目的 探讨妊娠期糖尿病患者血清microRNA-122(miR-122)联合microRNA-7047-5p(miR-7047-5p)预测不良围生儿结局价值.方法 选取2018年4月-2023年4月亳州市人民医院接收的100例妊娠期糖尿病患者作为观察组,选取同期该院孕检的90例健康孕妇作为对照组.检测两组血糖水平、血清miR-122、miR-7047-5p,采用Pearson法分析评估血清miR-122、miR-7047-5p水平与血糖水平的相关性;根据随访结果将观察组围生儿结局分为良好组(85例)与不良组(15例),比较两组血清miR-122、miR-7047-5p相对表达量,构建受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-122、miR-7047-5p联合预测妊娠期糖尿病患者不良围生儿结局的价值.结果 观察组空腹血糖(FBG)、2h餐后血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平高于对照组(P＜0.05).观察组miR-122相对表达量高于对照组(P＜0.05),miR-7047-5p相对表达量低于对照组(P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,miR-122与 FBG、2hPG、HbA1c均呈正相关(r=0.167、0.228和0.255,均 P＜0.05),miR-7047-5p 与 FBG、2 hPG、HbA1c均呈负相关(r=-0.358、-0.408和-0.386,均 P＜0.05).不良组miR-122相对表达量高于良好组(P＜0.05),miR-7047-5p相对表达量低于良好组(P＜0.05).ROC曲线分析结果显示,血清miR-122和miR-7047-5p联合预测GDM患者不良围生儿结局的敏感性为73.3％(95％CI:0.449,0.922),特异性为 85.9％(95％CI:0.766,0.925),曲线下面积为 0.836(95％CI:0.720,0.952).结论 在妊娠期糖尿病患者中,血清microRNA-122和microRNA-7047-5p与血糖水平相关,且两者联合检测可以有效预测GDM患者的不良围生儿结局,具有较高的预测敏感性和特异性.

目的:鉴定非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者和健康对照组人血清外泌体微小RNAs（microRNAs）差异表达谱，探索miRNAs在NAFLD发病、诊断及治疗中的价值。方法:各取4例人口学特征、个人史相近的S2~3级NAFLD患者和健康对照者进行血清外泌体miRNAs高通量测序，对差异表达最显著的4条miRNAs按S1组、S2~3组、对照（Control）组每组各20例行qRT-PCR验证，并进行靶基因预测，对靶基因进行GO和KEGG富集分析。正态分布的计量资料使用 t检验或方差分析，等级资料和非正态分布资料使用秩和检验，计数资料使用Pearson χ2检验或Fisher精确检验。 结果:初步鉴定出差异有统计学意义（ P < 0.05）且差异表达在2倍以上的血清外泌体miRNAs共19条，hsa-miR-122-5p、hsa-miR-146b-5p、hsa-miR-197-3P的相对表达关系为：S2~3组>S1组>Control组，hsa-miR-483-3p的相对表达关系为：NAFLD组（S1或S2~3）>Control组。GO分析显示靶基因在分子功能、细胞组分、生物过程均有广泛的注释，靶基因显著富集的通路共84条，从20条与NAFLD最密切的通路中筛选出与至少10条通路都相关的靶基因共5个，即PIK3R2、AKT2、AKT3、MAPK1、NFKB1。 结论:初步分析了NAFLD患者和健康对照组血清外泌体miRNAs差异表达谱，研究了4条miRNAs对于判断肝脂肪变性程度的价值，预测了数以千计的靶基因及其参与的复杂信号通路，为寻找无创诊断NAFLD的生物标志物和特异性治疗的新靶点提供了新的参考。

目的:研究长链非编码RNA GAS5(long non-coding RNA GAS5，GAS5)靶向调控miR-29、miR-96和miR-208促进胰岛β细胞分泌胰岛素的作用及其机制。方法:采用Q-PCR法检测122名健康人血清和88例2型糖尿病(T2DM)患者血清以及大鼠胰岛细胞瘤株INS-1832/13中，长链非编码RNA GAS5与miR-29、miR-96和miR-208的表达水平及其相关性。通过慢病毒载体构建，沉默和过表达GAS5观察对胰岛β细胞分泌胰岛素功能的影响。采用生物信息学预测GAS5与miR-29、miR-96和miR-208有互补结合位点，用荧光素酶报告系统验证其靶向关系。