自身免疫性溶血性贫血（autoimmune hemolytic anemia, AIHA）是由于机体免疫功能紊乱、产生自身抗体、红细胞破坏加速（溶血）超过骨髓代偿时发生的贫血。目前国内尚无AIHA流行病学的数据，国外资料显示AIHA的年发病率为（0.8~3.0）/10万 [1-2]。其发病机制尚未完全明确。自身抗体的产生涉及免疫系统的多个环节：①内源性红细胞和外源性/环境抗原的交叉反应而产生的分子模拟（交叉抗原和整合抗原）；②受后天因素（感染、恶性肿瘤、药物等）影响，自身抗原结构改变（突变抗原和错误抗原），抗原呈递失调，从而产生自身抗体；③B细胞和T细胞功能障碍，包括调节性T细胞数量减少和其他T细胞异常，常见于免疫缺陷病、自身免疫病和淋巴增殖性疾病 [2]。④病原微生物的线粒体DNA可以与红细胞膜表面TLR9结合，改变膜结构，降低CD47表达，激活红细胞吞噬程序，并激活固有免疫反应 [3]。

目的:探究与自身抗体抗线粒体抗体Ⅱ型（AMA-M2）发生反应的侧链二氧酸脱氢酶复合体E2蛋白（BCOADC-E2）关键性氨基酸在原发性胆汁性胆管炎（PBC）诊断中的价值。方法:克隆能够表达BCOADC-E2蛋白抗原表位同源目的基因序列BCKD，与工程质粒pGEX-4T1进行DNA重组，通过PCR获得15个点突变质粒，转入原核表达菌株中进行蛋白表达与纯化；ELISA法、蛋白质印迹法鉴定其与PBC患者血清AMA-M2特异性反应程度并进行分析比较，定位出对BCOADC-E2蛋白和AMA-M2特异性反应有关键影响的氨基酸，探讨其在PBC诊断中的价值。统计学处理采用单因素方差分析、两两比较采用LSD- t检验。 结果:共获得14个突变型蛋白、1个野生型蛋白。突变型蛋白pGEX-BCKD-S1A和pGEX-BCKD-C3A与PBC患者血清AMA-M2特异性反应程度均高于野生型蛋白pGEX-BCKD与AMA-M2特异性反应程度；突变型蛋白pGEX-BCKD-S1A（1.634±0.328）和pGEX-BCKD-C3A（1.744±0.345）与PBC患者血清AMA-M2特异性反应程度均高于野生型蛋白pGEX-BCKD（1.000±0.000）与AMA-M2特异性反应程度；突变型蛋白pGEX-BCKD-E4A（0.157±0.067）、pGEX-BCKD-V5A（0.057±0.029）、pGEX-BCKD-Q6A（0.580±0.166）、pGEX-BCKD-S7A（0.744±0.125）、pGEX-BCKD-D8A（0.351±0.135）、pGEX-BCKD-S10A（0.496±0.158）、pGEX-BCKD-V11A（0.149±0.089）、pGEX-BCKD-T12A（0.061±0.043）、pGEX-BCKD-I13A（0.007±0.017）、pGEX-BCKD-T14A（0.198±0.101）、pGEX-BCKD-S15A（0.156±0.087）、pGEX-BCKD-R16A（0.884±0.099）与AMA-M2特异性反应程度均低于野生型蛋白pGEX-BCKD（1.000±0.000）与AMA-M2特异性反应蛋白。结论:BCOADC-E2蛋白的1号和3号位半胱氨酸是提高蛋白BCOADC-E2与PBC患者血清AMA-M2特异性反应关键性氨基酸；4、5、6、7、8、10、11、12、13、14、15、16号位氨基酸被丙氨酸代替后形成突变型蛋白会降低其与AMA-M2特异性反应程度；5号位和13号位氨基酸是影响蛋白BCOADC-E2与AMA-M2特异性反应关键性氨基酸，对BCOADC-E2蛋白功能有着重要影响，对BCOADC-E2关键性氨基酸进行深入研究对PBC诊治有重要意义。

