目的:基于基因芯片数据挖掘和网络药理学研究芪归抵挡汤治疗糖尿病肾病(DKD)分子机制.方法:利用相关数据平台,挖掘芪归抵挡汤治疗DKD的活性成分和作用靶点,并进行GO功能和KEGG通路富集分析.最终,通过体内实验验证芪归抵挡汤调控糖尿病肾病的作用机制.结果:芪归抵挡汤共获得349个潜在靶点,GEO数据库分析获得具有显著性差异基因有841个,将二者取交集共获得45个交集靶点,经复合网络筛选出槲皮素、山柰酚、芦荟大黄素、常春藤皂苷元和β-谷甾醇等重要成分;CASP3、EGF、CXCL8、CCL2及ICAM1等治疗DKD的重要核心靶点.GO功能富集显示,药物反应、炎症反应和对缺氧的反应等在生物过程中富集度较高,质膜、细胞溶质和细胞外空间等在细胞组分中富集度高,蛋白质结合、受体结合和整合素结合等在分子功能中富集度较高;KEGG分析表明该方药效基础主要与AGE-RAGE、甲型流感、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、EB病毒感染和NF-κB等信号通路有关.体内研究发现,与正常对照组比较,模型对照组小鼠FBG含量明显升高,血清Scr、BUN含量明显增加,肾组织中AGE、RAGE、Caspase-3蛋白表达上调(P＜0.01);与模型对照组比较,芪归抵挡汤3.34 g/kg组可有效改善db/db小鼠血糖和肾功能(P＜0.01),显著减轻肾脏病理损伤,下调AGEs-RAGE信号通路相关的AGE、RAGE、Caspase-3蛋白的表达(P＜0.01);与白藜芦醇组比较,芪归抵挡汤3.34 g/kg组小鼠治疗6 w、12 w FBG含量,Scr含量明显降低,肾组织AGE、RAGE、Caspase-3蛋白表达明显下调(P＜0.05或P＜0.01).结论:芪归抵挡汤可有效降低糖尿病肾病小鼠的血糖水平、改善肾脏功能及病理损伤,并可调控AGEs-RAGE信号通路,具有清除糖尿病肾病"代谢记忆"潜能.

目的 探索健康生活方式指导员通过在线平台分享健康科普意愿的影响因素,为更好地发挥指导员的健康传播与促进作用提供依据.方法 基于计划行为理论(Theory of Planned Behavior,TPB)和益处与风险评价理论(Theory of Benefit and Risk Assessment,BRA),2022年9月在南京市健康生活方式指导员中进行实证研究,分析感知风险、感知益处、分享态度、主观规范和感知行为控制对分享意愿的影响及机制.结果 参与调查的指导员1665名,模型解释了分享意愿87％的变化(R2=0.87)和分享行为32％的变化(R2=0.32).分享态度(β=0.388)、主观规范(β=0.596)、感知行为控制(β=0.105)和感知益处(β=0.081)正向影响指导员分享健康科普意愿(P＜0.05).分享态度在感知益处和分享意愿间起部分中介作用,中介效应为0.205(95％CI:0.180～0.235);分享态度在感知风险和分享意愿间起完全中介作用,中介效应为0.076(95％CI:0.064～0.091).结论 基于TPB和BRA的整合模型可以较好地解释南京市指导员通过在线平台分享健康科普意愿的影响因素,为开展指导员培训和实施干预措施提供依据.

目的:探讨咪达唑仑对被剥夺氧和葡萄糖(oxygen-glucose deprivation，OGD)后的N2a/APP695细胞淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)代谢变化的影响及机制。方法:将处于对数生长期的N2a/APP695细胞用平衡盐缓冲液冲洗后随机分为空白组、对照组及实验组。空白组未经OGD处理，在正常培养箱内培养；对照组行OGD处理后继续培养复氧；实验组在OGD处理后加入不同浓度(分别为70、100、125、150 ng/ml)的咪达唑仑继续培养复氧。24 h后用AnnexinV-FITC/双染法流式细胞术检测各组细胞凋亡比例；用Western blot方法检测各组细胞的Caspase-3、Aβ 1-42、解整合素金属蛋白酶10(adisintegrin and metalloproteinase 10，ADAM10)、β-淀粉样前体蛋白水解酶1(β-site APP cleavage enzyme-1，BACE1)、早老素1(presenilin 1，PS1)蛋白水平。 结果:与空白组相比，对照组的细胞凋亡比例、Caspase-3、Aβ 1-42、BACE1及PS1水平显著升高( P<0.05)；APP及ADAM10水平无明显变化( P>0.05)。与对照组相比，实验组细胞凋亡比例、Caspase-3、Aβ 1-42显著下降( P<0.05)；咪达唑仑70 ng/ml组BACE1显著下降( P<0.05)，而APP、ADAM10及PS1无明显变化( P>0.05)。 结论:OGD可通过上调BACE1及PS-1导致Aβ 1-42表达增加促使细胞凋亡；而咪达唑仑可通过下调BACE1减少Aβ 1-42表达进而减少神经细胞凋亡，发挥对OGD损伤后N2a/APP695细胞的保护作用。

