目的:初步研究幽门螺杆菌( Helicobacter pylori ，HP)鞭毛蛋白FliD的部分免疫学特征。 方法:原核表达重组FliD蛋白；制备rFliD兔多克隆抗体，同时酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测rFliD特异性免疫球蛋白G(immunoglobulin G, IgG)与免疫球蛋白M(immunoglobulin M, IgM)水平；酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot, ELISPOT)检测rFliD刺激Hp患者外周血单核细胞(peripheral blood monocytes, PBMC)后的γ干扰素(interferon-γ，IFN-γ)及白细胞介素4(interleukin4, IL-4)表达水平；流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测rFliD蛋白刺激胃粘膜上皮细胞(Gastric epithelial cells, GES-1)细胞后的凋亡比例。结果:rFliD原核表达纯化成功；成功制备高效价rFliD兔多克隆抗体，并发现rFliD可诱导家兔产生高水平IgG与IgM，与免疫前血清比差异具有统计学意义( t值分别为5.42、8.18， P值均<0.05))，效价可达1：102 400；与健康对照组(healthy control, HC)相比，HP组rFliD特异性IFN-γ与IL-4均显著增高( t值分别为21.91, 13.57， P值均<0.05)，但产生IFN-γ的水平显著高于IL-4( t＝7.55， P< 0.05)；与磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline, PBS)对照组相比，rFliD刺激GES-1细胞后24或72 h均可发生显著性凋亡且差异具有统计学意义( t值分别为10.12、10.90， P值均<0.05)。 结论:幽门螺杆菌鞭毛FliD蛋白具有强免疫原性，可诱导产生较强的体液及细胞免疫应答，且细胞免疫应答以IFN-γ高表达的Th2型为主；同时发现其对GES-1细胞存在一定程度的凋亡效应。

目的:探究前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)在幽门螺杆菌( H. pylori)感染导致炎症反应中的作用机制。 方法:收集2020年5月1日至2021年1月31日初次就诊于十堰市太和医院消化内科的60例胃炎患者( H. pylori阳性和阴性患者各30例)与30例健康体检者，检测其血清PCSK9水平。选取 H. pylori标准菌株、4种 H. pylori临床分离菌株、正常胃上皮细胞系GES-1与THP-1细胞经诱导形成的巨噬细胞。将 H. pylori菌株与胃上皮细胞系GES-1共培养以制备不同上清液培养基，设立磷酸盐缓冲液空培养基即阴性对照培养基(阴性对照组)、 H. pylori与GES-1细胞共培养上清液培养基( H. pylori感染GES-1组)、正常GES-1细胞上清液培养基( H. pylori未感染GES-1组)、 H. pylori与GES-1细胞共培养上清液+PCSK9中和抗体培养基(抗PCSK9组)、 H. pylori与GES-1细胞共培养上清液+人免疫球蛋白G2培养基(同型对照组)。采用Transwell迁移实验、实时荧光定量聚合酶链反应、平板集落形成实验、 H. pylori吞噬溶酶体共定位实验等比较 H. pylori感染GES-1组、 H. pylori未感染GES-1组和阴性对照组，以及抗PCSK9组和同型对照组的巨噬细胞迁移数、CC趋化因子受体( CCR2)mRNA相对表达水平、白细胞介素(IL)-6和细胞坏死因子(TNF)-α释放水平、CD8 + T细胞胞膜磷酸化水平、巨噬细胞菌落数，分析PCSK9对 H. pylori感染导致炎症反应的调控机制。统计学方法采用独立样本 t检验。 结果:H． pylori阳性胃炎患者的血清PCSK9水平高于 H. pylori阴性胃炎患者和健康体检者[(384.00±57.57) μg/L比(208.80±48.89)、(176.10±47.14) μg/L]，差异均有统计学意义( t＝12.71、15.31，均 P<0.001)。与阴性对照培养基相比， H. pylori标准菌株和4种分离菌株均可诱导正常胃上皮细胞系GES-1分泌PCSK9[(1 267.00±287.50] g/L比(2 717.00±199.20)、(4 858.00±302.40)、(3 167.00±334.20)、(6 075.00±597.30)、(4 283.00±331.20) g/L]，差异均有统计学意义( t＝10.15、21.09、10.56、17.77、16.85，均 P<0.001)。 H. pylori感染GES-1组的巨噬细胞迁移数、巨噬细胞 CCR2 mRNA相对表达水平、IL-6水平、TNF-α水平和巨噬细胞菌落数均高于 H. pylori未感染GES-1组和阴性对照组[132.20±5.67比84.83±4.62、39.83±4.12，8.66±0.94比6.52±0.47、1.00±0.09，(281.00±8.56) ng/L比(115.00±7.72)、(64.00±5.44) ng/L，(619.80±18.47) ng/L比(373.30±12.85)、(225.70±6.44) ng/L，(357.00±16.31)菌落形成单位(CFU)比(134.80±8.64)、(74.17±9.68) CFU]，差异均有统计学意义( t＝15.85、32.27，4.96、19.79，35.28、52.43，26.84、49.37，29.49、36.53；均 P<0.001)。 H. pylori感染GES-1组的 H. pylori吞噬溶酶体共定位百分比，以及CD8 + T细胞胞膜CD3ζ Tyr142、杀伤分子颗粒酶B和穿孔素表达水平均低于 H. pylori未感染组和阴性对照组[(15.33±1.86)%比(34.50±3.72)%、(65.67±3.56)%，464.20±120.80比1 924.00±262.10、2 390.00±484.10，(6.41±0.42)%比(17.37±0.73)%、(26.60±1.57)%，(6.84±1.37)%比(14.53±0.48)%、(26.22±1.21)%]，差异均有统计学意义( t＝11.27、30.70，12.39、9.45，30.50、31.90，25.96、13.00；均 P<0.001)。抗PCSK9组的巨噬细胞迁移数、 CCR2 mRNA相对表达水平、IL-6水平、TNF-α水平和巨噬细胞内菌落数均低于同型对照组[72.50±4.97比128.30±6.74、0.82±0.06比1.00±0.08、(85.50±4.37) ng/L比(277.70±8.98) ng/L、(291.80±13.69) ng/L比(615.30±12.65) ng/L、(111.50±10.21) CFU比(346.20±18.04) CFU]，差异均有统计学意义( t＝16.33、4.40、47.13、42.50、27.73，均 P<0.001)。抗PCSK9组的 H. pylori吞噬溶酶体共定位百分比，以及CD3ζ Tyr142、杀伤分子颗粒酶B和穿孔素的表达水平均高于同型对照组[(51.05±3.03)%比(16.71±1.91)%、2 948.00±384.00比1 156.00±178.60、(53.88±3.86)%比(5.88±0.93)%、(32.80±2.07)%比(6.83±0.54)%]，差异均有统计学意义( t＝23.49、10.36、29.60、29.76，均 P<0.001)。 结论:H． pylori通过诱导胃上皮细胞释放PCSK9抑制CD8 +T活化和细胞毒作用，还可招募巨噬细胞，激活核因子κB信号轴上调巨噬细胞炎症因子释放水平，抑制巨噬细胞的吞噬杀伤作用，调控炎症反应。