目的:通过全外显子组测序(WES)技术筛查原发性胆汁性胆管炎(PBC)家系共有的低频变异位点，以期发现与PBC相关的新易感基因。方法:收集2000年1月至2017年12月于天津医科大学总医院诊断的3个PBC家系的7例PBC患者和2名健康对照者的临床资料，提取血液DNA样本并进行WES，应用SAMtools 1.3软件检测基因单核苷酸多态性(SNP)和得失位变异位点，并于已知数据库1000 Genome、ExAC、ESP6500和诺禾-中华基因数据库筛选低频变异位点。应用Pymol V2.3.2软件模拟主要组织相容性复合体-Ⅱ(MHC-Ⅱ)分子三维结构，观察家系间共有变异位点对应的氨基酸位置。结果:7例PBC患者首诊年龄为(61.2±10.2)岁。血清检测结果示7例患者的ALP为(306.9±242.5) U/L，GGT为(121.7±85.9) U/L，ALT为(47.6±33.1) U/L，AST为(55.7±34.1) U/L，免疫球蛋白G为(14.9±3.1) g/L；抗核抗体核型均存在胞质颗粒型特征；抗线粒体抗体均为阳性。5例PBC患者出现腹腔内淋巴结肿大；2例患者合并肝外自身免疫病；2例患者肝脏活组织检查结果均提示界面性肝炎和小胆管病变。3个PBC家系间共有18个SNP位点，分别位于 OTOA、 OBSCN和人类白细胞抗原- DRB1( HLA- DRBI)基因。 OTOA基因的rs200988634是3个家系共有的多态性位点； OBSCN基因的rs746424683、rs545316651、rs553144914、rs533059830和rs56087721分别导致9种氨基酸的改变；基因 HLA- DRB1共有12个不同的SNP位点，分别导致12种氨基酸的改变，其中rs16822698、rs112796209和rs11554463核苷酸突变分别导致MHC-Ⅱ分子β链的G154A、Y152C和Y107X氨基酸改变，Y107X氨基酸位于MHC-Ⅱ分子与抗原肽结合凹槽区域。 结论:对PBC家系进行WES是阐明恶性变异候选基因 OBSCN和 OTOA较好的策略。 HLA- DRB1为PBC的易感基因，可能通过改变氨基酸序列影响MHC-Ⅱ分子介导的抗原提呈过程。

目的:探讨干燥综合征（SS）合并肝损伤的临床病理特征，以提高对该病的认识。方法:收集首都医科大学附属北京地坛医院2008年10月至2022年1月49例SS合并肝损伤患者，患者均行超声引导下肝脏穿刺活检，所有标本进行HE染色，观察其组织形态学特点并进行病理指标分级，采用免疫组织化学EnVision两步法行细胞角蛋白（CK）7、CK19、CD38、MUM1、CD10染色，并进行网状纤维、Masson染色、罗丹宁染色、普鲁士蓝染色、过碘酸-雪夫（PAS）及淀粉酶消化PAS等组织化学特殊染色。结果:患者男性3例，女性46例，年龄31~66岁。SS合并药物性肝损伤最多见（22例，44.9%），其后依次为自身免疫性肝病［13例，26.5%；包括原发性胆汁性胆管炎（PBC）8例，自身免疫性肝炎3例，原发性胆汁性胆管炎-自身免疫性肝炎（PBC-AIH）重叠综合征2例］，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）9例（18.4%），其他病变5例（10.2%；包括3例肝脏非特异性炎症，1例肝淀粉样变，1例肝脏门静脉肝窦血管性疾病）。其中28例（57.1%）伴有较明显的小叶间胆管损伤，以SS合并PBC组及药物性肝损伤组为著；23例（46.9%）伴不同程度肝细胞脂肪变性。13例SS合并自身免疫性肝病组其肝组织ISHAK炎症评分、纤维化程度、胆管损伤程度、胆管改建程度、汇管区淋巴细胞浸润程度、浆细胞浸润程度、MUM1表达、CD38表达、血清碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、IgM、球蛋白升高比例、抗线粒体抗体（AMA）阳性比例、抗线粒体抗体M2亚型（AMA-M2）阳性比例、IgM阳性比例显著高于其他组（均 P<0.05）；SS合并药物性肝损伤组血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、结合胆红素、SSA阳性比例显著高于其他组（均 P<0.05）；SS合并PBC组（ P=0.006）及NAFLD组（ P=0.011）血清总胆固醇水平显著高于其他组（ P<0.05）。 结论:SS合并肝损伤者病理表现多样，炎症病变以SS合并自身免疫性肝病最重，SS合并非酒精性脂肪性肝病及非特异性炎症最轻。综合分析患者肝组织病理改变及实验室检查有助于SS合并不同类型肝损伤的诊断。

