目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:探讨血清微小RNA(miR)-26a、miR-21、miR-192在胃癌中的表达及相关性分析。方法:选取2021年1月至2021年12月诊治的102例胃癌患者作为研究对象，并设立其为观察组，按照1∶2配对原则选取51例健康体检者设立为对照组。对比不同组别患者血清miR-26a、miR-21、miR-192，并分析其在不同病理特征胃癌患者中的表达。采用Logistic回归模型构建miR-26a、miR-21、miR-192联合诊断胃癌模型，采用ROC曲线模型分析miR-26a、miR-21、miR-192及三项联合诊断胃癌的曲线下面积(AUC)值、敏感度、特异度。结果:观察组的miR-26a、miR-21、miR-192(20.43±5.96、36.74±12.47、0.15±0.04)均高于对照组(15.23±3.63、23.45±5.25、0.22±0.08， t＝5.718、7.286、6.396， P<0.01)。不同TNM分期、肿瘤浸润深度的miR-26a、miR-21、miR-192比较(17.52±4.93、33.82±10.64、0.17±0.03比26.79±0.85、43.13±13.89、0.11±0.01；16.29±4.01、33.79±11.17、0.18±0.03比26.59±0.85、41.13±13.12、0.11±0.01)，差异有统计学意义( t＝10.534、3.717、11.476、16.177、3.030、15.897， P<0.01)。ROC曲线分析显示，miR-26a、miR-21、miR-192及三项联合诊断胃癌的AUC值分别为0.734、0.844、0.776、0.956( P<0.05)；敏感度分别为50.00%、71.60%、100.00%、90.20%；特异度分别为100.00%、90.20%、56.90%、90.20%。 结论:血清miR-26a、miR-21、miR-192在胃癌患者中呈异常表达趋势，监测其水平变化有助于为及时发现胃癌提供依据。

目的:建立一种催化发夹自组装（CHA）联合成簇间隔的短回文重复序列及其关联蛋白12a（CRISPR-Cas12a）的传感技术，用于外泌体源性微小RNA-21（miR-21）的检测并分析其性能。方法:选取2023年9—10月在陆军军医大学第一附属医院确诊为乳腺癌的患者8例为乳腺癌组；选取同期健康体检者8名为健康对照组。采用试剂盒提取血浆外泌体及其miR-21。针对miR-21序列设计DNA发夹和CRISPR RNA序列。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光分光光度计验证检测技术可行性。进一步优化发夹浓度、CHA反应时间、Cas12a蛋白浓度和Cas12a蛋白反应时间。在此基础上，检测不同浓度（0、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 nmol/L）的miR-21，收集荧光强度采用一元线性回归方法做线性分析以评价方法学的灵敏度，同时检测不同类型miRNA（miR-31、miR-26a、miR-192、miR-25-3p）及空白对照以评价方法学特异性。采用病例对照研究，用该检测技术和逆转录PCR方法检测乳腺癌组和健康对照组血浆外泌体源性miR-21的相对表达水平以评价其临床样本检测能力。结果:应用CHA联合CRISPR-Cas12a技术建立了外泌体源性miR-21的检测方法。该方法检测miR-21的浓度与荧光强度呈良好的线性关系（相关系数为0.966 7），线性检测范围为0.1~10.0 nmol/L，检测限为87.81 pmol/L。miR-21的检测荧光强度为450.27±23.96，高于miR-31、miR-26a、miR-192、miR-25-3p和空白对照组（分别为98.89±7.35、98.12±2.07、98.93±2.45、96.66±2.45、82.93±3.54），差异均有统计学意义（ P均<0.001）。逆转录PCR结果显示，乳腺癌组血浆外泌体源性miR-21相对表达水平高于健康对照组（1.83±0.27比0.93±0.12， P<0.001）；CHA联合 CRISPR-Cas12a检测技术结果显示，乳腺癌组血浆外泌体源性miR-21相对表达水平高于健康对照组（1.94±0.21比0.98±0.08， P<0.001）；CHA联合 CRISPR-Cas12a检测技术与逆转录PCR检测的乳腺癌组和健康对照组的血浆外泌体源性miR-21相对表达水平比较，差异无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:建立了CHA联合CRISPR-Cas12a检测外泌体源性miR-21的高灵敏度与高特异性的传感技术，其检测血浆外泌体源性miR-21的结果与逆转录PCR结果一致，可用于乳腺癌患者筛查。