目的:探讨幽门螺杆菌免疫球蛋白G（Hp-IgG）抗体联合血清分泌型蛋白Dikkopf相关蛋白1（DKK1）、可溶性B7同源物3（sB7-H3）对早期胃癌（EGC）的诊断价值。方法:选择2020年6月至2023年8月江苏省南通市海门区人民医院收治的48例EGC患者作为研究对象（EGC组），选取同时期确诊的50例慢性萎缩性胃炎（CAG）患者作为CAG组，58例健康体检者作为对照组。采用胶体金法检测Hp-IgG抗体情况，酶联免疫吸附试验测定血清DKK1、sB7-H3水平；采用受试者操作特征（ROC）曲线分析Hp-IgG抗体、DKK1、sB7-H3对CAG与EGC的鉴别诊断价值，采用Kappa一致性检验评估其鉴别诊断的一致性。结果:对照组、CAG组、EGC组Hp-IgG抗体阳性率分别为36.21%（21/58）、72.00%（36/50）、89.58%（43/48），DKK1水平分别为（13.78±3.35）、（21.36±4.52）、（38.86±7.24）μg/L，sB7-H3水平分别为（7.63±1.59）、（12.34±3.64）、（25.35±5.27）μg/L，差异均有统计学意义（ χ2=34.51， P<0.001； F=316.95， P<0.001； F=314.22， P<0.001）；与对照组相比，CAG组、EGC组Hp-IgG抗体阳性率、DKK1及sB7-H3水平均升高（均 P<0.05）；与CAG组相比，EGC组Hp-IgG抗体阳性率、DKK1及sB7-H3水平均升高（均 P<0.05）。CAG患者Hp-IgG抗体阳性36例、阴性14例，DKK1水平分别为（22.18±4.84）、（16.33±3.57）μg/L，sB7-H3水平分别为（12.83±3.84）、（9.33±2.32）μg/L，差异均有统计学意义（ t=4.10， P<0.001； t=3.18， P=0.003）。EGC患者Hp-IgG抗体阳性43例、阴性5例，DKK1水平分别为（39.66±7.61）、（30.05±5.23）μg/L，sB7-H3水平分别为（26.18±5.62）、（16.24±4.25）μg/L，差异均有统计学意义（ t=2.74， P=0.009； t=3.82， P<0.001）。ROC曲线显示，Hp-IgG抗体鉴别诊断CAG与EGC的曲线下面积（AUC）为0.81（95% CI为0.72~0.88），敏感性为72.00%，特异性为89.58%；DKK1鉴别诊断CAG与EGC的AUC为0.90（95% CI为0.82~0.95），最佳截断值为28.32 μg/L，敏感性为70.00%，特异性为95.83%；sB7-H3鉴别诊断CAG与EGC的AUC为0.86（95% CI为0.78~0.92），最佳截断值为16.44 μg/L，敏感性为70.00%，特异性为95.83%；三者联合鉴别诊断CAG与EGC的AUC为0.95（95% CI为0.89~0.98），敏感性为90.00%，特异性为87.50%；三者联合优于Hp-IgG抗体、DKK1及sB7-H3各自单独鉴别诊断CAG与EGC（ Z=3.62， P<0.001； Z=2.13， P=0.035； Z=2.69， P=0.016）。Kappa一致性检验显示，Hp-IgG抗体联合DKK1、sB7-H3鉴别诊断CAG与EGC，与病理组织学检查一致性更佳（Kappa=0.78）。 结论:EGC患者Hp-IgG抗体阳性率、DKK1及sB7-H3水平均升高，三者联合检测鉴别诊断CAG与EGC效能更优。

