目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-149调控卵巢癌细胞增殖和转移的影响及其分子机制。方法:选取2019年1月至2021年1月河南大学淮河医院手术切除的47例卵巢癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织中miR-149水平。并采用荧光定量PCR分析人卵巢上皮细胞HOSEpiC、卵巢癌细胞SW620和skov3中miR-149水平；采用miRNA和miR-149慢病毒感染SW620细胞，命名为miRNA组和miR-149组，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞的增殖能力；采用流式细胞术分析两组细胞凋亡和周期变化；采用Transwell分析两组细胞的迁移能力；生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-149的靶基因；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-149靶蛋白表达、增殖、凋亡、周期和迁移相关蛋白表达水平。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:癌旁组织miR-149表达水平(1.07±0.15)明显高于卵巢癌组织(0.73±0.09)，差异有统计学意义( t＝13.490， P<0.05)。人卵巢上皮细胞HOSEpiC miR-149表达水平(1.27±0.10)明显高于卵巢癌细胞SW620和skov3(0.80±0.08、0.70±0.08)，差异有统计学意义( t＝8.859、10.740， P<0.05)。miRNA对照组细胞48 h吸光度值(1.91±0.08)明显高于miR-149组(1.23±0.18)，差异有统计学意义( t＝8.655， P<0.05)。miRNA对照组细胞凋亡比例[(3.69±1.06)%]明显低于miR-149组[(18.90±2.35)%]，差异有统计学意义( t＝14.470， P<0.05)。miRNA对照组细胞G 0/G 1期比例[(39.91±2.86)%]明显高于miR-149组[(31.33±2.42)%]，差异有统计学意义( t＝5.616， P<0.05)。miRNA对照组细胞S期比例[(16.73±1.51)%]明显低于miR-149组[(20.48±2.04)%]，差异有统计学意义( t＝3.619， P<0.05)。miRNA对照组细胞凋亡比例[(127.67±21.69)个]明显高于miR-149组[(99.50±10.21)个]，差异有统计学意义( t＝2.887， P<0.05)。miRNA对照组细胞细胞核增殖抗原(Ki-67)和黏着斑激酶(FAK)蛋白表达水平(0.94±0.06、0.91±0.05)明显高于miR-149组(0.73±0.06、0.59±0.08)，差异有统计学意义( t＝8.655、8.488， P<0.05)。RGS17是miR-149的靶基因。癌旁组织中RGS17蛋白表达水平(0.97±0.02)明显低于卵巢癌细胞RGS17蛋白表达水平(2.17±0.11)，差异有统计学意义( t＝15.620， P<0.05)。miRNA对照组细胞FAK蛋白表达水平(1.24±0.09)明显高于miR-149组(0.73±0.08)，差异有统计学意义( t＝10.200， P<0.05)。 结论:miR-149在卵巢癌组织和细胞呈低表达，miR-149过表达显著抑制卵巢癌细胞的增殖、周期和迁移，诱导细胞凋亡。

目的:探讨臭椿酮对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:根据检测结果实施分组，采用低(0.2 μmol/L)、中(0.4 μmol/L)、高剂量(0.6 μmol/L)的臭椿酮干预结直肠癌SW1116细胞24 h，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力，集落形成实验检测克隆形成数，流式细胞术检测细胞凋亡，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ENST00000441270和微小RNA-149(miR-149)的表达水平。转染ENST00000441270小干扰RNA(si-ENST00000441270)至SW1116细胞，采用上述方法检测干扰ENST00000441270表达对SW1116细胞活力、克隆形成以及凋亡的影响。双荧光素酶报告基因实验验证ENST00000441270与miR-149之间靶向关系。两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析和LSD- t检验。 