背景:巴豆霜能够激活ERK通路、对神经元细胞具有抗凋亡作用,是否具有抑制JNK、p38通路的激活而发挥抗凋亡的协同效应尚不清楚.目的:探讨巴豆霜对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧皮质区神经元损伤和凋亡的影响及机制.方法:①将90只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,巴豆霜低、中、高剂量组,尼莫地平组,每组15只,除假手术组外,剩余各组均采取线栓法制备大脑中动脉栓塞大鼠模型,巴豆霜各组大鼠分别按剂量20,40,60 mg/kg灌胃;假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水,1次/d,连续给药7 d.运用神经功能缺损评分、TTC染色、脑组织含水量、苏木精-伊红染色及尼氏染色筛选出最佳浓度即巴豆霜高剂量.②将120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、巴豆霜组、JNK抑制剂组、巴豆霜+JNK抑制剂组、p38 MAPK抑制剂组、巴豆霜+p38 MAPK抑制剂组和尼莫地平组,每组15只,除假手术组外,剩余各组大鼠均制备大脑中动脉栓塞大鼠模型,在造模之前30 min,将10 μL JNK抑制剂SP600125或10 μL p38 MAPK抑制剂SB203580分别注射到大鼠侧脑室,巴豆霜各组大鼠灌胃60 mg/kg巴豆霜,7 d 后,采用Western Blot、TUNEL染色及流式细胞术检测各组大鼠脑组织JNK/p38 MAPK信号通路及凋亡相关蛋白水平及细胞凋亡情况.结果与结论:①与假手术组相比,模型组神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死体积、细胞凋亡率显著升高(P<0.05),神经细胞呈散乱分布;与模型组相比,巴豆霜中、高剂量组和尼莫地平组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积显著降低(P<0.05),神经细胞病理形态明显改善;②与JNK抑制剂组相比,巴豆霜+抑制剂组大鼠脑组织p-JNK/JNK、p-p38/p38、Bax表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),而Bcl-2表达显著升高(P<0.05);③结果提示,巴豆霜可能通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路的激活、减少神经元凋亡等途径,达到对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用.

巴豆攻坚散结、泻下通腑,因其作用峻猛,故现今医者少用,患者畏惧,但巴豆有其独特作用,每能起沉疴痼疾.巴豆在《伤寒杂病论》中多用于救急,共出现5次,见于4首方剂,分别为三物白散(《金匮要略》为桔梗白散)、走马汤、九痛丸与三物备急丸,所治疾病分别为寒实结胸、肺痈、中恶、九种心痛、心腹诸卒暴百病等.巴豆炮制之后既可减少巴豆中植物蛋白的毒性作用,又可避免有效成分巴豆霜的流失,故临床应在掌握其适应证、适应剂量与急救方法的情况下,大胆使用,但应注意巴豆主要针对体质壮实者,需中病即止,勿过量使用.

整理古今“十九畏”同方配伍应用文献并进行分析,探讨“十九畏”古今同方应用情况及配伍特点.收集“十九畏”同方应用方剂共1600首(古代方剂602首、现代方剂998首),其中以肉桂-赤石脂最为常见(35.00％),其次为人参-五灵脂(31.56％)、丁香-郁金(17.00％);乌头类-犀角(8.88％)及巴豆-牵牛(7.00％)应用较少,水银-砒霜、三棱-牙硝、硫黄-朴硝、狼毒-密陀僧古今均极少同方配伍应用.肉桂-赤石脂多配伍补气药、温里药和清热药,常用于腹泻、腹痛等脾胃疾病及痛经等妇科疾病;人参-五灵脂多配伍补气健脾药、活血化瘀药,用于妇女经产诸疾、小儿惊风、恶性肿瘤及心血管疾病等;丁香-郁金多配伍健脾药、理气药、化痰止咳药,常用于呃逆、胃痛等脾胃疾病.提示配伍禁忌“十九畏”中肉桂-赤石脂、人参-五灵脂、丁香-郁金古今均有应用,但具有一定病证特点和配伍环境特点,其安全性及组方规律值得进一步研究.

