目的:探讨白细胞介素(IL)-37对肾癌细胞786-O增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:将肾癌细胞786-O分为对照组、不同剂量(12.5、50.0、200.0 ng/ml)重组IL-37蛋白组、pcDNA组、pcDNA-红细胞膜蛋白带4.1类似物4a的反义RNA1(EPB41L4A-AS1)组、200 ng/ml IL-37+si-NC组和200 ng/ml IL-37+si-EPB41L4A-AS1组，细胞计数试剂盒(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞增殖能力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell检测细胞侵袭，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测EPB41L4A-AS1和miR-106b-5p表达。双荧光素酶报告基因实验验证EPB41L4A-AS1和miR-106b-5p调控关系。两组间比较行 t检验；多组间比较采用单因素方差分析，组间进一步两两比较行LSD- t检验。 结果:12.5、50、200 ng/ml IL-37组786-O细胞吸光度( A)值(0.58±0.02、0.43±0.03、0.29±0.02比0.69±0.06， F＝207.113， P<0.05)、克隆形成数[(114.33±6.61)、(87.33±5.22)、(51.33±4.92)个比(139.44±9.49)个， F＝277.041， P<0.05]、划痕愈合率[(69.03±0.35)%、(54.9±1.84)%、(38.81±2.73)%比(85.08±0.91)%， F＝1 191.221， P<0.05]和侵袭数[(91.44±5.68)、(70.89±2.85)、(48.78±6.00)个比(112.44±6.62)个， F＝223.386， P<0.05]均低于对照组，差异均有统计学意义，细胞中EPB41L4A-AS1表达高于对照组(1.39±0.15、1.71±0.18、2.18±0.20比1.01±0.10， F＝84.386， P<0.05)，差异均有统计学意义，miR-106b-5p表达低于对照组(0.82±0.06、0.60±0.09、0.40±0.06比1.00±0.12， F＝82.545， P<0.05)，差异均有统计学意义，且呈剂量依赖性。pcDNA-EPB41L4A-AS1组786-O细胞(0.23±0.02比0.69±0.05， t＝25.626， P<0.05)、克隆形成数[(45.33±3.32)个比(137.78±7.01)个， t＝35.757， P<0.05]、划痕愈合率[(35.01±3.27)%比(85.11±1.29)%， t＝42.757， P<0.05]和侵袭数[(44.56±4.48)个比(109.44±8.59)个， t＝20.091， P<0.05]均降低，差异均有统计学意义。EPB41L4A-AS1可靶向负调控miR-106b-5p。200 ng/ml IL-37+si-EPB41L4A-AS1组786-O细胞中EPB41L4A-AS1表达低于200 ng/ml IL-37+si-NC组(1.14±0.13比2.49±0.19， t＝17.592， P<0.05)，差异均有统计学意义，miR-106b-5p表达高于200 ng/ml IL-37+si-NC组(0.91±0.09比0.43±0.08， t＝11.959， P<0.05)，差异均有统计学意义，细胞 A值(0.64±0.06比0.31±0.04， t＝13.729， P<0.05)、克隆形成数[(123.33±6.18)个比(49.22±3.23)个， t＝31.884， P<0.05]、划痕愈合率[(74.90±0.95)%比(38.15±2.17)%， t＝46.542， P<0.05]和侵袭数[(92.89±5.25)个比(47.44±4.13)个， t＝20.412， P<0.05]均高于200 ng/ml IL-37+si-NC组，差异均有统计学意义。 结论:IL-37可能通过调控EPB41L4A-AS1/miR-106b-5p轴抑制肾癌细胞786-O增殖、迁移和侵袭。

