目的:制备靶向甲型流感病毒血凝素(hemagglutinin，HA)蛋白的广谱抗体FHA3，并对其进行鉴定。方法:依据单链抗体(single-chain antibody fragment，scFv)序列信息，PCR扩增FHA3重链和轻链可变区序列，连入抗体哺乳细胞表达载体pFRT-IgG1κ，构建重组表达质粒pFRT-IgG1κ-FHA3。利用瞬时高效表达系统ExpiCHO以及亲和纯化技术获取抗体蛋白FHA3。ELISA检测FHA3与甲型流感病毒HA的结合。假病毒感染宿主细胞试验检测抗体FHA3的体外中和活性。结果:蛋白质电泳结果显示制备获取了高纯度FHA3。FHA3与甲型流感病毒H1N1 HA、H2N2 HA、H3N2 HA、H5N1 HA、H7N9 HA以及H9N2 HA均识别结合，且呈浓度依赖效应。FHA3具有较好的体外中和活性，在低浓度下(5 μg/ml)能有效阻断H5N1以及H7N9假病毒入侵靶细胞，在0.012 5 μg/ml浓度下能有效阻断H1N1假病毒入侵靶细胞。结论:获得1株具有体外中和活性的靶向甲型流感病毒HA蛋白的广谱抗体。

HIV/AIDS在世界上广泛流行，抗逆转录病毒药物尚无法彻底根除HIV感染，开发新的治疗和预防方法仍然至关重要。不断分离到的广谱中和抗体(bnAb)，在抗HIV-1感染和治疗方面的应用日益突出，也为新疫苗的设计带来曙光。本文对近年来bnAb的分离鉴定的技术及中和表位特征研究进展进行简要综述。

现在已经明确广谱中和抗体(broad-spectrum neutralizing antibodies，bNAbs)具有抑制人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)在机体复制和降低血浆中总病毒载量的作用，这也是HIV疫苗设计的主要目标。但是至今传统的疫苗设计策略并不能有效诱导产生bNAbs。通常只有10%～25%慢性HIV感染者才能诱导产生bNAbs。bNAbs具有高频率的体细胞超突变(high frequency of somatic hypermutation)及特有的CDR3区长度等特征，还需要在更有效的滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cells)作用下，经历多轮亲和力成熟，才能产生中和能力强、且中和谱较广的中和抗体。因此明确抗HIV中和抗体的亲和成熟特征以及Tfh细胞对其的调节机制是至关重要的，也为设计出能够产生bNAbs的HIV疫苗提供基础。

由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)引起的艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)在过去40多年间一直困扰着人类，防治AIDS仍是人类面临的重要挑战。尽管HIV疫苗依然是人类彻底战胜AIDS的最理想方法，但迄今尚无可供预防使用的有效疫苗问世。其主要原因是由于HIV是一种高度变异的病毒，传统的疫苗策略在预防极端多样的HIV感染上面临着巨大的挑战。因此，研发一种能够成功诱导针对多种HIV变异的广谱中和抗体的新型疫苗成为科学界的关注焦点。本综述介绍了目前新型的HIV免疫原设计策略和新型候选疫苗的研究进展，并总结了关于HIV疫苗的最新临床试验和研究进展，展望了未来在HIV疫苗开发领域的发展方向。

目的:探讨具有广谱中和活性的患者DRVI01血浆来源的HIV-1B′亚型毒株抵抗VRC01抗体中和的机制。方法:比较同期感染相同亚型且对VRC01抗体敏感的病毒序列，结合文献报道筛选可能影响VRC01中和作用的关键氨基酸，通过定点突变、不同来源膜蛋白序列交换，验证这些位点氨基酸对VRC01抗体中和作用的影响。结果:位于gp120的LoopD区E279D、R282K和V5区N460A、N463Q单点突变，逆转了病毒对VRC01中和敏感性。上述2个或3个位点联合突变后的毒株与单点突变毒株比较，对VRC01抗体中和敏感性明显增强。与文献报道不同，N276糖基化位点突变并未改变毒株对VRC01的敏感性。结论:具有广谱中和活性患者DRV01血浆来源的HIV-1B′亚型毒株主要通过LoopD区D279、K282和V5区N460、N463突变，抵抗VRC01抗体的中和作用。