目的 分析糖尿病肾病(DN)患者血清长链非编码RNA KCNQ1反向链/反义转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)、微小核糖核酸-192-5p(miR-192-5p)与白蛋白尿短期进展及预后的关系.方法 选取2021年4月-2022年12月康复大学青岛中心医院/青岛市中心医院内分泌风湿免疫科收治的DN患者102例为观察组,根据2次检测(间隔6个月)24 h尿白蛋白及SCr水平分为未进展亚组(n=78)和进展亚组(n=24),根据随访1年预后情况分为预后良好亚组(n=84)和预后不良亚组(n=18),选择同期医院健康体检者58例为健康对照组.采用qRT-PCR检测血清 LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p 相对表达量;Pearson 法分析 LncRNA KCNQ1OT1 与 miR-192-5p 的相关性;多因素Logistic回归分析患者白蛋白尿短期进展的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA KCNQ1OT1,miR-192-5p对患者预后的预测价值.结果 与健康对照组比较,观察组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=17.619/＜0.001、16.120/＜0.001);与未进展亚组比较,进展亚组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=7.698/＜0.001、9.485/＜0.001);与未进展亚组比较,进展亚组患高血压比例降低及FPG、HbA1c、BUN、SCr升高,差异均有统计学意义(x2/P=9.835/0.002,t/P=2.593/0.011、2.356/0.020、4.582/＜0.001、3.139/0.002);与预后良好亚组比较,预后不良亚组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p 水平降低(t/P=7.602/＜0.001,9.380/＜0.001);LncRNA KCNQ1OT1 与 miR-192-5p 呈负相关(r/P=-0.452/＜0.001);高血压、血清LncRNA KCNQ10T1水平升高为患者白蛋白尿短期进展的危险因素[OR(95％CI)=1.532(1.058～2.219)、1.638(1.100～2.438)],miR-192-5p水平升高为患者白蛋白尿短期进展的保护因素[OR(95％CI)=0.671(0.517～0.871)];LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p 以及二者联合预测患者预后的 AUC 分别为 0.808、0.822、0.896,联合预测显著优于各自单独预测(Z/P=2.030/0.042、2.116/0.034).结论 DN患者血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低,两者均为DN患者发生白蛋白尿短期进展的影响因素,且对患者预后具有一定辅助预测价值.

[目的]探讨分析microRNA-192表达量与溃疡性结肠炎患者炎性反应及预后的相关性.[方法]选取120例溃疡性结肠炎患者,其中活动期67例,缓解期53例.根据溃疡性结肠炎活动期患者临床严重程度将患者分为轻度组(25例)、中度组(22例)和重度组(20例).检测血清microRNA-192水平,采用Mayo评分、Baron评分,评估患者炎性反应程度,分析microRNA-192水平变化与溃疡性结肠炎患者炎性反应及预后的关系.[结果]活动期患者血清miR-192表达量为(0.19±0.04)显著低于缓解期患者的(0.25±0.07),差异有统计学意义(t=5.906,P＜0.05).重度组患者血清miR-192表达量低于中度组和轻度组,且组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);而重度组患者Mayo评分、Baron评分均高于中度组和轻度组,且组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,血清miR-192表达量与Mayo评分、Baron评分均呈负相关关系(均P＜0.05).复发率为47.50％(57/120),根据预后情况将患者分为复发组(57例)和未复发组(63例).复发组与未复发组患者年龄、体质指数、病变位置、IL-6、IL-15等指标比较差异无统计学意义(P＞0.05),而性别、吸烟、CRP、中性粒细胞胞浆抗体、红细胞沉降率、基底浆细胞增多、血清miR-192表达量与溃疡性结肠炎患者预后有关(P＜0.05).多因素Lo-gistic 回归分析结果显示,性别(OR=1.303,95％CI:1.014～1.675)、吸烟(OR=1.280,95％CI:1.020～1.607)、中性粒细胞胞浆抗体(OR=1.355,95％CI:1.040～1.766)、基底浆细胞增多(OR=1.402,95％CI:1.061～1.852)、miR-192(OR=1.311,95％CI:1.069～1.608)是影响溃疡性结肠炎患者预后的独立危险因素.血清miR-192表达量截断值为0.25时,预测溃疡性结肠炎患者预后的曲线下面积为0.73(95％CI:1.024～1.237),此时的灵敏度和特异度分别为76.36％,69.54％.[结论]溃疡性结肠炎患者血清miR-192表达下降,其水平与患者炎性反应呈负相关关系,检测血清miR-192水平可了解患者炎性反应程度.

