目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)、成纤维细胞因子19(FGF-19)水平与不良妊娠结局的关系及预测价值.方法:回顾性纳入2020年1月—2023年12月本院就诊的GDM患者104例(GDM组),按是否发生不良妊娠结局分为结局不良组(n=38)与结局良好组(n=76);另选取健康孕妇100例为对照组.均完成孕晚期血清CTRP3、FGF19水平检测,分析血清CTRP3、FGF19与GDM不良妊娠结局关系,使用受试者工作特征(ROC)曲线评价二项指标不良妊娠结局价值.结果:GDM组血清CTRP3(0.54±0.16 μg/L)、FGF19(55.48±15.61 pg/ml)水平低于对照组(0.66±0.19 μg/L、64.89±17.23 pg/ml),妊娠结局不良组 CTRP3、FGF19水平低于结局良好组(均P＜0.05).logistic回归分析,血清CTRP3、FGF19水平降低是GDM患者不良妊娠结局危险因素(P＜0.05).ROC曲线分析,血清CTRP3、FGF19水平预测GDM患者不良妊娠结局曲线下面积分别为0.710、0.724,二者联合检测的曲线下面积0.789.结论:GDM患者血清CTRP3、FGF19水平降低,且是患者发生不良妊娠结局的危险因素,二项指标均对不良妊娠结局有预测价值,且联合应用可提高预测效能.

目的:探讨不同年龄组人脂肪干细胞(ADSC)形态学、衰老特征、分化潜能、表面标志物表达、增殖能力差异，ADSC对成纤维细胞(Fb)增殖、迁移的影响。方法:2020年1—12月，取解放军联勤保障部队第九四〇医院烧伤整形科27例美容就医者的脂肪组织，年龄0~59岁。按供体年龄分为0~9岁组(4例)、10~19岁组(4例)、20~29岁组(5例)、30~39岁组(5例)、40~49岁组(5例)、50~59岁组(4例)6个组。获取各组ADSC传代培养，观察各组形态学特征，CCK-8法检测各组ADSC增殖能力，体外成脂、成骨诱导检测各组ADSC分化潜能，流式细胞仪检测各组ADSC表面标志物表达水平，qPCR检测各组(HGF)、(PPAR-γ)、Ⅲ型胶原酶、(DbX2)表达水平。收集同期1名健康对照者皮肤组织，获取Fb并传代培养至第二代，制备不同年龄组ADSC条件培养基(ADSC-CM)，通过CCK-8法检测各组ADSC-CM培养Fb的增殖能力，细胞划痕法检测Fb的迁移能力。用SPSS 21.0软件进行数据分析。结果:6个年龄组细胞均呈典型梭形，低龄组细胞可见细胞核小，细胞形态均匀相似；>20岁组细胞细胞核较大，形态不均匀。ADSC细胞增殖能力随年龄增长逐渐降低。ADSC成脂、成骨分化能力随年龄增加逐渐下降。各组ADSC间充质干细胞阳性表面标志物表达率均>93%。PPAR-γ、HGF、Ⅲ型胶原酶表达水平均随年龄增长而下降；DbX2表达水平随年龄增长而呈上升趋势。各组SA-β-GAL染色阳性细胞数随年龄增长而上升。各组ADSC-CM均可促进Fb增殖，但各组间差异无统计学意义( P>0.05)；随着年龄增加，ADSC-CM促进Fb迁移能力逐渐下降。 结论:人ADSC增殖能力、多向分化能力、分泌多种促进Fb增殖和迁移的细胞因子能力随着年龄增长出现下降趋势，但ADSC成脂分化能力从40岁后才出现明显下降，各年龄组ADSC都可促进Fb增殖和迁移。