目的:探讨整合心理行为干预对多动症患儿认知功能及P300的影响。方法:采取随机对照研究，选取绍兴市第七人民医院2022年3月至2023年9月收治的多动症患儿112例，按照随机数字表法分为A组（ n=56）、B组（ n=56），A组采用常规药物治疗，B组采用常规药物治疗联合整合心理行为干预，两组治疗3个月。观察两组治疗前后去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、视听整合连续执行测试评分、脑电θ/β比值、P300（潜伏期、波幅）的变化及临床疗效。 结果:治疗后，B组NE、DA分别为（340.83±43.22）ng/L、（1.12±0.25）ng/L，均低于A组的（416.15±48.37）ng/L、（1.30±0.31）ng/L，差异均有统计学意义（ t=8.69、3.38，均 P < 0.05）；B组综合注意力商数、综合反应控制商数评分分别为（82.52±14.15）分、（96.34±13.95）分，均高于A组的（75.20±13.83）分、（90.62±15.16）分，差异均有统计学意义（ t=-2.77、-2.08，均 P < 0.05）；B组脑电θ/β比值低于A组，差异有统计学意义（ t=3.22， P < 0.05）；B组P300 Cz区、Fz区潜伏期分别为（346.21±40.52）ms、（344.65±39.52）ms，均短于A组的（376.16±43.04）ms、（369.35±42.16）ms，波幅分别为（7.73±1.80）μV、（7.22±1.73）μV，均大于A组的（5.90±1.15）μV、（5.76±1.12）μV，差异均有统计学意义（ t=3.79、3.20、-6.41、-5.30，均 P < 0.05）。B组总有效率为94.6%（53/56），高于A组的82.1%（46/56），差异有统计学意义（χ 2=4.26， P < 0.05）。 结论:整合心理行为干预在多动症患儿中的实施效果良好，可降低患儿的NE、DA水平，提高认知功能，改善脑电θ/β比值、P300。

目的:观察T-2毒素对体外培养软骨细胞炎性细胞因子、人类白细胞分化抗原（CD）44及整合素表达的影响。方法:取1 ~ 2日龄SPF级Wistar乳鼠2只制备原代软骨细胞，进行体外培养，采用甲苯胺蓝染色法进行软骨细胞鉴定，细胞增殖/毒性检测试剂盒（CCK-8）法检测不同剂量T-2毒素（0、2、4、6、10、12、20 ng/ml）染毒24、48、72 h对软骨细胞的毒性作用，根据细胞存活率确定终浓度为0（对照）、2、4、6、8 ng/ml的T-2毒素作用48 h为后续实验条件。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测细胞上清液白细胞介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α及CD44含量；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测软骨细胞整合素α5、β1蛋白表达水平。结果:在相同作用时间下，不同剂量组间软骨细胞存活率比较，差异均有统计学意义（ F = 130.759、258.250、123.337， P均< 0.01）。作用48 h，不同剂量T-2毒素组软骨细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CD44含量比较，差异均有统计学意义（ F = 10.613、4.805、2.943、12.395， P < 0.01或< 0.05）。其中，2、4、6、8 ng/ml组IL-6含量均高于对照组（ P均< 0.05）；6、8 ng/ml组IL-1β含量均高于对照组和2 ng/ml组，且6 ng/ml组明显高于4 ng/ml组（ P均< 0.05）；6、8 ng/ml组TNF-α含量均低于对照组（ P均< 0.05）；2、4、6、8 ng/ml组CD44含量均低于对照组（ P均< 0.05）。作用48 h，不同剂量T-2毒素组软骨细胞整合素α5、β1蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（ F = 4.635、4.376， P均< 0.05）。其中，6、8 ng/ml组整合素α5蛋白表达水平均明显低于对照组（ P均< 0.05），整合素β1蛋白表达水平均明显高于对照组（ P均< 0.05）。 结论:T-2毒素可能通过上调IL-6、IL-1β和整合素β1的表达，同时下调TNF-α、CD44和整合素α5的表达，破坏软骨细胞与细胞外基质的平衡，造成软骨细胞损伤。