目的:探讨新型冠状病毒（SARS-CoV-2）感染（COVID-19）相关免疫性肌病的临床、影像、肌肉病理改变特点和治疗转归。方法:收集2022年12月至2023年4月在北京大学第一医院确诊的5例SARS-CoV-2 感染后免疫性肌病患者的临床特征、血清肌酸激酶、肌炎抗体、肌肉磁共振成像、肌肉病理资料，短期随访后分析其治疗效果。结果:5例患者中，男性3例，女性2例，发病年龄42~86岁，均表现为COVID-19症状消失后不久出现肢体近端无力，其中3例伴肌痛、1例伴吞咽困难、2例伴皮肤损害、1例伴间质性肺病。5例的血清肌酸激酶在1 663~16 000 IU/L，分别有1例出现抗3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A还原酶抗体和抗信号识别颗粒抗体，肌电图均显示肌源性损害，肌肉磁共振成像表现为弥漫性肌肉水肿，3例伴皮下组织和肌筋膜水肿。4例肌肉活组织检查结果提示坏死性肌病，伴随肌纤维内P62阳性沉积。2例电镜检查可见肌纤维出现线粒体空泡化以及核内管丝样包涵体。4例使用糖皮质激素，其中2例联合使用丙种球蛋白、环磷酰胺或他克莫司，1例采用观望疗法，结果肌无力均有不同程度好转，但4例患者的血清肌酸激酶依然高于正常水平。结论:COVID-19可以引起免疫性肌病，主要表现为肢体近端无力伴血清肌酸激酶增高，肌肉磁共振成像可见弥漫性水肿，肌肉活组织检查显示坏死性肌病，免疫抑制治疗有效性还需要继续观察。

目的:研究自身免疫性肝炎（AIH）患者T淋巴细胞亚群线粒体损伤特征及其临床意义。方法:回顾性分析杭州市西溪医院2021年6—12月57例AIH患者（AIH组）的临床资料，同时纳入60例健康体检者作为健康对照组，采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群（CD 8+ T淋巴细胞计数和CD 4+ T淋巴细胞计数），根据线粒体染色数值匹配内置算法判定辅助性T淋巴细胞（Th细胞）和抑制性T淋巴细胞（Ts细胞）线粒体损伤情况。采用罗氏E170全自动电化学发光免疫分析仪检测IgG、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平；采用免疫荧光法检测抗核抗体（ANA）滴度。采用多因素Logistic回归分析影响AIH患者发生Th细胞和Ts细胞线粒体损伤的独立危险因素。 结果:AIH组ALT、AST、IgG、ANA滴度阳性率、CD 4+ T淋巴细胞计数、CD 8+ T淋巴计数、Th细胞线粒体损伤率和Ts细胞线粒体损伤率明显高于健康对照组[（118.90 ± 37.61）U/L比（30.96 ± 14.37）U/L、（102.40 ± 36.51）U/L比（31.12 ± 14.06）U/L、（18.40 ± 3.71）g/L比（13.89 ± 1.98）g/L、96.49%（55/57）比16.67%（10/60）、438（323，637）× 10 6/L比398（272，469）× 10 6/L、296（211，296）× 10 6/L比270（193，322）× 10 6/L、61.40%（35/57）比8.33%（5/60）和82.46%（47/57）比11.67%（7/60）]，差异有统计学意义（ P<0.01或<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，AST升高和CD 8+ T淋巴细胞计数降低是影响AIH患者发生Ts细胞线粒体损伤的独立危险因素（ OR = 1.06和0.99，95% CI 1.01~1.10和0.99~1.00， P<0.05）；ALT升高和IgG升高是影响AIH患者发生Th细胞线粒体损伤的独立危险因素（ OR = 1.08和1.66，95% CI 1.02~1.14和1.11~2.48， P<0.05）。 结论:AIH患者检测T淋巴细胞亚群线粒体损伤具有积极的临床意义，可通过ALT、AST、IgG等生化指标预测T淋巴细胞亚群线粒体损伤发生的概率，以间接评估患者肝细胞坏死情况。