在胰岛β细胞中共转染GAS5 shRNA,用上述方法检测其对胰岛素受体(insulin receptor, INSR)、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate-1, IRS-1)和磷酸肌醇3-激酶(phosphatidylinositide 3-kinase, PI3K)水平的影响，从而揭示GAS5刺激胰岛β细胞分泌胰岛素的作用机制。结果:与健康人血清相比，2型糖尿病患者血清中GAS5的表达低于健康对照组( t＝4.632, P<0.01)，miR-29、miR-96和miR-208高于健康对照组( t分别为7.832、9.164、12.359，均 P<0.01)，而且GAS5水平与miR-29、miR-96和miR-208呈负相关( r分别为-0.50、-0.47、-0.70)。慢病毒过表达GAS5导致葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加，胰岛素含量增加。相反，GAS5的下调导致葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛素含量显著降低。利用生物信息学工具，筛选了miR-29、miR-96和miR-208作为GAS5的靶点，并通过双荧光素酶报告基因实验验证GAS5可以通过靶向抑制miR-96、miR-29和miR-208的表达发挥作用。shGAS5显著降低INSR、IRS-1和PI3K的表达( P分别为0.022、0.038、0.009)，而过表达GAS5在mRNA和蛋白水平上均显著上调INSR、IRS-1和PI3K的表达( P分别为0.024、0.045、0.016)。 结论:GAS5可能通过靶向调控miR-29、miR-96和miR-208的表达，进而对这些miRNA可能存在的负调控因子INSR、IRS-1和PI3K等的表达进行正向调控，刺激胰岛β细胞分泌胰岛素。

目的:探讨环状RNA VMA21(circ_VMA21)对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤和氧化应激的影响及其机制。方法:人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)随机分为Control、LPS、LPS+pcDNA-circ_VMA21、LPS+pcDNA、LPS+微小RNA(miR)-122-5p inhibitor、LPS+anti-miR-NC、LPS+pcDNA-circ_VMA21+miR-122-5p mimic组；实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_VMA21和miR-122-5p的表达水平；细胞计数检测细胞活性；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测蛋白表达；酶联免疫吸附法检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性；双荧光素酶报告实验检测circ_VMA21和miR-122-5p的靶向关系。两组间均数比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析(组间两两比较采用LSD- t检验)。 结果:LPS诱导的HUVEC中circ_VMA21表达水平降低(0.17±0.02比1.00±0.00)，miR-122-5p表达水平升高(3.76±0.09比1.00±0.00)，细胞活性降低(0.41±0.02比1.22±0.07)，细胞凋亡率(24.17±0.93比7.62±0.39)及裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)表达水平升高(0.80±0.06比0.13±0.01)，MDA含量[(736.11±27.21) nmol/ml比(159.37±14.93) nmol/ml]及LDH活性升高[(486.45±16.07) U/L比120.58±9.00) U/L]，SOD活性降低[(46.25±4.44) U/L比238.49±11.23) U/L， t＝9.721、13.122、15.321、22.472、10.817、38.123、18.237、25.522， P<0.05]；与LPS组和LPS+anti-miR-NC组比较，LPS+miR-122-5p inhibitor组miR-122-5p表达水平降低，细胞活性升高，细胞凋亡率及cleaved-Caspase-3表达水平降低，MDA含量及LDH活性降低，SOD活性升高( F＝2 564.169、693.501、540.990、704.667、41 336.059、1 170.734、414.559， P<0.05)。