目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

本研究旨在探讨微小RNA(microRNA，miR)-494在膀胱癌细胞增殖、侵袭过程中的作用及其机制。

目的:探讨环状RNA Ras同源家族成员T1(circ-RHOT1)及微小RNA-204-5p (miR-204-5p)在乳腺癌中的表达及其对人类乳腺癌细胞株7(MCF-7)细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移、凋亡及上皮-间充质转化过程的影响。方法:定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测circRHOT1及miR-204-5P在乳腺癌细胞系(人源性)MCF-7以及正常乳腺上皮细胞(人源性)MCF-10A中的表达；双荧光素酶实验及qRT-PCR证明circRHOT1和mirR-20-5p的关系。采用噻唑蓝(MTT)实验，克隆形成实验，流式细胞实验，transwell侵袭实验，划痕实验，检测各组细胞的增殖、克隆形成、侵袭、迁移及凋亡能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞上皮间质标志物表皮钙黏蛋白(E-cadlherin)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。采用 t检验或单因素方差分析进行统计分析。 结果:circRHOT1在乳腺癌细胞系MCF-7中的表达量显著高于乳腺正常上皮细胞MCF-10A(4.77±0.11比1.00±0.09， t＝45.940， P<0.01)。miR-204-p在乳腺癌细胞系MCF-7中的表达量显著低于乳腺正常上皮细胞(0.32±0.03比1.05±0.01， t＝10.330， P<0.01)。si-circROT1组的表达明显低于si-NC组(1.00±0.08比0.15±0.03， t＝17.230， P<0.01)。si-circRHOT1组细胞的体外增殖能力明显低于si-NC组(24 h：0.73±0.05比0.58±0.04， t＝43.517， P<0.05；48 h：1.15±0.10比0.82±0.06， t＝4.901， P<0.01；72 h：1.68±0.18比1.08±0.12， t＝5.003， P<0.01)、si-circRHOT1组细胞的集落形成能力明显低于si-NC组(77.69±13.54比27.82±5.76， t＝5.872， P<0.01)、si-circRHOT1组细胞的侵袭及迁移能力明显低于si-NC组[30.82±8.77比72.68±11.78， t＝4.935， P<0.01；(17.24±4.21)%比(67.77±8.02)%， t＝9.661， P<0.01]，si-circRHOT1组细胞的凋亡能力明显高于si-NC组(22.92±4.46比5.62±1.31， t＝6.448， P<0.01)。si-circRHOT1组细胞E-cadherin的表达高于对照组(6.84±0.56比0.96±0.24， t＝13.320， P<0.01)，si-circRHOT1组细胞N-cadherin，vimentin的表达低于si-NC组(0.34±0.07比1.06±0.35， t＝9.331， P<0.01；0.36±0.05比1.10±0.36， t＝8.645， P<0.01)。circRHOT1可充当miR-204-5P海绵，靶向抑制miR-204-5P表达；干扰miR-204-5P的表达可部分逆转circRHOT1介导的肿瘤抑制作用。 结论:circRHOT1通过充当miR-204-5P海绵，靶向调控miR-204-5p，增强乳腺癌MCF-7细胞增殖、集落形成、侵袭、迁移并减轻细胞凋亡能力。

目的:探讨肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠癌组织的表达变化及其上游微小RNA(miRNA，miR)对其表达水平的调控。方法:选取2020年1月至2023年1月新乡医学院第一附属医院收治的58例结直肠癌临床标本和癌旁组织作为研究对象，采用双向电泳技术分析结直肠癌和癌旁组织差异表达的蛋白，选取肿瘤相关钙信号传感器2作为研究对象，采用蛋白质印迹法(Western blot)分析癌旁组织和结直肠癌组织肿瘤相关钙信号传感器2表达水平。免疫组织化学分析两组组织细胞增殖抗原(PCNA)的阳性率；相关性分析肿瘤相关钙信号传感器2与细胞增殖的关系。转录组学分析癌旁组织和结肠癌组织miRNA，筛选差异靶向肿瘤相关钙信号传感器2的miRNA，并采用双荧光素酶报告基因验证分析miRNA的靶向性。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:双向电泳筛选10个差异的蛋白质，本研究选择差异显著的蛋白肿瘤相关钙信号传感器2作为研究对象。癌旁组织中肿瘤相关钙信号传感器2蛋白表达水平(0.92±0.14)明显低于结直肠癌组织(1.62±0.20)，差异有统计学意义( t＝14.320， P<0.05)。PCNA表达阴性患者肿瘤相关钙信号传感器2蛋白表达水平(1.33±0.13)明显低于结直肠癌组织(1.69±0.16)，差异有统计学意义( t＝6.092， P<0.05)。癌旁组织和结直肠癌组织总计差异miRNA共1 218个，其中上调表达732个，下调486个。发现5个与肿瘤相关钙信号传感器2存在互补的miRNA，分别为miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p。癌旁组织中miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p表达水平(1.07±0.08、1.07±0.09、1.11±0.15、1.01±0.10、1.15±0.15)明显高于结直肠癌组织(0.28±0.05、0.30±0.07、0.45±0.08、0.54±0.09、0.69±0.12)，差异有统计学意义( t＝21.050、26.350、14.850、12.600、9.165， P<0.05)。miRNA对照和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.96±0.07、0.94±0.03、0.92±0.06、0.91±0.08、0.95±0.05)明显高于miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p模拟物和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.22±0.06、0.24±0.07、0.34±0.09、0.45±0.08、0.60±0.12)，差异有统计学意义( t＝23.541、23.102、18.208、14.231、12.514， P<0.05)。 结论:肿瘤相关钙信号传感器2在结直肠组织中表达显著上调，受miR-488-3p、miR-625-5p、miR-3650、miR-518a-5p和miR-204-3p等miRNA调控。