目的:探究线粒体转录终止结构域1(MTERFD1)在卵巢癌细胞恶性生物学行为中的作用及初步的分子机制。方法:实时荧光定量法检测人卵巢癌(OC)细胞系SKOV3、HEY及OVCAR3，人胚肾上皮细胞系HEK-293和正常卵巢组织中的MTERFD1 mRNA表达水平。MTERFD1过表达质粒及小干扰RNA(siRNA)转染后，MTT法检测细胞增殖，Annexin-V/PI双染色法检测细胞凋亡；ELISA法检测卵巢癌细胞中MTERFD1水平对IL-6表达的影响，MTT法检测改变IL-6水平对不同MTERFD1表达的卵巢癌细胞增殖的影响。结果:人卵巢癌细胞系HEY、SKOV3及OVCAR3中MTERFD1 mRNA水平高于正常卵巢组织和HEK-293细胞系，差异均有统计学意义( P<0.05)。OVCAR3和HEK-293细胞中MTERFD1过表达组细胞增殖活力高于空白质粒组；敲减MTERFD1后，HEY和SKOV3细胞增殖活力明显减慢，细胞凋亡率高于阴性对照，差异均有统计学意义( P<0.05)。卵巢癌细胞中IL-6水平与MTERFD1表达呈正相关，同时IL-6阻断性抗体能够逆转MTERFD1在卵巢癌细胞增殖中的作用，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:MTERFD1可能通过调节IL-6促进卵巢癌细胞增殖。

目的:基于转录组测序（RNA-Seq），分析比较非酒精性脂肪性肝炎（NASH）早期小鼠模型中Yes相关蛋白（YAP）阳性肝细胞和YAP阴性肝细胞的差异表达基因（DEGs），初步了解此类YAP阳性肝细胞的功能学特征。方法:蛋氨酸-胆碱缺乏（MCD）饲喂C57BL/6小鼠2周构建NASH早期模型，对照组为正常饮食。肝组织行苏木精-伊红（HE）、天狼星红染色和病理学评分；免疫组织化学（IHC）观察YAP、p-YAP在肝组织的表达。胶原酶灌注联合Percoll密度梯度离心获取活率大于90%的原代肝细胞。进行YAP抗体标记、流式分选获得YAP阳性和YAP阴性肝细胞并进行RNA-Seq。测序结果用GO、KEGG和相互作用网路的分析方法筛选DEGs。RT-PCR验证模型组肝组织中YAP以及部分DEGs的表达水平。两样本均数比较采用独立样本 t检验。 结果:与对照组相比，MCD诱导小鼠2周的HE染色肝组织可见脂肪变（病理评分1.07±0.21），伴有小叶炎症（病理评分1.13±0.32）和肝细胞气球样变（病理评分0.80±0.20），天狼星红染色未见明显肝纤维化（病理学评分0.40±0.40）。IHC显示NASH早期的部分肝细胞YAP表达为阳性。RNA-Seq分析，YAP阳性和YAP阴性的肝细胞分别得到Clean reads为49 310 604条、54 820 036条。与YAP阴性肝细胞相比，YAP阳性肝细胞导致5 565个基因差异表达，包括上调基因1 662个，下调基因3 903个。上调基因的GO分析显示，嘌呤三磷酸核苷和三磷酸核苷等线粒体功能相关的代谢过程为显著富集的生物学过程（BP）；下调基因分析到显著富集的BP为嗅觉受体相关过程。KEGG分析显示，DEGs富集到292条通路，氧化磷酸化（OXPHOS）通路为显著富集信号通路。RT-PCR确认炎症因子（白细胞介素-1β、白细胞介素-6）、YAP及其靶基因（Cyr61、Ankrd1）以及OXPHOS通路的Cox5b、Sdhc基因水平显著上调，与测序结果一致。相互作用网络分析预测到8个关键基因。结论:NASH早期肝细胞代谢水平的变化可能与YAP活性增加有关。