结果:臭椿酮低剂量组SW1116细胞的活力[(0.84±0.05)比(0.84±0.05)， t＝0.529， P>0.05]、克隆形成数[(110.00±3.56)个比(111.33±3.86)个， t＝0.499， P>0.05]、凋亡率[(7.56±0.80)%比(7.35±0.63)%， t＝0.307， P>0.05]、ENST00000441270[(0.98±0.06)比(0.99±0.06)， t＝0.238， P>0.05]和miR-149[(1.01±0.07)比(0.99±0.07)， t＝0.303， P>0.05]表达与对照组比较，差异均无统计学意义。臭椿酮中、高剂量组SW1116细胞的活力(0.63±0.04、0.40±0.03比0.84±0.05， t＝7.667、12.667， P<0.05]、克隆形成数[(85.67±2.87)个、(58.33±2.62)个比(111.33±3.86)个， t＝9.487、24.666， P<0.05]、ENST00000441270表达[(0.69±0.05)、(0.41±0.03)比(0.99±0.06)， t＝7.138、13.799， P<0.05]低于对照组，差异均有统计学意义，细胞凋亡率[(12.61±0.91)%、(21.66±0.97)%比(7.35±0.63)%， t＝7.715、12.036， P<0.05]、miR-149表达[(1.48±0.08)、(1.92±0.10)比(0.99±0.07)， t＝7.415、14.074， P<0.05]高于对照组，差异均有统计学意义。si-ENST00000441270组SW1116细胞活力[(0.35±0.02)比(0.88±0.05)， t＝17.047， P<0.05]、克隆形成数[(49.67±2.87)个比(112.67±3.40)个， t＝24.525， P<0.05]低于阴性对照(si-NC)组，细胞凋亡率[(22.62±0.82)%比(7.58±0.65)%， t＝24.896， P<0.05]高于si-NC组，差异均有统计学意义。miR-149是ENST00000441270的靶基因。 结论:0.4、0.6 μmol/L的臭椿酮能够抑制结直肠癌细胞SW1116增殖，诱导细胞凋亡，其机制可能与抑制ENST00000441270/miR-149分子轴有关。

分析2013—2022年间我国糖尿病肾病发病机制的研究热点及发展趋势。本研究利用文献计量学方法，基于中国学术期刊全文数据库、万方数据知识服务平台、中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、科学网核心合集数据库和美国国家医学图书馆生物医学信息检索系统，借助VOSviewer软件对2013—2022年间中国研究人员发表的有关糖尿病肾病发病机制领域的文献进行可视化分析。研究共纳入中文文献1 664篇，英文文献2 149篇，结果显示：2013—2022年间，国内糖尿病肾病发病机制研究成果总体呈逐年增长趋势。共现分析显示：国内糖尿病肾病发病机制领域研究热点集中于足细胞、氧化应激、炎症、肾纤维化、尿蛋白等领域，前沿热点有生物标志物、Nrf2、肠道菌群、NLRP3炎症小体、细胞凋亡、微小RNA等。通过可视化分析可以直观呈现国内糖尿病肾病发病机制的研究热点及前沿趋势，进而为糖尿病肾病发病机制的后续研究提供新的思路和方向。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-149靶向P-糖蛋白(P-gp)对皮肤基底细胞癌阿霉素耐药的影响。方法:选取2014年8月到2018年8月河南省人民医院皮肤科收治的74例皮肤基底细胞癌患者作为研究对象。根据患者对顺铂化疗的敏感性程度，分为敏感组和耐药组。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析两组肿瘤组织中miR-149表达水平。采用脂质体法转染miR-149模拟物和对照miRNA至皮肤基底细胞株癌细胞株A431，分别作为miR-149组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色分析顺铂对两组细胞增殖能力的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-149的靶基因；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析肿瘤组织中靶基因的表达和miR-149对靶基因表达的影响。组间数据比较采用 t检验。 结果:耐药组患者肿瘤组织miR-149表达水平(0.48±0.18)较敏感组miR-149表达水平(1.21±0.23)显著下降，差异有统计学意义( t＝3.126， P<0.05)。CCK-8和EdU染色结果显示，经顺铂处理后，miR-149组细胞增殖能力(0.59±0.17)较对照组细胞(1.27±0.21)明显下降，差异有统计学意义( t＝3.010， P<0.05)。miR-149组细胞EdU染色阳性率[(35.56±6.90)%]较对照组细胞[(79.32±8.01)%]明显下降，差异有统计学意义( t＝3.399， P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示P-gp是miR-149靶基因。耐药组肿瘤组织中P-gp蛋白表达水平(1.24±0.19)明显高于敏感组肿瘤组织(0.61±0.18)，差异有统计学意义( t＝2.091， P<0.05)。miR-149组细胞P-gp蛋白表达水平(0.57±0.18)较对照组细胞(1.97±0.32)明显增加，差异有统计学意义( t＝2.581， P<0.05)。 结论:miR-149通过调节P-gp蛋白的表达，介导了皮肤基底细胞癌顺铂化疗耐药。