目的 探讨血清胃泌素-17(G-17)、胃蛋白酶原Ⅰ(PG-Ⅰ)/胃蛋白酶原Ⅱ(PG-Ⅱ)比值(PGR)、人类白细胞抗原-G(HLA-G)、膜联蛋白A1(ANXA1)联合幽门螺杆菌(HP)-免疫球蛋白G(IgG)抗体(HP-IgG抗体)对胃癌和癌前病变的鉴别诊断价值.方法 选择2021年1月至2022年5月在陕西中医药大学附属医院接受诊治的80例胃癌患者作为胃癌组,70例癌前病变患者作为癌前病变组,另选取在我院体检的健康人群50例作为健康对照组.比较三组受检者HP-IgG抗体阳性率以及血清G-17、PGR、HLA-G、ANXA1水平.根据胃癌组和癌前病变组患者HP-IgG抗体阳性情况,分为HP-IgG抗体阳性组(n=71)、HP-IgG抗体阴性组(n=9),比较两组血清患者的G-17、PGR、HLA-G、ANXA1水平.采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清G-17、PGR、HLA-G、ANXA1联合HP-IgG抗体检测对胃癌和癌前病变的鉴别诊断价值.结果 胃癌组患者的PGR为1.45±0.74,明显低于癌前病变组的5.02±1.88和健康对照组的12.36±2.02,G-17、HLA-G、ANXA1及HP-IgG抗体阳性率分别为(81.07±10.70)ng/mL、(90.88±9.13)U/mL、(6.93±1.64)g/L及88.75%,明显高于癌前病变组的(67.64±9.88)ng/mL、(68.35±8.84)U/mL、(4.85±1.02)g/L、75.71%和健康对照组的(54.32±8.74)ng/mL、(41.34±6.76)U/mL、(1.58±0.70)g/L、46.00%,而癌前病变组患者的上述各项指标明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌HP-IgG抗体阳性组患者的PGR为1.23±0.55,明显低于胃癌HP-IgG抗体阴性组的3.15±1.38,G-17、HLA-G、ANXA1分别为(81.96±11.34)ng/mL、(91.71±10.16)U/mL、(7.13±1.74)g/L,明显高于胃癌HP-IgG抗体阴性组的(74.03±9.92)ng/mL、(84.35±9.46)U/mL、(5.35±1.44)g/L,差异均有统计学意义(P<0.05);癌前病变HP-IgG抗体阳性组患者的PGR为4.54±1.83,明显低于癌前病变HP-IgG抗体阴性组的6.51±2.50,G-17、HLA-G、ANXA1分别为(69.25±9.35)ng/mL、(69.83±8.18)U/mL、(5.15±1.54)g/L,明显高于癌前病变HP-IgG抗体阴性组的(62.65±9.42)ng/mL、(63.75±8.16)U/mL、(3.90±1.20)g/L,差异均具有统计学意义(P<0.05);血清G-17、PGR、HLA-G、ANXA1、HP-IgG抗体单独及联合检测对胃癌和癌前病变的鉴别诊断的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.716、0.717、0.733、0.735、0.709、0.882.结论 血清G-17、PGR、HLA-G、ANXA1联合HP-IgG抗体检测对胃癌和癌前病变具有较好的鉴别诊断价值.