垂体梭形细胞嗜酸细胞瘤是一种极其罕见的鞍区高度血管化肿瘤，占鞍区肿瘤的0.1%~0.4%，属于世界卫生组织(WHO)Ⅰ级肿瘤。其临床及影像学表现难以与垂体腺瘤区分，确诊主要依赖于术后病理学检查。其病理学特征为肿瘤细胞具有嗜酸性外观和抗线粒体抗体、上皮细胞膜抗原、甲状腺转录因子1、s100蛋白、波形蛋白和半乳糖凝集素3免疫阳性。治疗方法以手术为主。本文主要结合相关文献总结目前关于垂体梭形细胞嗜酸细胞瘤的研究现状，以期对本病的诊治提供参考。

目的:分析重度抑郁障碍患者T淋巴细胞及其亚群的线粒体质量，探究其临床应用于抑郁障碍患者疾病进展、疗效监测的可能性。方法:选取金华市第二医院2021年—2022年接诊的重度抑郁障碍患者，按照诊断及治疗标准分为重度抑郁障碍患者组(A组)，重度抑郁障碍患者复发组(B组)，每组各30例，两组均采用抗体抑郁药物规律治疗12周。选取金华市第二医院2021年度体检门诊中健康体检者30例为健康对照组。比较三组研究对象汉密尔顿抑郁量表17项(HAMD-17)评分、16项抑郁症状快速评定量表(QIDS-SR16)评分。流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群(CD3 +细胞计数、CD3 +CD4 +细胞计数、CD4 +/CD8 +比值)，根据线粒体染色数值匹配内置算法得出辅助性T细胞(Th)及抑制性T细胞(Ts)线粒体损伤指数。 结果:入组时A、B两组患者HAMD-17评分分别为(24.67±3.53)分、(26.28±4.29)分，均显著高于健康对照组[(6.14±1.92)分， P<0.05]；QIDS-SR16评分分别为(23.55±4.01)分、(25.62±4.14)分，均明显高于健康对照组[(4.08±1.68)分， P<0.05]。治疗2~12周时，A、B组患者HAMD-17评分和QIDS-SR16评分均较治疗前显著降低(均 P<0.05)；治疗8、12周时，A组患者CD3 +CD4 +及CD4 +/CD8 +均高于B组( P<0.05)。入院时，A、B组患者Ts、Th线粒体损伤指数均高于健康对照组( P<0.05)，0~8周A、B组患者间Ts、Th线粒体损伤指数差异无统计学意义( P>0.05)，完成12周治疗后A、B组患者Ts、Th线粒体损伤指数均有所好转，其中B组Ts线粒体损伤指数高于A组( P<0.05)。 结论:监测T细胞亚群及线粒体损伤指数为研究重度抑郁障碍的发病机制，监测临床治疗效果提供了一个新的视角。