从全世界疫情报告来看，2019新型冠状病毒肺炎（新冠肺炎）重症患者病死率高。糖尿病患者是新冠肺炎的易感人群，合并糖尿病的新冠肺炎患者病死率较高，所以认为高血糖是重症新冠肺炎的独立危险因素，针对感染新型冠状病毒（2019-nCoV）的重症患者目前也无确切有效的治疗方法。临床研究中观察到重症新冠肺炎患者体内出现"细胞因子风暴"，持续高水平的细胞因子造成肺毛细血管内皮细胞及肺泡上皮细胞的弥漫性损伤，引起急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。ARDS是导致新冠肺炎患者死亡的主要原因。宿主导向疗法（HDT）是抗感染领域中的新兴治疗方法，可以激活人体自身保护性免疫反应，抑制过强的炎症反应，用于辅助传统药物治疗以缩短患者病程。二甲双胍被证实有宿主导向疗效，可以辅助治疗病毒和细菌感染性疾病。本文对二甲双胍辅助治疗重症新冠肺炎的合理性及潜在机制进行讨论，推测对重症新冠肺炎合并糖尿病患者使用二甲双胍进行降糖治疗，有可能预防或抑制ARDS发生，从而降低患者病死率，其作用机制可能是通过抑制白细胞介素-6（IL-6）信号通路，阻断"细胞因子风暴"，延缓肺纤维化进程，抑制内吞作用，从而上调血管紧张素转换酶2（ACE2）表达。

目的:构建靶向肿瘤间质癌相关成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein，FAP)的第2代和第4代CAR-T细胞，并比较两者在体内外的性能差异。方法:ELISA检测CAR-T细胞的细胞因子分泌情况；手工计数检测其增殖存活能力；Transwell迁移试验检测其趋化性能；流式细胞术检测其亚型分布；荧光素酶生物发光法检测其杀伤效率；小鼠肺癌转移模型评估其安全性和有效性。结果:第2代h4BBz CAR-T细胞的CAR表达率为(74.280±4.384)%，第4代h4BBz-7.19 CAR-T为(67.220±4.013)%；h4BBz-7.19 CAR-T细胞能够分泌IL-7和CCL19，使其在体外的增殖能力和趋化能力较h4BBz CAR-T细胞强，存活能力相当。在亚型分布中，两种CAR表达率在CD4 ＋ T细胞群和CD8 ＋ T细胞群中均无显著性差异，但h4BBz-7.19 CAR-T细胞中的Naive和T记忆干细胞(T memory stem cell, TSCM)亚群在CD4 ＋ T细胞群或CD8 ＋ T细胞群中所占比例均较h4BBz CAR-T细胞高。在杀伤试验中，h4BBz-7.19 CAR-T细胞在低效靶比时显示出较h4BBz CAR-T细胞更强的杀伤效率(效靶比为1∶1、2∶1、5∶1、10∶1、20∶1时的 P值分别为： P1∶1＝0.004、 P2∶1＝0.000 6、 P5∶1<0.000 1、 P10∶1＝0.022、 P20∶1＝0.116)，且其T细胞表面免疫抑制分子PD-1的表达水平较h4BBz CAR-T细胞低。在NOG小鼠肺癌转移模型中，h4BBz-7.19 CAR-T组小鼠的肿瘤生长较对照组缓慢，其生存时间更长( P＝0.003 8)，且对小鼠体重和脏器无影响。 结论:本研究构建的靶向FAP的第4代CAR-T细胞通过分泌IL-7和CCL19增强增殖存活、渗透趋化和特异性杀伤活性，并可在一定程度上通过改善肿瘤免疫抑制性微环境以延缓肿瘤生长、延长生存时间，从而为其在临床上的应用提供参考。

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在全球快速蔓延，人群普遍易感。目前认为病毒感染后诱发的免疫、炎性反应及其引起的"细胞因子风暴"是造成患者肺损伤，导致病情危重和死亡的重要原因。既往研究发现，肺感染患者往往存在维生素D不足和血钙降低。活性维生素D除调节钙、磷代谢外，还与机体的防御、炎性反应、免疫调节和修复等病理生理过程密切相关，在预防和治疗肺感染，特别是病毒感染中具有重要作用，且无糖皮质激素的不良反应，不增加病毒复制和继发细菌感染。活性维生素D还能预防和治疗COVID-19康复中可能出现的骨坏死和肺纤维化等并发症。因此，应重视活性维生素D在COVID-19临床诊治中的应用。