目的:探讨神经肽P物质(substance P，SP)活化NK92-MI细胞脱颗粒作用，分析差异表达circRNA调控NK92-MI细胞可能的机制。方法:将培养后的NK92-MI细胞分为空白对照组、SP刺激组和NK-1受体拮抗剂(neurokinin-1 receptor antagonist，NK-1RA)组。荧光定量PCR(real-time quantification PCR，qRT-PCR)法检测并分析NK92-MI细胞经SP刺激后穿孔素mRNA表达的时间效应，流式细胞术检测NK92-MI细胞脱颗粒标志物CD107a的表达，高通量测序技术分析circRNA表达谱，qRT-PCR法验证差异倍数最大的circZNF609和circAMBRA1的表达。生物信息学分析circZNF609、circAMBRA1与穿孔素相关的微小RNA(microRNA，miRNA)，并分析circZNF609、circAMBRA1与穿孔素mRNA表达的相关性。结果:刺激12 h后，SP刺激组穿孔素mRNA表达较对照组升高约2.06倍，刺激24 h后，穿孔素mRNA表达继续升高，约为对照组3.65倍，差异均具有统计学意义( t值分别为4.00、4.72， P值均<0.05)；在12 h时，NK-1RA组穿孔素mRNA的表达高于对照组，差异具有统计学意义( t＝2.39， P<0.05)，但在24 h时，与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。与静息NK92-MI细胞组相比，K562刺激组、K562+SP组、K562+SP+NK-1RA组中NK92-MI细胞CD107a的表达显著升高{(0.81±0.38)%比[(9.59±2.52)%，(17.78±1.94)%，(10.19±2.04)%]， t值分别为6.27、12.19、7.83， P值均<0.05}。SP作用NK92-MI细胞后共有9个差异表达的circRNAs：circZNF609、circAMBRA1、circCAMSAP1、circAAGAB、circLMBR1、circGNB1、circBPTF、circGPI和circCSNK1G3。NK-1RA可以阻断除circCSNK1G3外的上述8个circRNAs的表达。qRT-PCR验证circZNF609和circAMBRA1的表达与测序结果一致。生物信息学预测，circZNF609、circAMBRA1与穿孔素相关的miRNAs为miR-149-5p、miR-940和miR-942-5p。circZNF609、circAMBRA1与穿孔素mRNA的表达均呈负相关( r值分别为-0.57、-0.74， P值均<0.05)。 结论:SP可以通过与NK-1R结合活化NK92-MI细胞，下调circZNF609和circAMBRA1的表达，上调穿孔素mRNA的表达，促进NK92-MI细胞脱颗粒增强其杀伤功能。

目的:探讨环状RNA（circRNA）在RA PBMCs表达谱的差异及临床意义。方法:收集4例RA患者（T组）及4名健康体检者（C组）静脉血，运用Arraystar circRNA微阵列芯片检测2组PBMCs中circRNA表达谱，应用相关数据库进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）验证表达失调circRNA的表达情况，并对目标circRNA构建circRNA-微小RNA（miRNA）-信使RNA（mRNA）调控网络（即ceRNA网络）。建立受试者工作特征曲线（ROC曲线），对潜在诊断价值进行分析。采用SPSS Statistics 23.0和Graphpad Prism 8.0分析数据，采用两独立样本 t检验分析2组间差异。 结果:①微阵列芯片结果显示，与C组比较，T组PBMCs中异常表达的circRNA共有399个，其中149个上调，250个下调。②生物信息学分析：circRNA与miRNA结合位点预测提示RA中差异表达的circRNA可能通过靶向结合miR-140-5p、miR-338-5p和miR-9-5p等分子影响炎症反应；基因本体论分析发现差异表达的circRNA主要在细胞质、蛋白质结合等方面；京都基因与基因组百科全书通路分析发现涉及的通路多与人体免疫调节相关。③多样本RT-qPCR验证结果显示T组中hsa_circRNA_009012的相对表达量显著高于C组（ t=-4.417， P<0.01），hsa_circRNA_101328的表达水平显著低于C组（ t=-1.042， P<0.01），hsa_cir-cRNA_058230的表达无明显改变（ t=4.691， P>0.05）。④ ROC曲线分析提示hsa_circRNA_009012具有诊断RA的潜在价值（ROC曲线下面积=0.96）。 结论:circRNA在RA患者PBMCs中表达失调，可能参与RA发生发展的调控，其中hsa_circRNA_009012有望成为RA诊疗的新型生物学标志物。