目的:探讨胃蛋白酶原(PG)水平及幽门螺杆菌免疫球蛋白抗体G(HP IgG)在早期胃癌筛查中的应用价值,以期为临床诊疗提供科学参考.方法:选取我院2016年01月～2017年12月63例于我院接受治疗的早期胃癌患者作为观察组,另选取71例同期于我院体检的健康人群作为对照组;观察并比较两组患者血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ(PGR)水平和HP IgG抗体阳性率;采用受试者工作曲线(ROC)曲线分析血清PGⅠ、PGⅡ和PGR在早期胃癌中的诊断价值;比较HP IgG抗体阳性组和HP IgG抗体阴性组血清PGⅠ、PGⅡ和PGR水平.结果:观察组患者血清PGⅠ和PGR水平显著低于对照组,观察组患者血清PGⅡ水平显著高于对照组,观察组患者HP IgG抗体阳性率(82.54％52/63VS 28.17％20/71)显著高于对照组,差异具有统计学意义;ROC曲线分析显示:血清PGⅠ在诊断早期胃癌的最佳阈值为66.32μg/L,其敏感性为83.10％,特异性为76.19％;血清PGⅡ在诊断早期胃癌的最佳阈值为21.53μg/L,其敏感性为77.46％,特异性为73.02％;PGR在诊断早期胃癌的最佳阈值为4.137,其敏感性为87.32％,特异性为79.37％;HP IgG抗体阳性组患者血清PGⅠ和PGR水平显著低于HP IgG抗体阴性组,HP IgG抗体阳性组患者血清PGⅡ水平显著高于HP IgG抗体阴性组,差异具有统计学意义.结论:血清PGⅠ、PGⅡ、PGR和HP IgG抗体检测对早期胃癌筛查具有较好的应用价值,可为临床早期胃癌诊断提供参考.

目的 探究幽门螺旋杆菌-免疫球蛋白G(Helicobacter pylori-immunoglobulin G,Hp-IgG)、同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)和内皮素(Endothelin,ET)变化与血管性痴呆患者Hp感染的关系.方法 选取2015年1月-2017年12月于浙江省中西医结合医院就诊的血管性痴呆患者318例为研究对象,其中39例合并Hp感染患者设为感染组、279例未感染者设为未感染组.观察研究对象简易精神状态量表(Minimum Mental State Examination,MMSE)评分、Hp-IgG阳性率、Hcy和ET水平及感染组患者经呼吸14C实验确诊Hp感染确诊时(T0)、抗感染治疗3～5 d(T1)、抗感染治疗14 d(T2)MMSE评分、Hp-IgG阳性率、Hcy和ET水平.结果 感染组Hp-IgG阳性率为100.00％ (39/39)高于未感染组65.59％ (183/279)(P=0.040);感染组、未感染组Hp-IgG型抗体阳性率分别为100.00％、65.59％均高于同组Hp-IgG型抗体阴性率0.00％、34.41％(P＜0.05).T0时,感染组MMSE评分、Hcy和ET水平与未感染组比较,差异无统计学意义.T0～T2,感染组MMSE评分先下降、后升高,Hcy和ET水平先升高后下降,且T1时MMSE评分为(11.50±2.10)分低于未感染组,而Hcy和ET分别为(57.10±2.54)μmol/L和(4.52±1.15)EU/ml高于未感染组(P＜0.05).Hp-IgG型抗体阳性率、Hcy、ET、Hp感染阳性率呈正相关(P＜0.05).MMSE评分与Hp-IgG型抗体阳性率、Hcy、ET、Hp感染阳性率呈负相关(P＜0.05).结论 Hp-IgG型抗体阳性率、Hcy、ET水平变化与血管性痴呆患者Hp感染密切相关,且具有相互协同作用.掌握上述指标水平变化,利于全面掌握病情、降低血管性痴呆患者Hp感染率、阻断认知功能进一步下降,改善预后.