目的:基于单细胞RNA测序（scRNA-seq）生物信息学分析的预后相关的差异表达基因构建膀胱癌预后风险模型并验证。方法:从基因表达综合（GEO）数据库中下载膀胱癌scRNA-seq数据集GSE135337、GSE129845，数据更新时间分别为2022年、2019年；下载常规转录组数据集GSE13507(数据更新时间为2020年)中165例膀胱癌样本的表达谱及其生存信息。从癌症基因组图谱（TCGA）数据库中下载414例膀胱癌样本和19例癌旁样本的表达谱数据及405例膀胱癌患者的临床信息。采用R 4.1.2软件对GEO数据库中的10例膀胱癌单细胞样本进行质量控制及降维聚类并对其进行细胞注释；采用CellChat分析GEO数据库中单细胞数据的细胞间通信。采用单因素Cox比例风险模型分析筛选与膀胱癌预后相关的差异表达基因，并使用LASSO-Cox回归分析构建预后风险模型，计算风险评分。根据中位风险评分，以TCGA数据集中膀胱癌患者为训练集，将患者分为低风险组和高风险组；采用GEO数据库GSE13507数据集为验证集进行验证，通过Kaplan-Meier分析比较训练集、验证集低风险组和高风险组患者的总生存情况。通过时间依赖受试者工作特征（ROC）曲线分析评估预后风险模型的预测效能；采用R 4.1.2软件构建预测患者1、3、5年总生存率的列线图。分析TCGA数据集中膀胱癌患者风险评分与相应临床病理特征之间的关系，并进行基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析和基因集富集分析（GSEA）。结果:GSE135337和GSE129845数据集中，根据质量控制标准过滤后获得了50 263个细胞，其中43 519个细胞为尿路上皮细胞。尿路上皮细胞与成纤维细胞在膀胱癌微环境中具有更多的细胞交互作用，尿路上皮细胞主要通过中期因子信号通路发送信号。筛选出9个预后相关的差异表达基因（SPINK1、FN1、EFEMP1、ELN、PCOLCE2、TUBA1A、COL14A1、TCF4和TM4SF1）并构建预后风险模型，风险评分=-0.019×SPINK1+0.028×FN1+0.025×EFEMP1+0.023×ELN+0.098×PCOLCE2+0.004× TUBA1A+0.047×COL14A1+0.004×TCF4+0.096×TM4SF1。根据风险评分中位值（1.350），训练集、验证集高风险组（≥1.350）患者OS较低风险组（<1.350）差。ROC曲线分析表明，在训练集与验证集中1、3、5年总生存率的曲线下面积（AUC）均>0.65。根据年龄、分期和预后模型风险评分构建预测患者1、3、5年总生存率的列线图，其校正曲线接近理想曲线。风险评分在>60岁患者，M分期为M 1，N分期为N 1、N 2、N 3，TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期时均升高，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。富集分析发现多个显著富集的基因与体液免疫应答、粒细胞趋化、细胞因子-细胞因子受体相互作用和B细胞介导的免疫等功能与通路相关。 结论:基于scRNA-seq数据构建的较为稳定的膀胱癌预后预测模型可为临床评估患者预后提供参考。

目的:构建慢病毒稳定敲减FGF19大肠癌细胞系,探究FGF19敲减对人大肠癌细胞增殖、迁移的影响.方法:通过慢病毒转染大肠癌COLO201和HCT116细胞,分别在适宜病毒转染指数条件下转染并构建稳转株;以嘌呤霉素进行筛选,获得稳定敲减FGF19的细胞株;PCR和Western bloting鉴定COLO201和HCT116稳转细胞株中FGF19的表达情况;Transwell实验检测细胞的迁移活性,CCK-8和克隆形成实验检测细胞的增殖活性.结果:成功构建了稳定敲减FGF19的两株大肠癌细胞.稳定敲减FGF19的HCT116、COLO201细胞(KD组)的FGF19 mRNA水平与空载对照组(NC组)相比明显减少(P=0.001 1,P=0.000 1);与NC组相比,KD组细胞的FGF19蛋白表达明显下降,差异均具有统计学意义(P=0.001,P=0.000 1).KD组细胞的迁移活性以及增殖能力均相比NC组明显下降(迁移P=0.001 7/P=0.000 1;CCK-8P=0.042 5/P=0.033 4;克隆P=0.005 1/P=0.002 2).结论:成功构建FGF19敲减慢病毒载体及大肠癌细胞株,敲减FGF19可使大肠癌细胞的迁移活性明显下降,增殖能力降低,为研究FGF19在大肠癌中的作用奠定了实验基础.