目的:评价微小RNA-149-5p(miR-149-5p)在白藜芦醇减轻LPS诱导的大鼠心肌细胞损伤中的作用。方法:大鼠心肌细胞系H9C2经培养后，采用随机数字表法分为5组( n＝27)：对照组(C组)、LPS组、白藜芦醇组(RSV组)、miR149-5p抑制剂阴性对照组(LRN组)和miR149-5p抑制剂组(LRI组)。采用含10 μg/ml LPS的培养液孵育细胞24 h制备心肌细胞损伤模型。RSV组经白藜芦醇(终浓度10 μmol/L)孵育24 h，随后用含10 μg/ml LPS的培养液孵育24 h；LRN组和LRI组分别转染miR149-5p抑制剂阴性对照品和miR149-5p抑制剂，随后操作同RSV组。采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡率，微板法检测上清液LDH浓度和细胞还原型谷胱甘肽(GSH)含量，TBA反应法检测MDA含量，WST-1法检测SOD活性，DCFH-DA荧光探针检测ROS水平，ELISA法检测上清液TNF-α和IL-6浓度，RT-qPCR法检测miR-149-5p表达。 结果:与C组比较，LPS组miR-149-5p表达下调，细胞活力降低，上清液LDH、TNF-α和IL-6浓度、细胞凋亡率、ROS水平和MDA含量升高，GSH含量和SOD活性降低( P<0.05)。与LPS组比较, RSV组miR-149-5p表达上调，细胞活力升高，上清液LDH、TNF-α和IL-6浓度、细胞凋亡率、ROS水平和MDA含量降低，GSH含量和SOD活性升高( P<0.05)。与RSV组或LRN组比较，LRI组细胞miR-149-5p表达下调，细胞活力降低，上清液LDH、TNF-α和IL-6浓度、细胞凋亡率、ROS水平和MDA含量升高，GSH含量和SOD活性降低( P<0.05)。 结论:白藜芦醇减轻LPS诱导大鼠心肌细胞损伤的机制与上调miR-149-5p表达，抑制细胞凋亡、氧化应激和炎症反应有关。

目的:观察芍药内酯苷(AF)对白细胞介素(IL)-1β诱导软骨细胞损伤的保护作用，并探讨机制是否与调控微小RNA(miR)-149-5p/Wnt1诱导信号通路蛋白1(WISP1)通路有关。方法:分离培养远交群(SD)大鼠膝关节软骨细胞，采用10 μg/L的IL-1β建立软骨细胞损伤模型。根据处理方法不同将软骨细胞分为对照(Con)、IL-1β、IL-1β+AF-L、IL-1β+AF-M、IL-1β+AF-H、IL-1β+miR-NC、IL-1β+miR-149-5p、IL-1β+si-NC、IL-1β+si-WISP1、IL-1β+AF+anti-miR-NC、IL-1β+AF+anti-miR-149-5p组。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清中IL-6、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量；流式细胞术和蛋白质印记(Western blot)用于分析细胞凋亡和WISP1蛋白表达；实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-149-5p和WISP1 mRNA表达。双荧光素酶报告实验和Western blot验证miR-149-5p对WISP1的靶向作用。两组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析和SNK- q检验。 结果:IL-1β组软骨细胞上清液中IL-6(6.11±0.61比2.54±0.25， q＝26.072， P<0.05)、IFN-γ(53.62±5.33比8.14±0.82， q＝44.989， P<0.05)和TNF-α含量(29.54±2.71比4.21±0.42， q＝44.463， P<0.05)高于Con组，细胞凋亡率(28.65±2.71比8.23±0.81， q＝33.622， P<0.05)、WISP1表达(0.92±0.08比0.45±0.04， q＝22.873， P<0.05)高于Con组，miR-149-5p表达(0.44±0.04比1.00±0.05， q＝30.571， P<0.05)低于Con组。IL-1β+AF-L、IL-1β+AF-M、IL-1β+AF-H组软骨细胞上清液中IL-6(5.03±0.49、3.95±0.31、2.86±0.27比6.11±0.61， q＝7.887、14.775、23.735， P<0.05)、IFN-γ(37.19±3.21、24.58±2.44、13.54±1.32比53.62±5.33， q＝16.063、28.391、39.184， P<0.05)和TNF-α(21.65±2.17、12.64±1.28、6.95±0.63， q＝14.014、30.017、40.123， P<0.05)含量低于IL-1β组，细胞凋亡率(22.47±2.23、16.98±1.54、10.54±1.12比28.65±2.71， q＝10.175、19.215、29.818， P<0.05)、WISP1表达(0.78±0.07、0.66±0.06、0.53±0.05比0.92±0.08， q＝6.813、12.653、18.980， P<0.05)低于IL-1β组，miR-149-5p表达高于IL-1β组。