目的:探讨冠心病(CHD)患者冠状动脉旁路移植术(CABG)治疗后血清微小RNA(miR)-335、miR-193b水平与预后的关系。方法:选取阜外华中心血管病医院2018年6月至2020年6月收治的106例CHD患者作为研究对象，全部患者均行CABG治疗，术后进行为期12个月的随访，根据患者预后情况(是否发生不良心血管事件)分为预后不良组和预后良好组。检测并比较两组入院时血清miR-335、miR-193b水平，经Logistic回归、ROC曲线分析入院时血清miR-335、miR-193b水平对CHD患者CABG治疗预后的关系。结果:106例CHD患者经CABG治疗、随访后，有34例发生不良心血管事件，占32.08%；预后不良组胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)水平高于预后良好组[(6.02±0.87) mmol/L比(4.45±0.62) mmol/L、(1.87±0.40) mmol/L比(1.53±0.31) mmol/L]，miR-335、miR-193b水平低于预后良好组(0.55±0.29比0.81±0.27、0.46±0.25比(0.76±0.24)，差异有统计学意义( t＝10.577、4.940、4.571、5.869， P<0.05)；组间其他资料对比，差异无统计学意义( P>0.05)；经单项Logistic回归分析后，将 P值放宽至<0.1，纳入符合条件的因素，建立多项Logistic回归模型，结果显示，TC[ B＝3.666，比值比( OR)＝39.106，95%可信区间( CI)：8.551~178.831]、TG( B＝2.888， OR＝17.959，95% CI：4.516~71.423)过表达可能作为CHD患者CABG治疗预后的风险因子( P<0.05)，miR-335( B＝-3.324， OR＝0.036，95% CI：0.007~0.190)、miR-193b( B＝-5.068， OR＝0.006，95% CI：0.001~0.054)水平高表达可能作为CHD患者CABG治疗预后的保护因子( OR<1， P<0.05)；绘制ROC曲线，结果显示，入院时血清miR-335、miR-193b水平预测CHD患者CABG治疗预后不良的AUC均>0.70，具有一定预测价值，且以入院时血清miR-335、miR-193b的截点(cut-off)值取0.640、0.660时，可获得最佳预测价值。 结论:血清miR-335、miR-193b水平与CHD患者CABG治疗预后密切相关，两者联合检测有利于预测CHD患者预后。

目的:观察长链非编码RNA(lncRNA) GAS5靶向微小RNA(miR)-106b-5p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:收集112例胃癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析组织中lncRNA GAS5和miR-106b-5p的表达水平。HGC-27细胞随机分为lncRNA对照组、lncRNA GAS5组、miRNA对照组和miR-106b-5p KD组，分别采用慢病毒建立lncRNA GAS5过表达和miR-106b-5p敲减细胞系。细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验、Transwell实验检测各组的细胞增殖、迁移及侵袭能力；双荧光素酶报告基因分析lncRNA GAS5和miR-106b-5p关系。组间比较采用 t检验。 结果:癌旁组织中lncRNA GAS5表达量(1.003±0.107)显著高于胃癌组织(0.387±0.060)，差异有统计学意义( t＝8.649， P<0.05)。lncRNA GAS5组细胞lncRNA GAS5表达水平(3.073±0.373)明显高于lncRNA对照组(1.007±0.097)，差异有统计学意义( t＝9.284， P<0.05)。miR-106b-5p敲减组细胞miR-106b-5p表达水平(0.333±0.283)明显低于miRNA对照组(1.123±0.076)，差异有统计学意义( t＝11.880， P<0.05)。lncRNA GAS5组吸光度值(1.453±0.090)明显低于lncRNA对照组(1.983±0.196)，差异有统计学意义( t＝4.254， P<0.05)。miR-106b-5p敲减组吸光度值(1.277±0.081)明显低于miRNA对照组(2.083±0.191)，差异有统计学意义( t＝6.781， P<0.05)。lncRNA GAS5组细胞划痕愈合率[(43.347±4.713)%]明显低于lncRNA对照组[(79.643±7.069)%]，差异有统计学意义( t＝7.399， P<0.05)。miR-106b-5p敲减组细胞划痕愈合率[(39.773±1.817)%]明显低于miRNA对照组[(82.547±2.811)%]，差异有统计学意义( t＝18.633， P<0.05)。lncRNA GAS5组细胞侵袭数量[(58.137±5.167)个]明显低于lncRNA对照组[(89.733±8.942)个]，差异有统计学意义( t＝5.128， P<0.05)。