目的:观察升阳散火汤加味联合维生素B2 治疗恶性肿瘤靶向药物所致口腔溃疡的临床疗效.方法:采用随机数字表法将 64 例靶向治疗后口腔溃疡患者分为对照组和治疗组各 32 例.2 组均给予口腔护理,同时对照组给予维生素B2 口服治疗,治疗组在对照组基础上加用升阳散火汤加味治疗,2 组均连续治疗14 d.比较 2 组平均溃疡期、口腔溃疡分级、疼痛等级;比较 2 组治疗前后溃疡症状评分、中医证候积分及血清细胞因子、T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、B细胞(CD19+)及自然杀伤细胞(CD16+/CD56+)水平;比较 2 组临床疗效及不良反应发生情况.结果:治疗期间,对照组脱落 2 例,完成研究 30 例;治疗组脱落 1 例,完成研究 31 例.治疗后,治疗组总有效率 100%,高于对照组 80.00%(P＜0.05).治疗组口腔溃疡分级、疼痛等级均轻于对照组(P＜0.05),平均溃疡期较对照组缩短(P＜0.05).2 组治疗后口腔溃疡症状评分、中医证候积分较治疗前降低(P＜0.05);且治疗组治疗后口腔溃疡各项症状评分、中医证候积分均低于对照组(P＜0.05).2 组血清碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、超氧化物歧化酶(SOD)水平均较治疗前升高(P＜0.05),血清炎症因子[白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、丙二醛(MDA)水平均降低(P＜0.05);治疗组治疗后血清bFGF、SOD水平高于对照组(P＜0.05),血清MDA、炎症因子水平均低于对照组(P＜0.05).治疗后,治疗组CD3+及 2 组CD4+、CD19+水平及CD4+/CD8+均较治疗前升高(P＜0.05),CD8+、CD16+/CD56+水平降低(P＜0.05);治疗组治疗后CD3+、CD4+、CD19+水平及CD4+/CD8+均高于对照组(P＜0.05),CD16+/CD56+、CD8+水平低于对照组(P＜0.05).2 组均未出现严重不良反应.结论:升阳散火汤加味联合维生素B2 治疗恶性肿瘤靶向药物所致口腔溃疡疗效确切,能够缓解患者口腔溃疡症状及疼痛,提高免疫功能,降低炎症反应,加快溃疡愈合,安全性较高.

目的 研究成纤维细胞因子19(FGF19)在调控肿瘤细胞增殖和自噬中的生物学功能.方法 采用不同浓度的FGF19重组蛋白处理肿瘤细胞,观察细胞的形态及生长情况.CCK-8检测经 FGF19重组蛋白处理后的细胞增殖情况.采用免疫印迹检测FGF19重组蛋白处理对肿瘤细胞内自噬体标志蛋白LC3以及自噬相关蛋白p62表达的影响.利用免疫荧光技术检测FGF19重组蛋白处理后细胞内自噬斑点的变化.结果 FGF19重组蛋白处理可以促进肿瘤细胞的增殖;免疫印迹结果显示,FGF19处理抑制肿瘤细胞内 LC3-II的表达;免疫荧光结果显示,经过FGF19重组蛋白处理后的肿瘤细胞内LC3斑点比对照组明显减少.结论 一定浓度的FGF19能促进肿瘤细胞的增殖,抑制其自噬.

"炎症学说"是有关糖尿病病理生理机制的崭新观点,该学说认为糖尿病是细胞因子介导的炎症反应,可引起血管内皮功能障碍导致血管病变的发生发展.其中氧化应激是共同机制,炎症是导致疾病持续发展的关键因素.成纤维细胞生长因子19(fibroblast growth factor 19,FGF19)是一种新的代谢调节因子,也是餐后在远端小肠合成、分泌并释放入血的肠促激素.FGF19除调控胆汁酸的肠肝循环外,也可调节糖脂代谢,且近年发现其还具有抗炎作用.FGF19与糖尿病炎症反应或氧化应激的相关性使其成为糖尿病及其并发症防治的新靶点.