人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）感染的长期不进展者（LTNP）体内分离到的广谱中和抗体（bNAbs），已被证明可以预防HIV-1感染并降低感染者体内的病毒载量，成为了指导HIV-1疫苗设计和被动免疫治疗的突破口。中和抗体的功能除了与靶向表位有关，其亲和力也极大的影响了抗体的活性。HIV-1 bNAbs通过体内的多轮亲和力成熟获得了较高亲和力，从而实现了广谱度和中和活性的增加。高亲和力HIV-1 bNAbs在治疗过程中能更好的协助机体免疫系统清除病原体，并且使用剂量更少，毒副作用也相对较低。在亲和力成熟的同时，HIV-1 bNAbs表现出了高水平的体细胞超突变（SHM）、插入缺失、较长的重链第三互补决定区等不寻常的特征。这些特征阻碍了通过有效疫苗诱导HIV-1 bNAbs在体内产生并发育成熟，因此了解抗体亲和力成熟过程中发生的突变及其要点，有助于理解中和抗体的活性与特征的关系，并为设计有效的HIV-1潜在免疫原提供参考。

流感是由流感病毒引起的一种在全球范围内流行的传染病，从1918年追溯至今，已给公共健康和社会稳定带来了巨大的冲击。目前，接种流感疫苗是预防和控制流感流行的最有效方式。近几年，对广谱抗病毒药物和中和抗体的研究不断深入。流感病毒表面血凝素在病毒侵入宿主细胞阶段发挥重要作用，是现有流感疫苗的主要有效抗原成分，也是广谱中和抗体、广谱抗病毒药物的主要靶标。本文就近年来基于流感病毒血凝素的新型流感疫苗、中和抗体以及抗病毒药物等防治策略的研究进展进行综述，为后续流感的预防和控制提供新的思路。

目的:了解我国HIV CRF01_AE亚型及其相关重组亚型的包膜糖蛋白(envelope glycoprotein，ENV)分子流行情况，建立ENV共识序列以了解氨基酸突变及蛋白质三级结构。方法:收集Los Alamos数据库中2015—2021年我国HIV-1 CRF01_AE亚型及其相关重组亚型的完整ENV基因序列，构建系统发育进化树并建立ENV共识序列，使用Protscale及PROVEAN对ENV共识序列广谱中和抗体表位中的氨基酸亲疏水性变化及有害性突变进行预测，同时分析氨基酸突变对ENV三级结构的影响。结果:系统发育分析结果显示，有70.0%（14/20）的CRF01_AE亚型序列属于进化簇4，在ENV共识序列的广谱中和抗体表位V1/V2及Loop D中分别存在4个和1个的氨基酸突变使亲疏水性发生变化，PROVEAN预测结果显示V1/V2位点的G152D及β23/V5/β24表位的M476I为有害突变。ENV共识序列的蛋白质三级结构pLDDT值为86.2，在V1/V2表位存在由于有害突变所产生的新α螺旋。结论:我国HIV-1 CRF01_AE亚型基因谱系众多，加剧了重组病毒的形成。在ENV共识序列V1/V2结构域中由于氨基酸突变使其蛋白空间结构发生改变，这种改变可能会对后续广谱中和抗体的诱导产生影响。

成功建立体液免疫记忆反应至少取决于两层防御机制：抵抗再感染病原体的第一道防线为既有体液免疫记忆，其依赖于长寿浆细胞(plasma cells，PCs)分泌的预存的保护性抗体；第二道防线为反应性体液免疫记忆，即病原体经历的记忆B细胞迅速重新激活以产生抗体。其中后者在防御同源病毒的再次感染时起到至关重要的作用。由于人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)破坏免疫系统及病毒高变异特性对预防性疫苗的研发提出了挑战。因此，了解HIV诱导产生广谱中和抗体的记忆B细胞受体(B cell receptors，BCR)的特点为HIV-1预防性疫苗的设计提供新的思路和方向。

获得性免疫缺陷综合症(acquired immune deficiency syndrome，AIDS)是由I型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type I，HIV-1)感染引起的一类疾病。HIV-1在全球范围广泛传播，破坏免疫系统，一旦感染终身带毒，致死率高。在已经完成的Ⅲ期HIV-1疫苗效力试验中，RV144是唯一显示出免疫保护效果的疫苗，且免疫保护效果与HIV-1病毒包膜gp120 V1V2区域的抗体相关。HIV-1包膜V1V2的氨基酸序列及结构赋予病毒重要功能，包括进入靶细胞、诱导广泛交叉中和抗体及与α4β7整合素分子的相互作用等。根据V1V2结构域特征设计免疫原是研制疫苗的重要策略。现就HIV-1包膜V1V2区结构特征、中和表位及疫苗的研究进展作综述。