miR-106b-5p敲减组细胞侵袭数量[(51.917±2.671)个]显著低于miRNA对照组[(92.473±6.209)个]，差异有统计学意义( t＝10.393， P<0.05)。lncRNA GAS5与miR-106b-5p呈碱基互补。lncRNA GAS5组细胞miR-106b-5p表达水平(0.563±0.067)明显低于lncRNA对照组(1.187±0.100)，差异有统计学意义( t＝8.976， P<0.05)。 结论:lncRNA GAS5在胃癌中表达上调，而miR-106b-5p表达水平下调，lncRNA GAS5通过竞争吸附结合miR-106b-5p调节胃癌细胞增殖、迁移和侵袭。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) GAS5对乳腺癌细胞增殖、周期和凋亡的影响及其分子机制。方法:选取郑州人民医院2018年12月到2021年6月手术切除的102例乳腺癌和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析lncRNA GAS5和微小RNA(miR)-106b-5p表达水平；乳腺癌MCF-7细胞系随机分为lncRNA对照组、lncRNA GAS5组。采用细胞计数试剂(CCK-8)分析两组细胞增殖能力；采用流式细胞术分析两组细胞的周期和凋亡水平；采用荧光素酶基因报告实验检测lncRNA GAS5和miR-106b-5p的关系。蛋白质印迹法(Western blot)分析增殖、周期和凋亡相关蛋白表达水平。计量资料比较采用 t检验。 结果:乳腺癌组织lncRNA GAS5表达水平(0.41±0.11)明显低于癌旁组织lncRNA GAS5表达水平(1.20±0.18)，差异有统计学意义( t＝5.901， P<0.05)。乳腺癌组织miR-106b-5p表达水平(1.09±0.16)明显高于乳腺癌组织miR-106b-5p表达水平(0.57±0.13)，差异有统计学意义( t＝4.109， P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度值(1.87±0.20)高于lncRNA GAS5组细胞吸光度值(1.23±0.14)，差异有统计学意义( t＝3.128， P<0.05)。lncRNA对照组细胞G 0/G 1期比例[(32.89±3.19)%]明显低于lncRNA GAS5组细胞G 0/G 1期比例[(47.83±5.32)%]，差异有统计学意义( t＝4.328， P<0.05)。lncRNA对照组细胞S期比例[(36.82±4.84)%]明显低于lncRNA GAS5组细胞S期比例[(27.48±4.11)%]，差异有统计学意义( t＝3.891， P<0.05)。lncRNA对照组细胞凋亡比例[(3.48±0.79)%]低于lncRNA GAS5细胞[(18.59±3.81)%]，差异有统计学意义( t＝3.990， P<0.05)。miR-106b-5p是lncRNA GAS5的靶点。lncRNA对照组细胞miR-106b-5p表达水平(1.15±0.17)明显低于lncRNA GAS5组细胞miR-160b-5p表达水平(0.58±0.13)，差异有统计学意义( t＝4.012， P<0.05)。 结论:lncRNA GAS5在乳腺癌组织中表达下调，通过与miR-106B-5p吸附结合，调节乳腺癌细胞增殖、周期和凋亡等生物学过程。

目的 探讨微小RNA(miR)-148b、miR-375在胎儿先天性心脏病孕妇血清中的水平,及其联合产前超声在胎儿先天性心脏病诊断中的价值.方法 收集2019年1月至2023年1月进行产前筛查的疑似胎儿先天性心脏病的106例孕妇作为研究对象,根据产后随访结果将其分为病例组(先天性心脏病,n=80)和对照组(均无先天性心脏病,m=26).比较2组血清miR-148b、miR-375水平;ROC曲线分析血清miR-148b、miR-375对胎儿先天性心脏病的诊断效能;四表格法分析产前超声联合血清miR-148b、miR-375水平对胎儿先天性心脏病的诊断效能.结果 与对照组比较,病例组血清miR-148b水平显著降低,血清miR-375水平显著升高(P＜0.05).产前超声联合血清miR-148b、miR-375诊断胎儿先天性心脏病的准确率为93.40％,敏感性为92.50％,特异性为96.15％.其中,三项联合诊断的敏感性高于血清miR-148b、miR-375单独诊断(P＜0.05),三项联合诊断的准确率和特异性高于产前超声、血清miR-148b、miR-375单独诊断(P＜0.05).结论 胎儿先天性心脏病的孕妇血清miR-148b水平显著降低,血清miR-375水平显著升高,产前超声联合血清miR-148b、miR-375对胎儿先天性心脏病具有较高的诊断价值.