为提高血清学方法诊断幽门螺杆菌（Hp）感染的敏感性和特异性，建立了检测人血清中抗Hp抗体IgG的免疫印迹方法。对因消化道症状而行胃镜检查的连续137例患者采集活检粘膜进行Hp培养、涂片和尿素酶试验，同时收集其静脉血，用免疫印迹方法检测血清中抗Hp抗体IgG。137例患者中，104例患者胃粘膜用3种方法或其中2种方法检测Hp为阳性，30例患者用上述3种方法检测Hp均为阴性，另3例患者仅1种方法检测Hp为阳性。Hp阳性患者的血清识别条带明显多于Hp阴性患者的血清。若以免疫印迹积分≥2分判为Hp阳性，＜2分为Hp阴性，则免疫印迹方法的敏感性为100.0％，特异性为90.0％，阳性预测值和阴性预测值分别为97.2％和100.0％。与空肠弯曲菌和结肠弯曲菌无明显交叉反应。

1 病例资料患儿,女,4岁.2017年8月因“腹泻”在当地医院查血常规示:PLT 52×109/L,粒红两系正常,骨穿不除外ITP,予人免疫球蛋白5.0g静滴3天及抗感染、止血等对症治疗,血小板恢复正常.20多天后血小板再度下降,最低42×109/L,口服醋酸泼尼松2个月(具体用量不详),血小板维持在20～ 50×109/L之间,未再治疗.2018年8月于当地口服中药治疗近4个月,效果不佳.2019年1月因“支气管肺炎”查血常规示:PLT 27×109/L,予抗感染治疗后,血小板恢复正常.2019年4月出现皮肤磕碰后瘀斑,查血常规示PLT 5 × 109/L,先后予人丙种球蛋白冲击治疗2次,血小板可升至正常,两周后下降为40 ～50×109/L.既往反复呼吸道感染,盗汗,易劳累,时有鼻衄,口中异味,纳差,眠欠佳,手心热,大便每日1-2次,质干,需开塞露辅助通便,小便调.父母体健,非近亲结婚,家族无类似病史及遗传病史.体格检查:全身皮肤黏膜无出血点、瘀斑,全身浅表淋巴结未触及,胸骨无压痛,心肺腹查体阴性.舌红苔白,脉沉.辅助检查:2017年11月15日腹部B超:肝脾略大.2017年8月29日骨穿示:骨髓有核细胞增生活跃,粒系占51％,红系占16％,粒红比=3.29∶1.全片见巨核细胞71个,分类25个,其中颗粒巨23个,裸眼巨2个,血小板少见.意见:不除外免疫性血小板减少症.支原体抗体IgM(+),2019年7月24日血常规:PLT 32×109/L;抗核抗体(-),幽门螺杆菌检测(+).

目的 分析血清胃蛋白酶原(PG)、胃泌素-17(G-17)联合幽门螺杆菌(Hp)水平评估胃癌(GC)的临床价值.方法 选择2019年10月至2020年10月该院消化内科因上腹部痛、恶心呕吐、饱胀不适等症状住院的患者90例作为研究对象,所有患者均接受血清PG、G-17及Hp-免疫球蛋白G(Hp-IgG)抗体水平,以胃镜及病理检查结果为金标准将其分为GC组和非GC组,分析血清PG、G-17联合Hp水平评估GC的临床价值.结果 以胃镜及病理检查结果为金标准,90例患者中诊断为GC的为23例(25.56％);GC组血清胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、G-17及Hp-IgG水平均高于非GC组,差异有统计学意义(P<0.05);绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)结果显示,血清PGⅡ、G-17、Hp-IgG水平及联合检测预测GC的发生ROC曲线下面积均>0.8,具有一定预测价值,但联合检测的AUC最大,预测价值最高.结论 血清PG、G-17及Hp水平在GC患者中均呈高表达,其联合检测评估GC具有一定价值.

病原体感染是引起不孕不育的重要因素.幽门螺杆菌(Hp)是一种主要寄生于胃黏膜组织中的螺旋状革兰阴性耐酸细菌,Hp感染是世界范围内最常见的慢性感染之一[1].据统计,全球约有近半数人口感染Hp,我国自然人群的感染率为40％～70％,人是唯一被确认的传染源[2].Hp感染与妊娠有关,并与妊娠的结局及子代的发育相关,是导致不孕症发生的一个重要因素[3].研究表明,Hp感染患者的卵泡液和宫颈黏液中存在高滴度的抗Hp抗体免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)与分泌型免疫球蛋白A(Immunoglobulin A Secretory,sIgA),这两种抗体可以阻止精子进入生殖道或抑制精子对卵子的渗透,阻碍精子与卵子的结合[4].