与LPS+pcDNA-circ_VMA21组比较，LPS+pcDNA-circ_VMA21+miR-122-5p mimic组miR-122-5p表达水平升高，细胞活性降低，细胞凋亡率及cleaved-Caspase-3表达水平升高，MDA含量及LDH活性升高，SOD活性降低( F＝810.792、298.432、376.370、279.806、634.476、528.520、343.420， P<0.05)。 结论:circ_VMA21通过下调miR-122-5p抑制脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤和氧化应激。

目的:探讨血清微小RNA（miR）-15a-5p与局部进展期胃癌（LAGC）患者预后和新辅助化疗（NAC）反应的相关性。方法:回顾性分析中国人民解放军东部战区空军医院2016年5月至2020年4月122例接受NAC后行手术治疗的LAGC患者的临床资料。记录患者的一般临床资料和实验室检查结果。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清miR-15a-5p表达水平，分析miR-15a-5p表达与LAGC患者不同临床特征的关系。采用Becker肿瘤退缩分级标准评估病理学反应，其中1a级、1b级和2级患者为敏感组，3级患者为抵抗组。结果:根据血清miR-15a-5p中位数1.038将LAGC患者分为高表达（>1.038）和低表达（≤1.038），各61例。血清miR-15a-5p表达水平与喜食辛辣食物、超声内镜（EUS）-T分期和EUS-N分期有关（ P<0.01或<0.05）。根据病理学反应评估结果，抵抗组47例，敏感组74例。抵抗组血清miR-15a-5p明显高于敏感组[1.69（1.39，1.97）比0.99（0.96，1.02）]，差异有统计学意义（ Z =-8.55， P<0.01）。受试者工作特征曲线分析结果显示，血清miR-15a-5p预测NAC反应的曲线下面积为0.959（95% CI 0.929~0.990），最佳截断值为1.049，灵敏度为100.0%，特异度为85.1%。多因素Logistic回归分析结果显示，miR-15a-5p是影响LAGC患者NAC反应的独立危险因素（ HR = 1 880.840，95% CI 123.510~28 641.846， P<0.01）。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示，miR-15a-5p高表达患者中位总生存时间和中位无进展生存时间明显短于miR-15a-5p低表达患者（19个月比62个月和12个月比51个月），差异有统计学意义（log-rank χ2 = 41.99和61.97， P<0.01）；miR-15a-5p高表达患者10年总生存率和10年无进展生存率明显低于miR-15a-5p低表达患者（4.9%比52.5%和24.6%比85.2%），差异有统计学意义（log-rank χ2 = 33.70和45.32， P<0.01）。多因素Cox回归分析结果显示，R 0切除和miR-15a-5p是影响LAGC患者总生存时间和无进展生存时间的独立危险因素（总生存时间： HR = 1.945和3.487，95% CI 1.033~3.660和2.112~5.759， P<0.05或<0.01；无进展生存时间： HR = 2.427和6.335，95% CI 1.069~5.510和3.341~12.013， P<0.05或<0.01）。 结论:血清miR-15a-5p水平升高与LAGC患者NAC反应和预后不良有关，可作为LAGC预后和NAC反应预测的可靠生物标志物。

目的:明确低温缺血再灌注心律失常大鼠心肌miRNA表达的变化及其靶基因。方法:清洁级健康雄性SD大鼠，2～3月龄，体重300～400 g，麻醉后开胸取心脏，建立离体心脏灌注模型。成功建立离体心脏灌注模型6个，采用随机数字表法分为2组( n＝3)：对照组(C组)和心脏缺血再灌注组(IR组)。采用全心停灌60 min再灌注30 min的方法制备低温心脏缺血再灌注损伤模型。记录再灌注期间心律失常评分。通过高通量测序筛选出2组心肌表达有显著性差异的miRNA(DEmiRNAs)。利用RNAhybrid和miRanda数据库对DEmiRNAs调节的mRNA行靶基因预测，通过Gene Ontology和KEGG数据库对靶基因进行富集分析，选取与心律失常密切相关且表达水平较高的miRNA进行RT-PCR检测。 结果:高通量测序结果：与C组比较，IR组有7个miRNA表达有显著性差异(novel-miR-17、novel-miR-19、novel-miR-30、novel-miR-43、rno-miR-122-5p、novel-miR-16和rno-miR-429)。与心律失常关系密切且表达水平较高的miRNA有4个：与C组比较，IR组心肌novel-miR-17、novel-miR-30和rno-miR-122-5p表达上调，rno-miR-429表达下调( P<0.05)。通过miRNA-mRNA相关性分析结果：GJA1基因是novel-miR-17的靶点。 结论:心肌novel-miR-17可能作用于GJA1基因参与大鼠低温缺血再灌注心律失常的发生。