目的 探讨彩色多普勒超声检查联合血清微小RNA(miRNA)-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的早期诊断价值以及与卵巢癌周围血管侵袭的相关性.方法 回顾性选取2019年5月至2021年12月沧州市中心医院收治的102例卵巢肿瘤患者为研究对象,所有患者均行彩色多普勒超声检查,采用实时定量聚合酶链反应测定血清中miR-122-5p和miR-106b的表达水平.以病理诊断结果作为金标准,将研究对象分为卵巢癌组(n=51)和良性卵巢肿瘤组(n=51);卵巢癌组又分为侵袭组(n=32)和非侵袭组(n=19).比较卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组的临床资料(年龄、体重指数、生育和绝经)、彩色多普勒超声图像特征(实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4、肿瘤最大直径＞10 cm)、彩色多普勒超声血流参数[搏动指数(PI)和血流阻力指数(RI)]、血清miR-122-5p、miR-106b水平.应用多因素Logistic回归模型探究相关变量对卵巢癌的独立预测作用.应用受试者工作特征(ROC)曲线评估彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值.并比较侵袭组与非侵袭组彩色多普勒超声血流参数及血清miR-122-5p、miR-106b水平,采用Pearson相关性分析对彩色多普勒超声血流参数、miR-122-5p、miR-106b与卵巢癌周围血管侵袭的相关性进行分析.结果 卵巢癌组实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4以及肿瘤最大直径＞10 cm 所占比例分别为 80.39％、76.47％、74.51％、78.43％,均高于良性卵巢肿瘤组(9.80％、11.76％、29.41％、45.10％),PI、RI、血清miR-122-5p表达水平分别为0.94±0.27、0.48±0.11、1.01±0.27,均低于良性卵巢肿瘤组(1.47±0.32、0.71±0.19、1.42±0.30),miR-106b表达水平为4.57±1.13,高于良性卵巢肿瘤组(2.86±0.65),差异均有统计学意义(P＜0.05).Logistic回归模型分析显示,PI、RI、miR-122-5p、miR-106b是卵巢癌的独立预测因子,OR值分别为1.080、1.116、1.689、1.301(P＜0.05).ROC 曲线分析显示,PI、RI、miR-122-5p 和 miR-106b 以及联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.874、0.859、0.898、0.969,其联合诊断的价值高于单独应用.侵袭组PI、RI和血清miR-122-5p表达水平均低于非侵袭组,血清miR-106b表达水平高于非侵袭组,差异均有统计学意义(P＜0.05).Pearson相关性分析显示,彩色多普勒超声血流参数PI、RI及血清miR-122-5p水平与卵巢癌周围血管侵袭呈负相关(r=-0.743、-0.696、-0.822,P＜0.05),血清miR-106b水平与卵巢癌周围血管侵袭呈正相关(r=0.863,P＜0.05).结论 彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平可以提高卵巢癌的早期诊断价值,并且可根据这些指标评估卵巢癌周围血管侵袭程度,值得应用推广.

在许多发展中国家,宫颈癌是女性癌症相关发病和死亡的主要原因.本文阐明了微小RNA(miRNA)在上皮-间充质转化(EMT)中的作用机制,并发现miRNA通过调控EMT在宫颈癌的转移侵袭和肿瘤耐药中发挥重要作用.miR-92a-3p、miR-21、miR-138等可以直接靶向EMT促进宫颈癌转移侵袭;miR-98-5p、miR-204-5p、miR-340等可以通过抑制EMT来抑制宫颈癌转移侵袭;miR-101-3p、miR-106b、miR-4677-3p等可通过内源性竞争机制影响EMT进而影响宫颈癌发生和进展.在宫颈癌肿瘤耐药性中,miR-25-3p可通过靶向Sema4C,将EMT逆转为间质表型上皮样转化,增强宫颈癌耐药细胞对顺铂的敏感性.靶向miRNA可能是一种新型治疗宫颈癌的方法.

目的 探究白皮杉醇(PIC)调控微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)/RUNT相关转录因子3(RUNX3)轴对宫颈癌(CC)细胞迁移及侵袭的影响.方法 使用不同浓度PIC(0、20、40、80和160μmol/L)培养液处理人CC Hela细胞,通过CCK-8法检测PIC对细胞增殖活力的影响,以确定PIC最佳使用浓度.将Hela细胞分为Control组、PIC组、PIC+NC mimics组、PIC+miR-106b-5p mimics组、NC inhibitor组、miR-106b-5p inhibitor组、miR-106b-5p inhibitor+si-RNA组及miR-106b-5p inhibitor+si-RUNX3组.实时荧光定量PCR检测各组Hela细胞miR-106b-5p表达水平;Transwell法检测各组Hela细胞迁移及侵袭能力;Western blot法检测各组Hela细胞中RUNX3、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9蛋白表达水平;双萤光素酶报告基因实验检测miR-106b-5p与RUNX3靶向关系.结果 Hela细胞增殖活力随着PIC处理浓度的增高而呈现降低趋势(P＜0.05),其中80μmol/L PIC对Hela细胞的抑制作用接近半数抑制浓度(IC50),故选择80μmol/L为后续研究的PIC浓度.与Control组相比,PIC组miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平均降低,迁移和侵袭细胞数量减少,RUNX3表达水平增加(P＜0.05);与PIC+NC mimics组相比,PIC+miR-106b-5p mimics组miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平增加,迁移和侵袭细胞数量增多,RUNX3表达水平降低(P＜0.05).双萤光素酶报告基因实验证实RUNX3为miR-106b-5p的靶基因.与NC inhibitor组相比,miR-106b-5p inhibitor组RUNX3表达水平增加,miR-106b-5p、MMP2与MMP9表达水平降低,迁移和侵袭细胞数量减少(P＜0.05);与miR-106b-5p inhibitor+si-RNA组相比,miR-106b-5p inhibitor+si-RUNX3组RUNX3表达水平降低,miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平增加,迁移和侵袭细胞数量增多(P＜0.05).结论 PIC通过抑制miR-106b-5p表达、促进RUNX3表达来抑制CC细胞迁移及侵袭.

