSH-Px的降低,并缓解肝组织炎症和纤维化程度;此外,岩藻黄质可显著抑制肝组织α-SMA、TGF-β mRNA和α-SMA、TGF-β、p-Smad3蛋白表达水平.结论:岩藻黄质通过抑制TGF-β/p-Smad3通路缓解大鼠肝纤维化水平,调节氧化应激状态.

岩藻黄质(fucoxanthin,FX)是一种广泛存在于藻类和无脊椎的动物中的海洋活性物质,它的特点是分子质量小,化学活性强,易氧化,容易被生物体吸收,对皮肤细胞、肝、肾、脾和组织没有毒性.自从FX被发现后,它的安全性得以证实,其在体内和体外的代谢、不同的提取工艺及活性被研究,FX因其显著的活性,目前已经被用于临床试验和产品开发.研究表明FX具有开发为临床用药的潜力.

目的 建立昆布颗粒提取及制备工艺.方法 以岩藻黄质的得率为指标,以乙醇浓度、超声提取时间、液料比及提取次数为影响因素,考察昆布颗粒的最佳提取工艺;以昆布颗粒的溶解性及成型率为指标,考察最佳制备工艺.结果 昆布颗粒最优提取工艺为:以90％乙醇为溶剂,液料比为10:1,超声提取10 min.昆布颗粒制剂制备工艺确定为:浸膏粉:糊精:微晶纤维素为1:7:2,以80％乙醇为黏合剂,60℃下干燥5 h;所制备的昆布颗粒中岩藻黄质含量为1.16 mg/g.结论 该工艺稳定可靠,可为昆布颗粒剂的提取及制备提供参考.