目的:研究长链非编码RNA(long non-coding RNA，lcnRNA) INK4基因座中反义非编码RNA(antisense noncoding RNA in the INK4 locus，ANRIL)/miR-122-5p轴在高糖诱导足细胞炎症及氧化应激中的作用及机制。方法:培养足细胞MPC5细胞株并分为以下五组：低糖组、高糖组、si-NC＋低糖组、si-NC＋高糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组。检测LncRNA ANRIL、miR-122-5p、核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)、NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4, NOX4)的表达水平及白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6、瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor -α，TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine, 8-OHdG)的含量，验证LncRNA ANRIL与miR-122-5p的靶向作用。结果:高糖组MPC5细胞中LncRNA ANRIL的表达水平明显高于低糖组，miR-122-5p的表达水平明显低于低糖组，差异有统计学意义[(1.83±0.24)比(1.00±0.17)，(0.63±0.08)比(1.00±0.13)， t值分别为6.31、5.42， P值均<0.05]。miR-122-5p组MPC5细胞中野生型LncRNA ANRIL报告基因的荧光活力低于miR-NC组[(0.50±0.09)比(0.97±0.15)， t＝5.73， P<0.001)]，突变型LncRNA ANRIL报告基因的荧光活力与miR-NC组比较差异无统计学意义( P>0.05)。si-NC＋高糖组MPC5细胞中LncRNA ANRIL的表达水平明显高于si-NC＋低糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组，miR-122-5p的表达水平明显低于si-NC＋低糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组，差异均有统计学意义[(1.89±0.25)比(1.00±0.14)比(0.89±0.12)，(0.58±0.07)比(1.00±0.15)比(0.92±0.12)， F值分别为13.92、14.75， P值均<0.001)]。si-NC＋高糖组培养基中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显高于si-NC＋低糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组，差异均有统计学意义[ng/mL：(3.11±0.85)比(1.09±0.21)比(1.46±0.26)，pg/mL：( 91.38±13.27)比(59.39±9.39)比(70.47±11.34)，ng/mL：( 4.49±0.81)比(1.85±0.32)比(2.52±0.45 )， F值分别为15.68、11.38、16.58， P值均<0.001]。si-NC＋高糖组培养基中MDA、8-OHdG的含量明显高于si-NC＋低糖组和si-LncRNA ANRIL＋高糖组，差异均有统计学意义[nmol/L：(9.17±1.52)比(3.28±0.74)比(4.67±0.93)，ng/mL：( 2.74±0.42)比(0.91±0.16)比(1.45±0.29 )， F值分别为18.39、16.58， P值均<0.001]。 结论:LncRNA ANRIL靶向miR-122-5p并促进高糖诱导足细胞发生炎症及氧化应激反应。