为考察不同巴豆制霜过程对巴豆脂肪油、总蛋白及致肠道毒性的影响,将巴豆生品进行热压去油,冷压去油和淀粉稀释法炮制,得3种巴豆制霜品.小鼠灌胃给药,采用ELISA法测定小鼠血清中二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸含量,考察肠道通透性的变化;采用Western blot法测定不同肠段中紧密连接蛋白(occludin,claudin-1)表达变化,考察巴豆生品及其制霜品对肠道损伤的毒性差异.分别采用GC-MS和SDS-PAGE分析巴豆制霜前后脂肪油和总蛋白的变化.结果显示,巴豆生品能够显著增加小鼠肠道通透性和降低十二指肠、空肠紧密连接蛋白表达.制霜后小鼠肠道通透性和紧密连接蛋白表达均趋向正常,毒性降低.不同巴豆霜肠道毒性大小为:冷压巴豆霜＞稀释巴豆霜≈热压巴豆霜.3种巴豆霜脂肪油成分组成一致,但总蛋白含量和组成具有明显差异.含量高低:冷压巴豆霜＞热压巴豆霜＞稀释巴豆霜,其中冷压和稀释巴豆霜总蛋白条带相对分子质量分布一致,热压巴豆霜总蛋白组成发生显著变化,条带减少,变淡.表明在巴豆制霜中,稀释和加热过程均能够降低蛋白含量,且加热导致部分蛋白变性失活.稀释和加热均能降低巴豆霜毒性,但加热过程减毒作用更显著,表明加热是巴豆制霜过程中的关键步骤.

研究大枣对巴豆霜胃肠毒性及利尿效应的干预作用.将48只小鼠随机分为空白对照组(control)、巴豆霜低剂量组(0.039 g·kg-1·d-1,CTL)、巴豆霜高剂量组(0.078 g·kg-1 ·d-1,CTH)、大枣水提液组(9.75 g·kg-1· d-1,JF)、巴豆霜低剂量与大枣配伍组(巴豆霜0.039 g·kg-1· d-1,大枣9.75 g·kg-1· d-1,JFCTL)、巴豆霜高剂量与大枣配伍组(巴豆霜0.078 g·kg-1· d-1,大枣9.75 g·kg-1·d-1,JFCTH),每组8只.各组于给药第9天进行排尿量测定;给药10天后,收集新鲜粪便样品,采用16S rDNA测序的方法研究巴豆霜和大枣配伍前后肠道菌群的变化.所有实验方案均经南京中医药大学动物伦理委员会批准.结果表明,大枣与巴豆霜合用可减缓巴豆霜的快速利尿作用,显著上调单用巴豆霜后下降的血清白介素-2 (IL-2)、白介素-6(IL-6)、胃泌素(GAS)和生长抑素(SS)水平,减轻巴豆霜导致的小鼠小肠组织损伤,并改善其引起的肠道菌群失调.大枣合用低剂量巴豆霜后可使Sphingomonas、Oscillospira的相对丰度显著降低,大枣合用高剂量巴豆霜后致病菌属Bilophila水平降低.本研究表明大枣与巴豆霜配伍应用可在血清免疫指标、肠道运动、肠道损伤、肠道菌群结构等方面表现出一定的配伍减毒作用趋势.此外,大枣尚可减缓巴豆霜的逐水药势,呈现出一定的降效作用.

该研究基于课题组前期发现的"藻戟遂芫"与甘草配伍致毒增毒特点, 以利尿作用和肠道菌群结构为表征指标, 拓展性开展功效相似、基原相近、化学成分类型类同的中药巴豆霜与甘草合用可能导致的减效增毒作用研究.结果显示, 甘草与高剂量巴豆霜合用, 可减缓巴豆霜的快速利尿作用, 表现为一定的降效作用趋势;巴豆霜高、低剂量均可显著损伤小鼠小肠组织, 并使其肠道菌群组成结构发生显著变化.低剂量巴豆霜合用甘草后可使有害菌属Streptococcus (链球菌属) 和Rikenellaceae_ukn的水平显著升高, 高剂量巴豆霜和甘草合用后致病菌属Desulfovibrio (脱硫弧菌属) 和Streptococcaceae_ukn相对丰度升高, 两药合用进一步扰乱了肠道微生物稳态, 且提示有引发肝脏及肠道炎症的风险.研究结果从巴豆霜传统功效及其对肠道菌群结构影响方面证实巴豆霜与甘草合用具有一定的降效增毒作用趋势, 为巴豆霜临床安全用药提供了数据支持.