目的 观察miR-1表达变化对食管鳞癌细胞增殖、凋亡及侵袭、成瘤能力的影响.方法 培养食管鳞癌细胞株KYSE150并分为过表达组、抑制组和对照组;过表达组细胞转染pHBLV-miR-1慢病毒,抑制组转染miR-1抑制剂,对照组不做特殊处理;分别于培养0、24、48、72 h时采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力,采用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒测算细胞凋亡率,采用Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力.将裸鼠分为A、B、C组,将3×106/300 μL的KYSE150细胞于双侧腋部皮下注入裸鼠皮下,A组接种转染pHBLV-miR-1的KYSE150细胞,B组接种转染miR-1抑制剂的KYSE150细胞,C组接种不作特殊处理的KYSE150细胞;2周后观察裸鼠成瘤情况;分别于第4周末和第6周末处死各组裸鼠,测量肿瘤体积及质量.结果 培养24、48、72 h后,抑制组、对照组、过表达组KYSE150细胞增殖能力依次减弱(P均<0.05).过表达组细胞凋亡率最高,抑制组细胞凋亡率小于对照组(P均<0.05).过表达组迁移细胞数最少,抑制组迁移细胞数高于对照组(P均<0.05).B组裸鼠移植瘤体积和质量最小,C组肿瘤体积和肿瘤质量高于A组(P均<0.05).结论 miR-1过表达可抑制食管鳞癌细胞的增殖、侵袭、成瘤能力,促进细胞凋亡;抑制miR-1表达则可增强细胞的增殖、侵袭、成瘤能力,抑制细胞凋亡.

目的 检测氧化应激引起人视网膜血管内皮细胞(HMREC)损伤过程中微小RNA(miRNA)表达谱的改变,并探讨这些差异性表达的miRNA在视网膜血管内皮损伤过程中的作用.方法 利用不同浓度的H2 O2溶液孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC)建立氧化应激模型,并用CCK-8细胞增殖实验检测细胞活性.采用基因芯片技术检测氧化应激介导的HUVEC中miRNA表达谱的变化,对差异性表达的miRNA进行生物信息学分析,用实时PCR方法在HMREC中进行验证.结果 CCK-8检测HUVEC活力的结果显示,与同一时间对照组相比,100 μmol/L H2O2干预组8h和16 hHUVEC存活率未发生明显改变(F100μmol/L=3.897,P＞0.05),其他浓度H2O2干预组细胞存活率明显下降(F200μmol/L=8.172、F800μmol/L=239.214,P均＜0.05),且呈剂量和时间依赖性.400 μmol/L干预组24 h细胞存活率下降接近50％(F400μmol/L=6.905,P＜0.05).微阵列分析显示,H2O2(400 μmol/L)孵育HUVEC24 h后,共有116个miRNA的表达发生改变.其中有11个miRNA表达差异在1.5倍以上.生物信息学分析提示,差异表达的miRNA可能参与细胞的代谢调节、AMP活化蛋白激酶(AMPK)信号通路等多个生物学过程.实时PCR检测证实,在经过400 μmol/L H2O2处理24 h后的HUVEC和HMREC的氧化应激模型中,miRNA-15b、miRNA-106b、miRNA-497均显著下调(FmiRNA-15b,HUVEC=9.9、FmiRNA-106b,HUVEC=8.4、FmiRNA-497,HUVEC=63.5、FmiRNA-15b,HMREC=643.7、FmiRNA-106b,HMREC=81.4、FmiRNA-497,HMREC=199.9,P均＜0.05),而miRNA-195、miRNA-638、miRNA-1246、miRNA-4267和miRNA-4734均显著上调(FmiRNA-195,HUVEC=592.1、FmiRNA-638,HUVEC=812、FmiRNA-1246,HUVEC=58.5、FmiRNA-4267,HUVEC=1 179.1、FmiRNA-4734,HUVEC=173、FmiRNA-195,HMREC=67.8、FmiRNA-638,HMREC=103.7、FmiRNA-1246,HMREC=2 078.9、FmiRNA-4267,HMREC=234.6、FmiRNA-4734,HMREC=10.7,P均＜0.05).结论 氧化应激可导致HMREC中多个miRNA表达失衡,这些差异性表达的miRNA可能通过AMPK信号通路,在视网膜血管内皮损伤过程中发挥潜在作用.