目的:探讨姜黄素对骨髓间充质干细胞(BMSCs)骨向分化的调控机制。方法:2018年2月至2019年10月，采用15 μmol/L浓度姜黄素处理BMSCs细胞(购自中国科学院上海细胞库)，细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡，蛋白印迹法(Western blot)检测聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白(Col Ⅱ)、SRY-盒转录因子9(Sox9)和成纤维细胞生长因子18(FGF18)表达。将微小RNA(miRNA，miR)-NC组(转染miR-NC)、miR-122-5p组(转染miR-122-5p mimics)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-FGF18组(转染pcDNA-FGF18)、姜黄素＋miR-NC组(转染miR-NC)、姜黄素＋miR-122-5p组(转染miR-122-5p mimics)、姜黄素＋pcDNA组(转染pcDNA)、姜黄素＋pcDNA-FGF18组(转染pcDNA-FGF18)转染至BMSCs细胞，对照组仅加入培养基。检测并比较不同组增殖、凋亡和蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验检测miR-122-5p与FGF18间的结合。两组间比较采用 t检验，多组间均值比较采用SNK- q法分别比较组间差异。 结果:姜黄素组BMSCs细胞增殖率、Aggrecan、Col Ⅱ和Sox9蛋白表达显著高于对照组( t＝18.275、12.001、8.598、10.124， P<0.05)，凋亡率显著低于对照组( t＝18.056， P<0.05)，差异均有统计学意义。姜黄素组BMSCs中miR-122-5p表达显著低于对照组(0.47±0.03比1.01±0.07， t＝21.272， P<0.05)，FGF18的mRNA和蛋白表达显著高于对照组(mRNA为2.78±0.17比0.99±0.05，蛋白为1.56±0.13比1.01±0.09， t＝30.305、10.436， P<0.05)，差异均有统计学意义。过表达miR-122-5p可抑制BMSCs细胞增殖和Aggrecan、Col Ⅱ、Sox9蛋白表达并促进凋亡，过表达FGF18则有相反的作用。过表达miR-122-5p可显著减弱姜黄素对BMSCs细胞增殖、凋亡和成骨分化的调控作用，而过表达FGF18则可明显增强姜黄素对BMSCs细胞增殖、凋亡和成骨分化的作用。 结论:姜黄素可促进BMSCs细胞增殖和成骨分化并抑制凋亡，其机制可能与调控miR-122-5p/FGF18信号通路有关。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:探讨抑郁症患者经阿戈美拉汀联合高压氧治疗后，血清微小核糖核酸-324-5p(miR-324-5p)表达量的变化及其临床意义。方法:选取2019年3月至2020年12月在青岛市精神卫生中心就诊的122例抑郁症患者(抑郁症组)作为研究对象，另选取同期参加健康体检的50例健康人作为对照组。阿戈美拉汀联合高压氧治疗抑郁症，根据疗效将患者分为有效组( n＝91)和无效组( n＝31)。用实时荧光定量PCR法检测血清miR-324-5p的相对表达量，用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-324-5p预判疗效的效能，用Logistic回归分析miR-324-5p与疗效的关系，用限制性立方样条拟合Logistic回归分析miR-324-5p与疗效的量效关系。 结果:治疗后2组患者的miR-324-5p相对表达量均高于治疗前；无效组患者的miR-324-5p相对表达量低于有效组，差异均有统计学意义( P<0.05)。按1∶1倾向性评分匹配后，治疗后有效组患者的miR-324-5p相对表达量高于治疗前；无效组患者的miR-324-5p相对表达量低于有效组，差异均有统计学意义( P<0.05)。汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分高是抑郁症疗效的独立危险因素( P<0.05)，治疗后miR-324-5p高表达是抑郁症疗效的独立保护因素( P<0.05)。治疗后miR-324-5p预判抑郁症疗效的ROC曲线下面积、最佳截断点、灵敏度和特异度分别为0.778(95% CI：0.589~0.908)、0.72、53.33%和100.00%。治疗后miR-324-5p与抑郁症疗效有关( χ2＝9.26， P＝0.026)，呈非线性关系( χ2＝8.24， P＝0.016)。以治疗后miR-324-5p预判抑郁症疗效的最佳截断点作为参考点，当治疗后miR-324-5p值<0.72时，治疗无效风险高；>0.72时，治疗无效风险低。 结论:阿戈美拉汀联合高压氧治疗后抑郁症患者血清miR-324-5p相对表达量降低与疗效差有关。