胰岛淀粉样多肽(islet amyloid polypeptide, IAPP)与胰岛素由β细胞共同分泌，当胰岛素抵抗时2种蛋白均会增多，β细胞因加工超载积累错误折叠的IAPP，损伤胰岛正常分泌功能。然而，IAPP还可产生活性氧、激活多种信号通路、干扰细胞代谢、在细胞内形成沉淀物、与其他淀粉样蛋白交叉折叠等方式，导致不同程度的细胞或组织损伤，最终引起全身多系统疾病。然而，IAPP在其他系统疾病发生发展过程中发挥的作用尚未形成广泛共识，有关研究结果也未被有效整合。本文将系统、全面地阐述不同结构形态的IAPP对神经、循环、运动、免疫等系统疾病的作用机制，有助于探索IAPP相关系统疾病的病理机制，为制定治疗和预防策略提供新思路。

目的:探究乙型肝炎肝纤维化患者肝组织黏着斑激酶、整合素β1的表达水平及临床诊断价值。方法:选择2018年10月至2020年8月在贵阳市公共卫生救治中心诊治的92例乙型肝炎患者作为研究对象，根据肝穿刺活检组织病理结果进行肝纤维化分期，分为A组（S0~S1级，37例），B组（S2~S3级，49例）和C组（S4级，6例）。采用荧光定量PCR、免疫组化及免疫印迹法检测各组肝组织黏着斑激酶、整合素β1的表达。采用Pearson法对肝组织黏着斑激酶、整合素β1的表达与肝纤维化分期进行相关性分析，并通过ROC曲线分析黏着斑激酶、整合素β1对乙型肝炎肝纤维化的诊断效能。结果:比较3组间黏着斑激酶和整合素β1的基因表达、阳性表达率和蛋白表达，差异均有统计学意义（ F黏着斑激酶=81.220、11.938和138.726， F整合素β1=103.906、35.852和318.706， P均<0.01）。B组和C组黏着斑激酶和整合素β1的基因表达、阳性表达率和蛋白表达均高于A组（ P均<0.01）。黏着斑激酶、整合素β1表达与患者纤维化分期（S期）均呈正相关（ r黏着斑激酶=0.610、0.642和0.706， r整合素β1=0.520、0.498和0.596， P均<0.01）。黏着斑激酶、整合素β1二者联合的基因表达、阳性表达率和蛋白表达诊断乙型肝炎肝纤维化患者的ROC曲线下面积分别为0.874、0.926和0.889（ P均<0.05）。 结论:黏着斑激酶、整合素β1在乙型肝炎肝纤维化患者中存在随着病情程度加剧而升高的趋势，且与患者肝纤维化分期正相关，可作为早期辅助诊断乙型肝炎肝纤维化的有效指标，且二者联合诊断效能最优，具有临床应用价值。

目的:利用生物信息学方法挖掘呼吸机相关性肺损伤（VILI）小鼠的差异表达基因（DEG），并通过构建VILI小鼠模型对关键基因进行验证。方法:①实验1（生物信息学分析）：从基因表达数据库（GEO）下载VILI与自主呼吸对照组小鼠的肺组织基因芯片数据GSE9368和GSE11662，通过统计分析获得DEG，运用韦恩图获得两个数据的共同DEG，然后使用DAVID在线数据库对共同DEG进行基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科（KEGG）通路富集分析，最后利用基因与蛋白质相互作用检索在线数据库（STRING）对共同DEG进行基因编码蛋白相互作用（PPI）分析，并运用CytoScape软件、分子复合物检测分析插件（MCODE），以及CytoHubba插件中最大团中心性（MCC）、最大邻居连通度（MNC）与度（degree）算法进行拓扑分析，筛选出关键基因。②实验2（相关基因编码蛋白验证）：构建C57BL/6小鼠大潮气量（20 mL/kg）VILI模型，并设自主呼吸对照组。取小鼠肺组织进行苏木素-伊红（HE）染色，观察肺组织病理学改变；并对实验1中筛选出的关键基因编码蛋白进行免疫组化验证。结果:①实验1结果：GSE9368数据中筛选出114个DEG，其中上调99个，下调15个；GSE11662数据中筛选出258个DEG，其中上调188个，下调70个；获得共同DEG 66个，其中上调61个，下调5个。GO功能注释结果表明，共同DEG参与炎症反应、免疫应答、白细胞及中性粒细胞趋化浸润等过程；KEGG通路富集分析提示共同DEG主要富集于细胞黏附、细胞因子-细胞因子受体相互作用及肿瘤坏死因子（TNF）信号通路等。通过STRING及CytoScape构建差异基因PPI网络图和重要子模块，并获得拓扑分析MCC、MNC及degree算法得出的交集基因，分别为细胞因子信号转导抑制因子3（SOCS3）、白细胞介素-1β（IL-1β）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、整合素Itgam、CXC型趋化因子配体2（CXCL2）、CXC型趋化因子受体2（CXCR2）、L-选择素Sell及CC型趋化因子受体1（CCR1）。②实验2结果：构建大潮气量VILI小鼠模型结果显示，与自主呼吸对照组相比，机械通气结束后0 h小鼠肺组织有所损伤；通气结束后6 h肺组织结构受损明显，肺泡腔可见不同程度出血和塌陷，肺泡壁明显增厚，肺泡腔及间质还可见炎症细胞浸润。对拓扑分析交集前3位基因IL-1β、SOCS3、MMP-9的编码蛋白进行免疫组化染色，结果显示，随通气时间延长，小鼠肺组织中IL-1β、SOCS3、MMP-9蛋白表达逐渐上调，6 h时与自主呼吸对照组比较差异均有统计学意义〔IL-1β（积分 A值）：8.40±2.67比5.10±0.94，SOCS3（积分 A值）：9.74±1.80比5.95±1.31，MMP-9（积分 A值）：11.45±6.20比5.36±1.28，均 P<0.05〕。 结论:基于GSE9368和GSE11662数据的生物信息学分析发现，VILI与炎症损伤、细胞因子及免疫细胞浸润相关；IL-1β、SOCS3、MMP-9蛋白可能为VILI生物标志物。