李东垣《脾胃论》中使用了七个含有巴豆的处方,详细阐释了胃肠寒冷积滞及虚证实证均可使用巴豆治疗.巴豆七方涵盖了巴豆众多传统炮制方法,核心在于制熟减毒,并根据临床需要配伍辅料.巴豆配伍人参、白术治疗虚中积冷;配伍干姜、丁香等温里药温下扫邪;配伍木香、陈皮调畅气机;配伍黄连、大黄、百草霜制约巴豆辛热燥烈峻下之性;配伍三棱、莪术、神曲活血祛瘀、行气消积.通过对巴豆的炮制、灵活把握服用剂量以及经验配伍,达到峻药缓投、攻药虚用的目的.

目的:分析2020年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)(一部)药材和饮片外用的研究现状,以期为中药的临床外用研究提供参考.方法:统计2020年版《中国药典》(一部)药材和饮片中可外用中药的外用功能、用法、用量等信息,并进行对比分析.结果:2020年版《中国药典》(一部)共记载可外用的中药165味,其中明确记载外用功能的中药25味,包括千金子、千金子霜、天南星、制天南星、巴豆、巴豆霜、甘松、艾叶、白矾、百部、芫花、蜂蜡、蜂蜜、补骨脂、栀子、轻粉、鸦胆子、骨碎补、狼毒、菟丝子、商陆、蛤壳、滑石、滑石粉、蜂胶.2020年版《中国药典》记载的中药外用的用量多为外用适量,外用用量不明确;外用用法多集中为研未掺敷患处、煎汤熏洗、熬膏等;临床外用多用来治疗湿疹、手足癣、皮肤皲裂、烧烫伤、痈肿疮毒、白癜风等皮肤病.结论:2020年版《中国药典》所载可外用中药的数量总体呈递增趋势,但这些中药的外用功能、用量及用法仍有待完善.

目的:筛选巴豆制霜法的最佳工艺,分析炮制前后巴豆脂肪油的变化情况.方法:以脂肪油和巴豆苷含量为评价指标,采用L9(34)正交试验法,优选巴豆制霜工艺的温度、压力、压制次数和压制时间;采用GC法对制霜前后巴豆中的脂肪油进行分析.结果:最佳炮制工艺为在80℃,150 kPa的压力下,压制3次,每次30 min.验证试验中3批巴豆霜的脂肪油平均含量为19.1％,巴豆苷平均含量为2.46％.生巴豆和巴豆霜脂肪油中共检出22种共有脂肪酸.结论:优选出的巴豆霜炮制工艺稳定可行,重现性好,可为制定其炮制规范提供参考.

中药材指来源于自然界,未经加工的植物、动物和矿物,不可直接供处方使用,必须经过专门的炮制,制备成中药饮片才能应用于临床,中药炮制目的在于增强药物疗效,降低或消除药物的毒副作用[1].许多中药虽有较好的疗效,但毒性较大,临床应用安全性低.《中国药典》2015版收藏大毒中药10种,有毒中药42种,小毒中药30种,列入卫生部"有毒药品管理品种"范围,受《医疗用有毒药品管理办法》约束的有毒中药共28种,包含川乌、草乌、附子、天南星、半夏、马钱子、甘遂、大戟、芫花、班螯、巴豆霜、藤黄、砒霜、千金子霜、蟾酥、狼毒、商陆、朱砂、煨肉豆蔻、青娘子等[2-3].有毒中药品种虽少,但如半夏化痰止咳疗效佳,附子具有回阳救逆的功效,既可以作为饮片直接入药,也是多种中成药、中医处方的的组成成分之一,用途广泛,因此有毒中药的用药安全至关重要[4-5].笔者对常见中药炮制减毒方法及炮制工艺等方面研究进展概述如下.