目的 探究纳武利尤单抗联合安罗替尼治疗Ⅲb～Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的效果及对微小RNA-1269(miR-1269)、miR-204-5p表达的影响.方法 选取Ⅲb～Ⅳ期NSCLC患者82例,患者分配为 对照组、观察组,各41例,使用随机数字表法,对照组采用安罗替尼治疗,观察组在对照组的基础上采用纳武利尤单抗治疗;比较两组患者的疗效、治疗前后肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、miR-1269、miR-204-5p表达水平和不良反应的发生率.结果 观察组患者治疗后疾病控制率(87.80％,36/41)显著高于对照组(68.29％,28/41)(x2=4.556,P=0.033);与治疗前相比,治疗后观察组和对照组的CEA、CYFRA21-1、miR-1269水平显著降低,miR-204-5p水平显著升高(P＜0.05);治疗后与对照组相比,观察组的CEA、CYFRA21-1、miR-1269水平显著降低,miR-204-5p水平显著升高(P＜0.05);不良反应两组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 纳武利尤单抗联合安罗替尼治疗Ⅲb～Ⅳ期NSCLC患者可降低患者肿瘤标志物的水平,调节miR-1269、miR-204-5p的表达,效果更好.

在许多发展中国家,宫颈癌是女性癌症相关发病和死亡的主要原因.本文阐明了微小RNA(miRNA)在上皮-间充质转化(EMT)中的作用机制,并发现miRNA通过调控EMT在宫颈癌的转移侵袭和肿瘤耐药中发挥重要作用.miR-92a-3p、miR-21、miR-138等可以直接靶向EMT促进宫颈癌转移侵袭;miR-98-5p、miR-204-5p、miR-340等可以通过抑制EMT来抑制宫颈癌转移侵袭;miR-101-3p、miR-106b、miR-4677-3p等可通过内源性竞争机制影响EMT进而影响宫颈癌发生和进展.在宫颈癌肿瘤耐药性中,miR-25-3p可通过靶向Sema4C,将EMT逆转为间质表型上皮样转化,增强宫颈癌耐药细胞对顺铂的敏感性.靶向miRNA可能是一种新型治疗宫颈癌的方法.

癌症的发生和发展与微小RNA(miRNA)密切相关.miRNA是基因表达和调控的关键因子,可与特定的信使RNA(mRNA)或其他非编码RNA(ncRNA)结合,影响细胞转录、翻译或信号传导等过程.miR-204-5 p是micro RNAs家族成员之一,大量研究证实,miR-204-5 p可抑制包括结直肠癌(CRC)在内的各种癌症的恶性生物学行为,下调的miR-204-5 p会诱导癌细胞生长、增殖、迁移、侵袭、血管生成等.有研究认为,miR-204-5 p表达下调是导致CRC预后不良的重要原因之一.因此,miR-204-5 p可能成为未来筛查CRC的生物标志物和治疗CRC的新靶点.

目的 探究环状RNA KMT2E(circ KMT2E)对高糖(HG)诱导的人晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的影响及调控机制.方法 收集自2018 年12 月至2020 年11 月在海南医学院第二附属医院眼科中心进行白内障手术的33 例非糖尿病性白内障(DC)患者和33 例DC患者的晶状体前囊膜,TUNEL法检测晶状体前囊膜上LEC凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测晶状体前囊膜中circ KMT2E、miR-204-5p和基质金属蛋白酶(MMP)9 mRNA表达水平,采用Pearson法分析circ KMT2E、miR-204-5p和MMP9 mRNA表达水平的相关性.取人晶状体上皮细胞系(HLE-B3),CCK-8 法筛选最佳HG浓度及作用时间;将HLE-B3 细胞分为对照组、HG组、沉默对照组、KMT2E沉默组、过表达对照组、KMT2E过表达组、KMT2E过表达+miR-NC组、KMT2E过表达+miR-204-5p模拟物组,转染后将HLE-B3 细胞用HG处理24 h.RT-qPCR检测各组细胞中circ KMT2E、miR-204-5p和MMP9 mRNA表达水平,验证转染效果;CCK-8 法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测细胞中MMP9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase)-3 蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测circ KMT2E与miR-204-5p的靶向关系.结果 与非DC患者相比,DC患者晶状体前囊膜中LEC凋亡、circ KMT2E、MMP9 mRNA表达水平显著升高,miR-204-5p水平显著降低(P＜0.05);Pearson相关分析显示,DC患者晶状体前囊膜中 circ KMT2E 与 miR-204-5p 呈负相关,MMP9 与 miR-204-5p 呈负相关,MMP9 与 circ KMT2E 呈正相关.200 mmol/L葡萄糖作用24h时可显著抑制HLE-B3 细胞活力(P＜0.05).转染后,与对照组相比,HG组细胞中circ KMT2E、MMP9 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3 蛋白表达显著升高,miR-204-5p水平、细胞活力、Bcl-2 蛋白表达显著降低(P＜0.05);与HG组相比,KMT2E沉默组细胞中circ KMT2E、MMP9 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率、Bax、Cleaved Caspase-3 蛋白表达显著降低,miR-204-5p水平、细胞活力、Bcl-2 蛋白表达显著升高(P＜0.05),KMT2E过表达组上述指标变化则表现出相反的作用(P＜0.05);在过表达KMT2E的基础上,上调miR-204-5p,可降低MMP-9 表达,明显逆转circ KMT2E过表达对HLE-B3 细胞凋亡的影响.双荧光素酶报告基因检测结果显示,转染miR-204-5p mimic后,KMT2E-WT细胞的荧光素酶活性显著降低(P＜0.05).结论 沉默circ KMT2E可能通过靶向上调miR-204-5p,进而抑制MMP9 的表达,减少HG诱导的人LEC凋亡.