IL-1β+miR-149-5p组软骨细胞上清液中IL-6(3.21±0.31比6.19±0.61， t＝13.065， P<0.05)、IFN-γ(16.47±1.68比54.23±5.33， t＝20.270)和TNF-α含量(9.36±0.94比28.46±2.81， t＝19.338， P<0.05)低于IL-1β+miR-NC组，细胞凋亡率(12.33±1.25比29.65±2.41， t＝19.139， P<0.05)低于IL-1β+miR-NC组。IL-1β+si-WISP1组软骨细胞上清液中IL-6(3.41±0.34比6.22±0.58， t＝12.539， P<0.05)、IFN-γ(17.23±1.72比55.12±5.41， t＝20.023， P<0.05)和TNF-α(10.33±1.08比27.65±2.74， t＝17.642， P<0.05)含量显著低于IL-1β+si-NC组，细胞凋亡率(13.54±1.47比28.61±2.73， t＝11.678， P<0.05)低于IL-1β+si-NC组。miR-149-5p与WISP1直接结合。IL-1β+AF+anti-miR-149-5p组软骨细胞上清液中IL-6(5.84±0.58比2.71±0.26， q＝20.382， P<0.05)、IFN-γ(46.22±4.31比13.98±1.37， q＝27.042， P<0.05)和TNF-α(25.32±2.51比6.77±0.67， q＝29.011， P<0.05)含量高于IL-1β+AF+anti-miR-NC组，细胞凋亡率(21.41±2.33比9.68±0.96， q＝17.964， P<0.05)高于IL-1β+AF+anti-miR-NC组。 结论:芍药内酯苷通过调控miR-149-5p/WISP1通路对IL-1β诱导的软骨细胞损伤具有保护作用。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1靶向微小RNA(miR)-149-5p对于脑胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其分子机制。方法:采用Lipofectamine 2000进行细胞转染构建si-NEAT1组、过表达miR-149-5p组和miR-149-5p抑制组，细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖抑制率，双荧光素酶报告基因分析Lnc NEAT1靶向调控miR-149-5p，Transwell小室法检测迁移和侵袭细胞数，蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达，组间比较采用 t检验。 结果:人胶质瘤细胞U251中NEAT1水平(1.03±0.05)明显增加( t＝13.613， P<0.01)，而miR-149-5p(0.41±0.07)则是明显降低( t＝12.111， P<0.01)。抑制NEAT1表达，si-NEAT1组细胞增殖抑制率明显增加[(29.48±2.67)%， t＝13.809， P<0.01]，而细胞迁移数[(35.33±7.57)个]和侵袭数[(27.33±6.81)个]则明显降低( t＝4.395、4.962， P<0.05)，磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)水平明显降低( t＝6.959、8.661， P<0.05)。过表达miR-149-5p，细胞增殖抑制率[(29.32±6.41)%]同样明显增加( t＝6.922， P<0.05)，细胞迁移数(35.67±6.51)和侵袭数(28.00±8.89)同样明显降低( t＝4.392、4.471， P<0.05)，p-Akt和p-mTOR水平明显降低( t＝4.337、9.981， P<0.05)。NEAT1-WT活性受到miR-149-5p的抑制( t＝15.251， P<0.01)，转染pc-DNA-NEAT1能显著降低miR-149-5p( t＝8.178， P<0.01)，而转染si-NEAT1则明显上调miR-149-5p( t＝5.988， P<0.05)。与si-NEAT1+抗NC组比较，si-NEAT1+抗miR-149-5p组细胞增殖抑制率表达明显降低( t＝7.955、13.261， P<0.05)，而迁移细胞数、侵袭细胞数、p-Akt和p-mTOR水平明显增加( t＝4.841、3.784、5.589、4.572， P<0.05)。 结论:Lnc NEAT1靶向miR-149-5p调控Akt/mTOR信号通路可促进脑胶质瘤细胞增殖和转移，抑制miR-149-5p表达可逆转抑制Lnc NEAT1表达后对于脑胶质瘤细胞增殖和转移的影响。