目的 评估某品牌7种微小RNA(miRNA)检测试剂盒的检测性能.方法 采用多中心横向联合评价方法,在全国范围内选择10家检测中心在同一时间使用同一批样本,对同一批号试剂进行性能评估.检测项目为miR-21、miR-26a、miR-27a、miR-122、miR-192、miR-223和miR-801,以miR-1228为内参.评估参数包括精密度、符合率、检出限和抗干扰能力.结果 10家检测中心检测8种miRNA的循环阀值(Ct)的批内变异系数(CV)均<5.00%,批间CV均<6.50%.10家检测中心检测20例临床血浆样本的总符合率均为100.00%(20/20),对50拷贝/μL标准参考品的检出率均为100.00%(20/20).血红蛋白200 g/L、胆红素1 000 μmol/L和三酰甘油100 mmol/L对检测结果无明显干扰.结论 该试剂盒检测7种miRNA的精密度、符合率、检出限和抗干扰能力表现良好,可满足不同地区、不同实验室和不同检测系统的使用需求和预期用途,具有一定的临床应用价值.

目的 探究微小RNA-192(miR-192)对结直肠癌(CC)细胞系增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 分别设立A组(SW1116 CC细胞转染生理盐水)、B组(SW1116 CC细胞转染miR-192模拟物)及C组(SW1116 CC细胞转染miR-192抑制剂).分别以MTT法检测各组细胞增殖情况,以流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,以划痕实验检测细胞迁移能力,以Transwell实验检测细胞侵袭能力.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-192及 WNT家族成员2B(WNT2B)mRNA表达水平.结果 B组SW1116 CC细胞存活率、单克隆形成数目分别为(57.32±6.19)％、(284.59±15.08)个,均低于 A组的(76.21±8.23)％、(601.47±23.16)个与 C 组的(89.52±10.62)％、(2 150.68±34.79)个,而凋 亡率为(20.52±2.52)％,高于 A 组的(13.78±1.62)％与 C 组的(11.62±1.41)％;C 组 SW1116 CC 细胞存活率、单克隆形成数目均高于A组,而凋亡率低于A组(均P＜0.05).B组SW1116 CC细胞划痕宽度为(785.10± 46.18)mm,高于A组的(601.32±33.21)mm与C组的(326.99±17.48)mm,而C组划痕宽度低于A组,B组穿膜细胞数为(624.67±19.05)个,少于A组的(875.23±27.30)个与C组的(1 204.17±34.59)个,且C组穿膜细胞数多于A组(均P＜0.05).B组SW1116 CC细胞miR-192 mRNA相对表达水平为(3.01±0.26),相较于A组的(1.87±0.20)及C组的(0.97±0.23)均更高,且C组miR-192 mRNA相对表达水平低于A组,B组 WNT2B mRNA表达水平为(2.16±0.26),相较于A组的(4.11±0.50)与C组的(6.08±0.72)均更低,且C组 WNT2B mRNA表达水平高于A组(均P＜0.05).结论 miR-192可抑制CC的恶性演进,其主要作用机制之一可能与调控WNT2B表达有关.