背景 胆管癌(CCA)起源于胆管上皮细胞,起病隐匿,恶性度极高.循环血中微小RNA (miRNA)在CCA诊断中的价值尚待研究.目的 探讨血浆miR-92a-3p、miR-204-5 p、miR-186-5p诊断CCA的价值,以期提高CCA的诊断水平.方法 选取2015年5月-2016年1月河北医科大学第二医院符合纳入标准的CCA患者16例为病例组.同期选取本院无肝胆疾病患者15例为对照组.制备两组患者血浆标本,采用RT-qPCR法检测血浆miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p表达水平.采用二元Logistic回归分析计算miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p联合的Logistic回归方程;绘制miR-92a-3p、miR-204-5 p、miR-186-5p及其联合诊断CCA的受试者工作特征曲线(ROC曲线),计算ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、约登指数.结果 病例组miR-92a-3p表达水平高于对照组,miR-204-5p、miR-186-5p表达水平低于对照组(P＜0.05).miR-92a-3p、miR-204-5 p、miR-186-5p诊断CCA的AUC分别为0.708[95％ CI (0.524,0.892)]、0.725[95％ CI (0.535,0.915)]、0.750 [95％ CI (0.576,0.924)],截断值分别为0.130 8、0.008 5、0.005 2,灵敏度分别为0.938、0.563、0.563,特异度分别为0.467、0.933、0.933,约登指数分别为0.405、0.496、0.496.二元Logistic回归分析结果显示,Logit (P)=-0.031 +9.167 × miR-92a-3p-49.453 ×miR-186-5p-66.771×miR-204-5p,其诊断CCA的AUC为0.879[95％CI (0.749,1.010)],截断值为0.095 8,灵敏度、特异度、约登指数分别为0.938、0.800、0.738.miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p联合诊断CCA的AUC大于miR-92a-3p、miR-204-5 p、miR-186-5p单独诊断CCA的AUC (P＜0.05).结论 miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p可以用于CCA的诊断,且其联合诊断CCA的价值更高.

目的:探讨长链非编码RNA(long chain non-coding RNA,lncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1(metastasis-associatedlung adenocarcinoma transcript 1,MALATl)通过调控miR-204的表达影响胰腺癌细胞恶性生物学行为的作用及其可能机制.方法:收集2016年10月至2016年12月在河南省中医院6例胰腺癌手术切除标本及其对应的癌旁组织标本.用实时荧光定量PCR检测胰腺癌组织和癌旁组织、5种胰腺癌细胞(BxPC-3、HS-7667、PANC-1、AsPC-1和SW-1990)中lncRNA MALAT1的表达,双荧光素酶报告基因检测MALAT1与miR-204的相互作用,流式细胞术分析MALAT-1对胰腺癌细胞的细胞周期及细胞凋亡的影响;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测MALAT1和miR-204对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,Western blotting检测MALAT1对上皮间质转化相关蛋白的影响.结果:lncRNA MALAT1在胰腺癌组织中表达水平明显高于癌旁组织(1.85±-0.52vs 0.34±0.12,P＜0.05),MALAT1在SW-1990细胞中的表达水平最高(P＜0.05).lncRNA MALAT1能与miR-204的3'UTR特异性结合,调控miR-204的表达活性.抑制MALAT1表达后,可诱导SW-1990细胞G2/M细胞周期停滞、促进细胞凋亡,SW-1990细胞的迁移和侵袭能力减弱(均P＜0.05),下调SW-1990细胞N-cadherin、E-cadherin和vimentin的表达.过表达miR-204可促进SW-1990细胞迁移和侵袭.结论:lncRNA MALAT1通过靶向调控miR-204表达影响胰腺癌细胞的恶性生物学行为,在胰腺癌的发生发展过程中起重要作用.