目的:探讨胸乳入路腔镜甲状腺切除术在甲状腺乳头状癌患者中的疗效及对Wnt和整合素信号通路的影响。方法:选取2018年7月至2020年3月三二〇一医院确诊为甲状腺乳头状癌并住院行手术治疗的患者136例，按术式不同分为观察组（68例）和对照组（68例）。对照组予开放甲状腺切除术治疗。观察组予胸乳入路腔镜甲状腺切除术治疗。比较免疫功能（CD4+、CD8+和CD4+/CD8+）、疼痛指标（PGE2、IL-6、Cor和VAS评分），采用RT-PCR法检测手术前后两组（WNT1、 β-catenin、GSK3 β）及整合素信号通路。 结果:术后3 d，较对照组，观察组CD4 +和CD4 +/CD8 +水平明显更高[（27.62±2.52）vs（24.63±2.67）,（0.66±0.18）vs（0.52±0.13）]，而CD8+水平明显更低[（41.62±3.54）vs（45.62±3.63）]（ P<0.001）；观察组PGE2、IL-6、Cor、VAS均显著低于对照组[（48.54±9.86）vs（57.21±8.12）,（5.13±0.71）vs（6.99±0.95）,（511.23±67.52）vs（633.12±71.47）,（1.26±0.56）vs（3.99±2.06）]（ P<0.001）；观察组WNT1、 β-catenin、GSK3 β、整合素 β1、FAK、Ras、MAPK mRNA表达量均显著低于对照组[（1.79±0.15）vs（2.85±0.25）,（1.94±0.15）vs（2.64±0.24）,（2.13±0.19）vs（2.97±0.28）,（1.95±0.17）vs（2.58±0.23）,（2.15±0.16）vs（2.87±0.22）,（1.95±0.18）vs（2.91±0.27）, （1.89±0.12）vs（2.87±0.31）]（ P<0.001）。 结论:胸乳入路腔镜甲状腺切除术可有效减轻甲状腺乳头状癌患者术后疼痛水平，且对免疫功能影响更小，使Wnt和整合素信号通路表达受阻以降低肿瘤转移风险。

异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）是治疗多种良恶性血液病的重要方法，但存在移植物抗宿主病（GVHD）的风险，影响患者生存质量 [1,2]。其中，急性GVHD （aGVHD）是allo-HSCT后的重要并发症，通常发生于移植后3个月内，主要受累器官为皮肤、肝脏、胃肠道 [2,3,4]。其中60%的aGVHD患者有肠道症状，主要表现为厌食、腹泻、腹痛和出血等 [5]。Ⅱ~Ⅳ度aGVHD的一线治疗为糖皮质激素，有效率近50%，有效患者中仅有1/3可持续缓解 [6,7]，肠道受累患者对糖皮质激素反应更差、死亡率更高 [8]。目前，糖皮质激素耐药肠道aGVHD的二线治疗药物众多，但缺乏稳定有效的治疗药物，严重肠道GVHD患者2年生存率不到20% [9,10,11]。近年研究发现，供者T淋巴细胞表面α4β7整合素是介导其向肠道淋巴组织迁移的重要信号分子 [12]，参与肠道aGVHD的发生。维多珠单抗（Vedolizumab）是针对淋巴细胞表面α4β7整合素的人源化单抗，最初用于炎症性肠病（IBD）的治疗，后有研究发现其可以通过抑制初始和活化的T淋巴细胞向肠道相关淋巴组织的迁移来治疗肠道aGVHD [13]。我们应用维多珠单抗治疗2例糖皮质激素耐药肠道aGVHD患者并获得满意疗效，报告如下。