目的 探讨老年痴呆患者外周血单个核细胞微小RNA(miRNA)-16 和miRNA-192 表达及与认知功能的关系.方法 选择老年痴呆患者 64 例,根据认知功能障碍情况分为轻度组(n=29)与中度组(n=35).另选择老年健康体检者60 例为对照组.采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定 miRNA-16 和 miRNA-192 表达;采用简易精神状态检查(MMSE)量表评估认知功能.比较两组miRNA-16 和miRNA-192 表达,MMSE评分变化;比较不同认知功能障碍组miRNA-16和miRNA-192 表达;采用Pearson分析miRNA-16 和miRNA-192 表达与MMSE评分相关性.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-16 和miRNA-192 对认知功能的预测价值.结果 痴呆组miRNA-16 和miRNA-192 相对表达量显著高于对照组,MMSE评分显著低于对照组(P<0.05).中度组miRNA-16 和miRNA-192 相对表达量显著高于轻度组(P<0.05).经Pearson分析显示,miRNA-16 和miRNA-192 表达与MMSE评分呈线性负相关(P<0.05).经ROC曲线分析显示,miRNA-16 对认知功能预测灵敏度为85.90%,特异度为96.70%;miRNA-192 对认知功能预测灵敏度为85.90%,特异度为98.30%.结论 老年痴呆患者外周血单个核细胞miRNA-16 和miRNA-192 高表达,且与认知功能密切相关.

目的 探讨梅毒血清固定患者外周血单个核淋巴细胞中微小核糖核酸(micro RNA,miR)-31和微小核糖核酸(micro RNA,miR)-192 的表达水平及其诊断价值.方法 选取 2020 年 11 月～2022 年 11 月江阴市人民医院收治的梅毒患者 81 例,根据患者进行驱梅治疗后的血清转变情况分为血清固定组(n=37)和转阴组(n=44),根据临床病理分期分为一期梅毒患者组(n=45)和二期梅毒患者组(n=36),根据梅毒快速血浆反应素试验(rapid plasma response test,RPR)分为反应素初始滴度＜1∶8梅毒患者组(n=31),1∶8～1∶32梅毒患者组(n=26)和＞1∶32梅毒患者组(n=24).另选取同期进行健康体检的 50 例志愿者为健康对照组.实时荧光定量PCR检测各组外周血miR-31 和miR-192 水平;Logistic回归分析梅毒患者发生血清固定的影响因素;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析外周血miR-31,miR-192 水平对梅毒患者发生血清固定的诊断价值.结果 血清固定组、转阴组和健康对照组外周血miR-31(0.36±0.10,0.68±0.13,1.01±0.22)和miR-192(0.51±0.12,0.73±0.19,1.03±0.05)表达水平逐渐升高,差异具有统计学意义(F=167.815,173.090,均P＜0.05);病理分期为Ⅰ期患者外周血miR-31(0.56±0.13),miR-192(0.76±0.14)水平显著高于Ⅱ期(0.38±0.10,0.47±0.08),差异具有统计学意义(t=6.842,11.059,均P＜0.05);反应素初始滴度＜1∶8、反应素初始滴度为1∶8～1∶32、反应素初始滴度＞1∶32的梅毒患者血清miR-31(0.56±0.18,0.48±0.12,0.39±0.09)和miR-192(0.80±0.20,0.64±0.13,0.49±0.12)表达水平逐渐降低,差异具有统计学意义(F=10.057,26.166,均P＜0.05);miR-31[OR(95%CI)=0.537(0.338～0.853)]和miR-192[OR(95%CI)=0.375(0.192～0.732)]均是梅毒患者发生血清固定的保护因素(均P＜0.05);外周血miR-31,miR-192 以及两者联合诊断梅毒患者发生血清固定的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.729(95%CI:0.618～0.821),0.821(95%CI:0.720～0.898)和 0.927(95%CI:0.847～0.973),联合诊断的敏感度和特异度分别为 83.78%,84.09%,二者联合优于外周血miR-31 和miR-192 各自单独诊断,差异具有统计学意义(Z=3.836,2.563,均P＜0.05).结论 外周血miR-31 和miR-192在梅毒血清固定患者体内下调,二者联合诊断梅毒血清固定具有较高效能.